导读:本文包含了细菌脂蛋白耐受论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:细菌脂蛋白耐受,基因特异性表达,组蛋白修饰,RNA聚合酶Ⅱ碳端丝氨酸2磷酸化
细菌脂蛋白耐受论文文献综述
王蔚[1]（2013）在《细菌脂蛋白耐受经RNA聚合酶ⅡS2磷酸化在转录水平上调控基因的差异表达》一文中研究指出当机体受到细菌感染时,内源性免疫细胞通过模式识别受体(pattern-recognition receptors,PRRs)特异性识别病原微生物的病原相关分子模式(pathogen-associated molecular patterns,PAMPs),如细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS),细菌脂蛋白(bacterial lipoprotein,BLP)等,从而激活细胞信号转导通路,诱导基因表达,最终促发炎症并清除病原。然而内源性免疫细胞,特别是巨噬细胞、单核细胞和中性粒细胞释放的TNF-α,IL-1β和IL-6等促炎因子,往往会过度扩大炎症反应,加重疾病,甚至导致脓毒症患者的多器官功能衰竭。因此,有效抑制促炎细胞因子的过度释放,并同时维持免疫细胞的细菌杀灭能力,一直是病理生理学研究的重要课题。研究发现,在使用致死剂量LPS诱导小鼠脓毒症休克之前先给小鼠注射低于致死剂量的LPS,可以有效抑制小鼠体内促炎因子水平,小鼠死亡率显着下降,这种现象被称为LPS耐受。早期研究证实,LPS耐受的单核/巨噬细胞中TLR4信号通路受到抑制,因此认为LPS耐受的产生是由于细胞对LPS再次刺激失去应答能力。然而,最近Foster等人发现,在LPS耐受的小鼠巨噬细胞中,LPS诱导基因并不是全面地处于抑制状态,不同功能的基因可被LPS再刺激不同程度地诱导表达。并且这种功能相关基因的差异表达是通过转录水平上基因启动子处组蛋白4乙酰化(H4Ac)和组蛋白3第四位赖氨酸叁甲基化(H3K4me3)的差异修饰来调控的。BLP也可以诱导耐受。与LPS耐受相比,BLP耐受的小鼠不仅在致死剂量的BLP再刺激下可以有效存活,还可以对致死剂量的LPS产生交叉耐受。除了体内的TNF-α,IL-6等促炎因子分泌量明显降低以外,BLP耐受小鼠免疫细胞的表面细菌吞噬受体CR3和FcyR表达量明显上调,因此BLP耐受小鼠对细菌的识别,吞噬和细胞内杀灭能力均增强。细胞水平的研究发现,BLP耐受细胞中,BLP识别受体TLR2诱导的信号转导通路受到抑制,提示BLP耐受时,功能蛋白的表达差异可能是由于其基因的表达在转录水平上受到了不同的调控所导致。由此,本实验提出并且解决以下四个问题:1)BLP耐受过程中蛋白表达的差异是由其基因的表达差异所产生;2)这种差异表达是BLP耐受诱导的基因功能相关的再程序化,并且在TLR2信号通路受到广泛抑制的情况下,BLP耐受诱导基因的差异性表达是受转录水平的调控;3)BLP耐受与LPS耐受诱导的基因差异表达其调控机制不同,基因启动子处的组蛋白修饰在BLP耐受基因和BLP非耐受基因上并无差异;4)BLP耐受时不同功能相关基因的差异性表达是通过RNA Pol Ⅱ S2磷酸化实现的,并且这种调控作用发生在基因转录时的最后一个外显子处。为了证明BLP耐受的细胞受到再次刺激后,BLP诱导基因是否在TLR2信号通路受到抑制的情况下呈现差异性表达,分别对正常的和BLP(100 ng/ml)耐受的小鼠骨髓巨噬细胞施以1,000 ng/ml BLP刺激,采用基因芯片技术,比较45,102个小鼠基因在正常和BLP耐受两种细胞中的表达情况。