导读:本文包含了红厚壳素论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:肝细胞癌,蛋白激酶C,异巴西红厚壳素,细胞侵袭
红厚壳素论文文献综述
袁星[1]（2015）在《酮类天然产物异巴西红厚壳素的抗肝癌活性及其作用机制研究》一文中研究指出1、研究背景对肿瘤发生和发展中细胞信号通路内蛋白的变化进行阐明,是帮助我们找到有效的预防和治疗肿瘤方法的积极方式。肝癌(主要是hepatocellular carcinoma, HCC)在最近的几十年内,排在当今世界最常见肿瘤中的第五位,此外已成为因癌致死的第叁位。在中国肝癌的发病率与全世界的肝癌发病率相比较已高于55%。目前在中国由癌症引起的死亡中,肝癌排在第二位,占全部肿瘤的19.33%。多年来尽管生物医学和临床医疗工作者致力于攻克肝癌这顽疾,但进展甚微。目前手术治疗是比较有效的手段,但大部分肝癌病人被诊断发现时都已到了癌症的晚期(大部分都已经转移),外科切除的方法已经不再适合,而系统性的化学治疗通常成为唯一可尝试的治疗手段。发现新型肝癌药物治疗的靶标,不仅可以揭示新的信号通路在肝癌的发生和发展中的作用,而且为临床肝癌的药物治疗提供有效的靶标。抗肿瘤药物的开发是新药研究的方向之一,而天然产物具有来源广泛,结构多样以及药理作用独特的特点,经过长期的临床应用,大多数疗效确切,使用安全性高。在目前的临床应用药物中,有将近50%是来自天然产物及其衍生物。例如：氧代(?)酮类天然产物目前发现具备多种药理学活性,包括：抗炎、抑菌、抗肿瘤、心脑血管及免疫系统调节等。因此,从天然产物中寻找结构和功能的多样性高、成药性好、资源丰富易得的天然活性小分子已成为药物研究的热点。蛋白激酶C(protein kinase C, PKC)是G蛋白偶联受体(GPCR)及各种生长因子受体信号通路内的一类必不可少的蛋白分子。根据它们的结构和功能分为叁组：第一组为典型或传统的PKC (classical or conventional PKC, cPKC),包括α,βⅠ、βⅡ和Y亚类；第二组为新型PKC(novel PKC, nPKC),包括δ、ε、η、θ和μ亚类；第三组为非典型PKC (atypical PKC, aPKC),由ζ和λ/l亚类组成。每一种PKC亚型通过对其信号通路中特定的下游分子产生独特的作用,导致它们对肿瘤的发生,进展和转移产生或正面、或负面的影响,很多报道表明PKC某些亚基的过表达与肿瘤(包含肝癌)的发生以及进展高度相关。抑制PKC从细胞浆到细胞膜的转位,从而抑制其下游分子的磷酸化,或许为肝癌的治疗提供了一个思路。目前发现的PKC抑制剂因亚基选择性的缺乏,导致其在临床应用中表现出明显的毒副作用。因此,迫切需要找到化合物兼备特异性高和选择性好。在研发有治疗效果的抗肿瘤药物时,从自然界容易获得的天然产物中寻找,不失为一种优选的策略。当前报道显示,(?)酮类化合物在抗肿瘤功效方面潜能巨大。因此,本课题将在细胞模型和动物模型中引入抑制PKC活性及表达的氧代(?)酮类天然小分子化合物,通过其对肝癌细胞和移植瘤的抑制作用,检测凋亡,迁移及侵袭等指标变化,明确其PKC亚基的选择性,为临床上肝癌治疗过程中的药物设计提供一定的科学依据以及先导化合物。2、研究方法(1)利用细胞毒性检测实验,在人肝癌细胞株中筛选出具备潜在的有抗肿瘤活性的(?)酮类化合物。在细胞水平评价这些有抗肿瘤活性的化合物是否对肿瘤细胞的迁移、侵袭及增殖有抑制效力。(2)筛选能够短期在裸鼠皮下形成移植瘤的人肝癌细胞系。能够被最终用于体内实验的人肝癌细胞系需具有细胞增殖快；具有明显的在体外迁移及侵袭的活性；具有在裸鼠皮下能短时间内迅速成瘤等恶性肿瘤细胞所应具备的特性。(3)将人肝癌细胞注射到BALB/c裸鼠的皮下诱发肿瘤(移植瘤),通过尾静脉注射经体外筛选具有对抗肿瘤增殖的(?)酮类小分子化合物,检测肿瘤在裸鼠体内的生长及转移情况,并对肿瘤组织进行免疫组化分析、H&E检测凋亡以及免疫印迹等分析。(4)通过蛋白激酶活性分析,发现靶向PKC有活性抑制能力的小分子化合物,敲定重点研究对象。(5)由于每一种PKC亚型可通过其信号通路中特定的下游分子产生独特的生物作用。靶向PKC亚型,进一步研究具备PKC抑制活性的小分子化合物是否对PKC亚基的表达能够选择性下调,是否与PKC亚基有结合能力。同时检测小分子化合物对PKC下游与人肝癌细胞的凋亡、迁移及侵袭相关蛋白的影响。3、研究结果(1)对氧代(?)