导读:本文包含了矽肺纤维化论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:辅酶Q10,矽肺,纤维化,α平滑肌肌动蛋白
矽肺纤维化论文文献综述
蔺文轩,孙岳,杨安宁,刘洋,王宇欣[1]（2019）在《辅酶Q10对小鼠矽肺纤维化的作用》一文中研究指出[背景]矽肺是危害最严重的职业病,目前无特效治疗方案。研究发现辅酶Q10可缓解氨甲蝶呤诱导的肺纤维化,但能否缓解矽肺纤维化尚无文献报道;此外,羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGCR)作为内源性合成辅酶Q10的限速酶是否在该过程中发生变化也无研究报道。[目的]探讨辅酶Q10对小鼠矽肺纤维化的影响及HMGCR在该过程中的变化。[方法]C57BL/6小鼠随机分为3组:对照组(生理盐水组)、模型组(SiO_2组)、治疗组(SiO_2+辅酶Q10组),每组8只。模型组、治疗组采用气管内一次性滴注0.1 m L SiO2悬液(50 mg/mL)构建小鼠矽肺模型,对照组同法滴注等体积生理盐水。治疗组术后48 h给予辅酶Q10100 mg/(kg·d)灌胃。术后60 d处死各组小鼠,行HE及天狼星红染色,观察肺组织病理改变和胶原纤维沉积情况;碱水解法检测小鼠肺组织羟脯氨酸含量;实时荧光定量PCR法检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA表达,免疫组织化学法、Western blot检测α-SMA及HMGCR蛋白表达。[结果]模型组炎症细胞浸润及纤维化程度较对照组升高,而治疗组炎症细胞浸润及纤维化程度均较模型组减轻。模型组羟脯氨酸含量为(0.65±0.06)μg/mg,较对照组[(0.54±0.05)μg/mg]升高,而治疗组羟脯氨酸含量为(0.55±0.05)μg/mg,较模型组降低,差异均有统计学意义(P <0.05)。对照组、模型组、治疗组α-SMA mRNA的相对表达量分别为24 381.85±3 301.44、31 812.66±8 335.82、21 587.55±9 489.53,模型组α-SMA mRNA表达高于对照组及治疗组(P <0.05)。模型组α-SMA蛋白、HMGCR蛋白表达均较对照组升高,而治疗组较模型组降低,差异均有统计学意义(P <0.05)。[结论]辅酶Q10能够减轻小鼠矽肺纤维化并降低HMGCR表达。(本文来源于《环境与职业医学》期刊2019年10期）
贾仰民,王丽,韩静茵,王淑娟,喻婷[2]（2019）在《虎杖对壹期矽肺纤维化形成干预作用的机制研究》一文中研究指出目的:观察虎杖对壹期矽肺纤维化形成的影响。方法:选择SD大鼠,随机分为正常组,模型组,虎杖低、中、高剂量组,每组10只,其中各虎杖各剂量组予不同浓度虎杖水溶液灌胃;正常组及模型组予生理盐水灌胃。检测大鼠肺组织病理变化及Ⅰ、Ⅲ型胶原以及各促纤维化因子b FGF、PDGF和TNF-α基因和蛋白表达。结果:与模型组比较,虎杖对壹期矽肺模型大鼠肺组织病理及Ⅰ、Ⅲ型胶原以及各促纤维化因子b FGF、PDGF和TNF-α基因和蛋白表达均有明显抑制作用,而且给药浓度越高,效果越显着。结论:虎杖可以有效改善矽肺早期病理损伤,延缓矽肺纤维化进程。(本文来源于《中国中医药科技》期刊2019年05期）
高俊玲,毕会阳,赵曼曼,朱会兴,王鑫[3]（2019）在《过表达miRNA-101的BMSCs对大鼠矽肺纤维化的影响》一文中研究指出探究转染过表达miRNA-101的骨髓间充质干细胞(BMSCs)对大鼠矽肺纤维化的治疗意义。选取40只健康雄性大鼠随机分为4组(n=10):对照组,Si02模型组,BMSCs治疗组,BMSCs miRNA-101治疗组,每组均10只。本实验使用慢病毒感染构建稳转的BMSCs miRNA-101,继续培养至转染最佳效率备用。采用非暴露氏气管插管一(本文来源于《中国解剖学会2019年年会论文文摘汇编》期刊2019-08-18）
全尚琨,贺笑笑,江天,黄翌,高雪慧[4]（2019）在《帕比司他对小鼠矽肺纤维化的干预作用》一文中研究指出[背景]矽肺的病理改变主要是大量纤维增生和矽结节的形成。部分矽肺患者肺功能严重受损。目前临床上还没有有效的治疗矽肺的方法。组蛋白去乙酰化酶抑制剂与许多疾病有关,但其在小鼠矽肺纤维化中的作用尚不明确。[目的]探究组蛋白去乙酰化酶抑制剂帕比司他对二氧化硅诱导小鼠矽肺纤维化的作用。[方法]将28只C57BL/6雄性小鼠,随机均分为对照组、模型组、帕比司他治疗组及帕比司他药物对照组。模型组每天鼻腔滴注100 mg/mL SiO2悬浊液50μL,连续7 d;帕比司他治疗组给予与模型组同样处理外,第8天开始每周给予3次帕比司他腹腔注射(5 mg/kg·d),连续3周;帕比司他药物对照组只给予药物,不作其他处理。对照组给予生理盐水。第48天检测小鼠肺功能,并处死所有小鼠。