导读:本文包含了双杂交系统论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:黄瓜花叶病毒,外壳蛋白,番茄,酵母双杂交系统
双杂交系统论文文献综述
宁小清,张璐,潘瑞兰,曾泉,陈保善[1]（2019）在《利用酵母双杂交系统筛选与黄瓜花叶病毒外壳蛋白互作的寄主蛋白》一文中研究指出利用酵母双杂交系统,以黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus, CMV)的外壳蛋白(coat protein, CP)为诱饵,从番茄叶片c DNA文库中筛选与其互作的蛋白。结果显示,诱饵载体pBT3-SUC-CMV-CP均能在酵母细胞中正确表达,无自激活活性而且对酵母无毒性;通过对酵母双杂交文库的筛选和回转验证,共获得了98个阳性克隆,分别编码67个可能与CMV-CP相互作用的蛋白,分别参与植物防御反应、光合作用、物质转运、信号转导、能量代谢、氨基酸代谢、细胞壁的形态建成、植物的激素代谢等。本研究结果表明,CMV CP可同时调控寄主的多个代谢过程,在CMV的致病过程中有多重功能。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2019年07期）
李铃仙,曹阳,邢启凯,张玮,彭军波[2]（2019）在《利用酵母双杂交系统筛选可可毛色二孢菌效应因子LtALL1的互作蛋白》一文中研究指出葡萄溃疡病(Botryosphaeria dieback)是重要的葡萄枝干病害,在世界各国葡萄产区均普遍发生,且每年都会造成较大的经济损失。可可毛色二孢菌(Lasiodiplodia theobromae)是引发我国葡萄溃疡病的优势种群之一。目前,对于可可毛色二孢菌的致病机理还不明晰。效应子是病原菌分泌到寄主细胞间隙或寄主细胞内,在病原菌的侵入、定殖和扩展过程中发挥着重要作用的蛋白因子。本研究鉴定到一个可可毛色二孢菌效应因子LtALL1,其编码一个146个氨基酸的多肽,分子量为15 ku。LtALL1信号肽可使缺陷型酵母YTK12恢复蔗糖酶活性,具有分泌信号肽的功能。LtALL1基因在可可毛色二孢菌中的超表达降低了病原菌的致病力。进一步利用可可毛色二孢菌侵染的酵母双杂交cDNA文库,通过酵母双杂交技术对效应子LtALL1在寄主葡萄里的互作靶标进行了筛选。经测序比对分析,最终筛选获得66个阳性克隆,其中包括3个钙调节蛋白,3个转录因子(WRKY型、Myb型、bZIP型以及NAC型),2个泛素蛋白酶等。该项研究将为解析可可毛色二孢菌的致病机理奠定基础。(本文来源于《中国植物病理学会2019年学术年会论文集》期刊2019-07-20）
房宸曦,车妍,廖钰秋,王一凡,张宁[3]（2019）在《酵母双杂交系统筛选马铃薯StLURP1基因的互作蛋白》一文中研究指出寄生霜霉菌响应迟发上调基因1(late up-regulated in response to Hyaloperonospora parasitica 1,LURP1)在植物抵御致病菌寄生霜霉菌(Hyaloperonospora parasitica, Hp)的反应和抗逆中起到关键作用。为了阐明马铃薯(Solanum tuberosum)LURP1基因的生物学功能并明确其在蛋白互作网络中的作用,本研究利用同源重组的定向克隆方式构建了其诱饵载体p GBKT7-StLURP1,并通过酵母(Saccharomyces cerevisiae)双杂交系统筛选马铃薯c DNA文库。结果表明,双杂筛选的阳性率约为70%,最终获得88个阳性克隆,经测序鉴定出12种含完整开放阅读框的StLURP1互作蛋白,互作的真实性通过回转实验进行验证。对互作蛋白进行Blast比对和基因本体注释(Gene Ontology, GO)分析,结果显示,StLURP1与甘油磷酸二酯酶、富脯氨酸蛋白、多酚氧化酶、肌动蛋白解聚因子、重金属离子转运蛋白及DnaJ家族蛋白等多种蛋白相互作用,可能参与植物脂类代谢、生物与非生物胁迫响应、肌动蛋白解聚、重金属离子解毒及蛋白质折迭等生物过程。本研究为进一步研究StLURP1基因的生物学功能与作用提供了理论依据。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2019年06期）
