导读:本文包含了实时荧光聚合酶链式反应论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:获得性免疫缺陷综合征,水痘-带状疱疹病毒,实时荧光定量聚合酶链式反应
实时荧光聚合酶链式反应论文文献综述
张伟,马成杰,张健,宋心成,吴苑妮[1]（2019）在《实时荧光定量聚合酶链式反应在获得性免疫缺陷综合征合并水痘-带状疱疹病毒感染中的应用》一文中研究指出目的研究水痘-带状疱疹病毒(VZV)核酸检测技术对获得性免疫缺陷综合征(AIDS合并带状疱疹的诊断价值。方法收集AIDS合并带状疱疹患者的血液和疱疹液,进行病毒DNA检测,同时进行血清抗-VZV IgM及T细胞亚群检测。结果纳入AIDS合并带状疱疹患者共32例,入组患者疱疹液VZV DNA检测均为阳性,其中28例患者血液VZV DNA检测为阳性;仅有7例AIDS患者血清抗-VZV IgM阳性;疱疹液VZV DNA载量显着高于血液VZV DNA水平,差异有统计学意义(t=3.173、P=0.0032),血液及疱疹液VZV DNA检测阳性率显着高于血清抗-VZV IgM检测阳性率(87.5%、100%vs. 21.8%,P <0.001)。结论 VZV核酸检测技术对于AIDS合并水痘-带状疱疹病毒感染的病原学诊断具有重要价值。(本文来源于《中华实验和临床感染病杂志(电子版)》期刊2019年04期）
王青,刘莹,袁林,孟庆红,姚开虎[2]（2019）在《实时荧光定量聚合酶链式反应检测百日咳鲍特菌的效能研究》一文中研究指出背景百白破疫苗效价不足事件引发公众对百日咳的关注,但目前各种百日咳实验室检测方法均具有一定的局限性,无法满足快速进行病原学诊断的临床需求。目的评价一种商品化的实时荧光定量聚合酶链式反应(Q-PCR)试剂盒对百日咳鲍特菌(BP)感染的临床检测效果。方法 2016年11月—2017年4月在首都医科大学附属北京儿童医院采集无热咳嗽患儿鼻咽拭子302例,以及临床诊断为百日咳患儿鼻咽拭子50例。采用Q-PCR与细菌培养方法筛查302例无热咳嗽患儿是否存在BP感染,并比较两种方法检测50例临床诊断百日咳病例的阳性率,综合评估Q-PCR的临床应用价值。结果 302例无热咳嗽患儿中,以细菌培养为金标准时,Q-PCR检测的灵敏度为78.6%(11/14),特异度为95.8%(276/288),阳性预测值为47.8%(11/23),阴性预测值为98.9%(276/279)。在50例临床诊断百日咳病例的鼻咽拭子标本中,Q-PCR检测的阳性率为34.0%(17/50),细菌培养的阳性率为22.0%(11/50),两者比较,差异无统计学意义(χ~2=3.125,P=0.077)。结论以细菌培养结果为金标准,Q-PCR筛查百日咳的灵敏度及特异度较高;在为临床诊断百日咳患儿提供病原学证据中,Q-PCR与细菌培养方法检测阳性率相当。(本文来源于《中国全科医学》期刊2019年23期）
杨晨,李娟,丁清龙,周露[3]（2019）在《实时荧光定性聚合酶链式反应标准方法检测转基因产品的验证及应用》一文中研究指出目的验证实验室大豆、玉米和水稻及其制品转基因检测方法,并应用于实际样品检测。方法根据GB 19495.4-2018《转基因产品检测实时荧光定性聚合酶链式反应(PCR)检测方法》要求对无转基因标识的样品进行转基因成分检测。结果方法验证满意。40批次样品(大豆、玉米和水稻及其制品)中发现1批次的转基因成分检出,检出率为2.5%。结论市场中绝大部分未标示转基因成分的大豆、玉米和水稻及其制品确实未检出转基因成分,仅有极少数产品含有转基因成分,但未进行有效标识。(本文来源于《食品安全质量检测学报》期刊2019年13期）
