混合培养体系论文-魏伟,许超,叶志勇,黄晓君,袁嘉恩

混合培养体系论文-魏伟,许超,叶志勇,黄晓君,袁嘉恩

导读:本文包含了混合培养体系论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:造血干,祖细胞,间充质干细胞,共培养

混合培养体系论文文献综述

魏伟,许超,叶志勇,黄晓君,袁嘉恩[1](2016)在《混合培养体系中间充质干细胞与造血干细胞生物学特性》一文中研究指出为了体外同时获得符合鉴定标准的造血干/祖细胞(hematopoietic stem/progenitor cell,HSC/HPC)和间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC),本研究采用Ficoll淋巴细胞分离液方法从脐带血中分离出脐带血单个核细胞,MACS免疫磁珠法分离出CD34~+的造血干细胞。分离出的细胞与MSC同时接种在培养瓶中,利用15%AB型脐血浆的IMDM培养基添加白细胞介素3(interleukin-3,IL-3)、IL-6、血小板生成素(thrombopoietin,TPO)、干细胞因子(stem cell factor,SCF)和Flt-3配体(FMSlike tyrosine kinase 3 ligand,Flt-3L)因子培养体系来同时培养扩增HSC/HPC和MSC。为了评估扩增出的HSC/HPC和MSC是否符合细胞鉴定标准,本研究通过倒置显微镜观察HSC/HPC和MSC生长状态,并计数细胞。流式细胞仪检测HSC/HPC表面抗原CD34阳性百分率,检测第4代(P4)MSC表面抗原CD105、CD90、CD73、CD45、CD34和HLA-DR阳性表达率。半固体集落培养检测HSC/HPC的粒细胞-巨噬细胞集落形成能力。将共培养至P4的MSC行成骨、成软骨、成脂肪诱导鉴定。通过秋水仙素法进行MSC核型分析。结果显示,体外共培养的HSC/HPC依然有高增殖能力、集落形成能力和CD34阳性百分率。MSC具有向成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞诱导分化的能力。MSC染色体核型维持稳定。以上结果提示本研究成功建立了一种合适的MSC和HSC/HPC混合培养体系,通过该体系可同时获得两种干细胞,共培养后的MSC依然有典型的MSC的生物学功能;共培养后的HSC/HPC的粒细胞-巨噬细胞集落培养、细胞数量和流式表型符合鉴定标准,HSC/HPC生物学功能没有受到影响。(本文来源于《生理学报》期刊2016年05期)

木合依扎·热很别克,邵伟,赵艳坤,余雄[2](2016)在《奶山羊乳腺上皮细胞与骨髓间充质干细胞混合培养下最适共培养体系的建立》一文中研究指出【目的】研究乳腺上皮细胞与骨髓间充质干细胞混合培养促进细胞增殖作用的机制,提高奶山羊乳腺上皮增殖水平。【方法】采用分离培养的1月龄健康萨能奶山羊乳腺上皮细胞和骨髓间充质干细胞,分别设乳腺上皮细胞单纯培养组和不同比例的乳腺上皮细胞与骨髓间充质干细胞混合培养组,培养24、48、72、96、120和168 h时观察各组细胞的生长状态并检测细胞增殖率和贴壁率。【结果】混合培养组增值率和贴壁率比单纯培养组高,且细胞扁平时间晚于单纯培养组,混合培养体系可促进BMEC的增殖,减缓细胞凋亡。当BMEC与BMSCs以2∶1的比例混合培养到96 h时细胞的增值率和贴壁率最高。【结论】奶山羊乳腺上皮细胞和骨髓间充质干细胞共培养体系能够减缓乳腺上皮细胞的凋亡,促进乳腺上皮细胞增殖,提高细胞贴壁率。最佳共培养浓度为2∶1,最佳作用时间为96 h。(本文来源于《新疆农业科学》期刊2016年10期)