在施以1,000 ng/ml BLP刺激的耐受细胞中,有1,196个基因因为细胞对BLP的耐受而受到抑制,我们把这类因为细胞对BLP耐受而受到抑制的基因称为耐受基因(tolerizeable genes,T genes);另外有1,058个基因在耐受细胞中反而表现出比正常细胞更强的表达能力,我们把这类基因称为非耐受基因(non-tolerizeable genes,NT genes)。为了研究BLP耐受时BLP诱导基因的差异性表达是否与基因功能相关,按照基因芯片结果中基因的表达变化倍数值从大到小的顺序,分别对耐受基因和非耐受基因进行排序,从两组基因中各选出表达量变化最为显着的100个基因,并根据这些基因的功能进行分类。参与BLP应答的基因在BLP耐受过程中变化最为显着的前100个基因的功能主要来自于促炎/血管激活,病原体识别/抗原递呈,抗炎及信号通路负调因子,干扰素应答,细胞趋化和迁移,以及代谢几个方面。对该分类结果进行统计,在非耐受基因组中,与病原体识别/抗原递呈相关的基因占其中的28%,而促炎/血管激活相关基因仅占8%。而在耐受基因组中情况则完全不同,促炎/血管激活基因占30%,病原体识别/抗原递呈相关基因的比例仅为6%。其他功能的基因在两组中分布比例基本相同,如抗炎及信号通路负调因子基因在两组中均为4%;干扰素应答基因在耐受基因组中占2%,在非耐受基因组中占4%;细胞趋化/迁移相关基因在耐受基因组中占8%,而在非耐受基因组中占4%;代谢基因在耐受基因组中占50%,而在非耐受基因组中占52%。说明BLP耐受时基因表达的特异性与基因的功能相关,具体表现为促炎/血管激活基因的广泛抑制和病原体识别/抗原递呈相关基因的持续表达。为了进一步研究BLP耐受过程中,功能相关的基因表达差异的调控机制,分别从促炎/血管激活相关基因中选取典型耐受基因,从病原体识别/抗原递呈相关基因中选取典型非耐受基因,用Realtime-qPCR的方法进一步确认两组基因在mRNA水平上存在差别。耐受基因1112b(T=20.95,p<0.010),Cc120(T=50.98,p<0.001),Ccl22(T=86.24,p<0.001)在正常细胞受到 1,000 ng/ml BLP刺激4hh后显着升高,而在BLP耐受细胞中叁个基因均没有表现出因刺激而表达量升高,而是呈现明显的抑制状态。非耐受基因Mmp8(T=17.49,p<0.001),Cd209f(T=8.944,p<0.010)以及 Cd209g(T=17.21,p<0.010)的表达情况与耐受基因完全不同。在正常细胞受到1,000 ng/mlBLP再刺激后呈现低至中量表达,而在BLP耐受细胞中叁种基因的表达量非但没有受到抑制,反而显着升高。为了证明BLP耐受过程中,耐受基因和非耐受基因在mRNA水平上的差异是由于基因的不同表达模式所造成的,我们进一步验证了耐受和非耐受基因的动力学表达。正常细胞受到100 ng/ml的BLP刺激后,耐受基因I112b和Cc120即被激活,细胞内其mRNA水平在3hh左右累积达到高峰,并在24h后降解至本底水平,说明此时细胞已经形成耐受状态。在BLP耐受基础上再施以1,000 ng/ml的BLP刺激,耐受基因I112b在此后的27hh内维持在本底水平(T=111.4,p<0.001),而耐受基因Cc120虽然在受到大剂量BLP刺激后的3h左右再次达到高峰,然而峰值却显着低于正常细胞受诱导后所产生的mRNA水平(T=16.92,p<0.010)。与耐受基因相比,非耐受基因则呈现出截然不同的动力学表达过程。在细胞受到小剂量BLP(100 ng/ml)刺激后,Mmp8和Cd209f产生了低至中量的表达。但是值得注意的是,在BLP耐受基础上再施以大剂量BLP(1,000 ng/ml)刺激后,非耐受基因mRNA水平持续累积升高,并且在同时期内Mmp8(T=13.85,p<0.010)Cd209f(T=102.2,p<0.001)显着高于正常细胞受到大剂量BLP刺激时所产生的mRNA水平。