导读:本文包含了辐射敏感基因论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:实时荧光定量PCR,辐射敏感基因,生物剂量计,Gadd45α基因
辐射敏感基因论文文献综述
杨学琴,毛鑫玉[1](2019)在《辐射敏感基因Pig-a、Gadd45α和Hprt作为潜在生物剂量计的实验研究》一文中研究指出目的为了提高遗传损伤的检测水平和降低检测阈值,建立一种快速简便的生物剂量估算方法。选择Pig-a、Gadd45及Hprt叁个基因,探讨运用其mRNA表达水平的变化作为电离辐射生物剂量计的可能性。方法采集入职健康体检人员以及放射从业工作体检人员各25人外周肝素钠抗凝血各2ml,RT-qPCR检验其目的基因的相对表达量,分析辐射敏感基因本底表达量的平均值、波动范围和变异系数;使用配对t检验对健康人群与放射工作人群敏感基因表达量进行统计学差异分析;采集3名健康成年人肝素钠抗凝外周外各25 ml,不同剂量(0、0.5、1.0、2.0、5.0 Gy)的X射线照射,6 h后RT-qPCR检验其目的基因的相对表达量,二项式曲线回归分析存在的计量效应关系。使用SPSS 19.0软件进行统计分析,双侧检验;Graphpad 5.0作图。结果 Pig-a、Gadd45α基因在健康人群中本底水平差异较小,相对均一。Hprt基因变异系数大于20%,在健康人群中本底水平差异较大。Hprt基因在健康人群中的表达量高于暴露人群;Gadd45α基因与Pig-a基因在健康人群中的表达量低于暴露人群,两组比较有统计学意义(P<0.05)。Gadd45α、Hprt、Pig-a基因的表达量与辐射剂量存在剂量效应关系(Gadd45α基因曲线拟合方程为y=0.1307x2+0.4878x+1.2518;Pig-a基因曲线拟合方程为y=0.3635x2+0.1764x+1.3832;Hprt基因曲线拟合方程为y=0.5772x2-0.1754x+1.0147)。结论 Pig-a基因与Gadd45α基因的表达量在健康人群中本底值较低,差异较小,个体间变异小,对电离辐射具有特异性,有较高的灵敏度,基因表达量与照射剂量具有良好的剂量效应关系,均随照射剂量的增大而增加;Hprt基因本底值较低,个体间变异较大,在小剂量照射0-2Gy有良好的剂量效应关系,随照射剂量的增大而增加,在5Gy剂量点突然下降偏离剂量效应曲线。(本文来源于《中国毒理学会第九次全国毒理学大会论文集》期刊2019-09-17)
李连胜[2](2018)在《辐射敏感基因和血清SERS光谱作为潜在生物剂量计的实验研究》一文中研究指出电离辐射能够导致细胞DNA断裂,引起基因表达发生变化,同时还能引起全身性的生理生化指标的变化。辐射后机体和分子的变化可用于估算生物受照剂量进而发展成生物剂量计。现有生物剂量计不能满足高通量快速检测的要求,本文以小鼠外周血和小鼠血清为样本分别利用RT-PCR技术和非标记表面增强拉曼光谱(SERS)检测技术,分别从辐射敏感基因和血清拉曼光谱角度探索新型生物剂量计。目的:(1)探索不同剂量照射后小鼠TRIAP1和AEN基因表达的时间与及剂量效应,研究其作为生物剂量计的潜能。(2)探索表面增强拉曼技术对不同剂量照射小鼠血清的识别能力,研究其作为辐射生物剂量计的可行性。材料和方法:(1)(a)对BAL B/C雄性小鼠进行1、2、4、8和12Gy的γ射线照射,再对新的一组小鼠注射LPS,获取小鼠外周血。(b)提取外周血总RNA,反转录、RT-PCR检测TRIAP1和AEN基因的表达。(c)对两基因进行相对表达分析和剂量效应曲线拟合。(2)(a)对C57BL/6J雄性小鼠进行2、5.5、7和8Gy(或者9Gy)的γ射线照射,获取小鼠血清。(b)将血清与银溶胶混合孵育一定时间,用拉曼检测仪进行检测获得拉曼光谱。(c)用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)对数据进行分类分析并获得积分图。(d)用SIMCA的VIP分析以及SPSS的单因素方差分析,确定差异显着的拉曼峰的位移。