试剂盒检测小鼠肺组织中的羟脯胺酸含量;HE染色观察小鼠肺组织的病理改变;天狼猩红染色观察小鼠肺组织中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的表达;ELISA试剂盒检测小鼠血清和肺泡灌洗液中转化生长因子β1(TGF-β1)的含量。[结果]与对照组相比,模型组肺组织中炎症细胞浸润和矽结节明显增加,Ⅰ、Ⅲ型胶原的分布明显增多;羟脯胺酸含量[(1 008.43±182.07)mg/g]也较对照组[(566.83±120.22)mg/g]升高;肺泡灌洗液和血清中TGF-β1的含量[分别为(109.97±2.14)、(934.65±68.13)mg/L]相比对照组[(52.62±3.57)、(540.36±1.06)mg/L]增加,差异均具有统计学意义(P <0.05)。与模型组相比,帕比司他治疗组肺组织中矽结节明显减少,羟脯胺酸含量降低至(824.08±94.88)mg/g,Ⅰ、Ⅲ型胶原分布减少;此外,帕比司他还可明显改善矽肺小鼠肺功能,模型组呼吸频率与气道狭窄系数分别为(318.14±9.77)次/min和(2.22±0.41),帕比司他治疗组的分别为(378.95±36.47)次/min和(1.59±0.12);并下调肺泡灌洗液和血清中TGF-β1的蛋白表达水平[分别为(72.15±8.81)、(765.46±86.99)mg/L]。[结论]帕比司他可以干预小鼠矽肺纤维化的发展,改善矽肺小鼠肺功能。(本文来源于《环境与职业医学》期刊2019年07期）
郭敬文[5]（2019）在《自制中药和吡非尼酮对大鼠矽肺纤维化早期TGF-β1/Smad信号通路调节作用研究》一文中研究指出【研究目的】分别探讨自制中药颗粒和吡非尼酮对染矽尘大鼠肺纤维化早期的干预作用,并从TGF-β1/Smads通路探讨其可能的作用机制,为矽肺纤维化的临床治疗提供理论依据。【研究方法】1.将SD大鼠随机分为对照组、模型组、吡非尼酮组(50 mg/kg、100 mg/kg),每组16只。其中,对照组大鼠气管内灌注1.0 ml生理盐水,其余组灌注1.0 ml SiO_2悬浊液。造模后第二天给大鼠灌胃,吡非尼酮组大鼠分别灌胃50 mg/kg、100 mg/kg吡非尼酮,对照组、模型组灌注1%羧甲基纤维素钠(Carboxymethylcellulose,CMC)。灌胃第14天、第28天分批处死大鼠,行HE、Masson染色,并测定大鼠肺组织转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)、肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)和白介素-6(Interleukin-6,IL-6)的含量,检测大鼠肺组织中Ⅰ型胶原蛋白(Collagen-Ⅰ,Col-Ⅰ)、TGF-β1、Smad2/3、E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)和波形蛋白(Vimentin)的表达水平。2.将SD大鼠随机分为对照组、模型组、化纤中药颗粒组(500 mg/kg、1000 mg/kg),每组16只。其中,对照组大鼠气管内灌注1.0 ml生理盐水,其余组灌注1.0 ml SiO_2悬浊液。造模后第二天给大鼠灌胃,化纤中药颗粒组大鼠分别灌胃500mg/kg、1000mg/kg化纤中药颗粒,对照组、模型组灌注0.9%生理盐水。灌胃第14天、第28天分批处死大鼠,行HE、Masson染色,并测定大鼠肺组织TGF-β1、TNF-α、IL-1β和Col-Ⅰ的含量,检测大鼠肺组织中Col-Ⅰ、TGF-β1、Smad2/3及p-Smad2/3的表达水平。3.将SD大鼠随机分为对照组、模型组、抗肺纤中药颗粒组(500mg/kg、1000mg/kg),每组16只。其中,对照组大鼠气管内灌注1.0 ml生理盐水,其余组灌注1.0 ml SiO_2悬浊液。造模后第二天给大鼠灌胃,抗肺纤中药颗粒组大鼠分别灌胃500mg/kg、1000mg/kg抗肺纤中药颗粒,对照组、模型组灌注0.9%生理盐水。灌胃第14天、第28天分批处死大鼠,行HE、Masson染色,并测定大鼠肺组织TGF-β1、TNF-α和IL-1β的含量,检测大鼠肺组织中TGF-β1、Smad2/3的表达水平及E-cad、Vimentin的蛋白表达。【研究结果】1.吡非尼酮对染矽尘大鼠肺纤维化的干预作用吡非尼酮可抑制SiO_2诱导的大鼠体重减轻,减少肺炎性细胞的浸润和肺泡结构的损伤,减轻大鼠矽肺纤维化。模型组大鼠在灌胃第14天、第28天肺组织中TGF-β1、TNF-α、IL-1β和IL-6的含量及Col-Ⅰ的蛋白表达高于对照组(P<0.05),吡非尼酮组该水平均低于模型组(P<0.05),并且100 mg/kg吡非尼酮组各指标水平较低,差异有统计学意义(P<0.05)。此外,吡非尼酮干预14天和28天后,肺组织中波形蛋白的表达有所下调,E-钙黏蛋白的表达有所上调,并且吡非尼酮抑制了SiO_2诱导的肺组织中TGF-β1和Smad2/3的表达(P<0.05)。