在BLP耐受过程中,造成耐受基因和非耐受基因表达方式上的差异有两种可能,其一是由于mRNA稳定性的差异——非耐受基因的mRNA稳定性普遍较高,在首次刺激后较长时间内,其细胞内水平维持较高水平,而耐受基因稳定性较低,在首次刺激后较短时间内mRNA迅速降低恢复本底水平。另外一种可能是,耐受基因和非耐受基因的表达在转录水平受到不同的调控,即在首次BLP刺激后,耐受基因的转录受到抑制因而无法在受到二次刺激后被再度激活产生mRNA,而非耐受基因的转录仍然处于可诱导转录状态,因此可被再度诱导表达。为了验证上述耐受基因和非耐受基因其表达动力学上的差异,是否是由于两种类型基因的mRNA稳定性不同所导致,在小鼠骨髓巨噬细胞用1,000 ng/ml的BLP诱导4h后,加入转录抑制剂Actinomycin D(ActD),在接下来的4h中观察细胞内两组基因的mRNA水平。结果证实两种类型基因的mRNA降解均较为迅速,降解率在两h内达到50%左右。因此,两组基因mRNA的稳定性既不足以造成两组基因表达动力学上的差异,也无法在受到小剂量BLP预处理24h后继续维持非耐受基因在细胞内的高mRNA水平。由此说明BLP耐受时基因表达模式的差异并不是由于基因mRNA稳定性的不同所导致。为了验证BLP耐受时基因特异性的转录调控是否与LPS耐受依赖同样的机制,即H4Ac和H3K4me3。我们首先采用染色质免疫共沉淀技术检测BLP耐受细胞中,基因启动子处的H4Ac水平。BLP(100ng/ml)耐受细胞中两组基因的乙酰化水平均显着高于正常细胞(p<0.010),说明小剂量BLP的持续刺激可使BLP诱导基因启动子处的乙酰化水平持续升高。但是在BLP耐受基因和非耐受基因之间并不存在差异。为了证实这一结果,我们进一步采用特异性去乙酰化酶抑制剂trichostatin A(TSA)抑制组蛋白去乙酰化,比较两组基因在正常细胞和BLP耐受细胞中的表达情况。虽然加入去乙酰化酶抑制剂后两组基因表达水平均有所变化,但耐受基因1112b和Cc120在BLP耐受细胞中的抑制状态并未因受到去乙酰化抑制剂的影响而得到逆转,耐受基因的表达依然受到抑制(p<0.010)。说明BLP诱导基因在BLP耐受细胞中的差异性表达调控并不依赖于基因启动子处H4Ac的调控。为检测BLP耐受和非耐受基因启动子处的H3K4me3水平。在正常细胞和BLP(100 ng/ml)耐受细胞受到大剂量(1,000 ng/ml)BLP刺激后,在耐受基因1112b,Cc120和非耐受基因Cd209f,Mmp8启动子处均未检测到组蛋白3第四位赖氨酸叁甲基化水平的显着升高,说明H3K4me3并未发生在小鼠骨髓巨噬细胞对BLP应答的过程中。利用特异性去甲基化酶抑制剂pargyline(Parg)抑制染色质的去甲基化后,也未能恢复耐受基因在BLP耐受细胞中的表达。说明BLP诱导基因在BLP耐受细胞中的差异性表达调控也不依赖于基因启动子处H3K4me3的调控。除了基因启动子组蛋白修饰之外,RNA聚合酶Ⅱ(RNA polymerase Ⅱ,RNA Pol Ⅱ)的碳端丝氨酸2(serine 2,S2)磷酸化也是基因转录过程中重要的调控机制。通常认为,RNA Pol Ⅱ在转录开始大约50个碱基处受到S2磷酸化的调控。RNA Pol Ⅱ启动转录大约50个碱基后并不进入延伸状态,只有当S2被磷酸化后才能够继续进行延伸。最近又有实验证实,RNA Pol Ⅱ S2的磷酸化是发生在完成延伸之后。在细胞没有受到刺激的情况下,RNA Pol Ⅱ就出现在很多一级应答基因上。这时的RNA Pol Ⅱ可以合成全长的RNA转录本,但是由于其S2没有被磷酸化而不具备剪切和加工的功能,因此不能产生成熟有效的mRNA,而合成的全长RNA转录本只是为了维持基因的开放型结构,以便对随时可能来临的刺激作出快速应答。当细胞受到刺激,如LPS后,RNA Pol Ⅱ在转录延伸因子P-TEFb的作用下S2被磷酸化,从而获得剪切的活性,将全长RNA加工成为成熟的mRNA转录本。