结果:(1)(a)通过对不同样本的比较最终选择了外周血作为实验样本。(b)不同剂量照射后TRIAP1基因在1-3天有较好的时间效应与剂量效应,AEN基因在0.25-1天有较好的时间效应与剂量效应。(c)注射LPS后TRIAP1表达显着下降,AEN基因表达无显着性差异。(2)(a)SERS光谱随着照射后时间的延长,辐射剂量的变大,拉曼光谱强度降低。(b)OPLS-DA分析发现照射后24h正常组与各照射组能完全分开;照射后72h,不同剂量辐射组间仍有重迭只能能做初步区分;照射后10天半致死组与致死组完全分开。(c)拉曼光谱是物质的指纹谱,拉曼谱强度反应物质的含量。744和1495cm~(-1)代表的核黄素,1071 cm~(–1)代表的葡萄糖等和1495 cm~(–1)代表的甘氨酸等,这些物质的缺乏可能会造成小鼠机体代谢水平降低和体重下降,还可能会影响小鼠的体液免疫。结论:(1)研究表明辐射敏感基因TRIAP1和AEN具有作为辐射后早期生物标志物的潜力,本研究所用RT-PCR方法有可能成为高通量检测辐射生物剂量的检测方法。(2)研究表明SERS技术检测不同辐射剂量小鼠血清能够反映出不同损伤程度的差别,其本身又有快速检测的特点,有作为快速生物剂量计的潜力。(本文来源于《安徽医科大学》期刊2018-03-01)
李琳[3](2016)在《辐射敏感基因作为辐射损伤分子生物标志物的可行性研究》一文中研究指出目的探索人外周血中辐射敏感基因受照后的时间、剂量效应及其在健康人本底水平的分布情况,为其发展成为辐射损伤早期分子生物标志物提供实验证据。方法1.通过引物特异性验证,探针非特异性排除,优化反应温度等方式建立荧光定量PCR检测方法,构建候选基因质粒标准品,建立标准曲线。2.利用60Coγ放射源对3名健康人外周血进行照射,照射剂量分别为0、0.5、1、2、4、6、10 Gy,照射后培养0、2、4、8、12和24h,收集外周血,提取总RNA,利用实时定量荧光PCR检测TRAF4、DDB2、POLH、GADD45A及TNFSF9基因的表达量,并拟合不同时间点下的剂量效应曲线。3.本底水平研究,采集29名健康成年人的外周血作为本底组,检验辐射敏感基因在健康人群中的分布情况。4.利用C57BL/6系雄性小鼠进行体内实验的验证,对小鼠直接进行0、2、8Gy剂量的照射,照射后0、4、8、12、24、48、72 h检测TRAF4、DDB2、GADD45A基因在小鼠体内的表达变化情况,验证敏感基因在体内的表达效应。结果1.成功建立了荧光定量PCR检测方法,构建候选基因质粒标准品,建立标准曲线,为后续研究奠定基础。2.人外周血中TRAF4、DDB2、POLH、GADD45A基因受γ射线照射后,有较显着的时间及剂量依赖效应,辐射敏感性好,具有作为辐射损伤分子生物标志物的潜力。3.DDB2、POLH、GADD45A基因本底值较低且分布均一,不受性别、年龄等因素的影响,TRAF4基因受年龄因素影响较大。4.C57BL/6系雄性小鼠体内照射验证,发现TRAF4、DDB2、GADD45A基因时间表达效应与人外周血的表达效应存在不同,可能物种不同或体内外差异导致。结论辐射敏感基因TRAF4、DDB2、POLH、GADD45A具备作为辐射损伤分子生物标志物的潜力。本文中建立的实时荧光定量检测方法操作简便、快速,有希望发展成为一个新的辐射损伤剂量检测的方法。(本文来源于《青岛大学》期刊2016-05-26)
李孝鑫[4](2016)在《辐射敏感基因作为潜在生物剂量计的实验研究》一文中研究指出电离辐射能够导致DNA断裂引起基因表达发生变化,推测电离辐射敏感基因可能发展成为辐射损伤生物标志物,用于生物剂量的估算。现有的生物剂量计存在耗时耗力的问题,不能满足大批量受照人群的快速检测,因此需要建立一种快速、高通量的生物剂量估算方法应对大批量受照人群的剂量估算。本文将在前期基因芯片研究的基础上,对筛选出的辐射后差异表达、具有一定的剂量依赖性、本底值相对均一的TRIAP1、RPS27L、AEN、C12orf5、SPIB 5个辐射诱导上调基因和TCL1A 1个辐射诱导下调基因,利用实时荧光定量PCR进行深入研究,探索这些基因作为新型分子辐射生物剂量计的可行性。