导读:本文包含了猪内皮细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:猪内皮细胞,地塞米松,单核源树突状细胞,内源性抗原递呈分子
猪内皮细胞论文文献综述
王莹,吴晗,李志军,张永红,李焕荣[1]（2019）在《地塞米松刺激猪内皮细胞对猪单核源树突状细胞内源性抗原递呈分子表达水平的影响》一文中研究指出【目的】为探究在地塞米松(DSMS)刺激下,猪血管内皮细胞(VEC)对单核源树突状细胞(MoDC)内源性抗原递呈分子的影响。【方法】DSMS刺激VEC的不同时间段内,分别检测IL-8的表达量,以筛选可以下调VEC中IL-8表达量的DSMS质量浓度。用此质量浓度的DSMS与内皮细胞、MoDC细胞共同培养,共培养方式分为诱导后共培养和诱导共培养。收集不同组的MoDC,使用多功能酶标仪检测下室细胞的平均荧光强度,判断MoDC的迁移能力;通过荧光定量PCR检测MoDC内源性抗原递呈分子,以分析DSMS对MoDC抗原递呈能力的影响。【结果】DSMS处理VEC后,两种共培养方式中MoDC的迁移能力没有发生显着变化;荧光定量PCR检测LMP7mRNA和MHC-I mRNA的表达量均显着增加。【结论】DSMS可下调IL-8的分泌,在其刺激下,PIEC与MoDC共同培养上调MoDC LMP7 mRNA和MHC-I mRNA的表达水平,进而可能影响MoDC内源性抗原递呈能力。(本文来源于《北京农学院学报》期刊2019年03期）
胡文宝,潘登科,DavidK.C.Cooper,蔡志明,牟丽莎[2]（2019）在《hCD47诱导人巨噬细胞对猪内皮细胞的免疫耐受》一文中研究指出目的探讨人CD47(hCD47)在诱导人巨噬细胞对猪内皮细胞免疫耐受中的作用。方法将转染了pCDH-hCD47-FLAG质粒的猪髂总动脉内皮细胞(PIEC)设为pCDH-hCD47组;将转染了pCDH-FLAG空载体质粒的PIEC为pCDH组;将转染了hCD47-dN的PIEC设为pCDH-hCD47-dN组;将人脐静脉内皮细胞(HUVEC)设为阳性对照组。将细胞分别与人巨噬细胞共培养,检测信号调节蛋白α(SIRPα)的磷酸化情况以及人巨噬细胞对PIEC的杀伤作用。进一步从GT-/-及GT-/-/hCD47基因编辑猪中分离了猪主动脉血管内皮细胞(PAEC),并分析SIRPα的磷酸化情况及人巨噬细胞对PAEC的杀伤作用。结果 pCDH组细胞不能诱导SIRPα的磷酸化,而pCDH-hCD47组细胞与人巨噬细胞共培养10 min后便能够激活SIRPα的磷酸化,且随着共培养时间的延长,SIRPα的磷酸化程度也随之增强。pCDH-hCD47-dN组细胞不能激活SIRPα的磷酸化。人巨噬细胞对p CDH组细胞产生了明显的杀伤作用,p CDH-h CD47组细胞可明显抑制人巨噬细胞的杀伤作用(P<0.05),而pCDH-hCD47-dN组细胞则不能抑制人巨噬细胞的杀伤作用。GT-/--PAEC与人巨噬细胞共培养后,不能激活SIRPα的磷酸化;而GT-/-/hCD47-PAEC与人巨噬细胞共培养后则明显激活了SIRPα的磷酸化。人巨噬细胞对GT-/--PAEC产生了明显的杀伤作用,GT-/-/hCD47-PAEC可明显抑制人巨噬细胞的杀伤作用(P<0.05)。结论在猪内皮细胞中表达hCD47可以通过激活SIRPα的磷酸化抑制人巨噬细胞对内皮细胞的杀伤作用。(本文来源于《器官移植》期刊2019年02期）