酮类小分子化合物进行CCK-8细胞毒性筛选,经过终浓度50μM的初筛和浓度梯度复筛,发现天然产物异巴西红厚壳素(Isojacareubin, ISJ)及其中间体化合物7 (7,9-dihydroxy-2,2-diphenyl-6H-[1,3]dioxolo[4,5-c]xanthen-6-one)具备抗肝癌活性及选择性,即细胞毒性只针对肝癌细胞而并不针对正常肝细胞。进一步通过流式细胞仪检测凋亡细胞发现,ISJ及其中间体化合物7能够以剂量依赖的方式促进肝癌细胞HepG2凋亡,抑制其迁移及侵袭。(2)利用细胞划痕实验、transwell细胞侵袭实验以及异种移植瘤成瘤实验,肝癌细胞HepG2被发现具有细胞增殖快；显着的体外迁移、侵袭活性；在裸鼠皮下能迅速成瘤等恶性生物学特性。(3)天然产物ISJ的体内抗肿瘤活性被进一步评估,在裸鼠的右侧背部的皮下注射5×106个肝癌细胞HepG2/只,当肿瘤体积达到75-100 mm3时,通过尾静脉按照5mg/kg体重的剂量连续隔天给药14天。与对照组相比,结果发现5mg/kg的给药组能够显着抑制移植瘤的生长,并且给药组的小鼠体重无显着降低,说明药物无显着的毒副作用。H&E染色镜下显示给药组的肿瘤组织有明显的粥样坏死。此外,我们用免疫组化和免疫印迹的方法考察给药组肿瘤组织中相关蛋白的变化情况,结果发现凋亡相关蛋白c-PARP、c-Caspase 3和c-Caspase 9的表达量显着上升。(4)对氧代(?)酮类小分子化合物进行PKC酶的活性筛选后发现,ISJ及其中间体化合物7拥有PKC的抑制活性,尤其ISJ在5 μM时能够显着抑制PKC活性。(5)通过免疫印迹试验即western blot及pull down实验对天然产物ISJ进行亚基选择性分析,结果发现ISJ选择性抑制aPKC (PKCζ)在细胞浆的表达,并抑制aPKC (PKCζ)的活化即从胞浆转位至胞膜；同时,ISJ又可与cPKC (PKC α)或nPKC (PKC δ, PKCε和PKCμ)产生结合作用。(6)ISJ对PKC不同亚基的表达抑制效应和结合作用,直接导致了早期表现：ISJ抑制了肝癌细胞PKC下游的Raf/MAPK信号通路内相关蛋白激酶的磷酸化；晚期表现：ISJ抑制了肝癌细胞HepG2的恶性迁移、侵袭,以及与肝癌细胞HepG2恶性侵袭相关的蛋白表达被下调,与凋亡相关蛋白的表达被上调。4、结论本课题合成并生物评估了一类新颖的以氧代(?)酮结构为基础的PKC抑制剂。其中尤以天然产物ISJ,因其显着的体外抗肝癌增殖活性、促肝癌细胞HepG2凋亡效应和影响肝癌细胞HepG2的迁移、侵袭,而被重点研究。此外,我们发现ISJ具备更好的PKC抑制活性。因此,在众多氧代(?)酮类化合物中,天然产物ISJ被用于进行深层次的机制研究,结果表明靶向不同的PKC亚基,ISJ展现出不同的作用机制。ISJ选择性地抑制aPKC(PKCζ)在细胞浆的表达,并抑制aPKC(PKCζ)的转位即从胞浆到胞膜；同时,ISJ又可与cPKC(PKC α)或nPKC(PKC δ, PKCε和PKCμ)产生结合作用。该表达抑制效应及结合作用,直接导致了早期表现：ISJ抑制了肝癌细胞PKC下游的Raf/MAPK信号通路内相关蛋白激酶的磷酸化；晚期表现：ISJ抑制肝癌细胞HepG2的侵袭和增殖。此外,在肝癌异种移植瘤模型中,ISJ表现出显着的体内抗肿瘤活性。综上所述,本研究发现了一种新颖的以氧代(?)酮结构为基础的PKC抑制剂ISJ,可用于肝癌的治疗。(本文来源于《第二军医大学》期刊2015-05-01）
Ha,Minh,Hien,Paul,WS,Heng,Nguyen,Van,Thi,Nguyen,Khac,Quynh,Cu,Vo,Thi,Bach,Hue[2]（2011）在《GC-MS法测定Calophyllum inophyllum L.中的红厚壳素(英文)》一文中研究指出AIM:To establish a GC-MS method for the determination of calophyllolide in Calophyllum inophyllum L.and its application in quality control of natural medicine.METHODS:Methanolic extract from Calophyllum inophyllum L.was prepared.Calophyllolide was isolated,purified and then identified to serve as a chemical marker for development and validation a GC-MS method according to ICH guideline and USP.The