2.化纤中药颗粒对染矽尘大鼠肺纤维化的干预作用化纤中药颗粒可以有效抑制SiO_2诱导的大鼠肺组织病理学的改变。造模后第14天和第28天,模型组大鼠肺组织中的TGF-β1、TNF-α、IL-1β和Col-Ⅰ含量高于对照组,而中药干预后该指标含量有所降低,并且1000 mg/kg化纤中药颗粒组的含量较低,差异均具有统计学意义(P<0.05);造模后第14天和第28天,模型组大鼠肺组织Col-Ⅰ、TGF-β1、Smad2/3及p-Smad2/3蛋白的表达水平高于对照组,而中药干预后Col-Ⅰ、TGF-β1、Smad2/3及p-Smad2/3蛋白的表达水平有所降低,且1000 mg/kg化纤中药颗粒组的水平较低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。3.抗肺纤中药颗粒对染矽尘大鼠肺纤维化的干预作用SiO_2刺激14天和28天后,模型组大鼠肺组织有明显的炎症反应及胶原纤维的积聚,中药的干预可有效抑制大鼠肺组织病理学的改变,降低大鼠肺组织中的TGF-β1、TNF-α和IL-1β的含量;中药可升高肺组织E-cad的表达水平、降低肺组织Vimentin的表达水平,进而改善肺组织上皮-间质的转化;同时中药的干预抑制了SiO_2诱导的肺组织TGF-β1、Smad2/3蛋白的阳性表达,1000 mg/kg抗肺纤中药颗粒组的表达较低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。【研究结论】1.吡非尼酮的干预可改善SiO_2诱导的染矽尘大鼠肺泡炎症和矽肺纤维化程度,抑制大鼠肺组织中上皮-间质转化,该作用可能与TGF-β1/Smad2/3信号通路的调节有关。但是,具体的作用机制仍需要进一步研究。2.化纤中药颗粒可抑制SiO_2诱导的大鼠肺组织病理学的改变,降低肺组织促炎、促纤维化因子的表达及Col-I的含量,进而抑制大鼠肺组织细胞外基质的合成、沉积,从而发挥抗矽肺纤维化作用,并且该抑制作用可能与中药对大鼠肺组织TGF-β1/Smads通路的调节有关。3.抗肺纤中药颗粒可减轻染矽尘大鼠肺泡炎症和矽肺纤维化的形成,抑制SiO_2诱导的大鼠肺组织Vimentin表达的升高和E-cad表达的降低,进而抑制大鼠肺组织上皮-间质的转化,该抑制作用可能与肺组织TGF-β1/Smad表达降低有关。(本文来源于《济南大学》期刊2019-05-24）
刘玉红[6]（2019）在《益气养阴、化痰活血法调控TGF-β1/Smads信号通路阻遏矽肺纤维化的实验研究》一文中研究指出目的:研究益气养阴、化痰活血法对气管灌注二氧化硅(Si0_2)混悬液建立矽肺大鼠模型的改善作用及机制。方法:SD雄性大鼠96只,随机分为生理盐水对照组(A组)、矽肺模型组(B组)、低剂量治疗组(C组)、中剂量治疗组(D组)、高剂量治疗组(E组)、汉防己甲素组(F组),每组1-16编号。模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组、汉甲组分别一次性气管灌注Si0_2混悬液0.5ml(浓度为50mg/ml),对照组一次性气管灌注等量生理盐水。2周造模成功后,正常组生理盐水5ml灌服,低、中、高剂量组分别给予不同剂量的益肺化纤方,1天一次,汉甲组等量汉防己甲素按50mg/kg灌胃,3天一次,分别于4周、8周各处死8只大鼠,HE染色观察大鼠肺组织改变,ELISA法检测血清及肺组织中的TGF-β1、Smad3、Smad7含量。结果:1.取模型组大鼠肺组织行病理切片判定矽肺大鼠模型复制成功。2.肺组织病理变化:1)肉眼观察造模2周后对照组大鼠双肺质地柔软,表面光滑,呈淡粉红色,无结节形成。余大鼠双肺表面粗糙,表面肿胀,颜色苍白,包膜稍紧张,可见散在灰白色点状结节;4周后模型组及治疗组双肺颜色淡暗,苍白色与暗红色相兼,质地略变硬,可见散在出血点,表面凹凸不平,双肺表面可见散在灰白色小结节。8周后高剂量中药组、汉甲组大鼠双肺颜色暗红,苍白面积减少,可见小片状凹凸不平,双肺表面灰白色结节较模型组减少。2)HE染色对照组大鼠肺组织结构完整,肺泡结构清晰、壁薄,间质基本无炎症细胞浸润,4周、8周后无明显改变。模型组大鼠2周时肺泡腔及间质可见大量炎性细胞浸润,肺泡结构破坏明显,间质水肿、增宽,可见小片状纤维化和细胞结节;8周时肺组织纤维化程度加重明显,可见明显的矽结节形成、结节的融合。与模型组相比,治疗组大鼠肺泡内炎症细胞浸润程度都有不同程度减轻,肺组织内结节较模型组少且小。3.肺指数:各治疗组相比,高剂量组大鼠肺指数变化明显,P<0.05,差异有统计学意义;与模型组比,低、中治疗组及汉甲组大鼠肺指数变化不明显,高治疗组大鼠肺指数变化显着,差异有统计学意义(P<0.05)。4.肺纤维化指标:1)血清TGF-β1、Smad3、Smad7:4周与8周,与正常组相比,各治疗组及模型组血清TGF-β1、Smad3、Smad7表达下降;与模型组相比,各治疗组TGF-β1、Smad3表达下降,Smad7表达升高,差异有统计学意义(P<0.05);与汉甲组相比,高剂量治疗组血清TGF-β1、Smad3表达下降,Smad7表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。