何磊,张清秀,魏秀娥,宋加兴,荣良群[4]（2019）在《CytoTrap酵母双杂交系统筛选突触后致密物质-93与CX3CL1相互作用位点》一文中研究指出目的:筛选突触后致密物质-93(PSD-93)与趋化因子CX3CL1相互作用位点。方法:对诱饵基因PSD-93(1-852aa)进行全基因合成,PCR扩增CX3CL1(1-395aa)诱饵基因全长和PSD-93-mut1(1-192aa)、PSD-93-mut2(1-420aa)、PSD-93-mut3(1-535aa)、PSD-93-mut4(1-661aa)及CX3CL1-mut(25-357aa)文库基因,并将PSD-93和CX3CL1基因重组入pSos载体,构建全长诱饵质粒pSos-PSD-93和pSos-CX3CL1;PSD-93-mut1、PSD-93-mut2、PSD-93-mut3、PSD-93-mut4、CX3CL1-mut基因被重组入pMyr载体,构建突变体质粒pMyr-PSD-93-mut1、pMyr-PSD-93-mut2、pMyr-PSD-93-mut3、pMyr-PSD-93-mut4、pMyr-CX3CL1-mut。经酶切及测序鉴定构建质粒正确后将其转化酵母菌cdc25Hα,检测其在酵母中的表达、有无自激活作用及细胞质定位,并利用CytoTrap酵母双杂交系统筛选PSD-93与CX3CL1蛋白相互作用位点。结果:成功获得重组诱饵质粒和突变体质粒,在酵母双杂交系统中,通过将构建的质粒进行两两结合,筛选出以下阳性克隆:全长质粒pSos-PSD-93+全长质粒pMyr-CX3CL1,全长质粒pSos-CX3CL1+pMyr-PSD-93-mut3,全长质粒pSos-CX3CL1+pMyr-PSD-93-mut4,从而鉴定出PSD-93和CX3CL1结合的具体氨基酸序列。结论:在本实验条件下,PSD-93和CX3CL1的结合位点分别位于PSD-93的420-535aa序列和CX3CL1的357-395aa序列。(本文来源于《东南大学学报(医学版)》期刊2019年03期）
张阳,张玲玲,李若佼,谢欣冉,李仰平[5]（2019）在《应用酵母双杂交系统筛选虾夷扇贝FOXL2的相互作用蛋白》一文中研究指出FOXL2是脊椎动物的雌性决定基因,在多种无脊椎动物中也被认为是雌性决定与分化的关键基因,但其在无脊椎动物中的作用机制目前尚不清晰。本文利用Clontech酵母双杂交系统筛查虾夷扇贝FOXL2的相互作用蛋白。研究首先构建诱饵质粒pGBKT7-FOXL2,并检测诱饵蛋白的毒性及自激活活性,结果显示诱饵蛋白对酵母菌株无毒,也无自激活活性。利用该诱饵质粒,本研究从虾夷扇贝酵母双杂交cDNA文库筛选得到17个阳性克隆,测序验证得到12个读码框正确的阳性克隆,它们来自4种蛋白:COP9信号复合体亚基5、钠/钾ATP酶β3、哺乳动物室管膜相关蛋白1和胰脂肪酶相关蛋白2。研究进一步将诱饵质粒与4种蛋白的猎物质粒进行共转化验证,结果均为阳性,表明这4种蛋白与虾夷扇贝FOXL2都可能存在相互作用。本文为研究FOXL2在无脊椎动物性别决定与分化中的作用提供了参考。(本文来源于《中国海洋大学学报(自然科学版)》期刊2019年05期）
刘小缦,王群,王石,高素素,王晓梅[6]（2019）在《分裂泛素化酵母双杂交系统研究信息素因子STE2蛋白相互作用》一文中研究指出真菌的进化、分化及有性发育趋势受若干性别基因的调控,如交配型、信息素因子及异源叁聚体G-蛋白ɑ-亚基基因等;同时,信息素因子调控真菌的有性生殖在酿酒酵母中也得到充分研究。匍柄霉属(Stemphylium)是丝状子囊真菌中的一类重要真菌类群,许多丝状子囊真菌属、种中含有信息素因子。在自然界中,匍柄霉属真菌大多数是以无性态的形式存在,但其中也有一小部分存在有性生殖阶段。