导读:本文包含了离体缺氧模型论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:b,END.,3细胞,缺氧,醛固酮,依普利酮
离体缺氧模型论文文献综述
刘梦竹,金永华,于红梅,姚海乾,张莹[1]（2018）在《醛固酮及其受体拮抗剂对缺氧的离体血脑屏障模型作用研究》一文中研究指出目的探讨缺氧后永生化小鼠脑微血管内皮细胞系b END. 3细胞自身能否生成醛固酮,及其受体拮抗剂依普利酮对血脑屏障的保护作用。方法根据缺氧时间不同分组,MTT法测定缺氧后细胞活力,ELISA法测定缺氧后醛固酮的产生,RT-PCR法检测紧密连接蛋白ZO-1和claudin-5的mRNA表达。结果 MTT法显示,随着缺氧时间的延长,细胞活性降低,加入依普利酮后其细胞活性提高; ELISA结果显示,缺氧后伴有醛固酮的产生增加;经过依普利酮(0. 1、1、10μmol/L)处理后ZO-1、claudin-5蛋白表达增加(P <0. 05)。结论体外实验证实,缺氧后血管内皮细胞可自身合成醛固酮,醛固酮受体拮抗剂依普利酮可保护血脑屏障的屏障功能。(本文来源于《哈尔滨医科大学学报》期刊2018年03期）
田晓翠[2]（2017）在《离体脑神经血管单元模型的建立及β-石竹烯对其缺氧复氧损伤的保护作用研究》一文中研究指出目的:采用大鼠原代脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMECs)、星形胶质细胞、神经元细胞建立离体脑“神经血管单元(neurovascular unit,NVU)”共培养模型,并观察β-石竹烯(β-Caryophyllene,BCP)对其缺氧复氧(oxygen-glucose deprivation and re-oxygenation,OGD/R)损伤的保护作用。方法:1.(1)大鼠BMECs、星形胶质细胞、神经元细胞的培养方法分别如下:1)分离2周龄SD乳鼠的脑皮层组织,加入Ⅱ-型胶原酶和胶原酶/分散酶消化脑组织,20%BSA分离微血管段,消化传代纯化细胞,免疫荧光法(Immunofluorescence technique,IF)检测内皮细胞特异性蛋白Ⅷ因子(FactorⅧ)进行鉴定细胞纯度。2)分离24 h内新生SD乳鼠的皮层组织,加入0.125%的胰酶消化,用含10%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)的DMEM-F12培养基培养,通过振摇法纯化细胞,IF检测星形胶质细胞特异性酸性胶质纤维蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)鉴定细胞纯度。3)分离胚胎期17-19 d的SD乳鼠的脑皮层组织,先用含10%FBS的DMEM培养基培养细胞4-6 h,再改用Neurobasal+B27培养基培养,IF检测神经元特异性微管相关蛋白(microtubuleassociatedprotein,map-2)鉴定细胞纯度。(2)共培养模型的构建:采用transwell细胞小室共培养细胞。神经元于孔板底部生长至第5d后直接用于建模,transwell膜的外侧接种传代纯化后的星形胶质细胞,依靠张力作用5h后将其放入接种有神经元的孔板中,24h后于transwell膜的内池接种传代纯化后的bmecs,共培养3d后用于后续实验。并通过以下指标鉴定nvu模型:4h渗漏实验和跨内皮细胞电阻值(transendothelialelectricalresistance,teer)初步鉴定模型。相差显微镜和扫描电镜观察共培养模型中细胞的生长状态、透射电镜观察内皮细胞间的紧密连接(tightjunction,tj)、伊文思蓝(evansblue,eb)检测模型的通透性。2.构建离体nvu缺氧复氧损伤模型,分为正常对照组(controlgroup),缺氧复氧损伤组(ogd/rgroup),β-石竹烯组(bcp+ogd/rgroup,10μmol/l)。并通过以下指标观察β-石竹烯的保护作用:检测teer以及eb渗透率反应nvu通透性的变化、明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶-9(metalloproteinase-9,mmp-9)的活性,westernblot检测tj蛋白、凋亡相关蛋白以及生长相关蛋白-43(growth-associatedprotein-43,gap-43)表达、流式细胞仪检测神经元凋亡情况、免疫酶联法(elisa)检测nfg-β,sod、mda、ldh、no、tnf-α、il-1β、il-6的表达。结果:1.成功培养3种原代细胞。(1)bmecs呈典型的涡旋状生长,特异性factor-Ⅷ鉴定纯度可达96%以上。(2)星形胶质细胞经振摇传代处理后GFAP鉴定纯度达97%以上。(3)神经元细胞MAP-2鉴定纯度可达90%以上。