目的:研究辐射敏感基因照射后的时间效应和剂量效应关系以及健康人的本底水平,探讨其作为辐射损伤早期生物标志物应用于生物剂量估算的可行性。方法:1通过对TRIAP1、RPS27L、AEN、C12orf5、TCL1A、SPIB 6个辐射敏感基因和β-actin 1个内参基因的引物特异性检测、探针非特异性排除、反应温度的优化、质粒标准品的构建和标准曲线的建立,建立实时荧光定量PCR检测方法。2采用不同剂量(0Gy、0.5Gy、1Gy、2Gy、4Gy、6Gy、10Gy)的60Coγ射线照射正常人外周血,在照射后培养不同时间(0h、2h、4h、8h、12h、24h)收集,提取全血总RNA,采用实时荧光定量PCR的Taq Man探针两步法检测照射后TRIAP1、RPS27L、AEN、C12orf5、TCL1A、SPIB 6个辐射敏感基因的m RNA表达水平,观察其随受照剂量和培养时间的表达变化,筛选具有辐射损伤生物标志物潜力的基因。3采集29名健康志愿者的外周血进行TRIAP1、RPS27L、AEN 3个基因本底水平的分析(男性15名,女性14名;年龄组分别为21-30岁组10人,31-40岁组10人,41-50岁组9人),提取全血总RNA,采用实时荧光定量PCR的Taq Man探针两步法检测辐射敏感基因m RNA的本底表达水平。4采用6-8周龄体重18-22g的雄性C57BL/6小鼠,进行不同剂量(2Gy、8Gy)的γ射线整体照射,未照射样0Gy为对照组;照射后不同时间点(4h、8h、12h、24h、48h、72h)采集血样提取总RNA,利用实时荧光定量PCR的Taq Man探针两步法检测照射后TRIAP1、RPS27L、AEN 3个辐射敏感基因和18S RNA 1个内参基因m RNA随剂量和时间的表达变化,研究辐射敏感基因在小鼠的整体照射后的表达效应。结果:1通过对6个辐射敏感基因和β-actin内参基因引物特异性的检测、探针非特异性排除、反应温度的优化、质粒标准品的构建和标准曲线的建立,建立了实时荧光定量PCR的检测方法。2在对外周血进行不同剂量照射培养不同时间后,与对照组相比,TRIAP1基因在2h、4h开始增加,8h达到峰值10.44,12h、24h略有下降,在8h、12h和24h呈现出较好的剂量依赖关系;RPS27L在2h各剂量下无明显增加,4h开始逐渐增加,8h达到峰值9.97,12h和24h下降至与4h相近的水平,在4h、8h、12h和24h呈现出较好的剂量依赖关系;AEN基因在2h开始增加,4h、8h和12h持续增加并呈现出一定的剂量饱和效应,24h开始下降但仍高于本底;C12orf5基因在2h各剂量点下均无显着增加,4h开始增加明显,8h、12h和24h表达变化水平相近呈现出一定的剂量依赖性;TCL1A基因在2h各剂量点下均无显着减少,在4h、8h、12h和24h略有减少但未呈现出明显剂量依赖关系;SPIB基因在4h、8h表达水平升高但无显着性差异,在2h、12h和24h在各剂量点下几乎没有响应。3不同剂量照射后,TRIAP1基因在8h、12h和24h拟合0.5-10Gy的剂量效应曲线分别为y=2.663ln(x)+4.3668,R2=0.9969;y=1.6162ln(x)+3.6017,R2=0.9799;y=1.0839ln(x)+2.9733,R2=0.9562;RPS27L基因在4h,8h,12h和24h 0.5-10Gy的剂量效应拟合曲线分别为y=0.7608ln(x)+2.141,R2=0.9594;y=2.1686ln(x)+4.3925,R2=0.9636;y=0.8334ln(x)+2.4676,R2=0.9684;y=0.4786ln(x)+2.023,R2=0.9204;AEN基因在2h,4h,8h进行0.5-6Gy剂量范围的剂量效应拟合曲线分别为y=1.31ln(x)+2.1332,R2=0.9326;y=2.3864ln(x)+5.2762,R2=0.9913;y=4.6111ln(x)+8.4048,R2=0.9829,在12h和24h进行0.5Gy-4Gy剂量范围的剂量效应拟合曲线分别为y=2.5651ln(x)+5.3049,R2=0.9715;y=1.8254ln(x)+4.7758,R2=0.9686。