魏伟,许超,叶志勇,黄晓君,袁嘉恩[3](2016)在《混合培养体系中间充质干细胞与造血干细胞生物学特性》一文中研究指出为了体外同时获得符合鉴定标准的造血干/祖细胞(hematopoietic stem/progenitor cell,HSC/HPC)和间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC),本研究采用Ficoll淋巴细胞分离液方法从脐带血中分离出脐带血单个核细胞,MACS免疫磁珠法分离出CD34~+的造血干细胞。分离出的细胞与MSC同时接种在培养瓶中,利用15%AB型脐血浆的IMDM培养基添加白细胞介素3(interleukin-3,IL-3)、IL-6、血小板生成素(thrombopoietin,TPO)、干细胞因子(stem cell factor,SCF)和Flt-3配体(FMSlike tyrosine kinase 3 ligand,Flt-3L)因子培养体系来同时培养扩增HSC/HPC和MSC。为了评估扩增出的HSC/HPC和MSC是否符合细胞鉴定标准,本研究通过倒置显微镜观察HSC/HPC和MSC生长状态,并计数细胞。流式细胞仪检测HSC/HPC表面抗原CD34阳性百分率,检测第4代(P4)MSC表面抗原CD105、CD90、CD73、CD45、CD34和HLA-DR阳性表达率。半固体集落培养检测HSC/HPC的粒细胞-巨噬细胞集落形成能力。将共培养至P4的MSC行成骨、成软骨、成脂肪诱导鉴定。通过秋水仙素法进行MSC核型分析。结果显示,体外共培养的HSC/HPC依然有高增殖能力、集落形成能力和CD34阳性百分率。MSC具有向成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞诱导分化的能力。MSC染色体核型维持稳定。以上结果提示本研究成功建立了一种合适的MSC和HSC/HPC混合培养体系,通过该体系可同时获得两种干细胞,共培养后的MSC依然有典型的MSC的生物学功能;共培养后的HSC/HPC的粒细胞-巨噬细胞集落培养、细胞数量和流式表型符合鉴定标准,HSC/HPC生物学功能没有受到影响。(本文来源于《《生理学报》第68卷第5期——庆祝中国生理学会成立90周年专辑(续)》期刊2016-10-01)

陈锐[4](2016)在《丙丁梭菌/酿酒酵母混合培养同时外添乙酸的ABE发酵体系强化丙酮生物合成》一文中研究指出丙酮-丁醇-乙醇发酵(简称ABE发酵),其产品是丙酮(A)、丁醇(B)和乙醇(E)的溶剂混合物,摩尔比约为3:6:1。丙酮和丁醇都是重要的平台化合物和高效液态燃料或添加剂。目前,丙酮生产几乎全部依赖使用化石原料进行,ABE发酵的研究主流就是提高丁醇产量或提高丁醇占总溶剂的产品比例(丁醇/丙酮比),丙酮生物合成基本不受重视。但是,ABE发酵的经济性和实用性依赖于将丙酮作为重要平台化合物和高效燃料进行评价,因此,强化丙酮生物合成可以作为改善ABE发酵性能的重要切入点。本论文旨在维持丁醇浓度的同时,强化丙酮的生物合成、提高其发酵浓度,研究丙丁梭菌/酿酒酵母混合培养同时外添乙酸的发酵策略改善ABE发酵性能的理论机理和可行性。主要研究内容和结论如下:(1)在ABE发酵产溶剂期、外添少量乙酸能降低丙酮丁醇梭菌胞内的NADH再生速度、使较多碳流走向不依存NADH的丙酮合成途径;促进有益于细胞生存和丁醇合成的氨基酸在在梭菌胞内的积累。丙酮浓度、丁醇浓度和丙酮/丁醇比分别达到7.34g·L-1、12.18 g·L-1和0.6。与传统发酵(对照)相比,丙酮浓度和丙酮/丁醇比分别提高了25%和20%,丁醇浓度基本不变。(2)研究了丙丁梭菌/酿酒酵母混合培养同时外添少量乙酸(4 g·L-broth-1)的ABE发酵体系改善ABE发酵性能的机制机理。研究发现,该ABE发酵体系,强化了梭菌对葡萄糖的利用能力;可以将梭菌胞内的NADH再生速率控制在较为适中的低水平,缓解了细胞的能量周转负荷,在不影响丁醇合成的同时、使更多碳流走向丙酮合成途径;也可以增强有益氨基酸在梭菌胞内的积累、提高梭菌对高丁醇浓度环境的耐受力。在7 L厌氧发酵罐中实施该发酵策略,最终丙酮和丁醇浓度可以同时达到8.27 g·L-1和13.91g·L-1的较高水平,比对照提高41%和20%。(3)研究了降低培养基初始葡萄糖浓度,当ABE发酵进入产溶剂期、限制葡萄糖浓度,在葡萄糖/乙酸双底物条件下、实施上述发酵策略进一步提高丙酮浓度和丙酮/丁醇比的可行性。当合成乙酸的总添加量达到10 g·L-1时,丙酮浓度、丁醇浓度和丙酮/丁醇比分别达到9.28 g·L-1、13.44 g·L-1和0.69,丙酮浓度和丙酮/丁醇比进一步得到提升。(4)研究了使用乙酸发酵上清液代替合成乙酸、降低ABE发酵成本的可行性。在混菌培养中添加总量8 g·L-broth-1的乙酸发酵上清液进行ABE发酵,丙酮浓度、丁醇浓度和丙酮/丁醇比分别达到8.55 g·L-1、14.23 g·L-1和0.6,与对照相比、增幅达到46%、22%和20%。结果表明,使用乙酸发酵液也能改善提高ABE发酵性能。(本文来源于《江南大学》期刊2016-06-01)