(4)叁细胞共培养中细胞生长状态良好,并有相互促进生长的作用。4h渗漏试验中各孔液面均无明显下降,TEER值显着高于双细胞和单细胞培养,EB渗透率明显低于双细胞和单细胞培养,3细胞共培养模型中内皮细胞之间形成了具有屏障功能的TJ结构和桥粒结构。2.BCP对缺氧复氧诱导的离体NVU模型损伤具有保护作用:BCP可显着降低TNF-α、IL-1β、IL-6,MDA、LDH、MMP-9以及促凋亡蛋白Bax的表达量(P<0.05),上调紧密连接蛋白claudin-5、occludin、ZO-1、GAP-43、NFG-β、SOD以及抗凋亡蛋白Bcl-2表达量(P<0.05)。结论:1.叁细胞共培养模型中细胞之间可相互促进生长,能更好地模拟在体复杂的生理环境,与在体NVU具有部分相似的生理功能。2.β-石竹烯对缺氧复氧损伤的离体NVU模型具有显着的保护作用。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2017-05-01）
伊利亚尔·买买提力,俞瑾,郭海,郑宏[3]（2016）在《大鼠离体心脏模型中雷帕霉素调节HIf1α干预缺氧预处理心肌保护作用的机制》一文中研究指出目的本研究组在前期研究中证实雷帕霉素会减弱缺氧预处理对原代乳鼠心肌细胞的保护作用,本研究拟在整体心脏水平验证这一现象并探讨其机制。方法建立Langendorff大鼠离体心脏模型,分别测定并分析缺血再灌注(I/R)、缺氧预处理(HPC)、雷帕霉素干预后缺氧预处理(Rapa+HPC)叁组的血流动力学指标,验证雷帕霉素对缺氧预处理心肌保护效应的影响,应用qRT-PCR技术测定HIF1α与mTOR的mRNA表达水平。结果 Rapa+HPC组再灌注后30min,60min心率与I/R组差异无统计学意义,Rapa+HPC组LVDP、dp/dt虽较HPC组降低(p<0.05),但仍高于I/R组。HPC组HIF1α mRNA与mTOR mRNA水平高于I/R(16.96±1.82 vs 1.01±0.13,p<0.05;1.99±0.32 vs 1.05±0.40,p<0.05),及Rapa+HPC组(1.56±0.36,p<0.05;0.63±0.06,p<0.05)。结论缺氧预处理早期可产生心肌保护作用,促进缺血再灌注后心脏功能的恢复。雷帕霉素会减弱缺氧预处理的心肌保护效应。这一早期保护作用涉及HIF1α与mTOR表达增加,雷帕霉素可通过HIF1α与mTOR在这一过程中的表达,减弱缺氧预处理早期心肌保护作用。(本文来源于《新疆医学》期刊2016年06期）
杨庆强,张才全[4]（2010）在《人结肠癌细胞HT-29离体缺氧模型的制备和鉴定》一文中研究指出目的模拟体内肿瘤不同程度的缺氧环境,建立简单、稳定可靠的离体缺氧模型,比较各梯度缺氧对HT-29细胞生长活力的影响,以筛选出最适HT-29细胞生长的微缺氧环境。方法制作缺氧检测装置,灌注不同氧浓度的混合气体,溶解氧测定仪实时动态监测培养液氧分压的变化;RT-PCR检测低培养液氧分压下HT-29细胞HIF-1α mRNA的表达,以检验细胞是否处于缺氧状态;倒置相差显微镜下观察缺氧各梯度组HT-29细胞的形态变化;MTT检测各梯度缺氧对HT-29细胞增殖的影响,描绘细胞生长曲线。结果输入7.8%、4.8%、2.4%和1.2%氧(O2)后20min,10%FBS/RPMI-1640培养液的氧分压(PO2)分别恒定于30、20、10和5mmHg。缺氧各梯度组HIF-1α mRNA的表达均较对照组明显上调,尤以PO220mmHg组为着。PO230mmHg、PO220mmHg和PO210mmHg梯度组HT-29细胞的形态与对照组相似;而PO25mmHg梯度组则出现损伤性形态改变,其(A570)值最低;PO220mmHg梯度组(A570)值则显着高于对照组。结论该实验成功构建离体缺氧模型。在适度缺氧下,缺氧的应激作用,可能使相关缺氧反应基因表达上调,诱导细胞增殖加快,通过刺激增殖和细胞保护使肿瘤细胞在缺氧环境中长期生存。而严重缺氧导致增殖受到抑制,细胞形态出现损伤性改变。在对照组和缺氧的4个梯度组中,PO220mmHg组处于缺氧的应激和损伤作用的平衡点,其生长活力最好。肿瘤瘤体内PO220mmHg位于瘤体边缘,提示:位于瘤体边缘的肿瘤细胞在缺氧的诱导下增殖活性更强。这为后续深入探讨该缺氧水平下肿瘤细胞的侵袭能力及其机制奠定了基础。(本文来源于《中国现代医学杂志》期刊2010年16期）