乔金增,杨宁,刘士瑜,岳磊,李焕荣[3]（2017）在《左旋咪唑刺激猪内皮细胞抑制单核源树突状细胞的抗原递呈功能》一文中研究指出【目的】研究左旋咪唑(LMS)刺激的猪内皮细胞(VEC)对单核源树突状细胞(MoDC)的抗原递呈功能的影响。【方法】通过LMS刺激猪血管内皮细胞后,筛选出能够使内皮源IL-8表达量上调的低质量浓度LMS(10~(-6) mg/mL),将经LMS处理的内皮细胞与MoDC共培养,收集共培养的MoDC。流式细胞术检测MoDC的CD80/86和MHC-II的表达;丝裂霉素C处理后的MoDC与淋巴细胞混合,MTS法和流式细胞术分析MoDC抗原递呈和对淋巴细胞转化的影响。共培养分为诱导后共培养和诱导共培养。【结果】LMS处理VEC后,两种共培养方式所得MoDC的MHC-II与CD80/86阳性率、淋巴细胞刺激指数、Tc和Treg细胞阳性率均显着下调,而Th细胞阳性率和CD4~+/CD8~+比值显着上调。【结论】低浓度LMS处理的VEC可抑制MoDC的抗原递呈能力。(本文来源于《北京农学院学报》期刊2017年02期）
邱奕雁,朱峰,夏小龙,张小骞,陈扬[4]（2016）在《基于CRISPR/Cas9系统的猪内皮细胞UHRF1定向编辑及其对单核细胞趋化蛋白-1影响的研究》一文中研究指出目的对基于CRISPR/Cas9系统的猪内皮细胞泛素样含PHD和环指域1(UHRF1)定向编辑进行研究,并分析其对单核细胞趋化蛋白-1表达的影响。方法靶向设计并构建UHRF1基因外显子区域gRNA序列载体,并将其与h Cas9载体共转染猪内皮细胞制备单克隆抗体,并分析单核细胞趋化蛋白-1表达变化。结果本研究共获重组质粒5个,转染后获得细胞株a、细胞株b和细胞株c叁株UHRF1蛋白表达极低细胞株;UHRF1蛋白敲除后单核细胞趋化蛋白-1和MMP9、IL1、IL2及Bax蛋白表达分析水平明显降低而Bcl2表达明显升高,且与野生型细胞株相比差异有显着的统计学意义(P<0.05)。结论成功获得基于CRISPR/Cas9系统的猪内皮细胞UHRF1定向编辑,且获得细胞株内单核细胞趋化蛋白-1表达明显降低。(本文来源于《临床和实验医学杂志》期刊2016年15期）
桑海威[5]（2016）在《pIDO在人NK细胞对猪内皮细胞杀伤机制中的调节作用》一文中研究指出目的:运用生物信息学技术和现代生物工程技术以p IDO基因为研究目标,探讨p IDO基因的表达调控机制及该基因在NK细胞对猪内皮细胞杀伤中的调节机制。方法:首先运用生物信息学技术获取并分析p IDO基因5′调控区,预测可能存在的调控位点。构建7个不同长度启动子缺失片段和含有荧光素酶报告基因的重组质粒,分别将其转染至293细胞,运用荧光素酶报告基因检测系统检测各组转染细胞提取液的荧光强度,根据试验结果确定p IDO基因的关键调控序列。人工合成p IDO的c DNA序列,构建慢病毒表达载体p LVX-m CMV-Zs Green-PGK-Puro-IDO,并将其转染至猪内皮细胞系构建高表达p IDO基因的稳转细胞系。将稳转细胞系与NK92细胞混合培养,运用流式细胞术和TUNEL法对NK细胞杀伤稳转细胞系的能力进行评估。运用ELISA法和real-time PCR方法检测NK92细胞的IFN-γ和LFA-1表达强度,评估NK92细胞的活化水平。结果:生物信息学分析显示p IDO基因启动子区含有57个转录因子结合位点。运用双酶切和DNA测序的方法对构建的报告质粒进行鉴定。