韩营营,段瑶,刁保卫,闫梅英[4]（2019）在《利用实时荧光定量聚合酶链式反应快速检测鸭沙门菌》一文中研究指出目的为快速检测、鉴定鸭沙门菌,避免血清型误判,提高鸭沙门菌暴发应对能力,建立一种实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测方法。方法随机挑选60株鸭沙门菌及238株肠道常见病原菌代表菌株,针对鸭沙门菌血清型特异基因AW58_15605设计引物并建立qPCR检测体系,通过纯菌菌株、模拟粪便样本及临床样本评价该体系的特异度、灵敏度及检测下限。结果 60株鸭沙门菌株及临床感染的50份样本扩增结果均为阳性,而对鸭沙门菌血清型以外的其他沙门菌及肠道菌的扩增均为阴性。对鸭沙门菌纯菌DNA的最低检测下限为8拷贝/反应。粪便模拟样本检测中,增菌后qPCR检测下限达59.10cfu/g,明显低于分离培养及增菌前。结论本研究建立的基于特异基因的鸭沙门菌分子检测方法具有可操作性强、特异度高、灵敏度高的特点,建议在应急情况下优先选择qPCR用于沙门菌暴发筛查、鉴别及诊断由其引起的腹泻性疾病。(本文来源于《疾病监测》期刊2019年04期）
刘二龙,卢丽,吕英姿,蒋湘,李嘉琪[5]（2019）在《北极苹果结构特异性实时荧光聚合酶链式反应检测方法建立》一文中研究指出目的为实现转基因北极苹果(Arctic~(TM) apple)目的标识管理,建立特异性实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法。方法针对转基因北极苹果特异性序列设计引物和TaqMan探针,建立转基因北极苹果实时荧光PCR检测方法,并对该方法的特异性、灵敏度和重复性进行检测。结果建立的转基因北极苹果实时荧光PCR特异性强,定量检测限为20拷贝,扩增效率为96%,检测重复性良好。结论建立的特异性实时荧光PCR法可应用于转基因北极苹果的鉴定。(本文来源于《中国食品卫生杂志》期刊2019年01期）
张艺鸽,姜晓冰,于涛,孙丽滢[6]（2018）在《绿色魏斯氏菌实时荧光定量聚合酶链式反应检测方法的建立》一文中研究指出以rpoA基因为靶基因,建立绿色魏斯氏菌SYBR GreenⅠ实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)快速检测方法。针对rpoA基因设计特异性引物,建立绿色魏斯氏菌实时荧光定量PCR检测体系,通过特异性、灵敏度和重复性实验评价体系的检测效果,同时与常规PCR方法进行比较。结果表明:实时荧光定量PCR方法能够特异性检出绿色魏斯氏菌,对基因组DNA的检测灵敏度达到2.667×10~(-3) pg/μL,对纯培养物和模拟污染牛肉样品直接检测的灵敏度分别为30 CFU/mL和0.8 CFU/g;与常规PCR相比,实时荧光定量PCR检测的灵敏度是其1 000倍;不同浓度样品独立重复实验循环阈值的标准差均小于1,变异系数在0.02%～1.28%之间。本研究所建立的绿色魏斯氏菌实时荧光定量PCR检测方法具有特异性好、灵敏度高、重复性好的特点,能够进行准确的定量检测,是快速检测绿色魏斯氏菌的有效手段。(本文来源于《肉类研究》期刊2018年11期）
李楠,王佳慧,李凤琴,江涛[7]（2018）在《不同水源中GⅡ型诺如病毒实时荧光逆转录聚合酶链式反应检测方法建立及应用》一文中研究指出目的建立不同水源中GⅡ型诺如病毒(NoV GⅡ)实时荧光逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测方法 ,对某市疾病预防控制中心送检的10份疑似引起诺如病毒中毒的水样进行NoV GⅡ检测。方法以瓶装水、河水和生活污水为研究对象,采用硝酸纤维素膜-聚乙二醇(PEG)沉淀法富集病毒,对取样体积、病毒洗脱条件、PEG终浓度及PEG沉淀条件等进行了优化,提取病毒RNA、建立实时荧光RT-PCR检测方法 ;通过外加MS2计算方法的回收率,评价所建方法对水样中诺如病毒的回收效果。结果建立的方法对瓶装水、河水和生活污水中NoV GⅡ的平均回收率分别为(60.1±8.0)%、(22.0±6.5)%和(35.7±8.1)%,10份送检水样中3份检出NoV GⅡ。结论建立的实时荧光RT-PCR方法适用于瓶装水、河水和生活污水中NoV GⅡ的检测,饮用水被NoV GⅡ是引发某市人员中毒的原因之一。(本文来源于《中国食品卫生杂志》期刊2018年06期）
