导读:本文包含了长柄链格孢论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:烟草赤星病,长柄链格孢,ISSR,遗传多样性
长柄链格孢论文文献综述
杨涛,黎妍妍,郑露,黄俊斌,黄凯[1]（2018）在《湖北省烟草赤星病长柄链格孢遗传多样性分析》一文中研究指出为从分子水平揭示烟草长柄链格孢菌群体遗传学特性,本研究采用ISSR分子标记方法对十堰、襄阳、恩施、宜昌4个烟区的34株长柄链格孢菌进行了遗传多样性、遗传结构与分化以及种群间遗传变异分析;其中Nei’s多样性指数为0.1118～0.2061,Shnanon信息指数为0.1972～0.3177,表明长柄链格孢在不同地理种群间具有丰富的遗传多样性;遗传距离分析表明,十堰和襄阳,恩施与宜昌的菌株亲缘关系较近;居群每代迁移数(Nm)为3.2740> 1,表明不同地理的种群间存在基因流动;利用NTSYS软件按UPGMA方法聚类分析,当相似性系数设定为0.79时,可将34个供试菌株分为4个类群,但菌株并没有按地理来源聚为不同的组,表明菌株之间的遗传多样性与其地理来源无明显的相关性。(本文来源于《中国烟草学报》期刊2018年06期）
延慧君,王炫,高颖,刘岱琳[2]（2012）在《长柄链格孢菌对熊果酸的生物转化工艺优化》一文中研究指出目的:以熊果酸为底物,用长柄链格孢菌AS3.2875对熊果酸进行生物转化,并对培养基和转化条件进行优化。方法:以熊果酸的消耗率和28-O-β-D-吡喃葡萄糖熊果酸酯苷的生成率为指标,考察不同起始pH,磷酸盐,不同种类金属离子,孢子浓度,底物加入量,温度,转速,培养时间对熊果酸在长柄链格孢菌培养液中转化的影响,得到长柄链格孢菌对熊果酸的最佳转化条件。结果:优化后的培养条件为初始pH 5.0,0.25 g.L-1MgSO4,1.0 g.L-1K2HPO4,0.083 g.L-1FeSO4,孢子浓度为4%,底物加入量0.3 g.L-1,转速140 r.min-1,28℃,培养3 d。结论:长柄链格孢菌转化熊果酸生成28-O-β-D-吡喃葡萄糖熊果酸酯苷的生成率稳定在5%左右。(本文来源于《中国中药杂志》期刊2012年15期）
韩帅帅[3]（2012）在《长柄链格孢菌（Alternaria longipes）AlSte7的基因克隆及功能研究》一文中研究指出促分裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinase, MAPK)介导的信号转导途径是一类广泛存在于真核生物中信号途径,在许多生命活动中扮演重要角色,几乎涉及所有的生理及病理过程。同样真菌的生长发育等生命过程也受其调控,研究表明MAPK途径在真菌的致病性、形态建成和应激反应等方面起着重要的作用。本研究以长柄链格孢(Alternaria longipes)为研究对象,成功的克隆了A. longipes的一个MAPKK基因-AlSte7,并构建了基因插入突变载体,利用聚乙二醇介导的方法,对A. longipes的原生质体进行转化,进一步通过PCR方法,筛选并验证得到了AlSte7基因插入突变体,通过和野生菌的比对研究,分析了AlSte7基因的功能。利用Ste7同源基因的保守序列设计简并寡核苷酸引物,结合RT-PCR和Tail-PCR技术从A. longipes中克隆得到了MAPKK AlSte7基因；该基因全长cDNA1356bp, DNA1513bp,含有叁个内含子,均符合GT-AC法则；运用生物信息学软件对AlSte7基因进行碱基组成和氨基酸组成特征以及一级,二级结构等方面进行了分析,并与来源于其它真菌的Ste7同源基因进行了同源性比较。利用构建的AlSte7基因插入突变载体pCB1636-AlSte7以及M13F/M13R引物扩增重组质粒的PCR产物对A. longipes原生质体进行了转化,采用PCR方法筛并验证得到了AlSte7基因插入突变体。