导读:本文包含了椎间盘细胞培养论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:L-氨基胍,退变椎间盘细胞,一氧化氮合酶,炎性因子
椎间盘细胞培养论文文献综述
符俏,虞乐华[1]（2014）在《L-氨基胍对体外培养退变椎间盘细胞中炎性因子水平的影响》一文中研究指出目的:研究一氧化氮合酶(NOS)抑制剂L-氨基胍(L-AG)对体外培养的退变椎间盘细胞中炎性因子水平的影响,并探讨其作用机制。方法:采用体外培养的退变椎间盘细胞为研究对象,根据L-AG浓度分为0(对照组)、0.5%、1.0%和1.5%组,作用24h后,分光光度法检测NOS活性和一氧化氮(NO)水平,免疫印迹法检测炎性因子白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素6(IL-6)以及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达水平。结果:0.5%、1.0%、1.5%L-AG组退变椎间盘细胞中NOS活性分别为6.1、5.5和4.2U·mL-1,NO水平分别为128.3、116.5和97.7μmol·L-1,与对照组比较均显着降低(P<0.01);与对照组比较,不同浓度L-AG组退变椎间盘细胞中IL-1、IL-6及TNF-α表达水平均显著降低(P<0.01)。结论:NOS抑制剂L-AG可显着降低退变椎间盘细胞炎性反应,其作用机制可能与NOS抑制有关。(本文来源于《吉林大学学报(医学版)》期刊2014年01期）
吴玉杰,刘兴振,傅智轶,金文杰[2]（2011）在《退变腰椎间盘细胞经体外转基因培养生物学活性的实验研究》一文中研究指出目的构建转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β3的真核表达载体pEGFP-TGF-β3转染椎间盘髓核细胞,研究转基因TGF-β3对退变髓核细胞生物学特性的影响。方法通过手术方法制作椎间盘突变模型,从而获取原代退变椎间盘髓核细胞,通过脂质体将真核载体pEGFP-TGF-β3导入髓核细胞,然后对细胞的形态和增殖活性(MTT法)进行观察,应用Westen Blot检测TGF-β3在髓核细胞的表达含量,应用免疫细胞化学方法检测转染后髓核细胞的Ⅱ型胶原的表达。结果髓核细胞转染后,细胞活性增强,TGF-β3表达增加,并随着时间的延长而增加。Ⅱ型胶原表达增加。结论 TGF-β3转染退变髓核细胞可起到维持髓核细胞表型,并在细胞传代后仍发挥调节作用。TGF-β3确实具有促进髓核细胞增殖和Ⅱ型胶原合成的能力,从而有可能延缓甚至逆转椎间盘退变。(本文来源于《中国骨与关节外科》期刊2011年05期）
胡明,马远征,黄凤山,李大伟,冯孟明[3]（2011）在《人胚椎间盘细胞体外培养模型的建立和鉴定》一文中研究指出目的通过建立人胚椎间盘细胞体外培养模型,进一步研究细胞因素在椎间盘退变中的作用机制。方法取4例人体胚胎腰椎间盘,在改良Eagle培养基中建立椎间盘细胞模型,细胞染色、逆转录聚合酶链式反应、免疫荧光检测细胞Ⅰ、Ⅱ型胶原的表达进行鉴定。结果椎间盘细胞可在体外培养并进行传代,细胞中Ⅰ、Ⅱ型胶原具有较高的表达,细胞具有较高的分化状态。结论源自胚胎的髓核细胞于体外环境中可以较长时间维持其表型不变,且表型与正常髓核细胞很接近。(本文来源于《实用骨科杂志》期刊2011年02期）
张泓毅,马迅[4]（2009）在《重组大鼠血小板衍生生长因子(rR-PDGF-AA)对体外培养大鼠椎间盘细胞促增殖的影响作用》一文中研究指出目的了解重组大鼠血小板衍生生长因子(rR-PDGF-AA)在大鼠椎间盘细胞培养过程中的促增殖作用。方法对大鼠椎间盘细胞单层培养并于传代后建立对照组与实验组,定时于倒置显微镜下观察细胞形态、增殖的变化,行HE、甲苯胺蓝及免疫组化染色;对传代细胞于固定时间测定细胞吸光度值(OD),并描绘细胞生长曲线;经流式细胞仪检测处于S(DNA合成)期的细胞百分比值。结果①在倒置相差显微镜下连续观察,7d后原代细胞逐渐贴壁,多为梭形,有伪足伸出;经胰酶消化传代后,细胞贴壁生长速度加快约需4～5d,而加入血小板衍生生长因子组椎间盘细胞汇合时间缩短,生长加速。