结果显示,缺失突变体荧光素酶报告质粒构建成功。运用荧光检测分析发现p IDO基因5′调控区存在多处调控区域,其中转录起始点上游-1035~-903bp和-481~-378bp区域的缺失对荧光素酶活性的影响最明显。成功构建高表达p IDO基因的稳转猪内皮细胞系(PED-IDO)。稳转细胞系可以抵御NK92细胞的杀伤作用,检测发现,将NK92细胞与PED-IDO细胞混合培养后,其活化水平明显降低,IFN-γ和LFA-1表达强度均明显下调。结论:p IDO基因转录起始点上游-1035~-903bp和-481~-378bp区域存在重要的调控序列。p IDO基因通过抑制IFN-γ,LFA-1的表达和抑制NK92细胞活化的方式介导PED细胞逃逸NK92的杀伤作用。(本文来源于《华中科技大学》期刊2016-05-01）
魏静[6]（2016）在《人源化基因修饰猪内皮细胞的分离培养及鉴定》一文中研究指出异种移植(Xenotransplantation)是解决临床器官供体短缺的重要途径之一,猪被认为是人类异种器官移植的理想供体。然而,猪器官应用于人类器官移植方面却面临着多种排斥反应。将猪的α-1,3半乳糖基转移酶基因(0α-1,3GT)敲除及转人补体调节蛋白CD46能基本克服超急性排斥,但是仍然存在急性血管排斥反应和凝血紊乱等问题,其中血管内皮细胞的损伤是介导放大免疫排斥反应及凝血功能紊乱的重要环节。在猪到狒狒的肝移植中发现,受体在术后出现严重的血小板减少性内出血,初步发现血小板的减少与肝脏中肝窦内皮细胞的吞噬有关。本研究分离培养了猪主动脉内皮细胞(Porcine arterial endothelial cell, pAEC)和猪肝窦内皮细胞(Porcine liver sinusoidal endothelial cell, pLSEC)建立了猪肝窦内皮细胞分离纯化的方法,为在体外研究异种移植免疫排斥奠定了基础。利用课题组创建GGTA1、ASGR1、CMAH基因敲除的和转入hCD46、hTBM基因的异种移植小型猪,分离培养pAEC和pLSEC,并对GGTA1、ASGR1、 CMAH、hCD46在内皮细胞的表达进行流式分析。利用FITC-CD31流式细胞分析pAEC和pLSEC的纯度,扫描电镜和透射电镜观察pLSEC窗孔结构,免疫荧光法检测pAEC、pLSEC摄取DiI标记的乙酰化低密度脂蛋白(DiI-Ac-LDL)的内吞功能,实时荧光定量PCR (Real-time PCR, qRT-PCR)检测pLSEC、pAEC、猪耳成纤维细胞(Porcine ear fibroblast cell, pEFC)的CD31、CD146、Ⅷ因子、vWF因子的表达。采用端粒酶的逆转录的酶(Telomerase reverse transcripatase of human, hTERT)对pAEC进行永生化。流式细胞术对多基因修饰猪的相关基因GGTA1、ASGR1、CMAH、hCD46在内皮细胞上的表达进行分析。研究结果如下：(1)分离培养的pAEC呈典型的内皮细胞形态,铺路石样排列,生长状态良好；pAEC吸收Dil-Ac-LDL,流式细胞术结果表明培养第3代的pAEC表达CD31的纯度高达99.8%。(2)利用CD31作为肝窦内皮细胞的特异性标记来分离猪肝窦内皮细胞,得到的pLSEC呈内皮细胞的典型形态,铺路石样排列,具有标志性的窗孔结构；pLSEC具有DiI标记的乙酰化低密度脂蛋白(DiI-Ac-LDL)的内吞功能；培养第3代的pLSEC表达CD31高达96.3%,说明pLSEC传代培养的稳定性高、纯度达96.3%。