2)肺组织TGF-β1、Smad3、Smad7:4周与8周,与正常组相比,各治疗组及模型组肺组织TGF-β1、Smad3、Smad7表达下降;与模型组相比,各治疗组TGF-β1、Smad3表达下降,Smad7表达升高,差异有统计学意义(P<0.05);与汉甲组相比,高剂量治疗组肺组织TGF-β1、Smad3表达下降,Smad7表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:益肺化纤方可显着改善矽肺模型大鼠肺组织结构、纤维化程度,延缓矽肺纤维化的进展,其机制可能是益肺化纤方抑制TGF-β1/Smads信号通路中的TGF-β1及Smad3的表达,上调Smad7蛋白的表达,减少胶原沉积,从而延缓矽肺纤维化的发展进程。(本文来源于《西南医科大学》期刊2019-05-01）
郑熠娇[7]（2019）在《双氢青蒿素对矽肺纤维化TGF-β1/Smad信号通路的机制研究》一文中研究指出［研究目的］利用大鼠染矽尘模型,研究双氢青蒿素(Dihydroartemisinin,DHA)对矽肺大鼠肺纤维化的干预作用及其可能的作用机制,并对其干预矽肺纤维化的效果与汉防己甲素进行比较。［研究方法］将80只雄性SD大鼠在实验条件下适应性饲养一周,随机分为4组:空白对照组、模型组、DHA组和汉方己甲素组,每组20只,空白对照组不染尘,模型组、DHA组和汉方己甲素组采用非暴露式气管内一次性灌注法建立二氧化硅诱导的大鼠染矽尘模型。染尘后第二天开始给药灌胃,DHA组每天给予DHA 75mg/kg,汉防己甲素组每天给予汉防己甲素22mg/kg,模型组和对照组大鼠均给予等容积的0.9%生理盐水,每周给药6天,连续给药3个月,在染尘后的第7天,14天,28天,3个月每组各处死5只大鼠,取大鼠肺组织,观察大鼠病理学变化;检测肺组织羟脯氨酸含量;酶联免疫法(ELISA)检测不同时间点各组大鼠肺组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、人α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、白介素-6(1L-6)、Smad2/3含量;采用免疫组化法检测大鼠肺组织中TGF-β1、Col-Ⅰ、Smad2/3蛋白表达水平;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)测定大鼠肺组织中TGF-β1、TNF-α、Col-Ⅰ、Smad2/3蛋白表达水平。［研究结果］1肺组织病理学检查HE染色结果显示:各个时间点对照组大鼠肺组织整体结构基本正常,肺组织结构清晰,肺泡结构完整,肺泡没有明显的萎缩和扩张,肺间隔正常。第7天模型组大鼠肺组织出现充血,肺泡壁间隔增厚,肺泡腔和肺间质内有炎性细胞浸润。第14天模型组大鼠肺泡腔和肺间质内有大量炎性细胞浸润,肺泡壁增厚明显,局部肺泡开始融合。第28天模型组大鼠肺泡结构遭到破坏,肺泡壁间隔增厚,炎性细胞浸润量明显增多。3个月模型组大鼠肺组织可见纤维性结节,大部分肺泡消失,肺泡结构遭到严重破坏。经DHA和汉防己甲素干预治疗后大鼠肺组织损伤情况较模型组相比有所改善,肺泡腔和肺间质内炎性细胞有所减少。Masson染色结果显示:各个时间点对照组大鼠肺组织肺泡结构清晰完整,无明显的蓝色胶原纤维沉积。第7天模型组大鼠肺泡内出现少量胶原纤维。第14天大鼠肺泡内蓝色胶原纤维沉积增多,肺泡壁明显增厚。第28天出现较多蓝色胶原纤维沉积。3个月大鼠有明显矽结节形成,肺泡内有大量的蓝色胶原纤维沉积,而经DHA和汉防己甲素干预治疗后较模型组相比胶原纤维沉积有所减少。2各组大鼠肺组织羟脯氨酸(HYP)含量检测与对照组相比,DHA组、汉防己甲素组和模型组HYP含量升高,差异具有统计学意义(P<0.05),结合Masson染色说明大鼠染矽尘模型造模成功。与模型组相比,DHA和汉防己甲素组大鼠肺组织HYP含量降低(P<0.05),但DHA组和汉防己甲素组羟脯氨酸含量差异无统计学意义(P>0.05)。3各组大鼠肺组织中TGF-β1、α-SMA、TNF-α、1L-6、Smad2/3含量变化与对照组相比,DHA组、汉防己甲素组和模型组大鼠肺组织中TGF-β1、α-SMA、TNF-α、1L-6、Smad2/3含量升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,DHA和汉防己甲素组大鼠肺组织中TGF-β1、α-SMA、TNF-α、1L-6、Smad2/3水平降低,差异具有统计学意义(P<0.05),但比较DHA和汉防己甲组之间的大鼠肺组织中各炎性指标水平之间差异无统计学意义(P>0.05)。