本文主要研究内容
作者赵楚华(2019)在《剑花多糖的分离纯化、结构表征及生物活性研究》一文中研究指出:剑花,为仙人掌科量天尺属,是一种药食同源的植物花朵,广泛分布于热带和亚热带地区。岭南中医志记载剑花性味甘、凉、入肺,具有清痰热、除积热、止气痛、理痰火等功效,常被用于辅助治疗脑动脉硬化、心血管疾病、肺结核、支气管炎、颈淋巴结核、腮腺炎等疾病。植物化学素研究表明剑花富含活性多糖,然而,目前很少有关于剑花多糖的纯化、结构特征及抗氧化和免疫活性研究报道。因此,本论文初步研究了剑花多糖的分离纯化、结构鉴定及体外抗氧化和免疫活性,并进一步研究了H2O2-Fe2+降解对剑花多糖的影响,为深入地研究和开发剑花多糖提供基础理论依据。主要研究结果如下:(1)采用水提醇沉法制得剑花粗多糖,命名为FHRP。化学分析表明FHRP的总糖含量为71.08±1.71%、半乳糖醛酸含量为5.12±0.12%,还含有极少量蛋白质、硫酸基和葡萄糖醛酸。单糖组成分析表明FHRP由岩藻糖、阿拉伯糖、半乳糖和葡萄糖组成,各单糖摩尔比为32.86:60.46:6.09:0.58。高效液相色谱(HPGPC)分析表明FHRP有四组不同的分子量组分,属于非均一多糖。红外光谱(IR)结果表明FHRP含有α和β构型的吡喃酸性多糖。体外抗氧化和免疫实验表明FHRP具有良好的ABTS自由基清除活性和氧自由基吸收活性,且能显著促进小鼠巨噬细胞RAW264.7分泌NO和IL-6,表明剑花多糖具有潜在的抗氧化和免疫刺激活性。(2)通过DEAE-Sepharose fast flow阴离子交换柱分离纯化FHRP,得到三个多糖组分(FHRP-1、FHRP-2和FHRP-3),多糖含量分别为84.06±1.01%、80.63±1.97%和80.12±1.25%。HPGPC分析表明FHRP-1有两个组分,平均分子量分别为5535.99 kDa和116.89 kDa;而FHRP-2和FHRP-3均只有一个峰,为均一多糖,分子量分别为55.03kDa和134.26 kDa。单糖组成分析表明FHRP-1、FHRP-2和FHRP-3均由阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖和岩藻糖组成,FHRP-1的单糖摩尔百分含量比为37.55:54.78:1.31:6.36,区别于FHRP-2的18.11:70.64:3.72:7.53和FHRP-3的36.90:33.16:0.24:29.70。IR分析表明三者均含有糖醛酸和吡喃糖环的特征峰,且均含有β构型糖苷键,但FHRP-1还具有α构型糖苷键。刚果红实验表明在水溶液中,FHRP-1和FHRP-2没有三螺旋结构,FHRP-3则有三螺旋结构;而在弱碱性溶液中,三者均具有三螺旋结构。高碘酸氧化-Smith降解和甲基化结果表明FHRP-1的糖苷键主要有→6)-Galp-(1→、→6)-Glcp-(1→、Galp-(1→、→3,4)-fucp-(1→、→4)-Arap-(1→和→4)-Glcp-(1→;FHRP-2的糖苷键主要有→6)-Galp-(1→、→4)-Arap-(1→和→4)-Glcp-(1→;而FHRP-3的糖苷键主要有→4)-Arap-(1→、→3)-Glcp-(1→、→6)-Glcp-(1→、→3,4)-fucp-(1→、Galp-(1→、→6)-Galp-(1→和→4)-Glcp-(1→。体外抗氧化实验表明FHRP-1、FHRP-2和FHRP-3均能提高RAW264.7细胞中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性,降低丙二醛(MDA)的含量。体外免疫实验显示,三者均能显著提高RAW264.7细胞的增殖和胞饮能力,促进NO、IL-6和TNF-α的分泌,且FHRP-2和FHRP-3的效果优于FHRP-1。(3)采用Fe2+-H2O2降解法降解FHRP得到两个的剑花降解多糖(DFHRP-1和DFHRP-2)。化学组成分析表明Fe2+-H2O2降解对剑花多糖的多糖含量、蛋白质含量和单糖组成没有明显影响。HPGPC分析表明相比FHRP,DFHRP-1和DFHRP-2的分子量显著降低。SEM结果显示DFHRP-1和DFHRP-2的表面有不规则的孔洞,且表面较FHRP的光滑,降解破坏了多糖原有的表面形貌。功能实验分析结果表明与FHRP相比,DFHRP-1和DFHRP-2的持水能力和乳化性有所降低,持油能力有所提高。体外抗氧化实验表明DFHRP-1表现出较强的ABTS自由基清除活性,其次是DFHRP-2和FHRP;而DFHRP-1和DFHRP-2的氧自由基吸收能力(ORAC)值均高于FHRP。此外,体外免疫调节实验表明降解多糖能更显著地提高RAW 264.7细胞分泌NO和IL-6的含量,且DFHRP-1的效果最强,其次是DFHRP-2和FHRP。这些结果表明剑花降解多糖的功能和生物活性与其分子量大小密切相关,DFHRP-1和DFHRP-2可开发一种多用途的成分应用于食品、医药和化妆品领域。
Abstract
jian hua ,wei xian ren zhang ke liang tian che shu ,shi yi chong yao shi tong yuan de zhi wu hua duo ,an fan fen bu yu re dai he ya re dai de ou 。ling na zhong yi zhi ji zai jian hua xing wei gan 、liang 、ru fei ,ju you qing tan re 、chu ji re 、zhi qi tong 、li tan huo deng gong xiao ,chang bei yong yu fu zhu zhi liao nao dong mai ying hua 、xin xie guan ji bing 、fei jie he 、zhi qi guan yan 、geng lin ba jie he 、sai xian yan deng ji bing 。