张秀平,苗丽[8]（2018）在《实时荧光聚合酶链式反应检测肉制品中的鸭源性成分》一文中研究指出通过鸭的肌动蛋白β-actin保守基因设计可特异检测鸭肉成分的引物和探针,建立实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术检测鸭肉的方法,并通过模拟肉样和市售样品检测方法的准确性和适用性。结果表明:该方法可以特异性检测出麻鸭和草鸭成分,而对猪、牛、羊、鸡等DNA均没有扩增,检测灵敏度可达到1 pg DNA;通过模拟肉样检测确定最低质量分数检测限为0.01%;市售样品的检测结果表明,该方法能很好地应用于市场,满足市场检测需求。(本文来源于《肉类研究》期刊2018年07期）
岳苑,何微,贾冰凝,吴明,张慧玲[9]（2018）在《实时荧光聚合酶链式反应技术测定肉制品中犬源性成分》一文中研究指出根据犬线粒体脱氧核糖核酸(DNA)序列设计了特异性引物和探针,应用实时荧光聚合酶链式反应技术,检测了肉制品中犬源性成分的含量。所提取的17种犬的DNA样品扩增后均能得到典型S形扩增曲线,而所选取的14种其他动物源的DNA样品均未呈现同样的扩增曲线;同一模板所得Ct值(n=7)的相对标准偏差为1.2%。这说明所设计的条件具有较好的特异性和重复性。犬源性组分DNA的质量分数在0.000 01%~10%内与其Ct值之间呈线性关系,检测的灵敏度为0.1pg,不同加工方法所得肉制品的扩增结果之间无显着差异。(本文来源于《理化检验(化学分册)》期刊2018年02期）
高正琴,岳秉飞[10]（2017）在《白色念珠菌TaqMan-小沟结合物探针实时荧光定量聚合酶链式反应快速检测及抗真菌药物敏感性分析》一文中研究指出目的建立TaqMan-小沟结合物探针实时荧光定量聚合酶链式反应方法,快速定量检定临床标本中的白色念珠菌并进行抗真菌药物敏感性分析。方法针对白色念珠菌内转录间隔区和26S核糖体核糖核酸基因设计特异性引物和探针,构建含有上述基因的标准质粒进行定量分析,建立TaqMan-小沟结合物探针实时荧光定量聚合酶链式反应检测方法,评价其特异性、灵敏度、重复性和稳定性。对1185份临床标本中的白色念珠菌进行检测,同时进行真菌培养、普通PCR、基因克隆和测序鉴定。对所有真菌分离株进行抗真菌药物敏感性试验。结果研究结果显示,建立的白色念珠菌TaqMan-小沟结合物探针实时荧光定量聚合酶链式反应检测方法专属性强,能准确检出白色念珠菌,而与其他念珠菌属真菌、非念珠菌属真菌、细菌、寄生虫和病毒均无交叉反应,特异性为100%。该技术灵敏度高,能精确定量检测白色念珠菌DNA线性范围达11个数量级,白色念珠菌最低检测限度为5个菌落形成单位。该方法重复性非常好,组内和组间相对标准偏差均小于2%。测试中相关系数、斜率和效率没有显着变化,表明该方法稳定性好,精密度高。将其成功应用于临床标本中白色念珠菌载量的定量检测,用普通PCR和基因克隆测序分析进行了确证。整个检测过程可在2 h内完成,可以用作定量分析快速诊断方法。应用TaqMan-小沟结合物探针实时荧光定量聚合酶链式反应从1185份临床标本中检出94份白色念珠菌阳性标本,真菌培养获得8株存活的白色念珠菌,抗真菌药物敏感性试验分析结果显示:这些白色念珠菌分离株对制霉菌素、咪康唑、克霉唑、益康唑、氟康唑、沃尔康唑均敏感,但对两性霉素B、酮康唑、特比萘芬、氟胞嘧啶已经产生了耐药性。结论本研究新开发评价的TaqMan-小沟结合物探针实时荧光定量聚合酶链式反应,可以快速简易,精准稳定,特异灵敏地定量检定白色念珠菌,适用于动物源性产品中白色念珠菌检测、食品药品生物制品医疗器械安全检查、环境监测、流行病学调查。(本文来源于《第十叁届中国实验动物科学年会论文集》期刊2017-09-26）