4各组大鼠肺组织中Smad2/3、TNF-α、TGF-β1、Col-Ⅰ蛋白含量表达与对照组相比,DHA组、汉方己甲素组和模型组Smad2/3、TNF-α、TGF-β1、Col-Ⅰ蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组相比,DHA组和汉方己甲素组Smad2/3、TNF-α、TGF-β1、Col-Ⅰ蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.01),但DHA和汉方己甲素组Smad2/3、TNF-α、TGF-β1、Col-Ⅰ蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。［研究结论］1采用非暴露式气管内一次性灌注法建立二氧化硅诱导的大鼠染矽尘模型,造成大鼠肺组织损伤,继而促进肺纤维化的发生与发展。经DHA干预后,矽肺大鼠肺组织中炎性因子水平降低,从而减轻了矽肺大鼠肺组织损伤的程度。2 DHA能够抑制染矽尘大鼠肺组织中纤维化因子TGF-β1的释放,降低矽肺大鼠肺组织中Smad2/3蛋白表达水平,在一定程度上阻碍了TGF-β1/Smad信号通路,抑制肺纤维化的发生与发展。3对比DHA和汉方己甲素二者的治疗效果在叁个月的治疗期内并无明显差异。这可能与本实验设计的双氢青蒿素剂量有关,尚待进一步验证。我们将在后期实验中加大对双氢青蒿素的使用剂量,进一步观察双氢青蒿素和汉防己甲素的治疗效果,为临床诊治矽肺纤维化药物提供新的研究思路。(本文来源于《济南大学》期刊2019-05-01）
田盈[8]（2019）在《CypA在肺泡巨噬细胞泡沫化调节矽肺纤维化形成中的作用研究》一文中研究指出目的探讨亲环素A(CypA)在游离二氧化硅(SiO_2)诱导巨噬细胞泡沫化中的作用及其作用机制,从而进一步研究巨噬细胞泡沫化对矽肺纤维化的影响。方法第一阶段实验,使用100 ng/ml的豆蔻酸佛波醇乙酸酯(PMA)将处于对数期生长的人周围血单核细胞(THP-1),诱导分化为THP-1源性的巨噬细胞,培养48 h后,分为4个实验组:空白对照组细胞不做任何处理,给与ox-LDL对照组的培养基含终质量浓度50μg/ml的ox-LDL的培养基,给与50μg/ml SiO_2组的培养基含终质量浓度50μg/ml的SiO_2和50μg/ml ox-LDL的培养基,给与100μg/ml SiO_2组的培养基含终质量浓度为100μg/ml的SiO_2和50μg/ml的ox-LDL,培养48 h后,通过MIC测试条法检测细胞活力,通过油红O染色法和胆固醇试剂盒法观察巨噬细胞脂质蓄积的情况,酶联免疫吸附实验法检测巨噬细胞上清液中CypA表达情况,以蛋白质印迹法检测细胞中CypA表达的情况。第二阶段实验,用同样的方法建立泡沫细胞模型,采用慢病毒转染使CypA过表达,设立组别为空白对照组(Control,不做任何处理),过表达组(OE,过表达病毒),阴性对照组(NC,100μg/ml SiO_2+50μg/mlox-LDL+对照病毒),过表达实验组(OE+T,100μg/ml SiO_2+50μg/mlox-LDL+过表达病毒);采用基因沉默的方法使CypA低表达,设立组别为对照组(Control,不做任何处理),SiCypA组(SiCypA),阴性对照组(NC,NC+100μg/ml SiO_2+50μg/mlox-LDL),SiCypA实验组(SiCypA+T,SiCypA+100μg/ml SiO_2+50μg/mlox-LDL),培养48h。采用第一阶段的方法检测CypA的表达变化以及泡沫化情况。在第叁阶段,基于亲环蛋白A的过表达,CD36途径被阻断,细胞随机分为以下四个实验组:对照组(DMSO),SSO抑制剂组(5μM SSO),模型组(DMSO+SiO_2+ox-LDL)以及SSO实验组(SSO+SiO_2+ox-LDL),每个组培养48h。使用与第一阶段相同的方法观察细胞泡沫化情况。将第一、二、叁阶段的各组别细胞的上清培养人肺成纤维细胞(HFL-1),蛋白质印迹法检测细胞中胶原蛋白1(COLⅠ)和a平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平。结果1 MTS结果显示:与对照组比较,SiO_2质量浓度为100μg/ml时细胞活力最强。2油红O染色结果显示,与空白对照组相比,100μg/ml SiO_2组细胞泡沫样变化显着。3与空白对照组比较,ox-LDL对照组、50μg/ml SiO_2组、100μg/ml SiO_2组细胞内TC、FC表达水平均升高(P<0.01),且CE比重增加(P<0.01)。4CypA在细胞内表达水平均降低(P<0.01),上清液中CypA表达水平均升高(P<0.01)。5 CypA过表达模型构建成功后,与NC相比,细胞上清液中CypA表达明显增多(P<0.01),油红O染色结果显示,OE+T组细胞橘红色色脂滴明显增多;与NC组相比,OE+T组细胞内TC、FC表达水平均升高(P<0.01),且CE比重增加(P<0.05)。