导读:本文包含了旋转酶亚基论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:结核分枝杆菌,旋转酶B亚基,突变体,EMSA
旋转酶亚基论文文献综述
宋辉[1]（2010）在《结核分枝杆菌旋转酶B亚基与DNA相互作用研究》一文中研究指出DNA拓扑异构酶是生物体内的基础酶类,参与到所有涉及DNA拓扑结构变化的生命活动中,如DNA的复制,转录,重组。DNA旋转酶是类型Ⅱ拓扑异构酶的一种,也是唯一能够引入负超螺旋的拓扑异构酶。结核分枝杆菌的旋转酶是该菌体内唯一的类型Ⅱ拓扑异构酶,是抗生素的重要作用靶标。结核分枝杆菌旋转酶B亚基有四个主要的结构域：ATPase域、Transducer域、Toprim域和Tail域。本研究通过对结核分枝杆菌旋转酶B亚基的研究,构建了gyrB基因的缺失突变体gyrB463-714,gyrB1-631,gyrB1-482,gyrB1-270,gyrB271-480,gyrB485-714, gyrB278-714,gyrB1-542,gyrB1-519,gyrB1-500,将其连入表达载体pET28a,转入E.coli BL21中进行表达。表达并纯化野生型GyrB蛋白,缺失突变体GyrB1-462, GyrB463-714, GyrB1-631, GyrB1-482, GyrB1-270, GyrB271-480, GyrB485-714, GyrB278-714, GyrB1-542, GyrB1-519, GyrB1-500蛋白,将所得到的蛋白分别进行与单双链DNA结合的EMSA试验。试验结果发现,野生型GyrB蛋白能够结合单双链DNA；去除ATPase域后,GyrB278-714可以结合单双链DNA；去除ATPase和Transducer后的GyrB463-714可以结合单双链DNA；去除Toprim结构域和Tail结构域后的GyrB1-462,GyrB1-482可以结合单双链DNA；单独去除Tail结构域后的GyrB1-631可以结合单双链DNA；单独去除Toprim的GyrBΔtoprim能够结合单双链DNA。而单独克隆B亚基单个结构域的突变体亚蛋白不能得到表达,或表达后形成包涵体不能纯化。试验结果证实了结核分枝杆菌旋转酶B亚基是一个能够结合单双链DNA的蛋白；对旋转酶B亚基四个主要结构域分别进行缺失后,发现突变体蛋白保留了单双链DNA结合活性,表明这四个主要的结构域都具有不同程度的DNA结合活性,部分结构域的缺失对于DNA结合活性没有较大影响。(本文来源于《华中农业大学》期刊2010-06-01）
浮广森,吴进军,朱德裕,胡永林,毕利军[2]（2008）在《DNA旋转酶B亚基C端结构域的晶体结构——特征结构与DNA相互作用的结构机理》一文中研究指出在DNA的复制,重组,转录等过程中,DNA会由于复制叉或RNA聚合酶的前移而产生张如果没有一种调节机制,张力迅速地积聚将会使DNA产生数量极其巨大的超螺旋,这种结果对细的生存将是致命的。细胞内解决这些问题依靠的就是DNA拓扑异构酶。作为TypeⅡ拓扑异构酶家族中的一种,原核生物DNA旋转酶是唯一能够在消耗ATP的情况下不断地向双链DNA中引入超螺旋的一类酶,是原核生物细胞体系中不可缺少的,极重要的蛋白分子功能聚集体。DNA旋酶以异源四聚体(GyrA)_2(GyrB)_2的寡聚组装形式在体内发挥其生物学功能。它能够催化一条双DNA(G-segment)的断裂,使另一条双链DNA(T-segment)穿过这个断裂口,然后重新连接G-segmer从而完成了一轮改变DNA的超螺旋数的反应。经过了叁十多年的研究,DNA旋转酶的四个功单位中的叁个(GyrB-NTD,GyrA-NTD,GyrA-CTD)的晶体结构已分别得到了解析,但构成酶分(本文来源于《中国晶体学会第四届全国会员代表大会暨学术会议学术论文摘要集》期刊2008-07-27）
旋转酶亚基论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
在DNA的复制,重组,转录等过程中,DNA会由于复制叉或RNA聚合酶的前移而产生张如果没有一种调节机制,张力迅速地积聚将会使DNA产生数量极其巨大的超螺旋,这种结果对细的生存将是致命的。细胞内解决这些问题依靠的就是DNA拓扑异构酶。作为TypeⅡ拓扑异构酶家族中的一种,原核生物DNA旋转酶是唯一能够在消耗ATP的情况下不断地向双链DNA中引入超螺旋的一类酶,是原核生物细胞体系中不可缺少的,极重要的蛋白分子功能聚集体。DNA旋酶以异源四聚体(GyrA)_2(GyrB)_2的寡聚组装形式在体内发挥其生物学功能。它能够催化一条双DNA(G-segment)的断裂,使另一条双链DNA(T-segment)穿过这个断裂口,然后重新连接G-segmer从而完成了一轮改变DNA的超螺旋数的反应。经过了叁十多年的研究,DNA旋转酶的四个功单位中的叁个(GyrB-NTD,GyrA-NTD,GyrA-CTD)的晶体结构已分别得到了解析,但构成酶分
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
旋转酶亚基论文参考文献
[1].宋辉.结核分枝杆菌旋转酶B亚基与DNA相互作用研究[D].华中农业大学.2010
[2].浮广森,吴进军,朱德裕,胡永林,毕利军.DNA旋转酶B亚基C端结构域的晶体结构——特征结构与DNA相互作用的结构机理[C].中国晶体学会第四届全国会员代表大会暨学术会议学术论文摘要集.2008