导读:本文包含了阿特拉津氯水解酶基因论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:杜氏盐藻,雨生红球藻,atzA,筛选标记
阿特拉津氯水解酶基因论文文献综述
王绘砖,陈喜文,陈德富[1]（2008）在《阿特拉津氯水解酶基因在绿藻遗传筛选中的初步研究》一文中研究指出杜氏盐藻(Dunaliella salina)和雨生红球藻(Haematococcus pluvnis)作为重要的生物反应器,日益受到越来越广泛的关注,但遗传筛选成为其研究的瓶茎——除高浓度氯霉素和潮霉素等价格昂贵的抗生素外,多数抗生素对它们不敏感,因此寻找合适筛选标记基因成为建立其遗传转化体系的关键。阿特拉津是一种常用的叁嗪类除草剂,实验显示,0.2 mg/L 阿特拉津即能有效地抑制杜氏盐藻的生长,0.1 mg/L 阿特拉津则完全抑制雨生红球藻的生长。因此,阿特拉津作为一种经济方便的筛选标记可应用于上述两种单细胞绿藻的遗传转化系统中。由于阿特拉津氯水解酶能催化阿特拉津水解脱氯反应,使有毒的阿特拉津转变为无毒的羟基阿特拉津,因此本研究将来源于假单胞菌 ADP 和节杆菌 AD1的阿特拉津氯水解酶基因 (atzA)分别插入到植物双元表达载体 pBin438中,再通过电激转化法分别导入对数生长期的杜氏盐藻和雨生红球藻细胞中,试图建立杜氏盐藻和雨生红球藻转基因筛选体系。实验发现,电激转化电压高于0.4 kV 时可导致杜氏盐藻藻体破裂死亡,高于0.6 kV 时可导致雨生红球藻藻体破裂死亡。转 atzA 藻体培养在含阿特拉津的培养基中,20天后仍生长良好。分别提取其基因组 DNA 和总 RNA,进行 PCR 及 RT-PCR 检测,均能得到约1.4 kb 特异条带,表明 atzA 已整合到藻类基因组中,并在转录水平上得到了表达。为更精确检测转 atzA 藻体生长状况,避免死亡藻体对检测结果的影响,本研究测定了不同浓度阿特拉津培养基中生长的藻体叶绿素含量。结果显示,0.2、0.4、1.0、2.0和4.0 mg/L 阿特拉津培养基中生长的3 mL(约 0.02g)转基因杜氏盐藻,叶绿素含量分别为33.86±3.0、80.43±4.0、38.10±2.5、12.70 ±2.5和13.90±2.5 mg/g:0.1、0.2、0.5、1.0和2.0 mg/L 阿特拉津培养基中生长的3 Ml (约0.02g)转基因雨生红球藻,叶绿素含量分别为93.35±3.0、94.85±5.0、85.95±2.5、 53.16±2.5和29.44±2.5 mg/g。未转 atzA 的野生型藻体检测不到叶绿素含量。实验数据还显示,阿特拉津浓度低于临界浓度5倍范围内,叶绿素含量无明显差异;阿特拉津浓度增至临界浓度10倍以上,叶绿素含量急剧下降,表明低浓度阿特拉津即可实现对转基因绿藻的稳定筛选。(本文来源于《中国遗传学会第八次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编（2004-2008）》期刊2008-10-01）
王绘砖,陈喜文,王永芹,蔡宝立,陈德富[2]（2008）在《转阿特拉津氯水解酶基因烟草的获得及其生物降解能力分析》一文中研究指出阿特拉津氯水解酶(AtzA)能有效催化有毒的阿特拉津脱氯生成无毒的羟基阿特拉津。本文将来自假单胞菌ADP的atzA-ADP和来自节杆菌AD1的atzA-NK分别插入Ti载体pBin438,构建了atzA植物表达载体pBin438-atzA-ADP和pBin438-atzA-NK。并通过农杆菌介导法将其转入烟草,经基因组PCR筛选及RT-PCR分析,获得16株转atzA-ADP烟草株系和11株转atzA-NK烟草株系。在含150mgL-1阿特拉津的1/2MS培养基上生长50d时,株系401的降解能力最高,达79.26%,远高于野生型烟草的0.47%,说明转基因烟草可用于建立阿特拉津残留环境的植物修复系统。(本文来源于《作物学报》期刊2008年05期）