然而,关于RNA Pol Ⅱ S2的磷酸化发生于延伸前期还是后期目前尚无定论。因此我们设想在BLP耐受的细胞中,BLP诱导基因的不同转录模式是由于RNA Pol Ⅱ S2的磷酸化受到不同的调控造成的。为验证该假设,我们分别检验耐受基因和非耐受基因转录延伸的前期,第二个外显子(exon 2,E2)和延伸后期,最后一个外显子(the last exon,En)处RNA Pol Ⅱ S2磷酸化水平的差异。正常细胞受到1,000 ng/ml BLP刺激后,在耐受基因1112b E2处RNA Pol ⅡS2的磷酸化于1h达到较高水平,在4h时依然显着高于本底水平(T=20.91,p<0.010)。而在BLP(100 ng/ml)耐受细胞中,Il12b基因E2处的RNA Pol Ⅱ在大剂量BLP(1,000 ng/ml)再刺激1h后其S2磷酸化水平明显低于正常细胞同时期的水平(T=9.893,p<0.010)。但是与设想不同的是,在大剂量BLP再刺激4h后,RNA Pol Ⅱ S2的磷酸化水平继续显着上升,并没有受到明显抑制(p<0.050)。而非耐受基因Mmp8在正常细胞中,BLP刺激1h后RNA Po1 Ⅱ的S2磷酸化水平达到高峰,4h后仍然维持高度磷酸化状态(T=28.52,p<0.001)。而在BLP(100 ng/ml)耐受细胞中,大剂量BLP(1,000 ng/ml)再刺激后,Mmp8基因E2处的RNA Pol Ⅱ S2磷酸化在刺激后1h处有小量升高,而在刺激后4h其磷酸化水平显着升高(T=27.69,p<0.001)。我们进一步比较了两组基因En处的RNA Pol Ⅱ S2磷酸化水平,实验结果发现在正常细胞中,耐受基因Il12b在受到BLP刺激4h时En处的RNA Pol ⅡS2磷酸化水平明显升高(T=10.59,p<0.010),而在BLP(100 ng/ml)耐受细胞受到1,000 ng/ml BLP刺激4h后,RNA Pol Ⅱ S2磷酸化在I112b基因的En处仍被抑制在本底水平。而非耐受基因Mmp8在正常细胞和BLP耐受细胞受到1,000 ng/ml BLP刺激4h后,在其En处均检出S2高度磷酸化的RNA Pol Ⅱ(T=13.46,p<0.010)。综上所述,BLP耐受细胞中BLP可诱导基因根据其基因功能的不同产生了再程序化,从而表现为耐受基因和非耐受基因。并且,耐受基因和非耐受基因差异表达的调控机制存在于转录水平。与LPS耐受诱导的基因特异性表达调控机制不同,BLP耐受诱导的基因特异性表达调控并不依赖于基因启动子处的组蛋白修饰,而是通过在基因转录的延伸过程中,抑制RNAPol Ⅱ S2在耐受基因最后一个外显子处的磷酸化,同时保持RNA Pol Ⅱ S2在非耐受基因最后一个外显子处再次被诱导磷酸化而实现的。该结果提示,通过对RNAPol Ⅱ S2磷酸化进行干预,在体内抑制BLP诱导促炎基因的过度表达避免炎症反应的过度放大,同时维持甚至增强病原识别相关基因的表达以清除细菌病原体感染,防止脓毒症和脓毒症休克的发生发展。(本文来源于《南方医科大学》期刊2013-05-01）
周静,周苏明[2]（2009）在《细菌脂蛋白耐受对脓毒症小鼠心功能的影响》一文中研究指出目的观察小剂量细菌脂蛋白(BLP)刺激小鼠后,小鼠各项心功能指标及心肌匀浆中细胞因子TNF-a的变化。方法C57BL/6鼠,予10 mg/kg BLP刺激24h后,再建立盲肠结扎穿孔(CLP)的脓毒症模型,(本文来源于《第叁届重症医学大会论文汇编》期刊2009-05-22）
