导读:本文包含了固定化酰化酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:酶的固定化,固定化酶,酰化酶,头孢菌素
固定化酰化酶论文文献综述
罗晖,汪月,刘婧冉,仝双明,常雁红[1]（2019）在《头孢菌素C酰化酶的固定化策略及其对酶学性质的影响》一文中研究指出头孢菌素C酰化酶可以催化生产重要的医药中间体7-氨基头孢烷酸(7-ACA),作为一种重要的工业用酶,一般采用固定化的形式进行催化。本研究采用酶分子改造与固定化工艺调整两种途径进行酶的固定化研究,并考察了所获得固定化酶的相关性质。研究表明,酶分子表面的赖氨酸残基数量及分布情况会影响到酶在载体上的(本文来源于《第十二届中国酶工程学术研讨会论文摘要集》期刊2019-08-08）
刘萍,田洪年,张锁庆,张文胜,杨梦德[2]（2018）在《HPLC法测定固定化青霉素酰化酶合成头孢羟氨苄的活力》一文中研究指出目的建立一种HPLC法测定固定化青霉素酰化酶合成头孢羟氨苄活力的方法。方法酶与其底物7-ADCA及D-对羟基苯甘氨酸甲酯,在20℃的溶液中,搅拌转速为250r/min条件下反应10min,通过测定反应液中头孢羟氨苄的含量,从而换算出合成酶活力的数值。采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;流动相:0.02mol/L磷酸二氢钾溶液(用lmol/L氢氧化钾溶液调节pH值至5.0)-甲醇(98:2);流速:1.0mL/min;柱温:25℃;检测波长:230nm。结果头孢羟氨苄在0.24～0.39mg/mL范围内线性关系良好(r=1.0000),回收率均在99%～101%范围内,RSD为0.40%。结论该测定方法专属性强、准确可靠、重现性好,适用于青霉素酰化酶合成酶活力的检测。(本文来源于《中国抗生素杂志》期刊2018年12期）
陈振斌,王旭东,张霞云,刘冬蕾,李志忠[3]（2018）在《催化环境对固定化青霉素酰化酶催化性能的影响》一文中研究指出以UV为检测手段,通过对反应生成的6-氨基青霉烷酸(6-aminopenicillanic acid,6-APA)与对二甲氨基苯甲醛(paradimethylaminobenzaldehyde,PDAB)的显色反应,分别研究了在不同温度和pH值的水溶液中,在醇与NaH_2PO_4-Na_2HPO_4缓冲溶液配制成的混合液中固定化青霉素酰化酶(IPA)催化青霉素G(penicillin G,PG)酶活保留率随时间的变化.结果表明:在25~55℃,温度越高,青霉素催化能力越强;温度越低,酶活性保持率越高;在弱碱性条件下青霉素酰化酶催化能力强,在偏酸性或接近中性的条件下酶的保存稳定性较强;对多元醇,随着醇中羟基质量分数的减小,IPA的酶活保留率依次减小;对于一元醇,溶剂的极性与IPA活性呈反相关关系,即溶剂极性越强,IPA活性越低.(本文来源于《兰州理工大学学报》期刊2018年04期）
黄子轩[4]（2018）在《基于磁性纤维素纳米晶青霉素酰化酶的固定化及催化头孢克洛合成的研究》一文中研究指出头孢克洛属于第二代半合成头孢菌素类抗生素,其通过使转肽酶失活,干扰细菌细胞壁最终阶段的合成达到杀菌目的。头孢克洛对多种革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌均具有很强的杀灭作用,因此在临床上应用十分广泛。传统上,制备头孢克洛的化学法存在着步骤繁琐、大量使用有机试剂,合成过程的废弃物对环境和人体损害大等缺点,与之对比,酶法制备头孢克洛具有环保绿色、反应效率高,反应条件温和等优点,越来越受到人们的关注。