陕西省西安市鄠邑区疾病预防控制中心陕西西安710300）
【摘要】目的：探讨虎红平板凝集实验（RBPT）、试管凝集实验（SAT）、胶体金法（GICA）对布鲁氏菌病诊断的价值。方法：采用回顾性方法分析，选取我中心自2012年1月到2017年12月的212例从事牛羊养殖、皮毛加工从业受检者作为研究对象，均给予RBPT、SAT、GICA实验，比较分析三种检测结果。结果：RBPT、SAT、GICA检测结果经对比分析，无统计学意义（P>0.05）。结论：布鲁氏菌病需结合临床表现、合理应用检查方法来判断其发展阶段，并给予规范诊断治疗。
【关键词】布鲁氏菌病；RBPT；SAT；GICA
【中图分类号】R516.7【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2019）03-0126-02
布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的自然疫源性人畜共患传染病，以长时间发热、多汗，体乏，关节疼痛及肝脾肿大为临床特征，易转变为慢性，复发率高，不仅给生命财产带来损失，而且还制约了畜牧业的发展[1]。如何提高布鲁氏菌病的诊断是当前临床研究的重要课题，本文为了分析RBPT、SAT、GICA对布鲁氏菌病诊断的价值，特选取我中心连续五年共212例从事牛羊养殖、皮毛加工从业受检者作为本次研究对象，现报告如下。
1.资料与方法
1.1资料
选取我中心自2012年1月到2017年12月调查的212例从事牛羊养殖、皮毛加工从业受检者，纳入标准：签订知情同意书。排除标准：严重肝肾功能不全者；免疫系统疾病；血液疾病；精神疾病者。其中男性126例，女性86例；年龄24～59岁，平均年龄（45.42±3.45）岁。
1.2方法
RBPT：采用虎红平板凝集抗原，清晨空腹抽取3ml血液，待血液凝固后获取血清；在清洁玻片上加30μL待检血清，然后加入虎红平板凝集抗原，充分混匀，在5分钟内对结果进行判定。同时每次试验均设立阳性、阴性对照。阴性标准：无凝集颗粒；阳性标准：可见凝集颗粒。
SAT：（1）被检血清稀释：抽取3ml血液，每一份待检血清各准备5支小试管，第1支试管中加入2.3ml生理盐水，第2管不加，第3，4，5管中各加0.5ml生理盐水。第1支试管中加入0.2ml被检血清，待充分混匀后，用该吸管从第1管吸取混匀血清加入到第2和第3支试管中，各0.5ml，以该吸管将第3管混匀，并吸取0.5ml加入到第4管中，混匀。从第4管中取0.5ml加入到第5管中，混匀。再从第1管和第5管各吸取0.5ml弃去。（2）加入抗原：先用生理盐水将抗原原液作1:10稀释，稀释后的抗原加入各稀释的血清管中（第1管不加，作血清对照），每管加0.5ml，混匀。加入抗原后的第2管至第5管，每管总量1ml，血清稀释度从第2管至第5管分别为1:25，1:50，1:100，1:200。（3）对照：阴性血清对照：血清稀释后加抗原。阳性血清对照，其血清稀释到原有滴度，加抗原。抗原对照：适当稀释的抗原加生理盐水。（4）比浊管的制备：取本次试验用的稀释抗原5～10ml，加入等量的生理盐水作倍比稀释。每次试验须配制比浊管作为判定的依据。所有试验管，对照管，比浊管充分振荡后置37℃温箱20～22小时，取出后放室温2小时，然后以比浊管为标准判定结果。阳性标准：血清效价在1:100以上。
GICA：清晨空腹抽取3ml血液，凝固后取10μL的血清，加400μL生理盐水作1:40稀释，作为检测液备用。取试剂一个，吸取150μL（约3～4滴）于试剂圆孔中，2～15分钟内观察检测结果。阳性标准：试剂窗口C和T处出现2条红色沉淀线为阳性，即有布鲁氏菌感染。阴性标准：试剂窗口C处出现1条红色沉淀线为阴性，即无布鲁氏菌感染。
1.3统计学分析
所有数据采用SPSS19.0软件进行统计分析，用百分比计数，采用χ2检验；P＜0.05表示差异具有统计学意义。
2.结果
2.1RBPT与SAT检测结果比较
RBPT与SAT检测结果经对比分析，无显著差异（P＞0.05）。详见表1所示。
表1RBPT与SAT检测结果比较（%）
3.讨论
布鲁氏菌是一种革兰氏阴性的短小杆菌，牛、羊及猪等动物最容易感染，可引起母畜传染性流产。由于布鲁氏菌病中含有内毒素及菌体自身所引起人体过敏，可出现各种各样的变态反应性病变，布鲁氏菌骨髓炎是血源性布氏杆菌感染的局部表现，多数患者出现急性感染，发烧约2～3周，常常伴随有头痛、乏力及多汗等表现[2]。有时全身症状全部消退后，也可出现局部症状。当患者腰椎受累后，将出现持续性腰背痛，且伴随有肌肉痉挛，限制了活动，影响行走，直接威胁患者生命健康。因此，加强布鲁氏菌病的诊断具有重要意义。
临床对于布鲁氏菌病的诊断方法较多，本次主要比较RBPT、SAT、GICA三种检测方法。RBPT是较常用的诊断方法，该方法操作简单易行，且反应速度较快，适合较大面积及大范围筛查，有着较强敏感性，通过激活IgG的活性去除血清中非特异性的凝集素，有着较低成本。但若血清标本中出现严重的溶血反应或交叉反应，且反应时间超过4分钟，血清中纤维素的凝集将受到明显抑制，使得结果出现假阳性。RBPT法并不能判断布鲁氏菌病是自然感染所致还是人工免疫所致。SAT可定性也可定量判断检验结果，以检测IgM抗体为主，但该方法需要大量的布鲁氏菌凝集抗原，肉眼判定时受到的主观因素影响相对较大，且在24小时内才能够出结果，检测耗时较长，不适用大面积的布鲁氏菌病筛查[3]。GICA的操作过程较简单，但并不能有效调整待检血清标本中的抗体水平。在本次研究中，比较三种检测方法，经统计学分析，无统计学意义。由此表明：采用RBPT、SAT、GICA对布鲁氏菌病进行检测，三种方法检查结果间无显著差异。
综上所述，布鲁氏菌病需结合临床表现、合理应用检查方法来判断其发展阶段，并给予科学规范治疗。
【参考文献】
[1]杨春萍.用RBPT、SAT及GICA诊断布氏杆菌病的效果对比[J].当代医药论丛,2016,14(17):126-127.
[2]朱晓娟,查赟峰,徐德顺,等.布鲁菌病3种血清抗体检测方法的应用比较[J].中国卫生检验杂志,2017,3(14):2029-2030.
[3]何晶晶,刘景瑶,张雁,等.间接酶联免疫吸附试验在人布鲁菌病诊断中的价值研究[J].诊断学理论与实践,2017,3(1):84-87.