为了深入研究信息素受体STE2及其相关基因对匍柄霉属典型种有性生殖的影响,本研究选取含有信息素因子STE2的匍柄霉属典型种Stemphylium eturmiunum为试验材料,克隆鉴定了信息素受体STE2,然后将其构建至诱饵蛋白表达载体上,并在cDNA文库初筛得到数个疑似互作蛋白片段基础上,克隆其基因全长构建至靶蛋白表达载体上,并利用分裂泛素化的膜酵母双杂交系统,进行一对一验证筛选STE2的相关互作蛋白。该研究筛选出的互作蛋白结果为后期的CO-IP、Poll-Down实验提供了基础。(本文来源于《山东农业大学学报(自然科学版)》期刊2019年01期）
曹丹煜,陈刚,张健东,汤保贵,周晖[7]（2019）在《马氏珠母贝α2-巨球蛋白受体结合区酵母双杂交系统的构建及自激活检测》一文中研究指出【目的】构建马氏珠母贝(Pinctada martensii)酵母双杂交文库及α2-巨球蛋白受体结合区诱饵载体,检测其在酵母细胞中的自激活作用。【方法】利用CLONTECH SMART技术及酵母体内同源重组的方法构建马氏珠母贝酵母双杂交cDNA文库;将α2-巨球蛋白受体结合区克隆至pGADT7载体,并转化AH109酵母感受态细胞,检测自激活作用。【结果与结论】酵母双杂交文库容量为1.11×107克隆/mL,重组率大于90%;菌落PCR结果显示,插入片段长度均在500bp以上;诱饵质粒成功转化至AH109菌株,且无自激活性,符合文库构建指标,可用于文库筛选。(本文来源于《广东海洋大学学报》期刊2019年01期）
李颖秀,潘教文,李臻,王庆国,刘炜[8]（2019）在《利用酵母双杂交系统筛选水稻类受体蛋白激酶FTPK1的互作蛋白》一文中研究指出类受体蛋白激酶(receptor-like protein kinases, RLKs)作为重要的信号分子受体,在植物生长发育过程中起着重要的调控作用。RLKs主要通过胞内的激酶区磷酸化其底物蛋白来发挥作用,因此鉴定RLKs的底物蛋白对于其功能的研究至关重要。本研究利用酵母双杂交系统对FTPK1的互作蛋白进行筛选,初步确定了两个候选蛋白,为进一步研究该激酶的功能奠定了基础。(本文来源于《山东农业科学》期刊2019年01期）
何萍,赵孟成,王灵,黄增帅,陈堡[9]（2018）在《利用酵母双杂交系统筛选TRADD的互作牛分枝杆菌蛋白》一文中研究指出为研究牛分枝杆菌抑制肿瘤坏死因子介导的细胞凋亡来逃避宿主免疫反应的机制,本试验采用酵母双杂交系统在牛分枝杆菌中筛选可与肿瘤坏死因子受体1相关死亡域蛋白(TRADD)相互作用的蛋白。通过限制性内切酶Sau3AⅠ部分消化牛分枝杆菌基因组,回收片段随机插入pGADT7载体中,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,构建牛分枝杆菌基因组文库。PCR扩增人tradd基因,将扩增产物克隆于pGBKT7载体上,构建重组诱饵质粒pGBKT7-tradd,转化酵母菌Y2HGold。用诱饵质粒pGBKT7-tradd对牛分枝杆菌基因组文库进行筛选,以获得与TRADD互作的阳性候选克隆;提取阳性候选克隆中的质粒,经测序和同源性比对分析,获得与TRADD互作的牛分枝杆菌蛋白的生物学信息。结果显示,构建的文库滴度为2×10~6 CFU,平均插入片段在1.5kb左右,文库重组率>95%。经Western blotting验证,诱饵质粒pGBKT7-tradd可在酵母菌中表达诱饵蛋白TRADD,且TRADD的表达对酵母菌无毒性,不会在酵母菌中自激活。应用酵母双杂交系统初步筛选出20个与TRADD互作的阳性克隆,经复筛、测序和BLAST对比,最终发现7个基因序列。本研究应用酵母双杂交技术成功筛选到7个与TRADD互作的牛分枝杆菌蛋白,为进一步研究牛分枝杆菌对细胞凋亡的抑制机制提供线索。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2018年11期）