HE染色可见细胞形态及胞内变化,甲苯胺蓝及免疫组化染色分别可见细胞外蛋白多糖及Ⅱ型胶原合成增加;②MTT法测定OD值经过方差分析检验可知,F值为20.276,P=0.000,说明五组之间比较差异具有显着性。五组之间两两比较得出对照组、1μg/L组和10μg/L组之间比较无差异,1000μg/L组和100μg/L组之间比较无差异,对照组、1μg/L组、10μg/L组分别与1000μg/L组、100μg/L组比较差异具有统计学意义;③经流式细胞仪检测可见血小板衍生生长因子在有效浓度内与处于S期的细胞百分比呈正相关。结论血小板衍生生长因子对体外培养的椎间盘细胞的分裂增殖、基质中胶原及蛋白多糖的合成具有促进作用;并且在有效剂量范围内呈现正相关。(本文来源于《中国现代药物应用》期刊2009年16期）
张泓毅,马迅[5]（2009）在《椎间盘细胞人工培养的实验研究》一文中研究指出目的观察椎间盘组织细胞的生物学行为及环境影响,了解重组大鼠血小板衍生生长因子(rR-PDGF-AA)在细胞培养过程中的作用。方法对大鼠椎间盘细胞单层培养并在原代细胞传代后建立对照组与实验组:即,将未施加细胞因子干预的培养板设为对照组,将加有不同浓度血小板衍生生长因子(浓度梯度分别为1μg/L,10μg/L,100μg/L,1000μg/L)的培养板设为实验组。定时于倒置显微镜下观察细胞形态、增殖的变化,行HE、甲苯胺蓝及免疫组化染色法。并收集细胞周围基质,用氯胺T法和Alcian法分别检测细胞培养液中羟脯氨酸及硫酸软骨素的含量。结果①在倒置相差显微镜下连续观察,7d后原代细胞逐渐贴壁,多为梭形,有伪足伸出;经胰酶消化传代后,细胞贴壁生长速度加快约需4～5d,而加入血小板衍生生长因子组椎间盘细胞汇合时间缩短,生长加速。HE染色可见细胞形态及胞内变化,甲苯胺蓝及免疫组化可见细胞外蛋白多糖及Ⅱ型胶原合成增加;②随着血小板衍生生长因子浓度的增加(10,100,1000μg/L),硫酸软骨素和羟脯氨酸含量明显增加[硫酸软骨素:(33.34+4.32),(48.67+6.71),(69.79+6.62)μg/L;羟脯氨酸:(5.79+0.91),(8.27+1.23),(10.34+1.51)μg/L,P<0.05],血小板衍生生长因子的浓度与两者呈正相关(r=0.875,P<0.05;r=0.912,P<0.05)。结论血小板衍生生长因子对体外培养的椎间盘细胞的分裂增殖、基质中胶原及蛋白多糖的合成具有促进作用。(本文来源于《中国现代药物应用》期刊2009年15期）
胡龙[6]（2009）在《血管内皮细胞生长因子对体外培养大鼠凋亡椎间盘细胞的影响》一文中研究指出目的观察血管内皮细胞生长因子(VEGF)对体外培养大鼠椎间盘细胞及基质代谢的影响。方法建立大鼠椎间盘细胞培养体系,体外单层培养大鼠椎间盘细胞,取生长良好的第2代细胞实验,使用抗-Fas抗体诱导凋亡,加入不同浓度(10,100,1000μg/L)的碱性成纤维生长因子影响椎间盘细胞的凋亡及代谢过程,利用流式细胞仪-PI标记法检测椎间盘细胞凋亡情况;利用氯胺-T法和DMB比色法分别检测细胞培养液中羟脯氨酸及蛋白多糖的含量。结果(1)不同浓度的血管内皮细胞生长因子(10,100,l 000μg/L)椎间盘细胞凋亡率(87.62±11.06)%、(53.30±9.23)%、(16.75±4.21)%与正常组比较均有显着性差异(P<0.01)。(2)随着血管内皮细胞生长因子浓度的增加(10,100,1 000μg/L),羟脯氨酸含量、蛋白多糖含量明显增加,[羟脯氨酸含量(6.71±0.33)、(9.12±0.41)、(11.58±0.12)μg/L,P<0.01;蛋白多糖含量(23.21±2.87)、(32.45±5.23)、(37.18±3.22)μg/L,P<0.01]。血管内皮细胞生长因子的浓度与两者呈正相关(ra=0.972,P<0.01;rb=0.907,P<0.01)。结论血管内皮细胞生长因子可以抑制体外培养的椎间盘细胞凋亡,促进椎间盘细胞基质中胶原及蛋白多糖的合成。(本文来源于《卫生职业教育》期刊2009年13期）