实时荧光聚合酶链式反应论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
背景百白破疫苗效价不足事件引发公众对百日咳的关注,但目前各种百日咳实验室检测方法均具有一定的局限性,无法满足快速进行病原学诊断的临床需求。目的评价一种商品化的实时荧光定量聚合酶链式反应(Q-PCR)试剂盒对百日咳鲍特菌(BP)感染的临床检测效果。方法 2016年11月—2017年4月在首都医科大学附属北京儿童医院采集无热咳嗽患儿鼻咽拭子302例,以及临床诊断为百日咳患儿鼻咽拭子50例。采用Q-PCR与细菌培养方法筛查302例无热咳嗽患儿是否存在BP感染,并比较两种方法检测50例临床诊断百日咳病例的阳性率,综合评估Q-PCR的临床应用价值。结果 302例无热咳嗽患儿中,以细菌培养为金标准时,Q-PCR检测的灵敏度为78.6%(11/14),特异度为95.8%(276/288),阳性预测值为47.8%(11/23),阴性预测值为98.9%(276/279)。在50例临床诊断百日咳病例的鼻咽拭子标本中,Q-PCR检测的阳性率为34.0%(17/50),细菌培养的阳性率为22.0%(11/50),两者比较,差异无统计学意义(χ~2=3.125,P=0.077)。结论以细菌培养结果为金标准,Q-PCR筛查百日咳的灵敏度及特异度较高;在为临床诊断百日咳患儿提供病原学证据中,Q-PCR与细菌培养方法检测阳性率相当。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
实时荧光聚合酶链式反应论文参考文献
[1].张伟,马成杰,张健,宋心成,吴苑妮.实时荧光定量聚合酶链式反应在获得性免疫缺陷综合征合并水痘-带状疱疹病毒感染中的应用[J].中华实验和临床感染病杂志(电子版).2019
[2].王青,刘莹,袁林,孟庆红,姚开虎.实时荧光定量聚合酶链式反应检测百日咳鲍特菌的效能研究[J].中国全科医学.2019
[3].杨晨,李娟,丁清龙,周露.实时荧光定性聚合酶链式反应标准方法检测转基因产品的验证及应用[J].食品安全质量检测学报.2019
[4].韩营营,段瑶,刁保卫,闫梅英.利用实时荧光定量聚合酶链式反应快速检测鸭沙门菌[J].疾病监测.2019
[5].刘二龙,卢丽,吕英姿,蒋湘,李嘉琪.北极苹果结构特异性实时荧光聚合酶链式反应检测方法建立[J].中国食品卫生杂志.2019
[6].张艺鸽,姜晓冰,于涛,孙丽滢.绿色魏斯氏菌实时荧光定量聚合酶链式反应检测方法的建立[J].肉类研究.2018
[7].李楠,王佳慧,李凤琴,江涛.不同水源中GⅡ型诺如病毒实时荧光逆转录聚合酶链式反应检测方法建立及应用[J].中国食品卫生杂志.2018
[8].张秀平,苗丽.实时荧光聚合酶链式反应检测肉制品中的鸭源性成分[J].肉类研究.2018
[9].岳苑,何微,贾冰凝,吴明,张慧玲.实时荧光聚合酶链式反应技术测定肉制品中犬源性成分[J].理化检验(化学分册).2018
[10].高正琴,岳秉飞.白色念珠菌TaqMan-小沟结合物探针实时荧光定量聚合酶链式反应快速检测及抗真菌药物敏感性分析[C].第十叁届中国实验动物科学年会论文集.2017
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