导读:本文包含了蛋白免疫印迹法论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:反硝化脱氮,施氏假单胞菌,NapA,NapB,蛋白免疫印迹
蛋白免疫印迹法论文文献综述
周萌,柴晓利[1]（2019）在《施氏假单胞菌胞内NapA/NapB蛋白的多克隆抗体制备及蛋白免疫印迹分析》一文中研究指出旨在探究利用蛋白免疫印迹手段测定施氏假单胞菌胞内关键酶NapA和NapB表达量的可行性。选取多肽片段合成免疫抗原,并用其免疫兔子获得相应的多克隆抗体。ELISA检测第叁次免疫后两周的兔抗血清的效价,并将最终免疫产生的抗体用于施氏假单胞菌样品的蛋白免疫印迹分析。制备的多肽抗原具有良好的免疫原性,NapB免疫原效果甚佳,血清效价大于1∶160000,NapA的效价也可达到1∶14000。免疫印迹试验结果的发光图像中内参条带清晰整齐,在目标蛋白条带区域也可以看到明显反应带。本研究制备出的抗体可用于施氏假单胞菌胞内NapA和NapB蛋白的免疫印迹分析,后续还可以改变实验条件通过内参蛋白进行半定量。(本文来源于《山东化工》期刊2019年20期）
卢进,周东东,杨永清,尹磊淼[2]（2019）在《不同参数对蛋白免疫印迹法结果的影响》一文中研究指出[目的]探讨曝光时间、洗脱时间等参数对蛋白免疫印迹法结果的影响。[方法]通过测量灰度值,比较不同曝光时间(6 s和21 s)、洗脱时间(30 min和8 h)以及图像处理软件(Image J和Imagequant TL)对蛋白免疫印迹法结果的影响。[结果]上样量比值为2∶1的蛋白曝光6 s的灰度值读数分别为14766±724和7171±577(n=3),均数比值为2. 1∶1。延长曝光至21 s后相同样品灰度值分别为14932±1198和11994±616(n=3),均数比值减小为1. 2∶1;洗脱30 min和8 h后的曝光结果相比,上样量为1. 64μg蛋白灰度值分别为23713±1895和22892±571(n=3),差异无统计学意义; Image J和Imagequant TL两种软件对倍比梯度上样的蛋白样品读值,比值分别为1∶0. 56∶0. 41∶0. 22和1∶0. 59∶0. 40∶0. 15;对两组读值进行直线回归分析,可得斜率分别为0. 13和0. 14,提示两组读值趋势一致。[结论]曝光时间对蛋白免疫印迹法结果有明显影响,高丰度蛋白需要低曝光时间,才能保持确切的倍比关系;洗脱时间超过30 min对蛋白免疫印迹法灰度值结果没有直接影响;不同图像处理软件对灰度值结果分析趋势一致。(本文来源于《生物技术》期刊2019年04期）
程珊,汪波,肖凌,聂晶,郑健[3]（2019）在《基于蛋白免疫印迹的水蛭抗凝活性成分研究》一文中研究指出目的:建立Native-PAGE结合Western blot检测水蛭活性多肽与凝血酶相互作用产物的方法,探究水蛭有效抗凝成分。方法:本研究分别提取宽体金线蛭、日本医蛭两种水蛭虫体总蛋白及日本医蛭唾液蛋白,用凝血酶滴定法测定其抗凝血酶活性,Western blot检测凝血酶-活性多肽复合体。结果:研究发现两种水蛭Native-PAGE-WB均检测到凝血酶-活性多肽复合体,且SDS-PAGE-WB检测到复合体变性后产生凝血酶条带。结论:建立的Native-PAGE-WB法可有效检出水蛭活性多肽和凝血酶相互作用产物,且发现同水蛭素类似,宽体金线蛭活性抗凝多肽与凝血酶在体外也能形成稳定的蛋白复合体。(本文来源于《世界科学技术-中医药现代化》期刊2019年04期）