王志雄,张俊利,缪伟伟[5](2016)在《超临界提取的桑叶液对与乳腺肿瘤细胞混合培养体系中内皮细胞的影响》一文中研究指出目的研究桑叶液对与乳腺癌肿瘤细胞(MDA-MB-231)共培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC-2C)增殖、迁移、凋亡及其分子表达的影响。方法用Transwell建立与肿瘤细胞共培养HUVEC-2C模型,实验分为单独培养HUVEC-2C组,细胞共培养组和添加高、中、低剂量桑叶液实验组,利用CCK-8细胞活性检测试剂盒检测与肿瘤共培养的HUVEC-2C的增殖情况;用24孔transwell迁移小板培养观察HUVEC-2C与肿瘤共培养的情况下,HUVEC-2C的迁移情况,实验组分为共培养组和高剂量组;通过流式细胞仪检测与肿瘤细胞共培养的HUVEC-2C凋亡状况;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测共培养体系中血管内皮生长因子(VEGF)分泌影响,实验分为共培养组和高、中、低剂量实验组。结果桑叶液对HUVEC-2C的增殖具有抑制作用,并随着桑叶液浓度的增加而抑制能力增强,在桑叶液浓度为0.1、0.05、0.025g/m L时,与共培养组相比较均具有统计学意义(P<0.05),当桑叶液浓度为0.1g/m L时,其对HUVEC-2C增殖抑制率较为明显;通过观察Transwell小室,并与共培养组相比较,添加了桑叶液的HUVEC-2C的迁移受到了一定的制约;流式细胞仪(FCM)检测到桑叶液能够促进HUVEC-2C凋亡;且能够抑制共培养体系中的VEGF的表达。结论桑叶能够抑制与肿瘤细胞共培养的HUVEC-2C的增殖、迁移以及促进HUVEC-2C的凋亡,达到抑制肿瘤血管生成的目的,其机制可能与抑制VEGF的表达有关。(本文来源于《北京中医药大学学报》期刊2016年04期)

闫鹏,郑瑾[6](2015)在《ADDLs对神经元混合培养体系Notch-1信号通路及HIF-1α的影响》一文中研究指出目的探讨Aβ寡聚体(ADDLs)对原代培养小鼠皮层神经元及星形胶质细胞混合培养体系Notch-1信号转导及HIF-1α蛋白表达的影响。方法在原代培养小鼠皮层神经元及星形胶质细胞混合培养体系的基础之上,应用CCK-8法观察Aβ寡聚体对混合培养体系细胞活力的影响,并应用免疫印迹的方法检测Aβ寡聚体对混合培养体系的NICD及HIF-1α水平的影响。另外应用qPCR的方法检测凋亡相关caspase-3(本文来源于《中华医学会第十八次全国神经病学学术会议论文汇编(下)》期刊2015-09-18)