青霉素酰化酶(PA)作为一种能够高效催化β-内酰胺核与酰基侧链缩合的酶,已被证明可以用于多种β-内酰胺类抗生素的合成。为了克服游离酶稳定性差、重复利用困难等缺点,本文使用叁羟甲基磷(THP)作为交联剂,以本课题组自主研发的一种生物相容性好、理化性质优异、便于分离回收的新型材料——磁性纤维素纳米晶(MNCC)为固定化酶载体,将青霉素酰化酶固定于磁性纤维素纳米晶上,制备出一种高载酶量、高酶活回收率、高催化效率,稳定性好,便于快速分离回收的固定化青霉素酰化酶(PA-THP-MNCC)。随后,将该固定化催化剂应用于头孢克洛的合成中并系统的优化了各项影响因素。为进一步提高反应产率,采用含深度共熔溶剂(DES)的混合体系作为反应介质合成头孢克洛。主要的研究内容和结果如下:分别使用叁羟甲基磷和戊二醛(GA)为交联剂制备了固定化青霉素酰化酶PA-THP-MNCC与PA-GA-MNCC。在各自最优的制备条件下,PA-THP-MNCC的载酶量为172.3 mg(酶)/g(载体),酶活回收率为77.6%;PA-GA-MNCC的载酶量为148.4mg(酶)/g(载体),酶活回收率分别为48.7%。结果表明使用THP为交联剂制备固定化酶可以得到更好的固定化效果。通过X射线衍射(XRD)、扫描电子显微镜(SEM)、傅里叶红外光谱(FTIR)等对MNCC以及MNCC固定化酶进行物理化学表征,结果表明,PA-THP-MNCC二级结构中的α-螺旋结构含量与游离酶和PA-GA-MNCC对比分别提高了26.6%和19.83%,无规卷曲含量比游离酶和PA-GA-MNCC分别降低了24.26%和16.25%。结果说明其PA-THP-MNCC有更强的结构刚性和稳定性。对PA、PA-GA-MNCC和PA-THP-MNCC的酶学性质进行研究,结果发现叁者的最适温度分别为40、40、50oC,最适pH分别为9,9.5,10。PA-THP-MNCC的(温度、pH、有机溶剂)稳定性均要优于PA和PA-GA-MNCC。在4oC储藏20天后,PA-THP-MNCC仍然可以保持93%以上的酶活回收率,远高于游离酶和PA-GA-MNCC。反应动力学实验显示PA-THP-MNCC对底物具有更强的亲和能力和催化效率。通过酶学性质研究发现,与游离酶和PA-GA-MNCC相比,PA-THP-MNCC具有更好稳定性和催化活性。使用PA-THP-MNCC催化7-氨基-3-氯-头孢烯酸(7-ACCA)与酰基侧链苯甘氨酸甲酯(PGME)反应合成头孢克洛。研究了反应温度、底物摩尔比等关键因素对该反应的影响,得到的最优反应条件为:温度20oC、pH 6.5、底物摩尔比4.0、底物浓度30 mmol/L、酶量3 U/m L。在最优条件下反应产率可达到84.3%,合成水解比(S/H)为1.24。为进一步提高反应产率,通过筛选,在深度共熔溶剂氯化胆碱:乙二醇与水混溶的体系中(混溶比为7:3)进行该合成反应,在温度20oC、pH 6.8、底物摩尔比4.5、底物浓度30 mmol/L、投酶量4 U/mL条件下下,反应产率最高,达到92.1%,S/H为1.85。本文应用新型交联剂THP成功将青霉素酰化酶固定于磁性纤维素纳米晶载体上,所得的固定化酶PA-THP-MNCC具有良好的稳定性和催化活性并实现了水相中和含DES与水混溶体系中头孢克洛的合成,对新型交联剂THP的使用和头孢克洛的酶法制备具有一定的理论指导价值。(本文来源于《华南理工大学》期刊2018-04-23）