王栋,马迅[7]（2009）在《Wistar大鼠颈椎间盘细胞培养方法及形态学观察》一文中研究指出目的通过大鼠颈椎间盘细胞培养方法对比观察细胞的演变,选择一种最适培养方法,并为组织工程、基因治疗等提供意见和方法。方法将24只1、3、5、7月龄的Wistar大鼠依次分为A、B、C、D组,每组6只。取Wistar大鼠C2～C6椎间盘,用单层培养和微载体立体培养两种培养方法检测Ⅰ型、Ⅱ型胶原(CⅠ,CⅡ)含量。结果A、C、D组微载体立体培养CⅠ和CⅡ含量明显高于单层培养。结论椎间盘细胞的微载体叁维培养比单层培养可获得更高的胶原含量,有助于培养技术的进步。(本文来源于《中国现代医生》期刊2009年14期）
徐蔚蔚,邵增务,熊蠡茗,杨述华,俞旭东[8]（2009）在《烟酰胺对体外培养兔椎间盘细胞凋亡及能量代谢相关基因表达的影响》一文中研究指出目的观察烟酰胺(Nia)对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的体外培养的退变兔椎间盘组织内细胞凋亡及能量代谢相关基因表达的影响。方法构建兔椎间盘组织凝胶培养模型,分为正常对照组(不加入药物),烟酰胺组(加入0.5 mg/ml烟酰胺),退变组(加入10 ng/ml IL-1β)和治疗组(加入10 ng/ml IL-1β及0.5 mg/ml烟酰胺)。培养2周后对各组标本分别行TUNEL染色,Fas、Caspase 3、Bcl-2、HIF-1α、GLUT-1及VEGF免疫组化染色。结果TUNEL染色示治疗组阳性细胞染色率较退变组有所下降。Fas、Bcl-2染色示治疗组阳性细胞率均与退变组接近(均P>0.05)。Caspase 3染色示治疗组阳性细胞率较退变组明显降低(P<0.05)。HIF-1α、VEGF染色示治疗组阳性细胞率较退变组均明显降低(均P<0.01)。GLUT-1染色示治疗组阳性细胞率较退变组轻微下降(P>0.05)。结论烟酰胺可以抑制IL-1β诱导的椎间盘细胞凋亡,改善IL-1β导致的椎间盘能量代谢障碍。(本文来源于《华中科技大学学报(医学版)》期刊2009年02期）
刘清和,周君琳,陈亚平,孙鹏,海涌[9]（2009）在《低强度脉冲超声波对体外培养人退变腰椎间盘细胞的作用》一文中研究指出目的探讨低强度脉冲超声波(LIPUS)对体外培养人退变腰椎间盘细胞的作用。方法体外培养人退变髓核细胞,台盼蓝染色法测定活细胞率。将每份髓核细胞样本分为对照组和LIPUS组。应用LIPUS每天作用20 min,作用后第0、2、4、8天,采用免疫组化法测定Ⅱ型胶原水平,采用酶联免疫吸附法检测聚集蛋白聚糖(aggrecan)水平。结果体外培养人退变髓核细胞的活细胞率为9O%～95%。LIPUS干预后第2、4、8天,LIPUS组Ⅱ型胶原的合成和aggrecan含量均较相应时间点对照组显着增加(P<0.05)。结论LIPUS能够通过促进人退变髓核细胞合成Ⅱ型胶原和蛋白多糖防治椎间盘退变。(本文来源于《中国骨与关节损伤杂志》期刊2009年04期）
张泓毅[10]（2009）在《重组大鼠血小板衍生生长因子（rR-PDGF-AA）对体外培养大鼠椎间盘细胞促增殖的影响作用》一文中研究指出背景:自人类行医学史记载,颈肩痛、腰腿痛就是其所涉及的内容,而椎间盘退变又是颈腰痛最常见的原因。1934年,Mixter和Barr [1 ]首先通过手术证实和治愈腰椎间盘突出压迫神经根所致的坐骨神经痛,从而开创了所谓的“椎间盘时代(Dynasty of the disc)”。髓核摘除这一经典术式70余年来治愈了无数椎间盘病变的患者,然而这70余年来,全世界每年有数千篇相关的文献发表,每次相关骨科会议,椎间盘病变仍是最主要的议题之一。这一事实也说明,目前椎间盘退变性疾病的治疗仍存在许多问题,需要继续深入地研究和探索。近几年来,组织工程学的研究也扩展到脊柱外科的领域,国外学者开展了组织工程椎间盘相关的基础研究工作。虽然发表的研究报告数量尚少,然而却反应了本研究可喜的前景。目的:研究与椎间盘变性或再生相关的环境因素以及椎间盘组织和细胞的生物学行为,观察血小板衍生生长因子对体外培养椎间盘细胞分裂增殖及基质合成的影响,从细胞水平、分子生物学及基因水平对变性椎间盘进行基因治疗和组织工程学研究。方法:1、分离并消化大鼠椎间盘组织得到单个细胞并完成原代细胞接种培养。2、在原代细胞融合传代后建立对照组与实验组(施加1μg/L,10μg/L,100μg/L,1000μg/L不同浓度血小板衍生生长因子刺激生长)。3、采用HE、甲苯胺蓝染色法定时于倒置显微镜下观察细胞形态、增殖的变化,免疫细胞化学染色法检测Ⅱ型胶原的表达情况。