申婷婷,杨举,王宫,张晓亮,何根林[4]（2018）在《基于免疫印迹定量分析的总蛋白提取方法比较》一文中研究指出[目的]基于改良的对比蛋白提取结果的方法,探讨两种不同总蛋白提取方法对不同丰度蛋白提取得率的影响。[方法]小胶质细胞株N9总蛋白及商品化预染蛋白标准品,行聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),叁种常用图像软件定量免疫印迹结果,比较线性相关系数R~2;选择R~2值最高的软件,灰密度定量不同丰度p-IκBα经RIPA裂解液法和Minute试剂盒法蛋白提取后免疫印迹检测的p-IκBα蛋白得率。[结果]叁种软件定量分析同一免疫印迹结果显示,Image Studio Lite的上样量与条带灰密度值的R~2最大(R~2=0.998);运用Image Studio Lite定量免疫印迹检测p-IκBα高丰度组,发现使用RIPA裂解液法比Minute法的p-IκBα提取得率高出7.5%,而p-IκBα低丰度组,前者p-IκBα的得率只有后者的41%,差异显着(P<0.05)。[结论]Minute试剂盒法在免疫印迹检测中对低丰度蛋白具有高提取得率的优越性。(本文来源于《生物技术》期刊2018年04期）
吴琼,杨友辉,杨健,薛维娜,李勇军[5]（2018）在《大鼠肝组织中P-糖蛋白的免疫印迹检测方法》一文中研究指出目的探讨Western Blot检测P-糖蛋白表达的实验优化条件。方法随机选择6只雄性SD大鼠,给予荭草花提取物0.4g/(kg·d)灌胃,连续灌胃6d。采用钙盐沉淀法提取6只大鼠肝微粒体,利用BCA法进行蛋白定量后,制备蛋白上样样品。比较不同样品处理方法、转膜方法的检测效果。结果与高温变性相比,样品经室温变性上样可检测到目的条带。湿法电转法较半干法电转法转膜效果好,且湿转条件选择120V,2h较为好。结论样品室温变性处理、120V,2h的湿转转膜条件,是检测P-糖蛋白较优的Western Blot方法。并且在经荭草花提取物给药后的6只SD大鼠肝组织内P-糖蛋白的表达呈现一定的差异。(本文来源于《贵州医药》期刊2018年01期）
韩晓杰,段婷婷,庞雨,徐玉东,王宇[6]（2017）在《Western blot免疫印迹法检测磷酸化蛋白表达条件优化研究》一文中研究指出目的:探讨Western blot免疫印迹法不同转膜方法和不同抗原抗体比例对磷酸化蛋白表达的检测效果。方法:选择肌球蛋白轻链(myosin light chain,MLC)及其磷酸化蛋白作为研究对象,比较半干转印法、湿转法和1:3000、1:5000、1:10000等抗体稀释比例对磷酸化蛋白检测效果的影响。结果:半干转印法(恒压16V,30 min)观察到蛋白信号断续;而同样样品利用湿转法(恒压130 V,1h)检测发现信号连续且强度明显增高;对于磷酸化蛋白,半干转印法无法观察到磷酸化蛋白信号;而同样样品湿转法检测出现连续信号。统一利用湿转方法进行后续蛋白磷酸化检测,当抗体稀释比为1:3000时,结果出现非特异性条带;降低抗体稀释比为1:5000时无非特异性条带,且蛋白信号效果较好;抗体稀释比为1:10000时条带图像出现弥散且背景较高。结论:选择合适的转膜方式和抗原抗体比例有助于磷酸化蛋白表达检测。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2017年21期）
陈彩萍,冯志奇,宋壮,陈超,温小安[7]（2016）在《蛋白免疫印迹法同时检测大、小分子蛋白的实验条件改进》一文中研究指出目的:蛋白免疫印迹法是现代生物医学研究中广泛应用于蛋白定性和半定量分析的实验技术。然而,常规采用传统单一浓度凝胶的蛋白免疫印迹法在应用过程中仍有不足之处,如不能同时检测分子量很大和很小的蛋白,因而有必要探索一种增大凝胶有效分离范围的检测方法。本文提出采用组合凝胶来实现更大范围分子量蛋白的同时检测。方法:比较双浓度的组合凝胶与单一浓度凝胶的分离范围以及分析采用组合凝胶,蛋白免疫印迹法对大、小分子蛋白的检测效果。结果:12%/7.5%组合凝胶和15%/7.5%组合凝胶的分离范围显着大于相应的单一浓度凝胶。通过12%/7.5%组合凝胶,蛋白免疫印迹法同时检测到15-300 k Da范围内的大、小分子蛋白。结论:组合凝胶有助于蛋白免疫印迹法对分子量相差很大的蛋白进行同时检测分析,具有很强的实用性。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2016年24期）