所有曲线方程的R2均大于0.92,说明剂量效应关系显着。4通过29个健康人本底水平检测后的结果得出,TRIAP1基因本底值是0.170±0.031,波动范围0.101-0.248,变异系数18.086%;RPS27L基因的平均值为1.450±0.183,波动范围是1.085-1.775,变异系数是12.641%;AEN基因的平均值为0.056±0.010,波动范围是0.041-0.075,变异系数是18.001%。3个基因的变异系数均在20%以内,波动范围小且相对均一。分别对TRIAP1、RPS27L和AEN基因进行年龄和性别因素的差异性分析,结果显示TRIAP1、RPS27L和AEN均不受年龄因素(P分别为0.732、0.284、0.153)和性别因素(P分别为0.445、0.469、0.278)影响。5 2Gy和8Gy照射小鼠并在照射后饲养不同时间,与对照组相比,TRIAP1基因在照射后0-48h随时间的延长表达水平不断上升,在24h、48h和72h表达水平具有显着性差异(P<0.05),在48h达到峰值15.18,72h略有下降;RPS27L基因在4h和8h表达变化水平较高仅在8Gy剂量下4h与对照比无显着性差异,12h迅速下降,24-72h逐渐恢复至接近本底水平;AEN基因在4h开始逐渐升高,24h达到峰值4.10,随后逐渐下降,在8-72h表现出一定的差异性(P<0.05)。TRIAP1、RPS27L和AEN基因在0Gy、2Gy和8Gy照射下无显着剂量依赖关系。结论:1建立了Taq Man探针两步法的实时荧光定量PCR的检测方法。2γ射线不同剂量照射人外周血后培养不同时间,TRIAP1、RPS27L和AEN在不同的时间点表达水平显着升高并且具有较好的剂量依赖关系,提示这3个辐射敏感基因具有作为辐射损伤生物标志物的潜力,适用于辐射损伤早期生物剂量的估算。TCL1A、SPIB基因时间效应和剂量效应关系不显着,C12orf5基因相对表达变化水平低,这3个基因不具有作为辐射敏感基因的潜力。3通过本底水平的检测,TRIAP1、RPS27L和AEN基因本底波动范围小、本底水平均一且不受年龄和性别因素的影响,满足作为生物标志物的要求。4通过小鼠整体照射的研究发现,TRIAP1、RPS27L和AEN基因在小鼠体内均有响应。(本文来源于《安徽医科大学》期刊2016-03-18)
杨艳明,王志成,刘林林,曲雅勤[5](2010)在《乏氧/辐射双敏感启动子介导分泌型人TRAIL基因对肺腺癌A549细胞凋亡的影响》一文中研究指出目的:构建乏氧(HRE)/辐射(Egr1)双敏感启动子介导的分泌型人TRAIL(shTRAIL)基因表达载体pcD-NA3.1-HRE-Egr1-shTRAIL,观察其对肺腺癌A549细胞周期及增殖的影响。方法:利用化学合成HRE上下链,PCR扩增得到双链HRE;利用基因重组技术构建含有HRE/Egr1双敏感启动子介导shTRAIL的表达载体pcDNA3.1-HRE-Egr1-shTRAIL,经酶切、PCR和测序鉴定正确后,干扰质粒经脂质体介导转染肺腺癌A549细胞,利用流式细胞术和TUNEL检测细胞凋亡变化;利用蛋白质印迹法检测Caspase-3蛋白表达。结果:质粒大小为6282bp,BamHⅠ和SmaⅠ酶切,所得片段大小分别为1284和4998、2292和3990bp;以载体为模板,Egr1和shTRAIL引物进行PCR扩增,可得到469bp和820bp产物;将pcDNA3.1-HRE-Egr1-shTRAIL进行测序,所得结果与设计一致,说明构建正确。转染肺腺癌A549细胞后,乏氧与辐射能够增加细胞凋亡的百分比(P<0.05或P<0.01),两者联合,作用更明显,P<0.01;而且乏氧与辐射也能诱导Caspase-3表达的增强(P<0.05或P<0.01),两者联合作用,表达增加更明显,P<0.01。结论:乏氧/辐射双敏感启动子介导分泌型人TRAIL基因在乏氧和辐射条件下能够增加肺腺癌A549细胞的凋亡,诱导Caspase-3蛋白表达的增加,两者联合作用效果更明显。(本文来源于《中华肿瘤防治杂志》期刊2010年20期)
