聚乳酸解聚酶论文-张晓静,杨学群,刘仕伟,刘福胜,于世涛

聚乳酸解聚酶论文-张晓静,杨学群,刘仕伟,刘福胜,于世涛

导读:本文包含了聚乳酸解聚酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:聚乳酸,热解聚法,化学解聚法,离子液体

聚乳酸解聚酶论文文献综述

张晓静,杨学群,刘仕伟,刘福胜,于世涛[1](2012)在《聚乳酸解聚方法研究进展》一文中研究指出综述了近年来国内外关于聚乳酸的热解聚法和酸性水解法、碱性水解法、中性水解法、高温高压水解法、酶催化法、甲醇醇解法、正丁醇醇解法等化学解聚法的研究进展,并对聚乳酸在离子液体环境中进行化学解聚的可行性进行了探讨和展望。(本文来源于《化工环保》期刊2012年03期)

王战勇[2](2011)在《聚乳酸降解菌的选育及其解聚酶研究》一文中研究指出随着塑料制品的广泛应用,带来了严重的环境污染问题能源危机。人们逐渐认识到了生物可降解塑料应用的必要性。目前在世界范围内都在广泛的提倡和推广生物可降解塑料的使用。聚乳酸(PLA)由于其优良的理化性质,被公认为最具应用前景的生物降解塑料。但即使是生物降解塑料,自然状态下不是短时间内就能完全降解的,因此对以PLA为代表的生物降解塑料的生物降解研究是十分必要的。本研究从活性污泥和实验室保存菌种中筛选到了3株能够在以PLA为唯一碳源的培养基上生长的细菌菌株。通过菌体形态特征、菌落培养特征、生理生化反应考察以及16S rDNA序列比对,将菌株DS04-T鉴定为假单胞菌属(Pseudomonas)菌株,DS04-W鉴定为Bacillus megaterium(巨大芽孢杆菌);DS0701鉴定为纤维单胞菌属(Cellulomonas)菌株。其中Pseudomonas sp. DS04-T不具有水解明胶能力且具有酯酶活力,而其他两株菌株DS04-W和DS0701具有明胶水解能力并不具有酯酶活力。考虑到已见PLA生物降解酶的报道中多为蛋白酶,而酯酶报道相对较少,故选择菌株DS04-T为后续研究对象。结合单因素考察和正交试验分析,优选出利用菌株DS04-T液体发酵PLA解聚酶的最适培养条件如下:将保存于斜面培养基的菌种接种于装有100mL乳化PLA液体培养基(pH8.5) 250mL叁角瓶中,37°C,200 r/min振荡培养3 d,制备种子培养液。将种子培养液按6 % ( V/V)接种量于装有100 mL乳化PLA液体培养基(pH 8.5)的250 mL叁角瓶中,37°C,200 r/min振荡培养3 d。在此条件下获取的粗酶液的酶活力为0.167±0.04U/mL。菌株DS04-T发酵液经离心、超滤、Q Sepharose Fast Flow、Phenyl Sepharose 6 Fast Flow以及Sephacryl S-100 HR等一系列的纯化后,一种分子量为34kDa的PLA解聚酶LIP被纯化出来。该PLA解聚酶的最适pH和温度分别为8.5和50°C。该降解酶还能够降解叁油酸甘油酯、PHB和PCL等酯类化合物。Na~+和K~+能够激活该降解酶活性,而Zn~(2+),Mg~(2+),Cu~(2+)和Fe~(2+)会抑制该酶的活性。另外EDTA对该降解酶的活性也有明显的抑制。通过分子生物学手段完成了PLA解聚酶LIP基因的克隆,但是未能实现该PLA解聚酶在E.coli中的有效表达。采用数据库及生物信息学分析工具对PLA解聚酶LIP进行了序列分析以及结构预测。另外通过鸟枪法筛选到了另外一个PLA解聚酶基因pME,该基因与Pseudomonas mendocina全基因组文库(CP000680)中的一个protein of unknown function DUF1486的基因序列一致,在此基础上实现了其在E.coli中的有效表达。纯化获得的重组酶的分子量为19.2 kDa。其最适pH和温度分别为8.5和60°C。K+、Ca~(2+)和Ni~(2+)能够增强该重组酶的活性,而Na~+、Zn~(2+)、Mg~(2+)、Cu~(2+)、Fe~(2+)、Mn~(2+)和Co~(2+)则会抑制该酶的活性。利用菌株及其降解酶对PLA薄膜进行降解,结果显示菌株培养15d后可使PLA薄膜减重50%左右,而两种降解酶在经过36h-48h的降解后也能使PLA薄膜减重7~10%,扫描电子显微镜对降解后的PLA薄膜进行观察,发现酶降解只能在膜表面留下蚀刻痕迹,且两种酶的作用模式不同;而菌株降解后膜表面留下蜂窝状孔洞。无论是菌株或是降解酶对PLA的降解产物经质谱检测均只检测到乳酸单体,未见相应的寡聚体。(本文来源于《东北师范大学》期刊2011-06-01)