pLSEC表达肝窦内皮细胞的特异性标记分子CD146、Ⅷ因子、vWF, pLSEC表达CD31、CD 146、Ⅷ因子、vWF表达量显着高于pAEC和猪耳成纤维细胞(Porcine ear fibroblast cell, pEFC)。(3)质粒pCI-neo-hTERT电转染pAEC后,细胞已传代至第14代,pAEC永生化后保持了正常的血管内皮的生物学特性。(4)通过流式细胞术对GGTA1、ASGR1、CMAH基因敲除和转入hCD46基因的用于异种移植的小型猪基因在内皮细胞的表达进行分析,表明多基因修饰猪的无GGTA1、ASGR1、CMAH基因相关蛋白的表达,hCD46基因修饰猪表达hCD46蛋白。总之,本研究成功建立了多种基因修饰猪的主动脉内皮细胞和肝窦内皮细胞,利用CD31来纯化pAEC,同时转入pCI-neo-hTERT,得到永生化的pAECo确定了CD31可作为分离纯化pLSEC的特异性标记分子。pAEC和pLSEC为研究非Gal抗原以及肝窦内皮细胞对血小板吞噬的问题提供了良好的细胞模型。利用流式细胞分析的方法对多基因修饰猪的GGTA1、ASGR1、CMAH基因敲除和hCD46基因转入进行检测,提供了一种快速、准确的鉴定多基因修饰猪的方法。(本文来源于《西北民族大学》期刊2016-05-01）
周汇栋[7]（2015）在《表达人抗凝血蛋白的猪内皮细胞与抗凝药物对人血小板聚集的影响》一文中研究指出目的:凝血功能紊乱一直是困扰异种器官利用的关键因素。本实验观察表达人抗凝血蛋白的猪动脉血管内皮细胞(p AEC)与抗凝药物对人外周血中血小板聚集的影响,为克服异种移植中可能出现的血栓性微血管病(Thrombotic microangiopathy,TMA)与消耗性凝血病(Consumptive coagulopathy,CC)提供实验依据。方法:①抗凝血药物对血小板聚集的影响将抗凝药物(肝素、低分子肝素、水蛭素)浓度为1 IU/m L,5IU/ml加入到WT-p AEC中,通过血小板聚集检测仪,检测不同浓度的抗凝药物对血小板聚集的影响。②表达人抗凝血蛋白的猪动脉血管内皮细胞(p AEC)对人外周血血小板聚集的影响。a用流式细胞仪检测表达人抗凝血蛋白(α-1,3-半乳糖苷基因敲除[GTKO]、人类补体蛋白调节基因[CD46,CD55]、血栓调节蛋白基因[TBM]、内皮C蛋白受体基因[EPCR])的猪动脉血管内皮细胞中基因表达水平;b将转基因猪动脉血管内皮细胞分为GTKO-p AEC,GTKO/CD46/CD55-p AEC,GTKO/CD46/TBM-p AEC,GTKO/CD46/EPCR-p AEC四组,阳性对照组为野生型(WT-p AEC),阴性对照组为人动脉内皮细胞(h AEC);c通过血小板聚集检测仪,检测各种动脉内皮细胞对血小板聚集的影响。③表达人抗凝血蛋白的p AEC与抗凝药物共同作用时,对人血小板聚集的影响。将不同浓度的抗凝药物加入到效果最好的转基因p AEC中通过血小板聚集检测仪,检测其对血小板聚集的影响。结果:①抗凝药物(肝素、低分子肝素、水蛭素)都能抑制人外周血血小板聚集,1IU/ml的低分子肝素、水蛭素仅能部分抑制人血小板聚集(聚集率分别为15%、29%)。5IU/ml的低分子肝素、水蛭素与1IU/ml的肝素都几乎能完全抑制人血小板聚集(聚集率分别为3%、4%)。