6巨噬细胞中CypA基因沉默后,与NC组相比,上清液中CypA表达降低(P<0.01);SiCypA+T组橘红色脂滴明显减少,与NC组相比,SiCypA+T组细胞内TC、FC表达水平均降低(P<0.01),且CE比重减少(P<0.05)。7亲环蛋白A过表达模型中CD36蛋白的表达也增加(P<0.01),SSO抑制剂阻断CD36通路后,结果显示,与DMSO+T组相比,SSO+T组细胞内橘红色脂滴明显减少,TC、FC表达水平均降低(P<0.01),且CE比重减少(P<0.05)。8用各组上清液刺激人肺成纤维细胞(HFL-1),结果显示,与空白对照组相比,100μg/ml SiO_2组,COLⅠ和α-SMA蛋白水平均升高(P<0.05);与NC组相比,OE+T组COLⅠ和α-SMA蛋白水平均升高(P<0.05);与NC组相比,SiCypA+T组COLⅠ和α-SMA蛋白水平均降低(P<0.05)。结论1 CypA在巨噬细胞泡沫化过程中的表达发生变化。2 CypA在巨噬细胞泡沫化过程中发挥一定作用。3 CypA发挥作用过程可能与介导CD36表达有关。4巨噬细胞泡沫化可介导矽肺纤维化过程。图32幅;表12个;参139篇。(本文来源于《华北理工大学》期刊2019-04-08）
马景景[9]（2019）在《晚期糖基化终末产物受体参与调节矽肺纤维化的机制研究》一文中研究指出目的探究可溶性晚期糖基化终末产物(soluble receptor for advanced glycation end products,sRAGE)与细胞因子之间的相互关系,初步确定sRAGE在矽肺纤维化进程中的可能作用;构建TGF-β1诱导的上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)细胞模型,明确与晚期糖基化终末产物受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE)结合共同参与调节矽肺发病的关键配体,探讨RAGE介导的矽肺纤维化中可能的作用机理。方法选取58例在中国煤矿工人北戴河疗养院内已经确诊的男性矽肺患者(主要在煤矿环境下做开采、粉碎、打磨等尘灰较多的工作者),其中,矽肺壹期12例,矽肺贰期17例,矽肺叁期29例。此外,选取13例正常身体健康的成年男性作为对照组。应用酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent,ELISA)试剂盒检测人血清中sRAGE、TNF-α、TGF-β1、IL-6及IL-1β水平,同时收集研究对象的年龄、工龄、血压、体重指数(Body Mass Index,BMI)、首次接尘年龄、肺功能等基础资料。采用Pearson积矩相关分析sRAGE与TNF-α、TGF-β1、IL-6及IL-1β水平的相关性。常规条件下培养肺泡II型上皮细胞(alveolar type II epithelial cells,ATII),将人肺泡II型上皮细胞(A549)和大鼠肺泡II型上皮细胞(RLE-6TN)均随机分为对照组、5ng/ml TGF-β1刺激组、10ng/ml TGF-β1刺激组,分别培养48、72h,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测EMT标记物表达情况。实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测TGF-β1刺激48h后EMT相关标记物的mRNA表达水平。EMT模型建好后,Western blot和qRT-PCR检测RAGE表达情况,同时检测RAGE相关配体S100A4、HMGB1的表达情况。确定RAGE伴随EMT发生的TGF-β1刺激最佳浓度和时间后,给予RLE-6TN细胞晚期糖基化终末产物受体抑制剂(FPS-ZM1),细胞分为以下5ng/ml TGF-β1刺激组六组:对照组、TGF-β1刺激组、TGF-β1+1μg/ml FPS-ZM1组、TGF-β1+5μg/ml FPS-ZM1组、TGF-β1+10μg/ml FPS-ZM1组、10μg/ml FPS-ZM1组,采用Western blot检测EMT相关标记物、RAGE和RAGE下游信号通路β-catenin的蛋白表达情况。结果1矽肺壹期和矽肺贰期组sRAGE表达水平显着低于对照组(均P<0.05);矽肺壹期和矽肺贰期TNF-α表达水平明显高于对照组(均P<0.05);矽肺贰期和矽肺叁期组TGF-β1的表达水平高于对照组(均P<0.05);矽肺贰期组和矽肺叁期IL-6表达水平高于对照组,且矽肺贰期组IL-6表达水平低于矽肺壹期组(均P<0.05);矽肺壹期IL-1β表达水平高于对照组和矽肺叁期组(均P<0.05)。2相关性分析结果显示,sRAGE的水平与TNF-α、IL-6和IL-β1呈负相关,相关系数分别为-0.241、-0.288和-0.413(均P<0.05)。