周荣,刘建仓,刘良明,刘韧,肖南[3]（2008）在《Actin骨架偶联IRAK-NF-κB信号通路参与细菌脂蛋白诱导的交叉耐受》一文中研究指出目的:采用人单核细胞株(THP-1),建立小剂量BLP诱导THP-1细胞对BLP耐受的细胞模型,观察BLP诱导THP-1细胞对BLP耐受及对LPS交叉耐受时细胞actin骨架的变化情况,并探讨细胞actin骨架在BLP耐受及交叉耐受形成中的作用。方法:采用人单核细胞株THP-1,建立小剂量BLP预处理诱导的BLP耐受细胞模型;采用ELISA法测定炎症因子TNF-α、IL-1β及IL-6浓度;采用FITC标记的鬼笔环肽进行actin骨架染色;采用EMSA法检测NF-κB转录活性。结果:大剂量BLP(100μg/L)及大剂量LPS(100μg/L)孵育6h可诱导THP-1细胞的炎症反应激活,TNF-α、IL-1β及IL-6的释放显着增加,白细胞介素-1受体相关激酶-1(IRAK-1)活性显着增强,NF-κB转录活性明显上调,细胞actin骨架收缩成团块状,细胞形态改变并形成伪足;而用小剂量BLP(10μg/L)预处理12h后,THP-1细胞对大剂量BLP(100μg/L)及大剂量LPS(100μg/L)孵育6h的耐受性均明显增强,炎症因子(TNF-α、IL-1β及IL-6的释放明显减少,IRAK-1激酶活性被显着抑制,NF-κB转录活性明显降低,细胞伪足形成明显减少且形态明显改善,但仍有肌动蛋白聚集呈"团块"样;此外,actin骨架聚集抑制剂鬼笔环肽可取消由小剂量BLP诱导的耐受及交叉耐受,TNF-α、IL-1β、IL-6释放明显升高,IRAK-1激酶活性明显提高,NF-κB转录活性明显上调。结论:细胞骨架actin参与THP-1细胞BLP耐受及BLP交叉耐受的形成,其机制与actin骨架偶联的IRAK-NF-κB信号通路有关。(本文来源于《中国病理生理杂志》期刊2008年08期）
周静[4]（2008）在《细菌脂蛋白耐受对脓毒症小鼠心功能保护作用的机制研究》一文中研究指出第一部分BLP耐受对人THP-1细胞Toll样受体2及其下游信号转导分子和TNF-α表达的影响目的观察不同剂量细菌脂蛋白(BLP)刺激后,人单核细胞(THP-1细胞)Toll样受体2(TLR_2)、髓系分化因子88蛋白(MyD88)表达及肿瘤坏死因子(TNF-α)含量的变化。方法用小剂量BLP诱导THP-1产生耐受,再以大剂量BLP攻击,分别比较对照组、BLP耐受组、耐受后攻击组和直接攻击组TLR_2、MyD88和TNF-α的表达。以Western Blot测定TLR2和MyD88蛋白含量。ELISA法测定TNF-α含量。结果BLP耐受组、耐受后攻击组和直接攻击组的TNF-α水平均高于对照组,而耐受后攻击组的TNF-α表达明显低于直接攻击组,各组间TLR_2和MyD88蛋白含量无明显改变。结论BLP可刺激机体产生炎症因子,小剂量BLP诱导THP-1细胞产生BLP耐受,抑制细胞表达WNF-α,但不同剂量BLP对TLR_2和MyD88的蛋白表达无影响。第二部分细菌脂蛋白耐受对脓毒症小鼠心脏功能保护作用的机制研究目的了解脓毒症对小鼠心脏功能的影响,观察细菌脂蛋白耐受对心功能的保护作用并研究其作用机制。方法55只成年雄性C57BL/6小鼠随机分为4组:正常对照组、假手术组、脓毒症组(剖腹手术行盲肠结扎穿孔致脓毒症)、BLP耐受+脓毒症组,分别在CLP后0h、2h、6h、12h四个时间点做小鼠二维超声心动图,选择心率(HR)、左心室短轴缩短率(%FS)、射血分数(EF%)、心输出量(CO)、舒张期左心室后壁厚度(LVPWd)等做为观测指标。Western blot测定心肌细胞TLR2、MyD88、IRAK1、TRAF6、IKK-α,IκB-α和NF-κB(p65)蛋白表达,心肌匀浆测定细胞因子TNF-α、IL-10浓度,心肌免疫组化观察心肌组织内巨噬细胞浸润情况。心肌细胞免疫荧光TUNEL法检测心肌细胞的凋亡变化。