刘昕亮,牟怀德,徐蓉芳[8]（2015）在《2007-2012年乐山地区HIV-1抗体阳性标本蛋白免疫印迹带型分析》一文中研究指出目的了解乐山地区2007-2012年HIV-1抗体阳性标本蛋白免疫印迹带型分布情况,为临床诊断和治疗提供科学依据。方法采用WESTERN BLOT免疫印迹技术进行检测并严格按照《全国艾滋病检测技术规范》2009年修订版和试剂说明书要求进行实验操作和结果判断,使用SPSS 11.5进行统计处理。结果 1 163例确证阳性标本中除gag蛋白带型p55和p17阳性率较低外,其余带型阳性率均在94.00%以上;同时全带型组合出现率最高(57.70%);不同性别与蛋白印迹带型比较发现单条带型p55(χ2=7.427,P=0.006)和p17(χ2=6.370,P=0.012)在男女性别中的出现率差异有统计学意义;不同年龄组间单条带型gp41(χ2=8.827,P=0.032)、p51(χ2=11.418,P=0.010)、p55(χ2=16.622,P=0.001)出现率差异有统计学意义;在不同样品来源间的带型p31(χ2=14.662,P=0.023)、p55(χ2=18.594,P=0.005)出现率差异有统计学意义。结论乐山市HIV感染处于快速增长期,通过HIV-1抗体WESTERN BLOT带型分布在不同性别、不同年龄、不同人群中的带型分析,可对乐山市今后HIV感染者病原检测、诊断、传播源的追踪以及治疗提供有力的依据。(本文来源于《现代预防医学》期刊2015年18期）
任向波,吴秀丽,李芬[9]（2015）在《不同裂解液对血管蛋白提取和磷酸化蛋白免疫印迹的影响》一文中研究指出为寻找一种适合血管组织蛋白提取的裂解液配方以及用于磷酸化蛋白的免疫印迹分析,运用3种不同的细胞裂解液A,B和C,分别对经预处理的等量猪冠状动脉血管样品进行总蛋白的提取,BCA法测蛋白含量,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对蛋白进行分离,免疫印迹法检测pERK,p-AKT,p-MLC和p-MYPT1 4种磷酸化蛋白表达以比较3种裂解液的裂解效果.结果表明,3种裂解液均可以满足一般免疫印迹分析的要求,其中C液提取的蛋白浓度最低,B液提取的蛋白含量最高,但不适于低含量的小分子磷酸化蛋白p-MLC的检测,A液用于免疫印迹检测大、中、小3种分子量的磷酸化蛋白效果最佳.即细胞裂解液A(50mmol·L-1 pH 7.4Tris-HCl,150mmol·L-1 NaCl,0.1%SDS,1%NP-40,1mmol·L-1 EDTA,1mmol·L-1 EGTA,临用前加入蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂)可作为提取血管组织总蛋白进一步用于Western检测的一种理想配方.(本文来源于《河南师范大学学报(自然科学版)》期刊2015年05期）