王旭东[5]（2018）在《二氧化钛的改性及其固定化青霉素酰化酶的研究》一文中研究指出青霉素是一种拥有优异杀菌效果的抗生素,在抗菌消炎领域具有着十分广阔的应用前景。然而,近几十年来由于青霉素的滥用和过度生产,使大量青霉素被排放到环境中,导致细菌耐药性增强,在很大程度上削弱了青霉素原药的功效。为了保持青霉素类药物的抗菌性能,一般通过将青霉素原药水解,使原药转变成6-氨基青霉烷酸(6-aminopenicillanic acid 6-APA),然后通过改变其侧链合成半合成青霉素。因此,6-APA是合成青霉素类抗生素最重要的前体。6-APA的制备方法主要化学水解法和酶催化水解法两种。目前,化学水解法由于副反应多,生产效率低,环境污染严重等缺点已被淘汰。酶催化水解法具有催化选择性和特异性高,反应条件温和,产率高,绿色无污染等优点,已经取代了化学水解法被广泛应用于工业中。但是游离PGA在催化水解青霉素G的过程中存在稳定性差,环境耐受性弱,重复使用性差,产品提纯困难等问题。一般采用的解决方法是酶的固定化。然而,PGA经固定化后,将会导致酶活力的部分丧失。而且,废弃后的固定化PGA由于运动能力差,难以扩散,其分解产物会造成较严重的区域性环境、社会和视角污染等问题。因此,仍需对其固定化进行系统研究。二氧化钛(Titanium dioxide,TiO_2)颗粒表面含有大量羟基,且具有超亲水表面,这非常有利于PGA活性中心的维持。此外,TiO_2对短波长紫外光具有高折射和掩蔽效应,这将有助于保护固定化PGA免遭太阳光的破坏。同时,TiO_2在阳光下又具有催化作用,可以实现对废弃固定化PGA的降解和无害化处理。因此,本论文通过对TiO_2其表面进行修饰制备了固定化PGA的载体,围绕TiO_2的修饰和PGA固定化等相关问题,进行了一系统探索,取得了一些有意义的成果,现总结如下。(1)首先用戊二醛改性TiO_2颗粒,以接枝率(Graft ratio,G)为优化指标,以紫外-可见分光光度法为表征手段,系统研究了改性条件,如粒径(d),活化温度(T_a),改性温度(T_m),改性时间(t_m),p H值,醛醇比(R_a)和乙醇比(R_e)等对接枝率的影响,得到的最佳改性条件为d=3.4μm,T_a=120~℃,T_m=45~℃,t_m=30 h,p H=6.0,R_a=1:10和R_e=1。在最佳条件下,戊二醛的G能够达到50%。此后,采用不同改性条件的一系列改性TiO_2研究PGA的固定化,该过程以6-APA的紫外-可见分光光度法作为表征方法,研究了酶负载量(Enzyme loading capacity,ELC),酶活性(Enzyme activity,EA)和酶活性保留率(Enzyme activity retention ratio,EAR),结果表明固定化酶ELC达到8780 U,EA达到14872 U/g,EAR达到88%。(2)本文考察了不同固定化工艺条件对EA,ELC以及EAR的影响,得到了最佳的工艺条件(固定化时间t_i=24h,固定化温度T_i=35~℃,固定化p H=8,固定化酶浓度C_i=2.5%)。同时探究了固定化酶的稳定性(温度稳定性,p H稳定性,时间稳定性),结果表明固定化酶的稳定性较游离酶有了很大提高。最后固定化酶的重复使用性也得到了提高。(3)通过结构设计,对TiO_2表面进行系列改性,并以改性后的TiO_2为载体固定化PGA,初步研究微环境对EA,ELC以及EAR的影响,结果表明:TiO_2的一次改性时,环氧基端基硅烷偶联剂改性的TiO_2固定化PGA的催化效果较好。TiO_2的二次改性中醛基和环氧端基硅烷偶联剂依次改性固定化PGA的效果较好。同时探究了了不同微环境下固定化PGA的重复使用性,结果表明醛基微环境下固定化PGA重复使用性最好,氨基微环境下固定化PGA重复使用性最差。本论文将为PGA固定化载体的设计提供技术支撑,以帮助制备出高酶活力,高负载量和高酶活回收率的载体。(本文来源于《兰州理工大学》期刊2018-03-12）