斯华敏,朱丽,牟仁祥,刘文真,胡国成[3]（2008）在《表达细菌阿特拉津氯水解酶基因的转基因烟草对土壤中阿特拉津的生物降解》一文中研究指出植物修复(Phytoremediation)技术是消除或减少土壤环境中有机污染物的重要手段,本研究采用植物转基因技术对土壤中除草剂阿特拉津的降解进行了探索。通过农杆菌介导将阿特拉津氯水解酶基因AD1-atzA转入烟草中,获得了转基因植株。T1代植株在浇灌了20mg·L-1阿特拉津溶液的模拟污染土壤条件下生长45d,抗性植株的RT-PCR结果证实叶片中阿特拉津氯水解酶基因得到正常转录,液相色谱质谱分析在叶片中检出阿特拉津的水解产物羟基阿特拉津。结果表明,用转基因植物修复阿特拉津污染土壤是值得进一步探索的途径。(本文来源于《农业环境科学学报》期刊2008年02期）
施利利,郭玉华,张欣,蔡宝立,孙宗修[4]（2007）在《阿特拉津氯水解酶基因植物表达载体的构建》一文中研究指出成功构建了阿特拉津氯水解酶基因植物表达载体p1301-atzA。构建方法为:第一步将用EcoRI和HindⅢ双酶切得到的atzA基因与也经过这两个酶双酶切的pBluescriptⅡSK(+/-)载体连接,构建成pSK-atzA,用EcoRI和HindⅢ双酶切鉴定插入片段大小为1.5kb;第二步将pSK-atzA用SalI和SacI双酶切,同也经过这两个酶双酶切的pCAMBIA301载体连接,用SalI-SacI双酶切鉴定插入片段大小为1.5kb,从而构建成p1301-atzA,并用冻融法将重组子导入根癌农杆菌EHA105中,并用酶切和PCR方法进行了鉴定。(本文来源于《沈阳农业大学学报》期刊2007年04期）
徐胜文,王松文,郭玉华[5]（2006）在《细菌阿特拉津氯水解酶基因的功能及其应用》一文中研究指出简要介绍了能降解除草剂阿特拉津的细菌的种类和它们的生物降解途径、阿特拉津氯水解酶的功能和定向进化的研究进展,以及阿特拉津氯水解酶基因atzA在污染土壤生物修复和转基因植物研究中的应用。(本文来源于《天津农学院学报》期刊2006年01期）
陈德富,陈喜文,蔡宝立[6]（2004）在《阿特拉津氯水解酶基因的定点诱变和酶活力检测》一文中研究指出阿特拉津氯水解酶(AtzA)是一种对除草剂的生物降解和环境净化有重要意义的酶.采用定点诱变方法将假单胞菌ADP株的atzA基因第832位碱基(鸟嘌呤)诱变成腺嘌吟,然后将其插入表达载体pET21b(+),并在大肠杆菌中表达.表达的蛋白特性研究表明:AtzA或AtzA-NK融合蛋白系水溶性蛋白,很容易通过Ni-NTA Magnetic Agarose Beads分离纯化.采用阿特拉津脱氯反应产生HCl而引起pH指示剂颜色改变的测定方法能方便地对其酶活力进行定量.酶活力结果表明,突变酶的比活力与假单胞菌ADP菌株的AtzA相比没有明显改变,暗示突变位点(第278位缬氨酸突变成甲硫氨酸)不是酶的活性中心或底物结合部位.(本文来源于《南开大学学报(自然科学版)》期刊2004年03期）