对AlSte7基因插入突变体和野生菌进行了比较研究,结果显示AlSte7基因插入突变体在PDA上生长的速度明显下降,约下降32～48%左右,且PDB培养后测干重转化子较野生菌的有所降低；AlSte7基因插入突变体也不能产生完全分化的孢子；人工接种未刺伤烟草老龄叶片,AlSte7基因插入突变体基本不能侵染烟草叶片,形成危害症状。而人为刺伤烟草叶片后,AlSte7基因插入突变体能侵染叶片,造成明显的症状,说明AlSte7基因插入突变体丧失了穿透寄主的能力,但并没有丧失寄主中的定殖能力。(本文来源于《山东农业大学》期刊2012-05-01）
罗义勇,刘卫红,柳陈坚,毕薇,张克勤[4]（2011）在《长柄链格孢四个二甲酰亚胺类杀菌剂胁迫差异表达基因的克隆与序列分析》一文中研究指出为了阐明烟草赤星病病原真菌长柄链格孢Alternaria longipes对二甲酰亚胺类杀菌剂(DCFs)抗性的分子机理,前期克隆了16个DCFs胁迫差异表达基因的部分cDNA片段。为了利用基因敲除技术进一步分析这些差异表达基因的功能,本研究选取4个差异表达基因,即AlATP7、AlCIT1、AlGLUT和AlHSP88,应用DNA walking技术对它们两侧的未知序列进行克隆。DNA测序和Blast搜索表明,AlATP7基因开放阅读框为712 bp,含4个外显子和3个内含子,编码169个氨基酸;AlCIT1、AlGLUT和AlHSP88基因未克隆到全长序列,5′末端还有200-300 bp才到达翻译起始密码子ATG;在这些DNA序列中,AlCIT1基因长1 214 bp,含1个内含子,编码386个氨基酸;AlGLUT基因长1 308 bp,含1个内含子,编码417个氨基酸;AlHSP88基因长2 087bp,含2个内含子,编码628个氨基酸。与其他丝状真菌的氨基酸序列同源性比对发现,AlATP7和线粒体ATP合酶D亚基、Al-CIT1和柠檬酸合成酶、AlGLUT和主要易化子超家族(MFS)类型葡萄糖转运子、AlHSP88和热休克蛋白HSP88分别具有很高的同源性。同时,还对4个DCFs胁迫差异表达基因的系统发育进行分析。基于这些蛋白功能的文献报道和前期的研究,推测A.longipes存在着一种新的DCFs抗性机制:A.longipes利用MFS类型葡萄糖转运子将DCFs排除到细胞外解毒,线粒体ATP合酶和柠檬酸合成酶参与能量供给,而热休克蛋白AlHSP88可能在该机制中促进一些重要蛋白的正确折迭和修复过程中发挥重要作用。(本文来源于《生物技术通报》期刊2011年05期）
罗义勇,祝明亮,路则宝,毕薇,张克勤[5]（2011）在《长柄链格孢AlCyP1基因的克隆及其在渗透胁迫适应中的作用》一文中研究指出为了阐明烟草赤星病(tobacco brown-spot disease)病原真菌长柄链格孢(Alternaria longipes)对二甲酰亚胺类杀菌剂抗性的分子机制,以不同抗性水平的长柄链格孢菌株为实验材料,通过基因钓鱼(GeneFishing)技术进行基因差异表达分析;并利用基因敲除技术对已克隆到的AlCyP1基因进行功能分析.结果表明:一个亲环蛋白基因AlCyP1的表达量在不同抗性水平的长柄链格孢中存在明显差异;应用DNA步移(DNA walking)方法克隆得到AlCyP1基因的DNA序列,其开放阅读框中存在2个翻译起始密码子,可以编码产生2种不同长度的多肽,长、短多肽产物分别具有222和188个氨基酸,其中短多肽起始于长多肽的第35个密码子;另外,氨基酸序列同源性分析发现,AlCyP1和其他真菌的亲环蛋白具有很高的同源性,达50.0%~61.3%;利用基因敲除技术对AlCyP1基因进行功能分析发现,该基因通过表达水平的改变参与了长柄链格孢对渗透胁迫的适应调节过程.(本文来源于《浙江大学学报(农业与生命科学版)》期刊2011年02期）