established method was proved to be useful in quality control with the aid of Principle Component Analysis (PCA),a multivariate data analysis technique.RESULTS:The proposed method was selective against mass spectral deconvoluting software AMDIS32.The linear range was from 3.125-50 μg·mL-1.The RSD of intra-and inter-day precision variations were less than 3% and the mean recovery was (101.22±1.98)% (RSD=1.95%).PCA was used to indicate a differentiation of batches in production as well as proving that calophyllolide has influence on the discrimination of extracts from different batches.CONCLUSION:The proposed capillary gas chromatography/mass spectrometric method for the determination of calophyllolide obtained from resin of Calophyllum inophyllum L.nut oil showed its suitability,simplicity,rapidity and precision,and it can be used for chemical assay.This is the first time such a technique was reported in literature.The multivariate data analysis technique was employed to provide an extensive but inclusive method for quality control of the extracts,to ensure consistency for batch to batch of extracts to be used for product development.(本文来源于《中国天然药物》期刊2011年06期）
熊丽,梁健,陈晓辉,马爱玲,沈振铎[3]（2008）在《高效液相色谱法测定田基黄中异巴西红厚壳素的含量》一文中研究指出目的建立田基黄中异巴西红厚壳素的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,Hy-persil C18(250mm×4.6mm,5μm)柱,流动相为乙腈-0.04%磷酸水(47∶53,v/v),流速:1.0ml/min,检测波长:254nm,柱温:30℃。结果异巴西红厚壳素线性范围1.68～56mg/L,r=0.9997(n=6);平均回收率为101.5%(RSD=2.5%,n=9)。结论该方法简便、快速、精密度好,可为田基黄的质量控制提供依据。(本文来源于《中国实用医药》期刊2008年19期）
秦盛莹,陈晓辉,米丹,毕开顺[4]（2007）在《RP-HPLC法测定田基黄中异巴西红厚壳素的含量》一文中研究指出目的:建立测定田基黄中异巴西红厚壳素含量的方法。方法:采用 RP-HPLC 法,色谱柱为 Diamonsil C_(18)(200 mm×4.6 mm,5 μm);以乙腈-甲醇-水-磷酸(45:15:50:0.05)为流动相;流速为1.0 mL·min~(-1);柱温为室温;检测波长为254 nm。结果:异巴西红厚壳素浓度在5.01～80.2 μg·mL~(-1)范围内与峰面积呈良好线性关系,r=0.9999(n=5);平均回收率为97.5%(n=9)。结论:本方法简便、快速、准确,可用于田基黄中异巴西红厚壳素的含量测定。(本文来源于《药物分析杂志》期刊2007年05期）