结果假手术组的HR、FS、EF和LVPWd自0h至6h呈持续上升趋势,术后6h达顶点(与0h相比P≤0.05),此后下降,术后12h接近0h水平;CO自0h下降,2h时达最低(与0h相比P≤0.05),此后回升,12h时接近0h水平。脓毒症组的HR、FS和EF术后短暂上升,2h后HR和FS有所下降,EF上升趋缓,6h时HR、FS和EF仍高于0h水平,但此后明显下降,至12h时降至低于0h水平;而CO自0h呈持续下降,至12h明显低于0h水平(P≤0.05)。CLP后0h到6h,LVPWd无明显变化,6h后转而上升,12h达最高点,与假手术组相比,P≤0.05;BLP耐受+脓毒症组0h至6h时段HR、FS、EF和CO的变化趋势与脓毒症组相同,但前者FS、EF和CO的值均低于脓毒症组(P≤0.05);而6h后脓毒症组的4项指标继续下降,BLP耐受+脓毒症组转而上升,至12h时显着高于脓毒症组(P≤0.05);BLP耐受+脓毒症组的LVPWd呈现上升趋势,0h至2h时,上升趋势较陡,以后趋势渐缓,达12h时与CLP组无明显差异,与假手术组相比,P≤0.05。心肌细胞TLR2、MyD88、IRAK1、TRAF6、IKK-α,IκB-α和NF-κB(p65)蛋白表达及心肌匀浆中TNF-α、IL-10含量各组间无明显差异。心肌免疫组化显示,对照组及假手术组各时相均未见巨噬细胞浸润,脓毒症组12h时出现巨噬细胞浸润,BLP耐受+脓毒症组2h时见巨噬细胞浸润,6h及12h均未见巨噬细胞浸润。心肌细胞免疫荧光TUNEL法检测心肌细胞的凋亡水平显示,BLP耐受+脓毒症组心肌细胞凋亡的数量比相应时间点的假手术组和脓毒症组显着增加,而BLP耐受+脓毒症组内各时间点心肌细胞凋亡数量没有明显差异。结论手术对心脏功能有抑制作用;脓毒症对心脏功能有明显抑制:BLP耐受具有心功能保护作用:脓毒症早期心功能的变化可能与心肌细胞内炎症反应无关。随着脓毒症的进展,心肌细胞的凋亡增加,而BLP耐受延缓了凋亡的进展。(本文来源于《南京医科大学》期刊2008-05-01）
刘建仓,周荣,刘良明,刘韧,肖南[5]（2007）在《细菌脂多糖诱导人单核细胞株对细菌脂蛋白的耐受性及其与肌动蛋白骨架关系》一文中研究指出细菌脂多糖(LPS)可诱导宿主对LPS的耐受,但对细菌脂蛋白(BLP)是否存在交叉耐受,目前报道不一。采用人单核细胞株(THP-1),建立小剂量LPS诱导THP-1对LPS耐受的细胞模型;观察细胞肌动蛋白骨架、炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的浓度及NF-κB的DNA结合活力的变化情况;探讨BLP交叉耐受及细胞骨架在其中的作用。结果显示,THP-1细胞经小剂量(10ng/ml)LPS、大剂量(100ng/ml)LPS或BLP刺激后,细胞形态严重变形,肌动蛋白重组,细胞周边肌动蛋白丝带消失,出现明显的肌动蛋白收缩团块及伪足,细胞核内NF-κB的DNA结合活性显着升高,培养上清液中炎症因子(TNF-α、IL-1β及IL-6)的释放显着增加;而小剂量LPS预刺激12h后,再用大剂量的LPS或BLP刺激6h,上述指标明显改善;采用细胞骨架肌动蛋白聚集破坏剂鬼笔环肽预处理后的THP-1细胞,可取消由小剂量LPS诱导的自身耐受及对BLP的交叉耐受;可见,细菌LPS、BLP(100ng/ml)可诱导THP-1细胞肌动蛋白骨架的改变,激活NF-κB信号通路,诱导炎性细胞因子TNF-α、IL-1、IL-6过度释放,激活宿主炎症细胞的炎症反应;而小剂量LPS预刺激后可诱导出THP-1细胞对LPS的自身耐受和对BLP的交叉耐受;细胞骨架肌动蛋白参与了小剂量LPS诱导THP-1细胞对LPS自身耐受和对BLP交叉耐受的形成。(本文来源于《细胞生物学杂志》期刊2007年05期）