王雪娟,杨君,张艳,阎媛媛,马峙英[10]（2018）在《应用酵母双杂交系统筛选GbVWR互作蛋白》一文中研究指出前期研究表明海岛棉(Gossypium barbadense)GbVWR(Verticillium wilt resistance)基因参与了棉花抗黄萎病反应,但其抗病机制尚不清楚。本试验利用酵母双杂交系统筛选GbVWR互作蛋白,并通过对互作关系的分析初步探讨其介导的棉花抗病机制。结果表明:本研究成功构建了酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-GbVWR,并利用PEG/LiAc法将其转化至酵母菌株Y2HGold感受态细胞中,结果显示重组质粒无自激活活性及毒性;用携带诱饵载体pGBKT7-GbVWR的酵母菌株与黄萎病诱导的海岛棉Pima90-53酵母双杂交cDNA文库进行杂交,通过PCR、测序和数据库比对分析插入的基因片段,共筛选到24个与GbVWR潜在互作的蛋白,为进一步探明GbVWR的抗病功能提供了理论依据。(本文来源于《河北农业大学学报》期刊2018年05期）
双杂交系统论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
葡萄溃疡病(Botryosphaeria dieback)是重要的葡萄枝干病害,在世界各国葡萄产区均普遍发生,且每年都会造成较大的经济损失。可可毛色二孢菌(Lasiodiplodia theobromae)是引发我国葡萄溃疡病的优势种群之一。目前,对于可可毛色二孢菌的致病机理还不明晰。效应子是病原菌分泌到寄主细胞间隙或寄主细胞内,在病原菌的侵入、定殖和扩展过程中发挥着重要作用的蛋白因子。本研究鉴定到一个可可毛色二孢菌效应因子LtALL1,其编码一个146个氨基酸的多肽,分子量为15 ku。LtALL1信号肽可使缺陷型酵母YTK12恢复蔗糖酶活性,具有分泌信号肽的功能。LtALL1基因在可可毛色二孢菌中的超表达降低了病原菌的致病力。进一步利用可可毛色二孢菌侵染的酵母双杂交cDNA文库,通过酵母双杂交技术对效应子LtALL1在寄主葡萄里的互作靶标进行了筛选。经测序比对分析,最终筛选获得66个阳性克隆,其中包括3个钙调节蛋白,3个转录因子(WRKY型、Myb型、bZIP型以及NAC型),2个泛素蛋白酶等。该项研究将为解析可可毛色二孢菌的致病机理奠定基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
双杂交系统论文参考文献
[1].宁小清,张璐,潘瑞兰,曾泉,陈保善.利用酵母双杂交系统筛选与黄瓜花叶病毒外壳蛋白互作的寄主蛋白[J].基因组学与应用生物学.2019
[2].李铃仙,曹阳,邢启凯,张玮,彭军波.利用酵母双杂交系统筛选可可毛色二孢菌效应因子LtALL1的互作蛋白[C].中国植物病理学会2019年学术年会论文集.2019
[3].房宸曦,车妍,廖钰秋,王一凡,张宁.酵母双杂交系统筛选马铃薯StLURP1基因的互作蛋白[J].农业生物技术学报.2019
[4].何磊,张清秀,魏秀娥,宋加兴,荣良群.CytoTrap酵母双杂交系统筛选突触后致密物质-93与CX3CL1相互作用位点[J].东南大学学报(医学版).2019
[5].张阳,张玲玲,李若佼,谢欣冉,李仰平.应用酵母双杂交系统筛选虾夷扇贝FOXL2的相互作用蛋白[J].中国海洋大学学报(自然科学版).2019
[6].刘小缦,王群,王石,高素素,王晓梅.分裂泛素化酵母双杂交系统研究信息素因子STE2蛋白相互作用[J].山东农业大学学报(自然科学版).2019
[7].曹丹煜,陈刚,张健东,汤保贵,周晖.马氏珠母贝α2-巨球蛋白受体结合区酵母双杂交系统的构建及自激活检测[J].广东海洋大学学报.2019
[8].李颖秀,潘教文,李臻,王庆国,刘炜.利用酵母双杂交系统筛选水稻类受体蛋白激酶FTPK1的互作蛋白[J].山东农业科学.2019
[9].何萍,赵孟成,王灵,黄增帅,陈堡.利用酵母双杂交系统筛选TRADD的互作牛分枝杆菌蛋白[J].中国畜牧兽医.2018
[10].王雪娟,杨君,张艳,阎媛媛,马峙英.应用酵母双杂交系统筛选GbVWR互作蛋白[J].河北农业大学学报.2018