zhi wu hua xue su yan jiu biao ming jian hua fu han huo xing duo tang ,ran er ,mu qian hen shao you guan yu jian hua duo tang de chun hua 、jie gou te zheng ji kang yang hua he mian yi huo xing yan jiu bao dao 。yin ci ,ben lun wen chu bu yan jiu le jian hua duo tang de fen li chun hua 、jie gou jian ding ji ti wai kang yang hua he mian yi huo xing ,bing jin yi bu yan jiu le H2O2-Fe2+jiang jie dui jian hua duo tang de ying xiang ,wei shen ru de yan jiu he kai fa jian hua duo tang di gong ji chu li lun yi ju 。zhu yao yan jiu jie guo ru xia :(1)cai yong shui di chun chen fa zhi de jian hua cu duo tang ,ming ming wei FHRP。hua xue fen xi biao ming FHRPde zong tang han liang wei 71.08±1.71%、ban ru tang quan suan han liang wei 5.12±0.12%,hai han you ji shao liang dan bai zhi 、liu suan ji he pu tao tang quan suan 。chan tang zu cheng fen xi biao ming FHRPyou yan zao tang 、a la bai tang 、ban ru tang he pu tao tang zu cheng ,ge chan tang ma er bi wei 32.86:60.46:6.09:0.58。gao xiao ye xiang se pu (HPGPC)fen xi biao ming FHRPyou si zu bu tong de fen zi liang zu fen ,shu yu fei jun yi duo tang 。gong wai guang pu (IR)jie guo biao ming FHRPhan you αhe βgou xing de bi nan suan xing duo tang 。ti wai kang yang hua he mian yi shi yan biao ming FHRPju you liang hao de ABTSzi you ji qing chu huo xing he yang zi you ji xi shou huo xing ,ju neng xian zhe cu jin xiao shu ju shi xi bao RAW264.7fen bi NOhe IL-6,biao ming jian hua duo tang ju you qian zai de kang yang hua he mian yi ci ji huo xing 。(2)tong guo DEAE-Sepharose fast flowyin li zi jiao huan zhu fen li chun hua FHRP,de dao san ge duo tang zu fen (FHRP-1、FHRP-2he FHRP-3),duo tang han liang fen bie wei 84.06±1.01%、80.63±1.97%he 80.12±1.25%。HPGPCfen xi biao ming FHRP-1you liang ge zu fen ,ping jun fen zi liang fen bie wei 5535.99 kDahe 116.89 kDa;er FHRP-2he FHRP-3jun zhi you yi ge feng ,wei jun yi duo tang ,fen zi liang fen bie wei 55.03kDahe 134.26 kDa。chan tang zu cheng fen xi biao ming FHRP-1、FHRP-2he FHRP-3jun you a la bai tang 、ban ru tang 、pu tao tang he yan zao tang zu cheng ,FHRP-1de chan tang ma er bai fen han liang bi wei 37.55:54.78:1.31:6.36,ou bie yu FHRP-2de 18.11:70.64:3.72:7.53he FHRP-3de 36.90:33.16:0.24:29.70。IRfen xi biao ming san zhe jun han you tang quan suan he bi nan tang huan de te zheng feng ,ju jun han you βgou xing tang gan jian ,dan FHRP-1hai ju you αgou xing tang gan jian 。gang guo gong shi yan biao ming zai shui rong ye zhong ,FHRP-1he FHRP-2mei you san luo xuan jie gou ,FHRP-3ze you san luo xuan jie gou ;er zai ruo jian xing rong ye zhong ,san zhe jun ju you san luo xuan jie gou 。