3 TGF-β1刺激A549细胞48小时后,5ng/ml TGF-β1和10ng/ml TGF-β1组上皮标志物CDH1蛋白和mRNA水平均明显低于对照组,间质标志物CDH2蛋白表达明显高于对照组(均P<0.05);5ng/ml TGF-β1组和10ng/ml TGF-β1组RAGE、HMGB1、S100A4蛋白表达水平均明显高于对照组(均P<0.05);5ng/ml TGF-β1组HMGB1和S100A4的mRNA水平高于对照组(均P<0.05)。4 TGF-β1诱导RLE-6TN细胞48小时后,5ng/ml TGF-β1组上皮标志物ZO-1蛋白表达和CDH1的mRNA表达明显低于对照组,CDH2蛋白和mRNA表达水平以及α-SMA的mRNA表达水平均明显高于对照组(均P<0.05);5ng/ml TGF-β1组RAGE、HMGB1、S100A4蛋白和mRNA表达水平均增加。TGF-β1诱导细胞72小时后10ng/ml TGF-β1组ZO-1蛋白表达明显低于对照组,CDH2蛋白表达水平明显高于对照组(均P<0.05)。TGF-β1诱导细胞5FPS-ZM1抑制RLE-6TN细胞RAGE表达发现:TGF-β1+1μg/ml FPS-ZM1组、TGF-β1+5μg/ml FPS-ZM1组、TGF-β1+10μg/ml FPS-ZM1组与EMT模型组相比ZO-1表达均增加(均P<0.05),Vimentin和CDH2与EMT模型组相比表达均降低(均P<0.05)。与对照组相比,5ng/ml TGF-β1组β-catenin表达随RAGE增加而增加;与模型组相比,TGF-β1+1μg/ml FPS-ZM1、TGF-β1+10μg/ml FPS-ZM1组β-catenin均随着RAGE蛋白表达降低而降低(P<0.05)。结论1 sRAGE在矽肺病人血清中表达降低;sRAGE与TNF-α、IL-6和IL-β1的表达水平呈负相关,推测sRAGE可能通过影响细胞因子的表达调控矽肺纤维化的发生。2在TGF-β1诱导的肺泡上皮间质转化的细胞模型中,HMGB1/S100A4-RAGE通路活性增强。3抑制RAGE可以缓解TGF-β1诱导的EMT的发生,且RAGE可通过影响β-catenin信号通路参与调节TGF-β1诱导的EMT过程。图10幅;表15个;参122篇。(本文来源于《华北理工大学》期刊2019-04-08）
毛娜[10]（2019）在《基于iTRAQ技术筛选与矽肺纤维化有关差异蛋白的研究》一文中研究指出目的采用同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)技术筛选与转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1活化成纤维细胞有关的差异蛋白,以期为研究矽肺纤维化的发病机制、防治策略提供新思路。方法贴壁法体外原代培养Wistar大鼠肺成纤维细胞,采用TGF-β1(5 ng/ml)诱导其活化,分为对照组、TGF-β1诱导组。采用iTRAQ技术标记蛋白样品,液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)对标记的蛋白进行质谱分析,筛选对照组与TGF-β1诱导组中差异表达的蛋白。通过HOPE-MED8050动式染尘控制系统构建矽肺大鼠模型,分为对照24周组(control 24 w)、矽肺模型24周组(silicosis 24 w)。体外培养来源于对照24周组和矽肺模型24周组大鼠肺成纤维细胞。构建针对极低密度脂蛋白受体(Very low-density lipoprotein receptor,VLDLR)、多配体蛋白聚糖2(Syndecan-2,SDC2)的基因沉默载体并转染入人胚肺成纤维(MRC-5)细胞中,筛选有效沉默序列后分为:阴性对照组(Negative Control,NC)、VLDLR基因沉默组(VLDLRsiRNA#3)、SDC2基因沉默组(SDC2siRNA#3)、阴性对照+TGF-1诱导组(NC+TGF-β1)、VLDLR基因沉默+TGF-β1诱导组(VLDLRsiRNA#3+TGF-β1)、SDC2基因沉默+TGF-β1诱导组(SDC2siRNA#3+TGF-β1)。VG染色观察肺组织病理形态。免疫组织化学染色法检测V型胶原[Collagen alpha-1(V)chain,pro COL V]、XI型胶原[Collagen alpha-1(XI)chain,pro COL XI]、VLDLR、SDC2的表达与定位。免疫印迹法检测I型胶原(Collagen Type I,pro COL I)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、pro COL V、pro COL XI、血管细胞粘附因子1(Vascular cell adhesion protein 1,VCAM1)、内质网跨膜蛋白214(Transmembrane protein 214,TM214)、VLDLR、SDC2的表达。