离体缺氧模型论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:采用大鼠原代脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMECs)、星形胶质细胞、神经元细胞建立离体脑“神经血管单元(neurovascular unit,NVU)”共培养模型,并观察β-石竹烯(β-Caryophyllene,BCP)对其缺氧复氧(oxygen-glucose deprivation and re-oxygenation,OGD/R)损伤的保护作用。方法:1.(1)大鼠BMECs、星形胶质细胞、神经元细胞的培养方法分别如下:1)分离2周龄SD乳鼠的脑皮层组织,加入Ⅱ-型胶原酶和胶原酶/分散酶消化脑组织,20%BSA分离微血管段,消化传代纯化细胞,免疫荧光法(Immunofluorescence technique,IF)检测内皮细胞特异性蛋白Ⅷ因子(FactorⅧ)进行鉴定细胞纯度。2)分离24 h内新生SD乳鼠的皮层组织,加入0.125%的胰酶消化,用含10%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)的DMEM-F12培养基培养,通过振摇法纯化细胞,IF检测星形胶质细胞特异性酸性胶质纤维蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)鉴定细胞纯度。3)分离胚胎期17-19 d的SD乳鼠的脑皮层组织,先用含10%FBS的DMEM培养基培养细胞4-6 h,再改用Neurobasal+B27培养基培养,IF检测神经元特异性微管相关蛋白(microtubuleassociatedprotein,map-2)鉴定细胞纯度。(2)共培养模型的构建:采用transwell细胞小室共培养细胞。神经元于孔板底部生长至第5d后直接用于建模,transwell膜的外侧接种传代纯化后的星形胶质细胞,依靠张力作用5h后将其放入接种有神经元的孔板中,24h后于transwell膜的内池接种传代纯化后的bmecs,共培养3d后用于后续实验。并通过以下指标鉴定nvu模型:4h渗漏实验和跨内皮细胞电阻值(transendothelialelectricalresistance,teer)初步鉴定模型。相差显微镜和扫描电镜观察共培养模型中细胞的生长状态、透射电镜观察内皮细胞间的紧密连接(tightjunction,tj)、伊文思蓝(evansblue,eb)检测模型的通透性。2.构建离体nvu缺氧复氧损伤模型,分为正常对照组(controlgroup),缺氧复氧损伤组(ogd/rgroup),β-石竹烯组(bcp+ogd/rgroup,10μmol/l)。并通过以下指标观察β-石竹烯的保护作用:检测teer以及eb渗透率反应nvu通透性的变化、明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶-9(metalloproteinase-9,mmp-9)的活性,westernblot检测tj蛋白、凋亡相关蛋白以及生长相关蛋白-43(growth-associatedprotein-43,gap-43)表达、流式细胞仪检测神经元凋亡情况、免疫酶联法(elisa)检测nfg-β,sod、mda、ldh、no、tnf-α、il-1β、il-6的表达。结果:1.成功培养3种原代细胞。(1)bmecs呈典型的涡旋状生长,特异性factor-Ⅷ鉴定纯度可达96%以上。(2)星形胶质细胞经振摇传代处理后GFAP鉴定纯度达97%以上。(3)神经元细胞MAP-2鉴定纯度可达90%以上。(4)叁细胞共培养中细胞生长状态良好,并有相互促进生长的作用。4h渗漏试验中各孔液面均无明显下降,TEER值显着高于双细胞和单细胞培养,EB渗透率明显低于双细胞和单细胞培养,3细胞共培养模型中内皮细胞之间形成了具有屏障功能的TJ结构和桥粒结构。2.BCP对缺氧复氧诱导的离体NVU模型损伤具有保护作用:BCP可显着降低TNF-α、IL-1β、IL-6,MDA、LDH、MMP-9以及促凋亡蛋白Bax的表达量(P<0.05),上调紧密连接蛋白claudin-5、occludin、ZO-1、GAP-43、NFG-β、SOD以及抗凋亡蛋白Bcl-2表达量(P<0.05)。结论:1.叁细胞共培养模型中细胞之间可相互促进生长,能更好地模拟在体复杂的生理环境,与在体NVU具有部分相似的生理功能。2.β-石竹烯对缺氧复氧损伤的离体NVU模型具有显着的保护作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
离体缺氧模型论文参考文献
[1].刘梦竹,金永华,于红梅,姚海乾,张莹.醛固酮及其受体拮抗剂对缺氧的离体血脑屏障模型作用研究[J].哈尔滨医科大学学报.2018
[2].田晓翠.离体脑神经血管单元模型的建立及β-石竹烯对其缺氧复氧损伤的保护作用研究[D].重庆医科大学.2017
[3].伊利亚尔·买买提力,俞瑾,郭海,郑宏.大鼠离体心脏模型中雷帕霉素调节HIf1α干预缺氧预处理心肌保护作用的机制[J].新疆医学.2016
[4].杨庆强,张才全.人结肠癌细胞HT-29离体缺氧模型的制备和鉴定[J].中国现代医学杂志.2010