胡春苗,薛屏,曹雪荣,张玮玮[6]（2018）在《磁性聚合物微球固定化青霉素G酰化酶用于催化合成头孢克洛》一文中研究指出利用反相悬浮技术制备出平均孔径和比表面积分别为13.0 nm和123.6 m~2/g的磁性聚合物微球,其具有超顺磁性,饱和磁化强度为6.04 emu/g。磁性微球固定化青霉素G酰化酶在乙二醇-磷酸盐缓冲溶液共溶剂体系中催化7-氨基-3-氯-3-头孢烯-4-酸(7-ACCA)与D-苯甘氨酸甲酯(D-PGM)合成头孢克洛,20℃反应2 h时,头孢克洛产率为33.0%,合成与水解比(S/H)为0.13;而在相同反应条件下使用游离青霉素G酰化酶,产率和合成与水解比分别为17.0%和0.08。同时考察了酶用量、反应温度以及溶剂对磁性固定化酶催化合成头孢克洛性能的影响规律。(本文来源于《现代化工》期刊2018年04期）
陈星,杨露,詹望成,王丽,郭耘[7]（2018）在《青霉素G酰化酶在含环氧基团的顺磁性聚合物微球上的固定化（英文）》一文中研究指出青霉素G酰化酶(PGA)是一种重要的工业生物催化剂,常用于以青霉素G为底物生产7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸(7-ADCA)和6-氨基青霉烷酸(6-APA)等半合成β-内酰胺类抗生素.然而,PGA较差的稳定性和可重复使用性能限制了其在工业上的广泛应用.因此,将PGA固定在固体载体上是很有必要的,可以形成一种可重复使用的高性能的多相催化剂.用于生物酶固定化的良好载体应具备以下条件:(1)载体表面具有可用于与生物酶多点结合的高密度的官能团;(2)载体具有较大的比表面积以固定更多的生物酶.通常情况下,可以通过减小载体的粒径来增加其比表面积,然而,小粒径的载体很难从反应混合液中分离出来,造成固定化酶回收使用困难.为了将聚合物微球的优异固定化性能与磁性纳米粒子的独特顺磁性结合起来,我们制备了一种含环氧基团的顺磁性聚合物微球作为PGA的固定化载体.但由于Fe_3O_4纳米颗粒具有较高的表面能,在反相悬浮聚合反应过程中容易团聚成大颗粒,从而导致制备的顺磁性聚合物微球的磁体含量、表面形貌和粒径分布存在差异.此外,Fe_3O_4纳米颗粒与聚合反应单体之间的相容性不好,使得部分磁性颗粒不能很好地包埋于聚合物微球内部,影响固定化酶的活性和操作稳定性.本文以N,N′–亚甲基双丙烯酰胺为交联剂,以甲基丙烯酸缩水甘油酯和烯丙基缩水甘油醚为功能性单体,用反相悬浮聚合方法在SiO_2包覆的Fe_3O_4纳米颗粒表面成功制备出含环氧基团的顺磁性聚合物微球.用SEM,FT-IR,XRD,VSM和低温氮气吸附等手段对含环氧基团的顺磁性聚合物微球进行了表征.研究了SiO_2对Fe_3O_4纳米颗粒的包覆和Fe_3O_4/SiO_2纳米颗粒的数量对于固定化酶的初始活性和操作稳定性的影响.SiO_2在反相悬浮聚合过程中发挥重要作用,用SiO_2对Fe_3O_4纳米颗粒进行亲水性改性,有效改善了Fe_3O_4纳米颗粒与聚合反应单体的相容性,将其引入反相悬浮聚合体系中,可以制备得到球形度好、粒径分布均匀和超顺磁性的含环氧基团的顺磁性聚合物微球,其中当Fe_3O_4/SiO_2纳米颗粒的质量比为7.5%时制备的含环氧基团的顺磁性聚合物微球具有最好的PGA固定化性能.PGA通过其活性非必需侧链基团–氨基与顺磁性聚合物微球表面的环氧基团的共价结合来制备顺磁性固定化酶,该固定化PGA的初始活性为430 U/g(wet),在外加磁场的作用下容易回收使用,重复使用10次后可保留99%的初始活性,具有良好的热稳定性和酸碱稳定性,具有较好的工业应用前景.(本文来源于《催化学报》期刊2018年01期）