结果1 iTRAQ技术共鉴定出1648个蛋白。与对照组相比较,TGF-β1诱导组有196个差异蛋白表达变化≥1.20倍,其中20个差异蛋白表达变化≥1.50倍(13个上调蛋白,7个下调蛋白)。生物信息学分析结果显示差异蛋白主要与细胞增殖、凋亡、炎症反应,以及信号转导通路等多方面功能有关。2 VG染色结果显示,对照24周组肺组织肺泡壁薄,结构清晰完整,且无胶原沉积,模型24周组肺组织可见肺泡壁明显增宽,并有较多的细胞性和纤维性矽结节形成以及红色胶原沉积。3免疫组织化学染色结果显示,与对照24周组相比较,矽肺模型24周组pro COL V、pro COL XI、VLDLR、SDC2阳性表达明显增强,多表达于矽结节以及间质纤维化区域。4 Western blot结果显示,矽肺模型24周组肺组织pro COL I、α-SMA、pro COL V、pro COL XI、VCAM1、VLDLR和SDC2表达上调,分别为对照24周组11.09倍、27.17倍、7.03倍、3.61倍、12.16倍、2.39倍和21.12倍,而TM214无差异表达变化。在原代培养模型组24周矽肺大鼠成纤维细胞中pro COL I、α-SMA、pro COL V、pro COL XI、VCAM1、VLDLR和SDC2表达明显上调,分别为对照24周组6.16倍、5.63倍、29.34倍、13.74倍、4.09倍、80.58倍和4.06倍,而TM214无差异表达变化。5细胞转染实验:(1)Western blot结果可见,转染VLDLR、SDC2沉默质粒序列于MRC-5细胞中发现,与NC组相比较,VLDLRsiRNA#3有明显沉默效果,VLDLR的表达降至NC组6.65%;同样,与NC组相比较,SDC2siRNA#3有明显沉默效果,SDC2的表达降至NC组21.14%。(2)Western blot结果显示,VLDLRsiRNA#3组pro COL I、α-SMA、pro COL V、pro COL XI表达下调,分别降至NC组32.57%、42.55%、60.85%和16.65%;同样,SDC2siRNA#3组pro COL I、pro COL V、pro COL XI表达下调,分别降至NC组5.43%、19.41%和8.13%,而α-SMA无差异表达变化。(3)Western blot结果显示,在VLDLR转染实验中,与NC组相比较,NC+TGF-β1诱导组pro COL I、α-SMA、pro COL V、pro COL XI表达上调,分别为NC组3.78倍、3.71倍、12.38倍和10.78倍,VLDLRsiRNA#3+TGF-β1诱导组pro COL I、α-SMA、pro COL V、pro COL XI的表达明显下调,分别降至NC+TGF-β1诱导组的73.66%、55.70%、22.47%和50.06%;同样在SDC2转染实验中,NC+TGF-β1诱导组pro COL I、α-SMA、pro COL V、pro COL XI表达较NC组明显上调,SDC2siRNA#3+TGF-β1诱导组pro COL I、pro COL V、pro COL XI表达明显下调,分别降至NC+TGF-β1诱导组的44.95%、32.04%和37.63%,而α-SMA无差异表达变化。结论1 iTRAQ技术筛选出了196个与TGF-β1介导成纤维细胞活化有关的差异蛋白,其中pro COL V、pro COL XI、VCAM1、VLDLR和SDC2可能参与了矽肺纤维化的发生与发展。2基因沉默VLDLR、SDC2可在基础水平和TGF-β1诱导条件下抑制MRC-5细胞中胶原的合成。图14幅;表20个;参141篇。(本文来源于《华北理工大学》期刊2019-04-03）
矽肺纤维化论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:观察虎杖对壹期矽肺纤维化形成的影响。方法:选择SD大鼠,随机分为正常组,模型组,虎杖低、中、高剂量组,每组10只,其中各虎杖各剂量组予不同浓度虎杖水溶液灌胃;正常组及模型组予生理盐水灌胃。检测大鼠肺组织病理变化及Ⅰ、Ⅲ型胶原以及各促纤维化因子b FGF、PDGF和TNF-α基因和蛋白表达。结果:与模型组比较,虎杖对壹期矽肺模型大鼠肺组织病理及Ⅰ、Ⅲ型胶原以及各促纤维化因子b FGF、PDGF和TNF-α基因和蛋白表达均有明显抑制作用,而且给药浓度越高,效果越显着。结论:虎杖可以有效改善矽肺早期病理损伤,延缓矽肺纤维化进程。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
矽肺纤维化论文参考文献
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[2].贾仰民,王丽,韩静茵,王淑娟,喻婷.虎杖对壹期矽肺纤维化形成干预作用的机制研究[J].中国中医药科技.2019
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