导读:本文包含了根部特异性启动子论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:玉米,根部特异性启动子,烟草,GUS染色
根部特异性启动子论文文献综述
赵丽娜[1]（2011）在《玉米根部特异性启动子的克隆及功能分析》一文中研究指出目前植物基因工程广泛应用的启动子是CaMV35S组成型启动子,它驱动外源基因在植物的各种组织和所有发育阶段都会表达,不但造成物质和能量上的巨大浪费,还会引起植物的形态发生变化,影响植物的生长发育。利用组织特异性启动子指导外源基因定向地在人们预定的时间和空间、组织或器官表达,是实现对目标基因高效表达的重要途径,也是培育高效、安全转基因作物的首选。植物的生长发育受基因调控,根部特异性启动子是调控基因表达的关键元件之一。植酸是一种抗营养因子,同时也是植物体内磷的主要存在形式,其大部分不能被单胃动物消化吸收,而随粪便排出体外造成环境磷污染。通过植酸酶的作用,植酸盐可以水解成无机磷和肌醇,其水解过程能释放出肌醇和一些微量元素,从而可以提高植物性食品和饲料的营养价值,因此它具有分解植酸盐的特殊作用。植酸酶分解存在于谷物中的磷酸主要贮藏物质植酸,使磷酸游离出来,进而促进鸡和猪等难吸收植酸的单胃动物吸收磷酸。利用根部特异性启动子在粮食作物中提高植酸酶的表达量,创造低植酸的转基因作物,对于提高食品营养价值,促进人类健康具有重大的现实意义。本研究主要克隆玉米根部特异性表达启动子ZmGLU1P,并对其功能进行鉴定,在此基础上构建玉米根部特异性启动子驱动植酸酶基因的重组植物表达载体,通过花粉管通道法和农杆菌介导法将其导入玉米中,以期在根部中特异性表达,为外源植酸酶基因在玉米根部中高效表达提供了有用的调控元件。根据已发表的玉米β-葡萄糖苷酶基因启动子(GenBankDQ333310)序列,设计一对引物,利用PCR技术从玉米品种P138基因组DNA中分离得到玉米根部特异性启动子DNA片段ZmGLU1P,并将其克隆到pMD18-T Vector上。测序结果表明所克隆的片段长为1846bp,与预期结果相符。该片段与己发表的玉米β-葡萄糖苷酶基因启动子序列的同源性为99%,并含典型的TATA盒和CAAT盒,以及根部特异表达所必须的调控元件。用ZmGLU1P基因替代植物表达载体PBI121的CaMV35S启动子,与GUS基因连接,获得了由该启动子启动GUS报告基因的重组植物表达载体ZmGLU1P-GUS。通过液氮冻融法将重组质粒ZmGLU1P-GUS转化到农杆菌EHA105中,采用叶盘法转化烟草品种NC89。在含有Kan的MS选择培养基上进行筛选培养,结果获得了转ZmGLU1P-GUS的烟草植株,对转化烟草植株进行PCR和Southern杂交检测,结果显示成功地获得了转基因烟草植株。为了验证所扩增的启动子是否具有根部特异性表达的功能,我们对转基因烟草的根、茎、叶分别进行GUS组织化学分析。结果表明,转基因烟草的茎和叶未显色,而根部显蓝色,表现出明显的根部特异性,由此表明ZmGLU1P启动的GUS基因在根中能特异性表达。为了使外源基因在根部特异性启动子的调控下高效表达,进而对玉米品质进行改良,我们构建了植物表达载体PCAMBIA3301-ZmGLU1P-PhyA-NOS。它是将终止子和玉米根部特异性启动子以及植酸酶PhyA基因依次插入到植物表达载体PCAMBIA3301上使ZmGLU1P高效启动下游PhyA基因的表达。通过花粉管通道法及农杆菌介导法转化到玉米中并获得了批量转化植株,对T0代转化植株进行了PCR和Southern杂交检测,得到2棵转基因玉米植株。ii(本文来源于《吉林农业大学》期刊2011-06-01）