②表达人抗凝血蛋白的猪动脉血管内皮细胞GTKO-p AEC,GTKO/CD46/CD55-p AEC,GTKO/CD46/TBM-p AEC,GTKO/CD46/EPCR-p AEC对人外周血血小板聚集有抑制作用(聚集率分别为44%、39%、27%、33%),其中GTKO/CD46/TBM-p AEC的抑制效果最佳(27%)。③GTKO/CD46/TBM-p AEC与抗凝药物共同作用人血小板聚集,其聚集率可降至4%。结论:①抗凝药物(肝素、低分子肝素、水蛭素)都能抑制人外周血血小板聚集。②表达人抗凝血蛋白的猪动脉血管内皮细胞可以明显降低人血小板聚集率。③在抗凝药物存在的条件下,表达人抗凝血蛋白的猪动脉血管内皮细胞所引起的血小板聚集率可以降低至与人动脉血管内皮细胞产生的聚集率相类似水平。(本文来源于《南华大学》期刊2015-05-01）
张若涵,窦科峰,陶开山,李宵[8]（2013）在《miRNA-451表达质粒的构建及对GTKO猪内皮细胞的》一文中研究指出目的随着异种移植领域基础研究的逐步深入和GTKO猪的问世,异种移植已经进展到了新的阶段。但与同种移植相比,异种移植的急性排斥反应(AHXR)则成为阻碍受体存活时间进一步延长的最主要原因。miRNAs是在真核生物中发现的一类内源性的具有调控功能的非编码RNA。如果找寻出同种移植和异种移植中显着差异的miRNA,加以调控,则可能减轻甚至避免急性排斥反应。小鼠-大鼠异种异位心脏移植后供心miRNA表达谱的变化研究显示,miRNA-451在异种移植中为下调,在同种移植中为上调,作用相反。本实验目的在于构建miRNA-451表达质粒,转染GTKO猪内皮细胞,使其稳定表达;在模拟异种排斥反应的体外细胞实验中探究其对内皮细胞的保护。(本文来源于《2013中国器官移植大会论文汇编》期刊2013-11-01）
[9]（2012）在《RNA干涉α-1,3-半乳糖转移酶对猪内皮细胞免疫和生理功能的影响》一文中研究指出【目的】通过.RNA干涉沉默猪内皮细胞内α-1,3-半乳糖转移酶(α-1,3GT)基因,观察基因沉默对内皮细胞免疫和生理功能的影响。【方法】提取原代猪主动脉内皮细胞,并通过SV40LT基因转染构建永生化猪主动脉内皮细胞系。构建含猪α-1,3GT干涉基因的慢病毒载体,转染细胞并检测α-1,3GT和α-1,3-半乳糖抗原(α-1,3Gal)表达情况。将干涉后细胞与正常人(本文来源于《2012中国器官移植大会论文汇编》期刊2012-10-25）
暨明,易受南,谭孟群[10]（2011）在《siRNA阻断猪内皮细胞组织因子表达对异种移植中抗凝作用影响的研究》一文中研究指出目的探讨在异种移植中,siRNA阻断猪内皮细胞组织因子表达后对细胞抗凝作用的影响。方法 siRNA转染猪内皮细胞后,real-time PCR及流式细胞仪分别检测组织因子的基因及蛋白表达水平;并将转染与未转染siRNA的内皮细胞分别与人血液共孵育60 min,检测凝血块生成及血液中血细胞数量。结果 re-al-time PCR及流式细胞仪检测siRNA转染后,猪内皮细胞组织因子的基因及蛋白表达水平明显降低,与人血液共同孵育60 min后,siRNA转染组和未转染组的凝血块生成和血液中血细胞计数没有明显的差异。结论在异种移植中,猪内皮细胞组织因子表达的降低没有明显的增强内皮细胞抗凝作用。(本文来源于《中国现代医学杂志》期刊2011年26期）