闫鹏,乔娴,孙圣刚,刘金玲,郑瑾[7](2014)在《ADDLs对原代培养小鼠皮层神经元及星形胶质细胞混合培养体系Notch-1信号转导及HIF-1α表达的影响》一文中研究指出目的探讨Aβ寡聚体(ADDLs)对原代培养小鼠皮层神经元及星形胶质细胞混合培养体系Notch-1信号转导及HIF-1α蛋白表达的影响。方法在原代培养小鼠皮层神经元及星形胶质细胞混合培养体系的基础之上应用CCK-8法观察Aβ寡聚体对混合培养体系细胞活力的影响,并应用免疫印迹的方法检测Aβ寡聚体对混合培养体系的NICD及HIF-1α水平的影响。另外,应用qPCR的方法检测凋亡相关caspase-3mRNA水平。结果 Aβ寡聚体干预浓度在高于2μM的情况下可使混合培养体系细胞活力水平明显降低,并呈现浓度依赖。10μM的ADDLs明显升高了原代混合培养体系的NICD及HIF-1α蛋白表达水平,且均呈现出相对的时间依赖性,同时这两种蛋白表达水平的变化表现出基本一致的趋势。同时,10μM的ADDLs明显上调了混合体系的caspase-3 mRNA水平。结论 Aβ寡聚对原代培养小鼠皮层神经元及星形胶质细胞混合培养体系的毒性作用与上调NICD及HIF-1α表达水平密切相关。(本文来源于《卒中与神经疾病》期刊2014年02期)

张金平,阚振荣,苏维[8](2011)在《混合培养体系对实际染料废水的脱色与降解研究》一文中研究指出[目的]研究混合培养体系对染料废水的脱色和降解条件,为印染工业废水的大规模生物处理奠定基础。[方法]利用4株丝状真菌和4株细菌组建一真菌细菌混合培养体系,考察了该混合培养体系在不同条件下对2种染料废水的脱色与降解效果。[结果]2种废水在中和预处理使pH在6.0左右后,真菌与细菌以2∶1同时接种效果较好,通氧有利于脱色与降解,处理时间因水质而异。对深蓝废水12 h脱色率和降解率分别达到98.36%和92.70%;对难于脱色的中红废水24 h脱色率和降解率分别达到87.22%和82.98%。通过全波长扫描图谱,证明了大部分染料被降解。[结论]通过研究确定了该混合培养体系对染料废水脱色和降解的最佳条件。(本文来源于《安徽农业科学》期刊2011年18期)

张金平,阚振荣,苏维[9](2008)在《混合培养体系对染料的脱色和降解条件研究》一文中研究指出目的:探讨混合培养体系对染料的脱色和降解的条件,为实际应用奠定一定基础。方法:利用4株细菌和4株丝状真菌组建了一真菌细菌混合物培养体系,考察了该混合培养体系对各单一依染料的脱色与降解情况,初步研究了其对混合染料脱色与降解的工艺条件,包括接种比例、处理时间、氧气供应、接种顺序等。结果:真菌与细菌同时接种,且接种比例为2:1,振荡培养到3h就达到很高的脱色率和降解率,12h时脱色率和降解率分别达到98.36%和89.89%;而且该混合培养体系对高浓度染料有较强的耐受性,在染料浓度高达320 mg/L时,脱色率和降解率仍高达97.03%和74.03%。结论:得到了该混合培养体系对染料脱色和降解的最佳工艺条件。(本文来源于《生物技术》期刊2008年01期)