崔堂兵,罗焕亮,郭勇,王菊芳,代建国[5]（2004）在《胡桐悬浮培养细胞中苯丙氨酸解氨酶活性与红厚壳素产量的关系》一文中研究指出胡桐CR2细胞悬浮培养过程中,苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性上升后红厚壳素产量即增加。加入真菌诱导子后,PAL 活性与红厚壳素产量呈一定的正相关。以PAL抑制物降低PAL活性后,红厚壳素产量也降低;诱导物与抑制物同时加入, PAL活性与红厚壳素产量均界于诱导物处理与未处理之间。(本文来源于《植物生理学通讯》期刊2004年06期）
罗焕亮,郭勇,崔堂兵,代建国,张俊松[6]（2004）在《真菌诱导子对胡桐悬浮培养细胞产生红厚壳素的影响》一文中研究指出目的 探讨真菌诱导子对胡桐悬浮培养细胞产生红厚壳素的影响。方法 通过对胡桐叶斑病病菌的分离培养 ,制成真菌诱导子补加到胡桐细胞悬浮培养基中 ,考察不同浓度、不同加入时间对胡桐细胞生物量及红厚壳素产量的影响。结果 S I菌株诱导胡桐CR2细胞合成红厚壳素的最佳浓度为 60mgGE·L- 1,诱导子在细胞生长静止期初期 (即培养d 18)加入对红厚壳素产量影响最大 ,可使产量提高 2 7% ,并促进了红厚壳素向胞外分泌。结论壳多孢菌的添加能有效提高胡桐细胞悬浮培养体系中红厚壳素的产量(本文来源于《药学学报》期刊2004年04期）
罗焕亮[7]（2003）在《胡桐细胞培养生产红厚壳素的细胞工程研究》一文中研究指出红厚壳素是一种来源于胡桐的香豆素化合物，它对引起艾滋病的HIV-1病毒具有强烈的抑制作用。调查结果表明，胡桐植物资源并不丰富，仅分布在海南岛东部的琼山至万宁一带，多数散生，小有连片分布。由此说明了通过植物细胞培养开发胡桐中抗HIV红厚壳素化合物的积极意义。 GC-MS分离出40种胡桐叶的挥发性成分，主要是醇类和高级烷烃化合物。以Inophyllum B为标准品，建立了检测红厚壳素的HPLC方法。 在MS培养基上，胡桐幼苗的叶、茎段与胚根均可诱导出愈伤组织，其中以茎段的诱导率最高达95.6％，而胚乳难以诱导愈伤组织。胡桐愈伤组织生长与培养基中无机盐含量有关，在B_5、MS、White叁种不同的基本培养中，以B_5最适于胡桐愈伤组织的诱导，MS次之，White最差。1200lx全天光照可使茎段外植体的诱愈率达100％，对愈伤组织生长最佳。2,4-D／6-BA以6／1～4／1的比例有利于胡桐愈伤组织的生长。 比较不同外植体诱导的愈伤组织的生长量与红厚壳素含量，筛选出高产愈伤组织系CR2，红厚壳素含量为1.480mg／gDW。通过二次正交旋转组合设计，获得适于CR2愈伤组织系生长的优化培养基Mo(附加2，4-D2.0mg／L、6-BA0.32mg／L、蔗糖35g／L的B_5培养基)。 在Mo培养基中，胡桐CR2悬浮培养细胞的生长过程曲线及培养体系中红厚壳素积累曲线均呈S型，整个生长过程均经历了5个主要阶段：迟滞期、指数生长期、线性生长期、稳定期、衰退期。迟滞期较长，生物量及红厚壳素产量达峰值的时间分别为培养21d和24d。不同起始蔗糖浓度、不同NH_4~+／NO_3~-比例及氮源总量对CR2悬浮培养细胞生长及红厚壳素的生物合成均有明显影响，3.5％的蔗糖、2／25的NH_4~+／NO_3~-比、27mmol／L的总氮量有利于CR2悬浮培养细胞的生长及培养体系中红厚壳素的合成。CR2细胞悬浮培养过程中，培养基中红厚壳素含量在细胞生长稳定期末期迅速增长，而细胞内红厚壳素含量变化不大。 从胡桐叶斑病的病组织中分离到壳多孢菌(Stagonospora curtisii(Berk．)Sacc)S-I菌株对胡桐CR2细胞合成红厚壳素具有诱导作用，最佳浓度为60mgGE／L。真菌刺激剂诱导培养过程中，细胞内红厚壳素含量变化不大，而培养液中红厚壳素含量在整个培养周期中一直呈线性增长。CR2细胞不同的生长阶段加入真菌刺激剂对红厚壳素的合成有显着影响。细胞生长18d加入真菌刺激剂诱导培养3d，使红厚壳素总量达59.174mg／L，较对照提高27％。 研究了CR2细胞悬浮培养过程苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的变化与红厚壳素积累动力学过程的关系。CR2细胞悬浮培养过程中，PAL活性的上升随后带来红厚壳素产量的增加，两者存在正相关性。真菌刺激剂加入，PAL活性出现不同(本文来源于《华南理工大学》期刊2003-11-14）
红厚壳素论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