关淑艳,赵丽娜,王丕武,楚海娇,刘强[2]（2011）在《玉米根部特异性启动子的克隆及功能分析》一文中研究指出【目的】从玉米幼根基因组DNA中克隆β-葡萄糖苷酶基因根部特异性启动子序列ZmGLU1P,并对其功能进行分析。【方法】利用PCR技术从玉米品种P138幼根基因组DNA中克隆玉米根部特异性启动子片段ZmGLU1P,将其与GUS基因融合,构建植物表达载体pCAMBIA121-ZmGLU1P,转化到EHA105根癌农杆菌中,通过根癌农杆菌介导法转化烟草NC89,对转化烟草植株进行PCR和Southern杂交检测。采集PCR和Southern杂交检测为阳性的转基因烟草的根、茎、叶,进行GUS活性的组织染色检测。【结果】克隆获得了ZmGLU1P片段,其长度为1 846 bp,与已报道的序列同源性达99%以上。转基因烟草植株的PCR和Southern杂交结果显示,成功地获得了转基因阳性植株;GUS活性检测表明,根中GUS活性最强,而在茎和叶等组织中GUS活性甚微,表明ZmGLU1P片段具有根部特异性启动子功能。【结论】玉米β-葡萄糖苷酶基因上游1 846 bp的片段ZmGLU1P具有根部特异性启动子功能,为根部特异性启动子。(本文来源于《西北农林科技大学学报(自然科学版)》期刊2011年05期）
王丹,王丕武,付永平,厉志[3]（2009）在《大豆根部特异性启动子的克隆及功能分析》一文中研究指出利用PCR技术从大豆品种吉农17基因组DNA中分离得到大豆根部特异性启动子片段RSP,长度约为2.5kb。序列分析表明RSP与报道序列同源性达97%以上。将其与GUS基因融合,构建植物表达载体pRSP-GUS后,转化到EHA105根癌农杆菌中,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法转化烟草(Nicotiana tabacum)NC89。转基因植株的GUS活性检测表明,仅能在根中检测到GUS活性,而在茎、叶和种子等其它组织中都未检测到GUS活性,证实RSP片段具有根部特异性表达功能。(本文来源于《大豆科学》期刊2009年02期）
王丹,付永平,马健,王丕武[4]（2009）在《大豆根部特异性启动子的克隆及功能分析》一文中研究指出根部特异性启动子是具有根部特异性表达功能的一类特异启动子。在采用分子生物学手段对农作物进行遗传改良的过程中,常希望插入的外源基因能够限定在特定的组织中表达,从而使植物获(本文来源于《全国植物分子育种研讨会摘要集》期刊2009-01-04）
王丹,厉志,王丕武[5]（2008）在《大豆根部特异性启动子的克隆及功能分析》一文中研究指出根部特异性启动子(root specific promoter,RSP)是具有根部特异性表达功能的一类特异启动子。在采用分子生物学手段对农作物进行遗传改良的过程中,常希望插入的外源基因能够限定在特定的组织中表达,从而使植物获得有益的性状而不影响其它特性,这就需要通过特异性启动子对靶基因的表达进行调控。植物的生长发育受基因调控,启动子是调控基因(本文来源于《吉林省第六届生命科学大型学术报告会论文集》期刊2008-12-01）
崔鑫欣[6]（2007）在《根部特异性启动子rRB7在拟南芥和棉花中的表达研究》一文中研究指出启动子在基因表达调控中起关键性作用，它在很大程度上决定目的基因表达的时间、空间和强度。当前商业化应用的植物基因工程产品大多使用的是组成型启动子，它们驱动外源基因在植物各种组织和所有发育阶段表达，这无疑增加了植物的代谢负担，并造成物质和能量的浪费，往往还会引起植物形态发生改变，甚至影响植物生长发育。因此，本研究从烟草基因组中克隆根部特异性表达TobRB7基因启动子rRB7，并分别与gfp和vgb基因融合，转化拟南芥和棉花，取得如下结果：1．构建成功3个植物表达载体：pGBI121GFP，携带35s启动子驱动gfp基因的表达盒；pGBIrRB7GFP，携带rRB7启动子驱动gfp基因的表达盒；pGBIrRB7VHB，携带rRB7启动子驱动vgb基因的表达盒。