王松文,施利利,孙宗修,蔡宝立,傅亚萍[7]（2004）在《农杆菌介导的细菌阿特拉津氯水解酶基因对水稻的遗传转化》一文中研究指出研究构建了植物表达载体p1301-atzA,使来源于节杆菌(Arthrobacter sp.)AD1菌株的阿特拉津氯水解酶基因atzA受控于CaMV35s启动子下表达。用农杆菌介导法将植物表达载体p1301-atzA导入粳型保持系津稻107中,经潮霉素抗性筛选,得到可育的再生植株。转基因植株总DNA经PCR和Southern检测表明atzA基因已整合到水稻的基因组中。对转基因植株进行除草剂阿特拉津抗性检测,在喷施浓度为0.133％的阿特拉津溶液后,对照植株和敏感植株死亡,而转基因植株表现出对阿特拉津的抗性,保持正常生长,但不同转化株系的抗性表达水平不同。对转基因植株T,代进行的遗传分析表明,外源基因atzA能稳定遗传给后代,且大多数株系的分离比符合3:1。(本文来源于《中国农业科学》期刊2004年08期）
任毅,韩宇宁,王松文,蔡宝立[8]（2003）在《节杆菌AD1菌株的阿特拉津氯水解酶基因在大肠杆菌中的表达》一文中研究指出用PCR方法从节杆菌ADI菌株中扩增出完整的阿特拉津氯水解酶基atzA,该基因与载体pGEM-T 连接成重组质粒以后,转化大肠杆菌DH5a,表达出了有活力的阿特拉津氯水解酶。(本文来源于《南开大学学报(自然科学版)》期刊2003年04期）
阿特拉津氯水解酶基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
阿特拉津氯水解酶(AtzA)能有效催化有毒的阿特拉津脱氯生成无毒的羟基阿特拉津。本文将来自假单胞菌ADP的atzA-ADP和来自节杆菌AD1的atzA-NK分别插入Ti载体pBin438,构建了atzA植物表达载体pBin438-atzA-ADP和pBin438-atzA-NK。并通过农杆菌介导法将其转入烟草,经基因组PCR筛选及RT-PCR分析,获得16株转atzA-ADP烟草株系和11株转atzA-NK烟草株系。在含150mgL-1阿特拉津的1/2MS培养基上生长50d时,株系401的降解能力最高,达79.26%,远高于野生型烟草的0.47%,说明转基因烟草可用于建立阿特拉津残留环境的植物修复系统。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
阿特拉津氯水解酶基因论文参考文献
[1].王绘砖,陈喜文,陈德富.阿特拉津氯水解酶基因在绿藻遗传筛选中的初步研究[C].中国遗传学会第八次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编（2004-2008）.2008
[2].王绘砖,陈喜文,王永芹,蔡宝立,陈德富.转阿特拉津氯水解酶基因烟草的获得及其生物降解能力分析[J].作物学报.2008
[3].斯华敏,朱丽,牟仁祥,刘文真,胡国成.表达细菌阿特拉津氯水解酶基因的转基因烟草对土壤中阿特拉津的生物降解[J].农业环境科学学报.2008
[4].施利利,郭玉华,张欣,蔡宝立,孙宗修.阿特拉津氯水解酶基因植物表达载体的构建[J].沈阳农业大学学报.2007
[5].徐胜文,王松文,郭玉华.细菌阿特拉津氯水解酶基因的功能及其应用[J].天津农学院学报.2006
[6].陈德富,陈喜文,蔡宝立.阿特拉津氯水解酶基因的定点诱变和酶活力检测[J].南开大学学报(自然科学版).2004
[7].王松文,施利利,孙宗修,蔡宝立,傅亚萍.农杆菌介导的细菌阿特拉津氯水解酶基因对水稻的遗传转化[J].中国农业科学.2004
[8].任毅,韩宇宁,王松文,蔡宝立.节杆菌AD1菌株的阿特拉津氯水解酶基因在大肠杆菌中的表达[J].南开大学学报(自然科学版).2003