猪内皮细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探讨人CD47(hCD47)在诱导人巨噬细胞对猪内皮细胞免疫耐受中的作用。方法将转染了pCDH-hCD47-FLAG质粒的猪髂总动脉内皮细胞(PIEC)设为pCDH-hCD47组;将转染了pCDH-FLAG空载体质粒的PIEC为pCDH组;将转染了hCD47-dN的PIEC设为pCDH-hCD47-dN组;将人脐静脉内皮细胞(HUVEC)设为阳性对照组。将细胞分别与人巨噬细胞共培养,检测信号调节蛋白α(SIRPα)的磷酸化情况以及人巨噬细胞对PIEC的杀伤作用。进一步从GT-/-及GT-/-/hCD47基因编辑猪中分离了猪主动脉血管内皮细胞(PAEC),并分析SIRPα的磷酸化情况及人巨噬细胞对PAEC的杀伤作用。结果 pCDH组细胞不能诱导SIRPα的磷酸化,而pCDH-hCD47组细胞与人巨噬细胞共培养10 min后便能够激活SIRPα的磷酸化,且随着共培养时间的延长,SIRPα的磷酸化程度也随之增强。pCDH-hCD47-dN组细胞不能激活SIRPα的磷酸化。人巨噬细胞对p CDH组细胞产生了明显的杀伤作用,p CDH-h CD47组细胞可明显抑制人巨噬细胞的杀伤作用(P<0.05),而pCDH-hCD47-dN组细胞则不能抑制人巨噬细胞的杀伤作用。GT-/--PAEC与人巨噬细胞共培养后,不能激活SIRPα的磷酸化;而GT-/-/hCD47-PAEC与人巨噬细胞共培养后则明显激活了SIRPα的磷酸化。人巨噬细胞对GT-/--PAEC产生了明显的杀伤作用,GT-/-/hCD47-PAEC可明显抑制人巨噬细胞的杀伤作用(P<0.05)。结论在猪内皮细胞中表达hCD47可以通过激活SIRPα的磷酸化抑制人巨噬细胞对内皮细胞的杀伤作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
猪内皮细胞论文参考文献
[1].王莹,吴晗,李志军,张永红,李焕荣.地塞米松刺激猪内皮细胞对猪单核源树突状细胞内源性抗原递呈分子表达水平的影响[J].北京农学院学报.2019
[2].胡文宝,潘登科,DavidK.C.Cooper,蔡志明,牟丽莎.hCD47诱导人巨噬细胞对猪内皮细胞的免疫耐受[J].器官移植.2019
[3].乔金增,杨宁,刘士瑜,岳磊,李焕荣.左旋咪唑刺激猪内皮细胞抑制单核源树突状细胞的抗原递呈功能[J].北京农学院学报.2017
[4].邱奕雁,朱峰,夏小龙,张小骞,陈扬.基于CRISPR/Cas9系统的猪内皮细胞UHRF1定向编辑及其对单核细胞趋化蛋白-1影响的研究[J].临床和实验医学杂志.2016
[5].桑海威.pIDO在人NK细胞对猪内皮细胞杀伤机制中的调节作用[D].华中科技大学.2016
[6].魏静.人源化基因修饰猪内皮细胞的分离培养及鉴定[D].西北民族大学.2016
[7].周汇栋.表达人抗凝血蛋白的猪内皮细胞与抗凝药物对人血小板聚集的影响[D].南华大学.2015
[8].张若涵,窦科峰,陶开山,李宵.miRNA-451表达质粒的构建及对GTKO猪内皮细胞的[C].2013中国器官移植大会论文汇编.2013
[9]..RNA干涉α-1,3-半乳糖转移酶对猪内皮细胞免疫和生理功能的影响[C].2012中国器官移植大会论文汇编.2012
[10].暨明,易受南,谭孟群.siRNA阻断猪内皮细胞组织因子表达对异种移植中抗凝作用影响的研究[J].中国现代医学杂志.2011