隋玉辉,刘岱琳,邱峰,陈虹[6]（2008）在《长柄链格孢对百两金皂苷的生物转化》一文中研究指出朱砂根为紫金牛科紫金牛属植物朱砂根Ardisia crenata Sims的根。性味苦辛、凉,具有清热解毒、散瘀止痛的作用。用于治疗心胃气痛、风湿骨痛、跌打损伤等症[1]。现代药理研究发现朱砂根中的叁萜皂苷类化合物具有较强的抗癌活性,百两金皂苷A和B是从(本文来源于《中草药》期刊2008年07期）
徐后娟[7]（2008）在《长柄链格孢（Alternaria longipes）蛋白激酶基因克隆及功能研究》一文中研究指出信号转导是外界同生物体或生物体细胞间的信息传递的重要手段。大量研究表明蛋白的可逆磷酸化是细胞信号传递系统的重要组成部分,也是生物体内存在的一种最为普遍的调节方式,在许多生命活动中扮演重要角色,几乎涉及所有的生理及病理过程。蛋白质可逆磷酸化是由蛋白激酶(protein kinase,PK)和蛋白磷酸酶(protein phosphates,PP)催化完成。蛋白激酶作为重要的信号分子逐渐被广大学者所认识和接受。本研究以长柄链格孢(Alternaria longipes)为研究对象,研究了A. longipes原生质体制备和再生的最佳方法和条件,采用10mg/mL的溶壁酶,选择菌龄为24h的菌体,酶解温度为30℃,酶解时间为3h,制备选择0.7M的NaCl,再生选择0.7M的蔗糖为稳渗剂,可以得到高浓度且再生能力强的原生质体。利用限制性内切酶介导的整合技术成功的转化了A. longipes原生质体,并对转化体系进行了优化,包括限制性内切酶的种类和使用量、原生质体的浓度、质粒的形态和用量、PEG的浓度。本实验中用2μg HindⅢ线性化的质粒pUCATPH,转化过程中加入20U限制性内切酶HindⅢ,原生质体浓度为107个/mL,60%的PEG3350,共获得600多个转化子,转接5代能稳定遗传。随机挑选转化子进行PCR验证,结果证明潮霉素基因已经整合到受体菌的基因组中。研究并优化了农杆菌介导的A. longipes分生孢子转化,包括AS的使用状态和使用浓度、共培养时间、受体菌孢子浓度、农杆菌浓度。在诱导过程和共培养过程中加200μmol/L AS处理,共培养48h,农杆菌OD600为0.25,受体孢子浓度为106个/mL时,共得到了85个转化子,转化效率明显低于REMI。利用蛋白激酶同源保守序列设计兼并寡核苷酸引物,结合RT-PCR和RACE技术从A. longipes中克隆得到了一种蛋白激酶,全长cDNA1905bp,包含有一个1476bp的开放阅读框,编码491个氨基酸残基。该基因的cDNA和DNA序列已经在GenBank中注册,登录号分别为EU381116和EU3811167。运用生物信息学软件对A. longipes蛋白激酶编码基因进行碱基组成和氨基酸组成特征、功能位点、跨膜结构、保守区结构以及一级,二级结构等方面进行了分析,并与其他来源的蛋白激酶编码基因进行了同源比较。aapk1基因的催化域具有蛋白激酶催化域一般结构的特征。亚区Ⅰ的富含甘氨酸的区域(GTGSFGRV),亚区Ⅱ的K72和亚区Ⅲ的E91的保守碱基,亚区VIB的YRDLKPEN,亚区Ⅶ的DFG,亚区Ⅷ的GTPDYLAPE,亚区Ⅸ的D220,亚区XI的R280都是蛋白激酶中高度保守的碱基,并且在催化蛋白质的磷酸化过程中扮演着重要的角色。采用同源重组利用双连接PCR(double-joint PCR)构建了aapk1基因的打靶载体,分别取基因上游652bp和下游620bp片段作为同源重组的两臂。