郑和平,覃晓琳,黄进梅,薛耀华,白顺[10]（2015）在《免疫印迹法测定Tp47蛋白与梅毒患者血清的免疫反应性》一文中研究指出目的克隆Tp47基因、构建原核表达载体、表达并纯化Tp47蛋白,通过免疫印迹法(Western-Blot)检测其免疫反应活性。方法聚合酶链反应扩增Tp47基因,将Tp47克隆至pGEX-6P-1载体,构建重组表达质粒pGEX-6P1-Tp47,经测序鉴定正确后,转化大肠埃希菌BL21(DE3),经诱导表达后,用亲和层析方法纯化重组蛋白,鉴定正确后采用Western-Blot检测重组蛋白与梅毒阴性、阳性血清的免疫反应性。结果成功构建pGEX-6P1-Tp47原核表达质粒,表达、纯化后获得了相对分子质量约为71×103的重组蛋白;Western-Blot检测显示其能与梅毒阳性患者血清发生特异性反应,而与梅毒阴性患者血清无交叉反应性。结论成功克隆、表达、纯化Tp47重组蛋白,其与临床各期梅毒患者血清具有较好的免疫反应性,为Tp47重组蛋白用于梅毒早期诊断提供了理论依据。(本文来源于《国际检验医学杂志》期刊2015年10期）
蛋白免疫印迹法论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
[目的]探讨曝光时间、洗脱时间等参数对蛋白免疫印迹法结果的影响。[方法]通过测量灰度值,比较不同曝光时间(6 s和21 s)、洗脱时间(30 min和8 h)以及图像处理软件(Image J和Imagequant TL)对蛋白免疫印迹法结果的影响。[结果]上样量比值为2∶1的蛋白曝光6 s的灰度值读数分别为14766±724和7171±577(n=3),均数比值为2. 1∶1。延长曝光至21 s后相同样品灰度值分别为14932±1198和11994±616(n=3),均数比值减小为1. 2∶1;洗脱30 min和8 h后的曝光结果相比,上样量为1. 64μg蛋白灰度值分别为23713±1895和22892±571(n=3),差异无统计学意义; Image J和Imagequant TL两种软件对倍比梯度上样的蛋白样品读值,比值分别为1∶0. 56∶0. 41∶0. 22和1∶0. 59∶0. 40∶0. 15;对两组读值进行直线回归分析,可得斜率分别为0. 13和0. 14,提示两组读值趋势一致。[结论]曝光时间对蛋白免疫印迹法结果有明显影响,高丰度蛋白需要低曝光时间,才能保持确切的倍比关系;洗脱时间超过30 min对蛋白免疫印迹法灰度值结果没有直接影响;不同图像处理软件对灰度值结果分析趋势一致。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
蛋白免疫印迹法论文参考文献
[1].周萌,柴晓利.施氏假单胞菌胞内NapA/NapB蛋白的多克隆抗体制备及蛋白免疫印迹分析[J].山东化工.2019
[2].卢进,周东东,杨永清,尹磊淼.不同参数对蛋白免疫印迹法结果的影响[J].生物技术.2019
[3].程珊,汪波,肖凌,聂晶,郑健.基于蛋白免疫印迹的水蛭抗凝活性成分研究[J].世界科学技术-中医药现代化.2019
[4].申婷婷,杨举,王宫,张晓亮,何根林.基于免疫印迹定量分析的总蛋白提取方法比较[J].生物技术.2018
[5].吴琼,杨友辉,杨健,薛维娜,李勇军.大鼠肝组织中P-糖蛋白的免疫印迹检测方法[J].贵州医药.2018
[6].韩晓杰,段婷婷,庞雨,徐玉东,王宇.Westernblot免疫印迹法检测磷酸化蛋白表达条件优化研究[J].现代生物医学进展.2017
[7].陈彩萍,冯志奇,宋壮,陈超,温小安.蛋白免疫印迹法同时检测大、小分子蛋白的实验条件改进[J].现代生物医学进展.2016
[8].刘昕亮,牟怀德,徐蓉芳.2007-2012年乐山地区HIV-1抗体阳性标本蛋白免疫印迹带型分析[J].现代预防医学.2015
[9].任向波,吴秀丽,李芬.不同裂解液对血管蛋白提取和磷酸化蛋白免疫印迹的影响[J].河南师范大学学报(自然科学版).2015
[10].郑和平,覃晓琳,黄进梅,薛耀华,白顺.免疫印迹法测定Tp47蛋白与梅毒患者血清的免疫反应性[J].国际检验医学杂志.2015