王金龙[3](2011)在《聚乳酸降解菌的选育及其解聚酶的研究》一文中研究指出人类发展到21世纪,生活质量逐渐提高,石油化工产品越来越多的应用于人类的日常生活中,塑料作为一种广泛的金属的代替品而深受人们的喜爱,其应用广泛,经济耐用,成本低,使用方便等特点使其生产规模逐年扩大,然而低成本的塑料制品又很少有回收的价值,因此而导致了令人头疼的白色污染问题,为了解决白色污染,各国都在极力的寻找一种可以代替传统塑料的材料,聚乳酸(PLA)作为一种可降解塑料的原材料,由于其特有的性能而受到越来越多的关注,聚乳酸是利用乳酸为原料合成的聚酯材料,具有良好的生物降解性,现已应用到医疗卫生,纺织,包装,农业等领域。本论文重点在于证明聚乳酸生物降解可行性。筛选出一株具有降解聚乳酸能力并可分泌聚乳酸解聚酶的细菌,探究该菌株分泌聚乳酸水解酶的最佳条件,分离、纯化出聚乳酸解聚酶,并对其酶学性质进行初步研究。实验结果如下:1从抚顺石油厂的活性污泥中筛选纯化出菌株DS0701,经过生理生化性能比对,以及16SrDNA鉴定,该菌系属于纤维单胞菌属(Cellulomonas.sp.),且该菌具有降解PLA能力。2对菌株DS0701降解PLA的条件进行检测,最终确定,最适培养温度为37℃,最适培养pH为7.0。培养时间为72h,最佳摇床转数为150r/ min。3对DS0701菌株降解能力测定,检测结果表明,菌株DS0701不仅能够降解PLA,而且对其他的几种可降解材料也有降解能力,如聚羟基丁酸酯(PHB)、3-羟基丁酸与3-羟基戊酸的共聚物(PHBV),聚(3-羟基丁酸酯-co-4-羟基丁酸酯)(P(3-4HB))等。4进行酶的分离与纯化,在对培养条件进行测定之后,对该菌株进行发酵产酶,通过离心,超滤,冻干,盐析,层析等方式对PLA解聚酶进行分离与纯化,进而研究其解聚酶的酶学性质。5.进行聚乳酸薄膜降解,降解时间为9天,降解后膜透明度明显减弱,变为白色,强度大大降低,膜的边角明显变圆,质地变酥脆。从扫描电镜照片上可以观察到膜表面部分地方开始变化,聚乳酸膜逐步裂解,膜表面因被降解而开始变得粗糙至膜出现细微裂痕和空洞。(本文来源于《东北师范大学》期刊2011-06-01)

吴丽斌[4](2009)在《可降解聚乳酸的细菌选育及其解聚酶的研究》一文中研究指出聚乳酸(PLA)是一种新兴的高分子材料,其理化性能优异,很多方面可与现阶段广泛使用的通用塑料相比,某些性能甚至超过通用塑料,而且聚乳酸还能被生物降解为无毒无害物,因此其应用前景被普遍看好,目前已被应用于医学、生态学、纺织业等高附加值领域。本论文重点在于证明聚乳酸生物降解可行性。筛选出一株具有降解聚乳酸能力并可分泌聚乳酸解聚酶的细菌,探究该菌株分泌聚乳酸水解酶的最佳条件,分离、纯化出聚乳酸解聚酶,并对其酶学性质进行初步研究。实验结果具体如下:1.由野外采集的多个土样中筛选出可降解聚乳酸的一株细菌,经初步鉴定为纤维单胞杆菌属[Cellulomonas (Bergey et al.,1923),Clark],编号为DS2006。通过菌种培养条件优化实验,测得菌种产聚乳酸解聚酶的最适培养温度为35℃、最适培养pH值为7.4。2.对DS2006产生的聚乳酸解聚酶进行分离纯化,并对其酶学性质进行初步探讨。纯化倍数约为14.87,酶活力回收率11.25%,酶蛋白的相对分子质量约为42.8kD。3.该酶最适反应温度为45℃,最适反应pH值为7.5。在温度30℃以下和pH值7.0~8.0范围内时较稳定。金属离子Ca2+、Mg2+对PLA解聚酶有激活作用,而Cu2+、Hg2+、Zn2+等金属离子对此酶有明显抑制作用。质谱仪测得聚乳酸解聚酶降解聚乳酸的产物中含有乳酸及乳酸二聚体。4.进行聚乳酸薄膜降解,降解时间为10天,降解后膜强度大大降低,透明度明显减弱,变为白色,膜的边角明显变圆,质地变酥脆。从扫描电镜观察到试样表面部分地方开始变化,聚乳酸膜逐渐走向解体,膜表面因被降解而开始变得不平直至膜出现细微裂痕和空洞。(本文来源于《东北师范大学》期刊2009-06-01)