2．通过花沾法将植物表达载体pGBI121GFP、pGBIrRB7GFP导入拟南芥，分别获得T1代再生植株15株和16株。利用激光共聚焦显微镜扫描转基因拟南芥幼苗不同部位的荧光强度，结果表明，rRB7启动子驱动GFP基因在根尖伸长区、成熟区以及根颈部优势表达，但其荧光强度比对照CaMV35S启动子低约23.6％，在茎、叶中基本不表达，说明该启动子具有根组织特异性，但与CaMV35S启动子相比不是一个强启动子。3．通过花粉管通道法将植物表达载体pGBIrRB7VHB导入陆地棉品种Y18中，经卡那霉素筛选和PCR鉴定，得到转基因植株15株。用荧光定量PCR技术检测rRB7启动子驱动vgb基因在部分单株根组织中的相对表达量，结果表明启动子片段rRB7可驱动vgb基因在棉花根组织特异表达，但单株表达水平均低于对照CaMV 35S启动子，与拟南芥中的检测结果一致。叶绿素含量测定结果表明，在根部特异性表达vgb基因对转基因棉花叶绿素含量变化的影响较小。本论文分析了来源于烟草的rRB7启动子在拟南芥及棉花中表达的组织特异性，验证了该启动子在植物根组织中具有优势表达特性，并与vgb基因融合，提高了转基因棉花的耐涝性，为rRB7启动子应用于植物根组织的基因工程改良研究打下了基础，并对增强植株吸收水分，肥料及微量元素、有效抵抗土传病虫害以及在特殊生态环境下生存均具有一定的实际意义。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2007-06-01）
根部特异性启动子论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
【目的】从玉米幼根基因组DNA中克隆β-葡萄糖苷酶基因根部特异性启动子序列ZmGLU1P,并对其功能进行分析。【方法】利用PCR技术从玉米品种P138幼根基因组DNA中克隆玉米根部特异性启动子片段ZmGLU1P,将其与GUS基因融合,构建植物表达载体pCAMBIA121-ZmGLU1P,转化到EHA105根癌农杆菌中,通过根癌农杆菌介导法转化烟草NC89,对转化烟草植株进行PCR和Southern杂交检测。采集PCR和Southern杂交检测为阳性的转基因烟草的根、茎、叶,进行GUS活性的组织染色检测。【结果】克隆获得了ZmGLU1P片段,其长度为1 846 bp,与已报道的序列同源性达99%以上。转基因烟草植株的PCR和Southern杂交结果显示,成功地获得了转基因阳性植株;GUS活性检测表明,根中GUS活性最强,而在茎和叶等组织中GUS活性甚微,表明ZmGLU1P片段具有根部特异性启动子功能。【结论】玉米β-葡萄糖苷酶基因上游1 846 bp的片段ZmGLU1P具有根部特异性启动子功能,为根部特异性启动子。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
根部特异性启动子论文参考文献
[1].赵丽娜.玉米根部特异性启动子的克隆及功能分析[D].吉林农业大学.2011
[2].关淑艳,赵丽娜,王丕武,楚海娇,刘强.玉米根部特异性启动子的克隆及功能分析[J].西北农林科技大学学报(自然科学版).2011
[3].王丹,王丕武,付永平,厉志.大豆根部特异性启动子的克隆及功能分析[J].大豆科学.2009
[4].王丹,付永平,马健,王丕武.大豆根部特异性启动子的克隆及功能分析[C].全国植物分子育种研讨会摘要集.2009
[5].王丹,厉志,王丕武.大豆根部特异性启动子的克隆及功能分析[C].吉林省第六届生命科学大型学术报告会论文集.2008
[6].崔鑫欣.根部特异性启动子rRB7在拟南芥和棉花中的表达研究[D].中国农业科学院.2007