杨艳明,王志成,王铁君,王溪,曲雅勤[6](2009)在《乏氧/辐射双敏感启动子介导分泌型人TRAIL基因对肺腺癌A549细胞周期及增殖的影响》一文中研究指出目的构建乏氧(HRE)/辐射(Egr1)双敏感启动子介导的分泌型人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)(shTRAIL)基因表达载体pcDNA3.1-HRE-Egr1-shTRAIL,观察其对肺腺癌A549细胞周期及增殖的影响。方法利用化学合成HRE上、下链,PCR扩增得到双链HRE;利用基因重组技术构建含有HRE/Egr1双敏感启动子介导shTRAIL的表达载体pcDNA3.1-HRE-Egr1-shTRAIL,经酶切、PCR和测序鉴定正确后,干扰质粒经脂质体介导转染肺腺癌A549细胞,MTT法检测A549细胞增殖的变化,流式细胞术检测A549细胞周期的变化。结果BamHI和SmaI酶切,所得片段大小分别为1284bp和4998bp、2292bp和3990bp;以载体为模板,Egr1和shTRAIL引物进行PCR扩增,可得到469bp和820bp产物;将pcDNA3.1-HRE-Egr1-shTRAIL进行测序,所得结果与设计一致,说明构建正确。转染肺腺癌A549细胞后,乏氧与辐射能够降低细胞增殖能力,增加G0/G1和S期细胞百分比,降低G2/M期细胞百分比(P<0.05,P<0.01),二者联合作用更明显。结论乏氧/辐射双敏感启动子介导分泌型人TRAIL基因在乏氧和/或辐射条件下能够延长细胞G0/G1和S期,缩短G2/M期,并且抑制肺腺癌A549细胞增殖能力,二者协同作用更明显。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2009年11期)
杨艳明,李艳博,贾晓晶,曲雅勤[7](2009)在《乏氧/辐射双敏感启动子介导分泌型人TRAIL基因载体的构建及表达》一文中研究指出目的:构建乏氧(HRE)/辐射(Egr1)双敏感启动子介导的分泌型人TRAIL(shTRAIL)基因表达载体pcDNA3.1-HRE-Egr1-shTRAIL,观察乏氧和辐射对其表达的影响。方法:利用化学合成HRE上、下链,PCR扩增得到双链HRE;pMD19T-Egr1经SacⅠ和HindⅢ双酶切得到Egr1;pshuttle-shTRAIL经KpnⅠ和BamHⅠ双酶切得到shTRAIL;利用基因重组技术构建含有HRE/Egr1双敏感启动子介导shTRAIL的表达载体pcDNA3.1-HRE-Egr1-shTRAIL,经酶切、PCR和测序鉴定正确。肺腺癌A549细胞分为正常组、乏氧组(1%)、照射组(6 Gy)和乏氧加照射组;表达载体转染肺腺癌A549细胞,RT-PCR及ELISA法检测shTRAIL的表达。结果:BamHⅠ和SmaⅠ酶切,所得片段大小分别为1 284和4 998 bp、2 292和3 990 bp;以Egr1和shTRAIL引物PCR扩增该载体,得到469和820 bp产物;将pcDNA3.1-HRE-Egr1-shTRAIL进行测序,所得结果与设计一致,说明构建正确。转染肺腺癌A549细胞后,乏氧组、辐射组及乏氧加照射组shTRAIL mRNA和蛋白表达增加,与对照组比较差异有显着性(P<0.05),且乏氧加照射组表达更明显。结论:成功地构建了乏氧/辐射双敏感启动子介导分泌型人TRAIL基因表达的载体pcDNA3.1-HRE-Egr1-shTRAIL;乏氧及照射能够诱导TRAIL表达增加,且二者具有协同作用。(本文来源于《吉林大学学报(医学版)》期刊2009年03期)