AIM:To establish a GC-MS method for the determination of calophyllolide in Calophyllum inophyllum L.and its application in quality control of natural medicine.METHODS:Methanolic extract from Calophyllum inophyllum L.was prepared.Calophyllolide was isolated,purified and then identified to serve as a chemical marker for development and validation a GC-MS method according to ICH guideline and USP.The established method was proved to be useful in quality control with the aid of Principle Component Analysis (PCA),a multivariate data analysis technique.RESULTS:The proposed method was selective against mass spectral deconvoluting software AMDIS32.The linear range was from 3.125-50 μg·mL-1.The RSD of intra-and inter-day precision variations were less than 3% and the mean recovery was (101.22±1.98)% (RSD=1.95%).PCA was used to indicate a differentiation of batches in production as well as proving that calophyllolide has influence on the discrimination of extracts from different batches.CONCLUSION:The proposed capillary gas chromatography/mass spectrometric method for the determination of calophyllolide obtained from resin of Calophyllum inophyllum L.nut oil showed its suitability,simplicity,rapidity and precision,and it can be used for chemical assay.This is the first time such a technique was reported in literature.The multivariate data analysis technique was employed to provide an extensive but inclusive method for quality control of the extracts,to ensure consistency for batch to batch of extracts to be used for product development.
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
红厚壳素论文参考文献
[1].袁星.酮类天然产物异巴西红厚壳素的抗肝癌活性及其作用机制研究[D].第二军医大学.2015
[2].Ha,Minh,Hien,Paul,WS,Heng,Nguyen,Van,Thi,Nguyen,Khac,Quynh,Cu,Vo,Thi,Bach,Hue.GC-MS法测定CalophylluminophyllumL.中的红厚壳素(英文)[J].中国天然药物.2011
[3].熊丽,梁健,陈晓辉,马爱玲,沈振铎.高效液相色谱法测定田基黄中异巴西红厚壳素的含量[J].中国实用医药.2008
[4].秦盛莹,陈晓辉,米丹,毕开顺.RP-HPLC法测定田基黄中异巴西红厚壳素的含量[J].药物分析杂志.2007
[5].崔堂兵,罗焕亮,郭勇,王菊芳,代建国.胡桐悬浮培养细胞中苯丙氨酸解氨酶活性与红厚壳素产量的关系[J].植物生理学通讯.2004
[6].罗焕亮,郭勇,崔堂兵,代建国,张俊松.真菌诱导子对胡桐悬浮培养细胞产生红厚壳素的影响[J].药学学报.2004
[7].罗焕亮.胡桐细胞培养生产红厚壳素的细胞工程研究[D].华南理工大学.2003