周苏明[6]（2007）在《细菌脂蛋白耐受对炎症反应信号转导通路的影响以及对脓毒症小鼠心功能的保护作用》一文中研究指出第一部分BLP耐受对人THP-1细胞TLR_2及其下游信号转导和TNF-α表达的影响目的观察不同剂量细菌脂蛋白(BLP)刺激后，人单核细胞(THP-1)Toll样受体2(TLR_2)、髓系分化因子88蛋白(MyD88)表达及肿瘤坏死因子(TNF-α)含量的变化。方法用小剂量BLP诱导THP-1产生耐受，再以大剂量BLP攻击，分别比较对照组、BLP耐受组、耐受后攻击组和直接攻击组TLR_2、MyD88和TNF-α的表达。以Western Blot测定TLR2和MyD88蛋白含量。ELISA法测定TNF-α含量。结果BLP耐受组、耐受后攻击组和直接攻击组的TNF-α水平均高于对照组，而耐受后攻击组的TNF-α表达明显低于直接攻击组，各组间TLR_2和MyD88蛋白含量无明显改变。结论BLP可刺激机体产生炎症因子，小剂量BLP诱导THP-1细胞产生BLP耐受，抑制细胞表达TNF-α，但不同剂量BLP对TLR_2和MyD88的蛋白表达无影响。第二部分脓毒症对心脏功能的影响及BLP耐受的保护作用目的了解脓毒症对小鼠心脏功能的影响，观察细菌脂蛋白耐受对心功能的保护作用并研究其作用机制。方法成年雄性C57BL／6小鼠随机分为3组：假手术组、脓毒症组(剖腹手术行盲肠结扎穿孔致脓毒症)、BLP耐受+脓毒症组，以假手术组术前(0h)作为正常对照。分别在0h、2h、6h、12h四个时间点做小鼠二维超声心动图选择心率(HR)、左心室短轴缩短率(％FS)、射血分数(EF％)、心输出量(CO)等做为观测指标。Western blot测定心肌细胞TLR2蛋白表达，心肌匀浆测定细胞因子TNF-α浓度。心肌免疫组化观察心肌组织内巨噬细胞浸润情况。结果假手术组的HR、FS和EF自0h至6h呈持续上升趋势，术后6h达顶点(与0h相比p＜0.05)，此后下降，术后12h接近0h水平；CO自0h下降，2h时达最低(与0h相比p＜0.05)，此后回升，12h时接近0h水平。脓毒症组的HR、FS和EF术后短暂上升，2h后HR和FS有所下降，EF上升趋缓，6h时HR、FS和EF仍高于0h水平，但此后明显下降，至12h时降至低于0h水平；而CO自0h呈持续下降，至12h明显低于0h水平(p＜0.05)。BLP耐受+脓毒症组0h至6h时段HR、FS、EF和CO的变化趋势与脓毒症组相同，但前者FS、EF和CO的值均低于脓毒症组(P＜0.05)；而6h后脓毒症组的4项指标继续下降，BLP耐受+脓毒症组转而上升，至12h时显着高于脓毒症组(P＜0.05)。心肌细胞TLR2蛋白表达及心肌匀浆中TNF-α含量各组间无差异。心肌免疫组化显示，对照组及假手术组各时相均未见巨噬细胞浸润，脓毒症组12h时出现巨噬细胞浸润，BLP耐受+脓毒症组2h时见巨噬细胞浸润，6h及12h均未见巨噬细胞浸润。结论手术对心脏功能有抑制作用；脓毒症对心脏功能有明显抑制：BLP耐受具有心功能保护作用：脓毒症早期心功能的变化可能与心肌细胞内炎症反应无关。(本文来源于《南京医科大学》期刊2007-04-01）
细菌脂蛋白耐受论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的观察小剂量细菌脂蛋白(BLP)刺激小鼠后,小鼠各项心功能指标及心肌匀浆中细胞因子TNF-a的变化。方法C57BL/6鼠,予10 mg/kg BLP刺激24h后,再建立盲肠结扎穿孔(CLP)的脓毒症模型,
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
细菌脂蛋白耐受论文参考文献
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标签：细菌脂蛋白耐受; 基因特异性表达; 组蛋白修饰; RNA聚合酶Ⅱ碳端丝氨酸2磷酸化;