对A. longipes原生质体进行了转化,采用PCR方法筛选到aapk1基因缺失突变体,并利用southern杂交和RT-PCR的方法对筛选的转化子△aapk1进行了验证,结果表明我们筛选的转化子就是aapk1基因缺失突变体。对△aapk1转化子和野生菌进行了比较,结果显示△aapk1转化子的产孢量和孢子的形状、大小、颜色都没有明显的差异,但△aapk1转化子在PDA上生长速度明显慢,PDB培养后测干重△aapk1转化子也低于野生菌,我们认为aapk1基因对于A. longipes的菌丝生长起着调控作用。对致病性的研究结果显示,△aapk1转化子孢子悬浮液接种NC89烟草的离体叶片,病斑出现晚,但病斑大小没有明显的差异。(本文来源于《山东农业大学》期刊2008-05-01）
陈伟群,张天宇[8]（1997）在《长柄链格孢(Alternaria longipes)和链格孢(A.alternata)的RAPD分析》一文中研究指出对来自中国及亚、非、欧叁大洲5个国家的10个烟草赤星病菌（Alternarialongies）及5个链格孢菌（A．alternata）标准菌株用6种随机引物（OPR01、OPR12、OPR13、OPR14、OPR15、OPK19）进行了基因组DNA随机扩增多态性分析，对RAPD带型所进行的聚类分析结果表明，所有参试菌株之间相似性很高（90．3％～94．7％），其系统聚类关系与寄主和地理来源没有相关性，证明A．longipes与A．alternata亲缘关系很近，建议将A．alternata确定为烟草赤星病菌的学名。(本文来源于《中国烟草学报》期刊1997年01期）
长柄链格孢论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:以熊果酸为底物,用长柄链格孢菌AS3.2875对熊果酸进行生物转化,并对培养基和转化条件进行优化。方法:以熊果酸的消耗率和28-O-β-D-吡喃葡萄糖熊果酸酯苷的生成率为指标,考察不同起始pH,磷酸盐,不同种类金属离子,孢子浓度,底物加入量,温度,转速,培养时间对熊果酸在长柄链格孢菌培养液中转化的影响,得到长柄链格孢菌对熊果酸的最佳转化条件。结果:优化后的培养条件为初始pH 5.0,0.25 g.L-1MgSO4,1.0 g.L-1K2HPO4,0.083 g.L-1FeSO4,孢子浓度为4%,底物加入量0.3 g.L-1,转速140 r.min-1,28℃,培养3 d。结论:长柄链格孢菌转化熊果酸生成28-O-β-D-吡喃葡萄糖熊果酸酯苷的生成率稳定在5%左右。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
长柄链格孢论文参考文献
[1].杨涛,黎妍妍,郑露,黄俊斌,黄凯.湖北省烟草赤星病长柄链格孢遗传多样性分析[J].中国烟草学报.2018
[2].延慧君,王炫,高颖,刘岱琳.长柄链格孢菌对熊果酸的生物转化工艺优化[J].中国中药杂志.2012
[3].韩帅帅.长柄链格孢菌（Alternarialongipes）AlSte7的基因克隆及功能研究[D].山东农业大学.2012
[4].罗义勇,刘卫红,柳陈坚,毕薇,张克勤.长柄链格孢四个二甲酰亚胺类杀菌剂胁迫差异表达基因的克隆与序列分析[J].生物技术通报.2011
[5].罗义勇,祝明亮,路则宝,毕薇,张克勤.长柄链格孢AlCyP1基因的克隆及其在渗透胁迫适应中的作用[J].浙江大学学报(农业与生命科学版).2011
[6].隋玉辉,刘岱琳,邱峰,陈虹.长柄链格孢对百两金皂苷的生物转化[J].中草药.2008
[7].徐后娟.长柄链格孢（Alternarialongipes）蛋白激酶基因克隆及功能研究[D].山东农业大学.2008
[8].陈伟群,张天宇.长柄链格孢(Alternarialongipes)和链格孢(A.alternata)的RAPD分析[J].中国烟草学报.1997