董庆霖,赵学明[10](2006)在《雨生红球藻和红发夫酵母混合培养体系的氮代谢机理》一文中研究指出雨生红球藻和红发夫酵母是自然界申能够大量合成虾青素的两种主要微生物,二者混合培养比单独培养能提高虾青素的产量,氮代谢是影响虾青素合成的关键因素之一.为此,着重研究了雨生红球藻单独培养及混合培养过程中的氮代谢机理.结果表明,在强光照射诱导雨生红球藻合成虾青素的过程中,藻细胞迅速吸收硝酸盐并向胞外分泌NH_4~+,培养液中的NH_4~+浓度上升,同时值pH值也急剧升高.由于NH_4~+对藻细胞有毒害作用,抑制了虾青素的进一步合成.而在混合培养过程中,即使在虾青素大量合成阶段,培养液中的NH_4~+浓度也基本稳定.进一步的分析结果表明,红发夫酵母细胞吸收利用了雨生红球藻细胞代谢过程中产生的NH_4~+,培养液的pH值基本稳定7.0左右,从而使藻细胞内流向虾青素合成方向的碳代谢流始终保持较高的通量,提高了虾青素产量.(本文来源于《天津大学学报》期刊2006年S1期)

混合培养体系论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

【目的】研究乳腺上皮细胞与骨髓间充质干细胞混合培养促进细胞增殖作用的机制,提高奶山羊乳腺上皮增殖水平。【方法】采用分离培养的1月龄健康萨能奶山羊乳腺上皮细胞和骨髓间充质干细胞,分别设乳腺上皮细胞单纯培养组和不同比例的乳腺上皮细胞与骨髓间充质干细胞混合培养组,培养24、48、72、96、120和168 h时观察各组细胞的生长状态并检测细胞增殖率和贴壁率。【结果】混合培养组增值率和贴壁率比单纯培养组高,且细胞扁平时间晚于单纯培养组,混合培养体系可促进BMEC的增殖,减缓细胞凋亡。当BMEC与BMSCs以2∶1的比例混合培养到96 h时细胞的增值率和贴壁率最高。【结论】奶山羊乳腺上皮细胞和骨髓间充质干细胞共培养体系能够减缓乳腺上皮细胞的凋亡,促进乳腺上皮细胞增殖,提高细胞贴壁率。最佳共培养浓度为2∶1,最佳作用时间为96 h。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

混合培养体系论文参考文献

[1].魏伟,许超,叶志勇,黄晓君,袁嘉恩.混合培养体系中间充质干细胞与造血干细胞生物学特性[J].生理学报.2016

[2].木合依扎·热很别克,邵伟,赵艳坤,余雄.奶山羊乳腺上皮细胞与骨髓间充质干细胞混合培养下最适共培养体系的建立[J].新疆农业科学.2016

[3].魏伟,许超,叶志勇,黄晓君,袁嘉恩.混合培养体系中间充质干细胞与造血干细胞生物学特性[C].《生理学报》第68卷第5期——庆祝中国生理学会成立90周年专辑(续).2016

[4].陈锐.丙丁梭菌/酿酒酵母混合培养同时外添乙酸的ABE发酵体系强化丙酮生物合成[D].江南大学.2016

[5].王志雄,张俊利,缪伟伟.超临界提取的桑叶液对与乳腺肿瘤细胞混合培养体系中内皮细胞的影响[J].北京中医药大学学报.2016

[6].闫鹏,郑瑾.ADDLs对神经元混合培养体系Notch-1信号通路及HIF-1α的影响[C].中华医学会第十八次全国神经病学学术会议论文汇编(下).2015

[7].闫鹏,乔娴,孙圣刚,刘金玲,郑瑾.ADDLs对原代培养小鼠皮层神经元及星形胶质细胞混合培养体系Notch-1信号转导及HIF-1α表达的影响[J].卒中与神经疾病.2014

[8].张金平,阚振荣,苏维.混合培养体系对实际染料废水的脱色与降解研究[J].安徽农业科学.2011

[9].张金平,阚振荣,苏维.混合培养体系对染料的脱色和降解条件研究[J].生物技术.2008

[10].董庆霖,赵学明.雨生红球藻和红发夫酵母混合培养体系的氮代谢机理[J].天津大学学报.2006

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