聚乳酸解聚酶论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

随着塑料制品的广泛应用,带来了严重的环境污染问题能源危机。人们逐渐认识到了生物可降解塑料应用的必要性。目前在世界范围内都在广泛的提倡和推广生物可降解塑料的使用。聚乳酸(PLA)由于其优良的理化性质,被公认为最具应用前景的生物降解塑料。但即使是生物降解塑料,自然状态下不是短时间内就能完全降解的,因此对以PLA为代表的生物降解塑料的生物降解研究是十分必要的。本研究从活性污泥和实验室保存菌种中筛选到了3株能够在以PLA为唯一碳源的培养基上生长的细菌菌株。通过菌体形态特征、菌落培养特征、生理生化反应考察以及16S rDNA序列比对,将菌株DS04-T鉴定为假单胞菌属(Pseudomonas)菌株,DS04-W鉴定为Bacillus megaterium(巨大芽孢杆菌);DS0701鉴定为纤维单胞菌属(Cellulomonas)菌株。其中Pseudomonas sp. DS04-T不具有水解明胶能力且具有酯酶活力,而其他两株菌株DS04-W和DS0701具有明胶水解能力并不具有酯酶活力。考虑到已见PLA生物降解酶的报道中多为蛋白酶,而酯酶报道相对较少,故选择菌株DS04-T为后续研究对象。结合单因素考察和正交试验分析,优选出利用菌株DS04-T液体发酵PLA解聚酶的最适培养条件如下:将保存于斜面培养基的菌种接种于装有100mL乳化PLA液体培养基(pH8.5) 250mL叁角瓶中,37°C,200 r/min振荡培养3 d,制备种子培养液。将种子培养液按6 % ( V/V)接种量于装有100 mL乳化PLA液体培养基(pH 8.5)的250 mL叁角瓶中,37°C,200 r/min振荡培养3 d。在此条件下获取的粗酶液的酶活力为0.167±0.04U/mL。菌株DS04-T发酵液经离心、超滤、Q Sepharose Fast Flow、Phenyl Sepharose 6 Fast Flow以及Sephacryl S-100 HR等一系列的纯化后,一种分子量为34kDa的PLA解聚酶LIP被纯化出来。该PLA解聚酶的最适pH和温度分别为8.5和50°C。该降解酶还能够降解叁油酸甘油酯、PHB和PCL等酯类化合物。Na~+和K~+能够激活该降解酶活性,而Zn~(2+),Mg~(2+),Cu~(2+)和Fe~(2+)会抑制该酶的活性。另外EDTA对该降解酶的活性也有明显的抑制。通过分子生物学手段完成了PLA解聚酶LIP基因的克隆,但是未能实现该PLA解聚酶在E.coli中的有效表达。采用数据库及生物信息学分析工具对PLA解聚酶LIP进行了序列分析以及结构预测。另外通过鸟枪法筛选到了另外一个PLA解聚酶基因pME,该基因与Pseudomonas mendocina全基因组文库(CP000680)中的一个protein of unknown function DUF1486的基因序列一致,在此基础上实现了其在E.coli中的有效表达。纯化获得的重组酶的分子量为19.2 kDa。其最适pH和温度分别为8.5和60°C。K+、Ca~(2+)和Ni~(2+)能够增强该重组酶的活性,而Na~+、Zn~(2+)、Mg~(2+)、Cu~(2+)、Fe~(2+)、Mn~(2+)和Co~(2+)则会抑制该酶的活性。利用菌株及其降解酶对PLA薄膜进行降解,结果显示菌株培养15d后可使PLA薄膜减重50%左右,而两种降解酶在经过36h-48h的降解后也能使PLA薄膜减重7~10%,扫描电子显微镜对降解后的PLA薄膜进行观察,发现酶降解只能在膜表面留下蚀刻痕迹,且两种酶的作用模式不同;而菌株降解后膜表面留下蜂窝状孔洞。无论是菌株或是降解酶对PLA的降解产物经质谱检测均只检测到乳酸单体,未见相应的寡聚体。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

聚乳酸解聚酶论文参考文献

[1].张晓静,杨学群,刘仕伟,刘福胜,于世涛.聚乳酸解聚方法研究进展[J].化工环保.2012

[2].王战勇.聚乳酸降解菌的选育及其解聚酶研究[D].东北师范大学.2011

[3].王金龙.聚乳酸降解菌的选育及其解聚酶的研究[D].东北师范大学.2011

[4].吴丽斌.可降解聚乳酸的细菌选育及其解聚酶的研究[D].东北师范大学.2009

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