赵国群,安蔚,刘金龙[8]（2017）在《固定化青霉素G酰化酶合成头孢氨苄过程中酶活稳定性研究》一文中研究指出目的改善固定化青霉素G酰化酶(PGA)的酶活稳定性,从而提高其重复使用次数。方法采用模拟法,研究了酶法合成头孢氨苄过程中影响PGA酶活稳定性的一些主要因素。结果 7-氨基-3-脱乙酰氧基头孢烷酸(7-ADCA)、苯甘氨酸甲酯(PGM)对固定化PGA表现出了很强的底物抑制作用,而且它们的抑制作用与其浓度几乎无关。固定化PGA加入到7-ADCA、PGM溶液后,其酶活迅速降低,但反应时间超过12h后,PGA酶活几乎保持恒定不变。头孢氨苄对固定化PGA表现出了产物抑制作用,这种抑制作用主要是由其水解产物造成的。随着与头孢氨苄反应时间的延长,固定化PGA的酶活一直持续降低。当控制反应温度≤30℃时,固定化PGA表现出良好的酶活稳定性。当酶反应液p H值为6.5时,固定化PGA酶活稳定性最好。结论合理控制头孢氨苄合成反应条件能够有效改善固定化PGA酶活稳定性。(本文来源于《中国抗生素杂志》期刊2017年10期）
刘冬蕾[9]（2017）在《青霉素酰化酶固定化载体的设计合成》一文中研究指出本论文在熟悉传统固定化PGA研究方法和手段的基础上,进行研究手段和方法创新,从考察PGA在不同有机介质中的催化活性出发,通过所得结果,设计出有利于呈现PGA催化活性的固定化载体微环境,并合成了对PGA催化活性保持率高的叁嵌段温敏性聚合物新型载体,较深入系统的研究了载体中各单体嵌段比例与其最低临界溶解温度、PGA负载量和固定化PGA催化活性之间的关系,以及固定化条件与PGA负载量和固定化PGA催化活性这些衡量载体性能的指标之间的关系,取得了一定结果。主要研究内容总结如下:1)以氯甲基化改性的大孔吸附树脂CLX1180为载体,利用CLX1180的苄基氯与PGA的氨基之间的亲核取代反应固定化PGA,采用傅里叶变换红外光谱表征固定化PGA结构,研究固定化条件对PGA负载率和固定化PGA活力的影响,最后对固定化PGA的连续操作稳定性和储存稳定性进行了系统考察。结果表明:PGA成功固定于CLX1180载体上;最佳固定化时间为10 h,温度为36 oC,p H为6.0,原始游离PGA活力为7360 U/g的酶液为35.00 m L,所得固定化PGA活力为2200 U/g,具有良好的连续操作稳定性和储存稳定性;但活力回收率不高,仅为29.89%。2)系统考察了游离PGA在室温下与烷烃、醇、酸、卤代烃、醚类等含各种功能基的有机溶剂作用不同时间后的催化活性,结果表明:(1)随时间延长,对于疏水性有机溶剂,活力保留率(Cr)减小并逐渐达到平衡,对同一系列,log P越小,Cr越小;对于亲水性有机溶剂,Cr在多数情况下立即降低至某一值,然后再逐渐增大至最大值,最后逐渐减小至平衡值,对同一系列,log P越小,Cr越大。(2)Cr达平衡的时间随溶剂分子尺寸l的增加表现为不同的变化趋势,具体为:l<4.4?时,Cr达平衡较快且平衡时间不受l的影响;4.4?<l<6.9?时,Cr达平衡较慢,且平衡时间随l的增加而增加;l>6.9?时,Cr达平衡较快,且平衡时间随l的增加而减小。(3)多元醇处理的PGA,其Cr最大且维持稳定。