gao dian suan yang hua -Smithjiang jie he jia ji hua jie guo biao ming FHRP-1de tang gan jian zhu yao you →6)-Galp-(1→、→6)-Glcp-(1→、Galp-(1→、→3,4)-fucp-(1→、→4)-Arap-(1→he →4)-Glcp-(1→;FHRP-2de tang gan jian zhu yao you →6)-Galp-(1→、→4)-Arap-(1→he →4)-Glcp-(1→;er FHRP-3de tang gan jian zhu yao you →4)-Arap-(1→、→3)-Glcp-(1→、→6)-Glcp-(1→、→3,4)-fucp-(1→、Galp-(1→、→6)-Galp-(1→he →4)-Glcp-(1→。ti wai kang yang hua shi yan biao ming FHRP-1、FHRP-2he FHRP-3jun neng di gao RAW264.7xi bao zhong chao yang hua wu qi hua mei (SOD)he guo yang hua qing mei (CAT)de huo xing ,jiang di bing er quan (MDA)de han liang 。ti wai mian yi shi yan xian shi ,san zhe jun neng xian zhe di gao RAW264.7xi bao de zeng shi he bao yin neng li ,cu jin NO、IL-6he TNF-αde fen bi ,ju FHRP-2he FHRP-3de xiao guo you yu FHRP-1。(3)cai yong Fe2+-H2O2jiang jie fa jiang jie FHRPde dao liang ge de jian hua jiang jie duo tang (DFHRP-1he DFHRP-2)。hua xue zu cheng fen xi biao ming Fe2+-H2O2jiang jie dui jian hua duo tang de duo tang han liang 、dan bai zhi han liang he chan tang zu cheng mei you ming xian ying xiang 。HPGPCfen xi biao ming xiang bi FHRP,DFHRP-1he DFHRP-2de fen zi liang xian zhe jiang di 。SEMjie guo xian shi DFHRP-1he DFHRP-2de biao mian you bu gui ze de kong dong ,ju biao mian jiao FHRPde guang hua ,jiang jie po huai le duo tang yuan you de biao mian xing mao 。gong neng shi yan fen xi jie guo biao ming yu FHRPxiang bi ,DFHRP-1he DFHRP-2de chi shui neng li he ru hua xing you suo jiang di ,chi you neng li you suo di gao 。ti wai kang yang hua shi yan biao ming DFHRP-1biao xian chu jiao jiang de ABTSzi you ji qing chu huo xing ,ji ci shi DFHRP-2he FHRP;er DFHRP-1he DFHRP-2de yang zi you ji xi shou neng li (ORAC)zhi jun gao yu FHRP。ci wai ,ti wai mian yi diao jie shi yan biao ming jiang jie duo tang neng geng xian zhe de di gao RAW 264.7xi bao fen bi NOhe IL-6de han liang ,ju DFHRP-1de xiao guo zui jiang ,ji ci shi DFHRP-2he FHRP。zhe xie jie guo biao ming jian hua jiang jie duo tang de gong neng he sheng wu huo xing yu ji fen zi liang da xiao mi qie xiang guan ,DFHRP-1he DFHRP-2ke kai fa yi chong duo yong tu de cheng fen ying yong yu shi pin 、yi yao he hua zhuang pin ling yu 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自华南理工大学的赵楚华,发表于刊物华南理工大学2019-10-23论文,是一篇关于剑花多糖论文,分离纯化论文,抗氧化论文,免疫调节论文,降解论文,华南理工大学2019-10-23论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自华南理工大学2019-10-23论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。