4、采用MTT(噻唑蓝比色)法测定椎间盘细胞的吸光度值并绘制细胞生长曲线。5、将传代细胞消化为单个,经流式细胞仪测定处于S期(DNA合成期)细胞含量。6、经统计软件分析得出结论。结果:1、在倒置相差显微镜下连续观察,10天后95%以上的细胞贴壁,原代细胞多为梭形,有伪足伸出;经胰酶消化传代后,细胞贴壁生长速度加快,而加入血小板衍生生长因子组椎间盘细胞汇合时间缩短,生长加速。2、HE染色细胞多为梭形,有伪足伸出,细胞核为圆形或椭圆形,围绕细胞核,胞浆内可见较多空泡;甲苯胺蓝染色细胞核为紫色,胞浆染为深蓝色。Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色呈现阳性结果。3、MTT法测定椎间盘细胞吸光度(OD)值经过方差分析检验可知,F值为20.276,P=0.000,说明五组之间比较差异具有显着性。五组之间两两比较得出,对照组、1μg/L组和10μg/L组之间比较无差异,1000μg/L组和100μg/L组之间比较无差异,对照组、1μg/L组、10μg/L组分别与1000μg/L组、100μg/L组比较差异具有统计学意义,统计学差异显着(P<0.05)。4、随着生长因子浓度的增加,经流式细胞仪检测处于S期的细胞数量呈现正相关。rR-PDGF-AA能提高细胞的增殖活性,并且在有效浓度范围内呈剂量效应关系。结论:本实验为椎间盘细胞的培养提供了简单、有效的方法,血小板衍生生长因子对体外培养的椎间盘细胞的分裂增殖、基质中胶原及蛋白多糖的合成具有促进作用,可明显提高细胞线粒体活性、增加S期细胞百分比,其效应在一定范围内与剂量和时间呈正相关。(本文来源于《山西医科大学》期刊2009-03-15）
椎间盘细胞培养论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的构建转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β3的真核表达载体pEGFP-TGF-β3转染椎间盘髓核细胞,研究转基因TGF-β3对退变髓核细胞生物学特性的影响。方法通过手术方法制作椎间盘突变模型,从而获取原代退变椎间盘髓核细胞,通过脂质体将真核载体pEGFP-TGF-β3导入髓核细胞,然后对细胞的形态和增殖活性(MTT法)进行观察,应用Westen Blot检测TGF-β3在髓核细胞的表达含量,应用免疫细胞化学方法检测转染后髓核细胞的Ⅱ型胶原的表达。结果髓核细胞转染后,细胞活性增强,TGF-β3表达增加,并随着时间的延长而增加。Ⅱ型胶原表达增加。结论 TGF-β3转染退变髓核细胞可起到维持髓核细胞表型,并在细胞传代后仍发挥调节作用。TGF-β3确实具有促进髓核细胞增殖和Ⅱ型胶原合成的能力,从而有可能延缓甚至逆转椎间盘退变。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
椎间盘细胞培养论文参考文献
[1].符俏,虞乐华.L-氨基胍对体外培养退变椎间盘细胞中炎性因子水平的影响[J].吉林大学学报(医学版).2014
[2].吴玉杰,刘兴振,傅智轶,金文杰.退变腰椎间盘细胞经体外转基因培养生物学活性的实验研究[J].中国骨与关节外科.2011
[3].胡明,马远征,黄凤山,李大伟,冯孟明.人胚椎间盘细胞体外培养模型的建立和鉴定[J].实用骨科杂志.2011
[4].张泓毅,马迅.重组大鼠血小板衍生生长因子(rR-PDGF-AA)对体外培养大鼠椎间盘细胞促增殖的影响作用[J].中国现代药物应用.2009
[5].张泓毅,马迅.椎间盘细胞人工培养的实验研究[J].中国现代药物应用.2009
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[8].徐蔚蔚,邵增务,熊蠡茗,杨述华,俞旭东.烟酰胺对体外培养兔椎间盘细胞凋亡及能量代谢相关基因表达的影响[J].华中科技大学学报(医学版).2009
[9].刘清和,周君琳,陈亚平,孙鹏,海涌.低强度脉冲超声波对体外培养人退变腰椎间盘细胞的作用[J].中国骨与关节损伤杂志.2009
[10].张泓毅.重组大鼠血小板衍生生长因子（rR-PDGF-AA）对体外培养大鼠椎间盘细胞促增殖的影响作用[D].山西医科大学.2009