3)根据2)的结果,选取含醇羟基的甲基丙烯酸β-羟乙酯(HEMA)作为构建载体微环境的单体,室温下可通过点击反应与PGA的氨基共价结合的含环氧基的甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)作为PGA固定化靶点单体,可使载体发生溶胶/凝胶相转变的N,N二乙基丙烯酰胺(DEA)作为温敏性单体,采用RAFT聚合,合成不同序列(PDEA-b-PHEMA-b-PGMA简写DHG,PDEA-b-PGMA-b-PHEMA简写DGH)、不同单体嵌段比例的叁嵌段温敏性聚合物载体,研究了载体中各单体嵌段比例与其最低临界溶解温度(LCST)、PGA负载量和固定化PGA催化活性之间的关系。结果表明:(1)不同嵌段比例载体的相对分子量与时间成线性增长关系,分子量分布在1.10-1.35之间,说明载体的合成是活性可控聚合。(2)随载体中单体HEMA摩尔百分比的增加,其LCST升高,但相转变温度区间变宽,温敏性减弱;随单体GMA摩尔百分比的增加,LCST降低,相转变温度区间变宽,温敏性减弱。(3)随单体(HEMA或GMA)摩尔百分比的增加,PGA负载量均呈现先增加后逐渐趋于平缓的趋势,而固定化PGA活力和活力回收率均先大幅增加到最大值后略有下降并趋于平缓。其中DHG序列中,当GMA比例为24%,HEMA比例为47%(DHG4724)时,其LCST为36 oC,固定化游离PGA量为910 U(原始游离PGA活力为886 U/g),固定化PGA活力为780 U/g,活力回收率为88%,重复使用10次后,其活力保留率为83%。4)以3)中的DHG4724为载体,考察固定化条件对PGA负载量、固定化PGA活力以及活力回收率的影响,得出固定化PGA的最佳条件:酶液浓度为10%(体积为5 m L),p H为8.0,固定化温度为36 oC,时间为16 h,所得固定化游离PGA量为1100 U(原始游离PGA活力为886 U/g),固定化PGA活力为830 U/g,活力回收率为94%。(本文来源于《兰州理工大学》期刊2017-04-01）
安蔚[10]（2016）在《酶法合成头孢氨苄过程中固定化青霉素酰化酶酶活稳定性及其再生研究》一文中研究指出头孢氨苄(Cephalexin)是第一代可用于口服的头孢类抗生素,具有抗菌谱广、杀菌力强、耐酸、胃肠吸收好等优点,该药被列入我国和其他各国基本药物目录中。与传统的化学法相比,酶法合成头孢氨苄具有反应条件温和,工艺操作简单,无需基团保护,清洁安全等优点。目前国内外均使用固定化青霉素G酰化酶(Penicillin G acylase,PGA)合成头孢氨苄。固定化PGA价格昂贵,如何最大程度地使固定化PGA酶活保持稳定,从而最大程度地提高固定化PGA的重复使用次数,是当前酶法合成头孢氨苄生产中亟待解决的问题之一。本课题对酶法合成头孢氨苄时造成青霉素酰化酶酶活降低的因素,如何改善固定化青霉素酰化酶稳定性,以及失活固定化PGA的再生进行了研究。造成青霉素酰化酶酶活降低的因素研究。7-ADCA和PGM对固定化PGA有很强的抑制作用,而且PGM的抑制作用几乎与其浓度无关;头孢氨苄对固定化PGA具有产物抑制作用,而且这种抑制作用与其浓度呈正相关;固定化PGA在反应温度≤30℃,酶反应液pH值为6.5时,固定化PGA酶活稳定性最好;磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液可显着提高固定化PGA酶活稳定性。改善固定化青霉素酰化酶稳定性的研究。研究了金属离子、表面活性剂、糖类、氨基酸以及醇类对固定化PGA酶活的影响。Ca2+对固定化PGA的有激活作用,使其酶活提高了10.65%。添加果糖、聚乙烯醇和异丙醇可显着提高固定化PGA酶活。赖氨酸和甘氨酸对固定化PGA有很大的激活作用,使其酶活增加了34%以上;而色氨酸和叶酸有明显的抑制作用。