邢春根,杨晓东,周丽英,吴永友,蒋银芬[8](2007)在《大肠癌细胞辐射敏感相关基因的筛选》一文中研究指出应用基因芯片技术初步筛选人大肠癌细胞辐射敏感相关基因。培养2种不同辐射敏感性的人大肠癌细胞LOVO和SW480,收集细胞至少达到107数量级,提取细胞总RNA,采用人全基因组表达谱芯片获得该两株细胞的基因表达谱,分析比较两者之间基因表达的差异。1、LOVO细胞组检出基因16882个,SW480细胞组检出基因17114个。2、在2倍以上差异表达基因中筛选出上调基因908个,下调基因1312个。上调基因中包括Fas基因、NFkB基因等,下调基因中包括Caspas6基因、RAD21基因等,已有研究证明与辐射敏感相关。3、LOVO细胞中高表达的基因主要有CEACAM5、THBS1、SERPINE2、ARL7、HPGD,提示与辐射敏感相关;SW480细胞中高表达的基因主要有SCD、NQ01、LYZ、KRT20、ATP1B1,提示与辐射抵抗有关。1、大肠癌辐射敏感性的预测可以从基因水平来体现。2、表达谱基因芯片技术能快速、灵敏地预测大肠癌辐射敏感性,筛选大肠癌辐射敏感性相关基因。(本文来源于《辐射研究与辐射工艺学报》期刊2007年04期)
何文兴,李洪梅,徐莺,肖猛,李群[9](2006)在《川草2号老芒麦(Elymus sibiricusL.)UV-B辐射敏感基因rbcL的克隆及其调控表达研究》一文中研究指出rbcL是编码光合关键酶1,5-二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)大亚基的基因。运用mRNA差异显示技术(DDRT-PCR)并通过5′RACE(rapidamplificationofcDNAends)从高原植物川草2号老芒麦(ElymussibiricusL.cv.‘chuancaoNo.2’)中获得了受增强UV-B辐射抑制的rbcL基因,该基因全长cDNA为1.51kb,开放阅读框(ORF)长1.434kb,编码477个氨基酸。氨基酸序列与Elymustrachycaulus中的Rubisco大亚基具有97%的同源性、与Triticumaestivum和Hordeumcomosum的Rubisco大亚基同源性均为98%。Northern杂交分析表明,增强UV-B辐射后6h,rbcL基因表达受到强烈抑制,处理后60h,其表达几乎完全被抑制,表明即使是长期生长在高原地区、强UV-B辐射条件下的高原物种,在受到较强的UV-B辐射后,其rbcL基因的转录也会受到抑制。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2006年12期)
杨晓东[10](2006)在《大肠癌辐射敏感相关基因与蛋白初步筛选》一文中研究指出实验目的:应用基因芯片技术和蛋白组学技术初步筛选人大肠癌细胞辐射敏感相关基因与蛋白。实验方法:1)、基因组部分:培养2种不同辐射敏感性的人大肠癌细胞LOVO和SW480,收集细胞至少达到107数量级,提取细胞总RNA,采用人全基因组表达谱芯片获得两株细胞的基因表达谱,分析比较两者之间基因的差异表达情况。2)、蛋白组部分:同法培养LOVO细胞和SW480细胞,分别予以0、2、4、6GyX线照射,运用SELDI-TOF蛋白质芯片技术测定照射后24小时细胞的蛋白质谱,分析两株细胞间不同照射剂量后的蛋白质表达情况,通过Swiss-Prot数据库搜索比较两者之间的差异表达。实验结果:1、LOVO细胞组检出基因16882个,SW480细胞组检出基因17114个。2、在2倍以上差异表达基因中筛选出上调基因908个,下调基因1312个。上调基因中包括Fas基因、NFkB基因等,下调基因中包括Caspas6基因、RAD21基因等已有研究证明与辐射敏感相关。3、LOVO细胞中高表达的基因主要有CEACAM5、THBS1、SERPINE2、ARL7、HPGD,提示与辐射敏感相关;SW480细胞中高表达的基因主要有SCD、NQ01、LYZ、KRT20、ATP1B1,提示与辐射抵抗有关。4、两种细胞间差异表达的蛋白质峰共5组,平均质荷比(m/z)分别为3366.87, 4743.52,6077.43,7259.53,9155.45。