本文主要研究内容
作者温婧怡（2019）在《酿酒酵母菌细胞壁蛋白粗提物诱导绵羊瘤胃上皮细胞SBD-1表达的研究》一文中研究指出：目前抗生素滥用对人和动物健康造成的损害以及对环境的破坏日益突出,这种情况迫使研究人员不断寻找可以替代抗生素的物质。防御素在替代抗生素方面拥有无限潜能,是一类具有广谱抗微生物活性的小分子天然免疫抗微生物肽(Antimicrobial peptides,AMPs)。β-防御素是防御素家族中分布最广的一类防御素,广泛分布于哺乳动物、禽类和鱼类体内,而绵羊β-防御素-1(sheep beta defensin-1,SBD-1)是绵羊胃肠道内分布最为广泛的防御素,尤其在绵羊瘤胃中高度表达。本试验在mRNA和蛋白水平研究酿酒酵母菌细胞壁蛋白粗提物对绵羊瘤胃上皮细胞(ovineruminal epithelia cells,ORECs)SBD-1 表达的影响。试验首先对 ORECs进行体外培养;用超声破碎法将培养的酿酒酵母菌破碎以提取细胞壁,再运用复合酶法提取细胞壁蛋白粗提物;然后以浓度为0、12.5、25、50和100μg/mL的酿酒酵母菌细胞壁蛋白粗提物刺激ORECs 2、4、8和12 h;最后通过实时荧光定量PCR技术(quantitative real-time PCR,qPCR)和酶联免疫吸附测定试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测不同浓度的酿酒酵母菌细胞壁蛋白粗提物诱导ORECs不同时间后SBD-1 mRNA和蛋白的表达变化。结果表明:本试验在体外成功的培养了 ORECs,且当原代细胞生长到第12 d时基本将细胞培养瓶瓶底铺满。运用复合酶法所提取的酿酒酵母菌细胞壁蛋白粗提物通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测符合显色范围。且不论在mRNA还是蛋白水平上,酿酒酵母菌细胞壁蛋白粗提物都可以诱导ORECs SBD-1的表达,且当酿酒酵母菌细胞壁蛋白粗提物浓度为100 μg/mL诱导ORECs 12 h时,SBD-1的表达量达到最大。
Abstract
mu qian kang sheng su lan yong dui ren he dong wu jian kang zao cheng de sun hai yi ji dui huan jing de po huai ri yi tu chu ,zhe chong qing kuang pai shi yan jiu ren yuan bu duan xun zhao ke yi ti dai kang sheng su de wu zhi 。fang yu su zai ti dai kang sheng su fang mian yong you mo xian qian neng ,shi yi lei ju you an pu kang wei sheng wu huo xing de xiao fen zi tian ran mian yi kang wei sheng wu tai (Antimicrobial peptides,AMPs)。β-fang yu su shi fang yu su jia zu zhong fen bu zui an de yi lei fang yu su ,an fan fen bu yu bu ru dong wu 、qin lei he yu lei ti nei ,er mian yang β-fang yu su -1(sheep beta defensin-1,SBD-1)shi mian yang wei chang dao nei fen bu zui wei an fan de fang yu su ,you ji zai mian yang liu wei zhong gao du biao da 。ben shi yan zai mRNAhe dan bai shui ping yan jiu niang jiu jiao mu jun xi bao bi dan bai cu di wu dui mian yang liu wei shang pi xi bao (ovineruminal epithelia cells,ORECs)SBD-1 biao da de ying xiang 。shi yan shou xian dui ORECsjin hang ti wai pei yang ;yong chao sheng po sui fa jiang pei yang de niang jiu jiao mu jun po sui yi di qu xi bao bi ,zai yun yong fu ge mei fa di qu xi bao bi dan bai cu di wu ;ran hou yi nong du wei 0、12.5、25、50he 100μg/mLde niang jiu jiao mu jun xi bao bi dan bai cu di wu ci ji ORECs 2、4、8he 12 h;zui hou tong guo shi shi ying guang ding liang PCRji shu (quantitative real-time PCR,qPCR)he mei lian mian yi xi fu ce ding shi yan (enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)jian ce bu tong nong du de niang jiu jiao mu jun xi bao bi dan bai cu di wu you dao ORECsbu tong shi jian hou SBD-1 mRNAhe dan bai de biao da bian hua 。jie guo biao ming :ben shi yan zai ti wai cheng gong de pei yang le ORECs,ju dang yuan dai xi bao sheng chang dao di 12 dshi ji ben jiang xi bao pei yang ping ping de pu man 。yun yong fu ge mei fa suo di qu de niang jiu jiao mu jun xi bao bi dan bai cu di wu tong guo SDS-ju bing xi xian an ning jiao dian yong jian ce fu ge xian se fan wei 。ju bu lun zai mRNAhai shi dan bai shui ping shang ,niang jiu jiao mu jun xi bao bi dan bai cu di wu dou ke yi you dao ORECs SBD-1de biao da ,ju dang niang jiu jiao mu jun xi bao bi dan bai cu di wu nong du wei 100 μg/mLyou dao ORECs 12 hshi ,SBD-1de biao da liang da dao zui da 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自内蒙古农业大学的温婧怡，发表于刊物内蒙古农业大学2019-10-08论文，是一篇关于防御素论文,绵羊瘤胃上皮细胞论文,实时荧光定量技术论文,酶联免疫吸附测定论文,内蒙古农业大学2019-10-08论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自内蒙古农业大学2019-10-08论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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