异丙醇、L-赖氨酸、Ca2+、聚乙烯醇复合加入到头孢氨苄反应液时,它们之间没有协同作用。酶法合成头孢氨苄时添加0.5%异丙醇,使得固定化PGA重复使用次数达16次,比未添加的对照相比提高45.45%,固定化PGA的酶活稳定性获得了非常显着的改善。失活固定化PGA进行了再生研究。去离子水洗涤和酸水(pH6)洗涤对失活固定化PGA没有再生作用,而碱水(pH8)洗涤具有再生作用。30℃下用pH8碱水洗涤60 min,使其酶活提高5.7%。超声处理(频率28 KHz,15 min)使得失活固定化PGA酶活提高了5.67%。展开-再折迭再生法对失活固定化PGA的再生无效。介质直接再生法(30%乙二醇+100 mM7-ADCA)对失活固定化PGA具有再生效果,使其酶活提高13.81%。失活固定化PGA的适宜再生方法为:首先用30%乙二醇-100mM7-ADCA溶液浸泡60 min,然后用碱水洗涤60 min,最后用28 KHz超声处理15min,使失活固定化PGA酶活力恢复率达77.75%,再生效果良好。(本文来源于《河北科技大学》期刊2016-12-01）
固定化酰化酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的建立一种HPLC法测定固定化青霉素酰化酶合成头孢羟氨苄活力的方法。方法酶与其底物7-ADCA及D-对羟基苯甘氨酸甲酯,在20℃的溶液中,搅拌转速为250r/min条件下反应10min,通过测定反应液中头孢羟氨苄的含量,从而换算出合成酶活力的数值。采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;流动相:0.02mol/L磷酸二氢钾溶液(用lmol/L氢氧化钾溶液调节pH值至5.0)-甲醇(98:2);流速:1.0mL/min;柱温:25℃;检测波长:230nm。结果头孢羟氨苄在0.24～0.39mg/mL范围内线性关系良好(r=1.0000),回收率均在99%～101%范围内,RSD为0.40%。结论该测定方法专属性强、准确可靠、重现性好,适用于青霉素酰化酶合成酶活力的检测。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
固定化酰化酶论文参考文献
[1].罗晖,汪月,刘婧冉,仝双明,常雁红.头孢菌素C酰化酶的固定化策略及其对酶学性质的影响[C].第十二届中国酶工程学术研讨会论文摘要集.2019
[2].刘萍,田洪年,张锁庆,张文胜,杨梦德.HPLC法测定固定化青霉素酰化酶合成头孢羟氨苄的活力[J].中国抗生素杂志.2018
[3].陈振斌,王旭东,张霞云,刘冬蕾,李志忠.催化环境对固定化青霉素酰化酶催化性能的影响[J].兰州理工大学学报.2018
[4].黄子轩.基于磁性纤维素纳米晶青霉素酰化酶的固定化及催化头孢克洛合成的研究[D].华南理工大学.2018
[5].王旭东.二氧化钛的改性及其固定化青霉素酰化酶的研究[D].兰州理工大学.2018
[6].胡春苗,薛屏,曹雪荣,张玮玮.磁性聚合物微球固定化青霉素G酰化酶用于催化合成头孢克洛[J].现代化工.2018
[7].陈星,杨露,詹望成,王丽,郭耘.青霉素G酰化酶在含环氧基团的顺磁性聚合物微球上的固定化（英文）[J].催化学报.2018
[8].赵国群,安蔚,刘金龙.固定化青霉素G酰化酶合成头孢氨苄过程中酶活稳定性研究[J].中国抗生素杂志.2017
[9].刘冬蕾.青霉素酰化酶固定化载体的设计合成[D].兰州理工大学.2017
[10].安蔚.酶法合成头孢氨苄过程中固定化青霉素酰化酶酶活稳定性及其再生研究[D].河北科技大学.2016