5、LOVO细胞随辐射剂量增加有梯度变化的蛋白质峰有5组,其平均质荷比(m/z)分别为2478.24,4521.30,5383.82,8454.03,11610.70;SW480细胞随辐射剂量增加有梯度变化的蛋白质峰有4组,其平均质荷比(m/z)分别为5655.29,7472.21,15829.02,17859.47。6、根据平均质荷比,通过Swiss-Prot数据库搜索初步筛选出与肿瘤辐射敏感性高度相关的主要蛋白GADD45B,Thioredoxin, Metallothionein 1(MT1)。7、Thioredoxin在基因表达谱中是下调基因,Metallothionein 1(MT1)在基因表达谱中是上调基因,GADD45B在基因表达谱中属于无变化基因。(本文来源于《苏州大学》期刊2006-05-01)
辐射敏感基因论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
电离辐射能够导致细胞DNA断裂,引起基因表达发生变化,同时还能引起全身性的生理生化指标的变化。辐射后机体和分子的变化可用于估算生物受照剂量进而发展成生物剂量计。现有生物剂量计不能满足高通量快速检测的要求,本文以小鼠外周血和小鼠血清为样本分别利用RT-PCR技术和非标记表面增强拉曼光谱(SERS)检测技术,分别从辐射敏感基因和血清拉曼光谱角度探索新型生物剂量计。目的:(1)探索不同剂量照射后小鼠TRIAP1和AEN基因表达的时间与及剂量效应,研究其作为生物剂量计的潜能。(2)探索表面增强拉曼技术对不同剂量照射小鼠血清的识别能力,研究其作为辐射生物剂量计的可行性。材料和方法:(1)(a)对BAL B/C雄性小鼠进行1、2、4、8和12Gy的γ射线照射,再对新的一组小鼠注射LPS,获取小鼠外周血。(b)提取外周血总RNA,反转录、RT-PCR检测TRIAP1和AEN基因的表达。(c)对两基因进行相对表达分析和剂量效应曲线拟合。(2)(a)对C57BL/6J雄性小鼠进行2、5.5、7和8Gy(或者9Gy)的γ射线照射,获取小鼠血清。(b)将血清与银溶胶混合孵育一定时间,用拉曼检测仪进行检测获得拉曼光谱。(c)用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)对数据进行分类分析并获得积分图。(d)用SIMCA的VIP分析以及SPSS的单因素方差分析,确定差异显着的拉曼峰的位移。结果:(1)(a)通过对不同样本的比较最终选择了外周血作为实验样本。(b)不同剂量照射后TRIAP1基因在1-3天有较好的时间效应与剂量效应,AEN基因在0.25-1天有较好的时间效应与剂量效应。(c)注射LPS后TRIAP1表达显着下降,AEN基因表达无显着性差异。(2)(a)SERS光谱随着照射后时间的延长,辐射剂量的变大,拉曼光谱强度降低。(b)OPLS-DA分析发现照射后24h正常组与各照射组能完全分开;照射后72h,不同剂量辐射组间仍有重迭只能能做初步区分;照射后10天半致死组与致死组完全分开。(c)拉曼光谱是物质的指纹谱,拉曼谱强度反应物质的含量。744和1495cm~(-1)代表的核黄素,1071 cm~(–1)代表的葡萄糖等和1495 cm~(–1)代表的甘氨酸等,这些物质的缺乏可能会造成小鼠机体代谢水平降低和体重下降,还可能会影响小鼠的体液免疫。结论:(1)研究表明辐射敏感基因TRIAP1和AEN具有作为辐射后早期生物标志物的潜力,本研究所用RT-PCR方法有可能成为高通量检测辐射生物剂量的检测方法。(2)研究表明SERS技术检测不同辐射剂量小鼠血清能够反映出不同损伤程度的差别,其本身又有快速检测的特点,有作为快速生物剂量计的潜力。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
辐射敏感基因论文参考文献
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