林婧楠:鲤春病毒血症病毒截短糖蛋白的原核表达及抗体制备论文

林婧楠:鲤春病毒血症病毒截短糖蛋白的原核表达及抗体制备论文

本文主要研究内容

作者林婧楠,赵景壮,徐黎明,刘淼,任广明,卢彤岩(2019)在《鲤春病毒血症病毒截短糖蛋白的原核表达及抗体制备》一文中研究指出:以鲤春病毒血症病毒(Spring Virernia of Carp Virus,SVCV)shlj1分离株基因组RNA为模板,利用RT-PCR扩增获得SVCV糖蛋白(Glycoprotein,G)部分基因序列(420 bp),克隆至pET-32a原核表达载体,构建重组质粒pET-32a-G;将重组质粒转入大肠杆菌Rosetta表达菌株,利用SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)对截短G蛋白的表达及纯化情况进行检测;将纯化的G蛋白免疫小鼠制备鼠抗血清,采用酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和细胞间接免疫荧光抗体试验(Indirect fluorescent antibody test,IFAT)对抗血清进行鉴定。SDS-PAGE结果显示该重组截短G蛋白与预期大小相符(约为35 kDa),以包涵体的形式表达;ELISA结果显示,制备的鼠抗截短G蛋白血清效价为1∶80 000;IFAT结果显示,抗血清能够识别不同地区的SVCV分离株(黑龙江省3株,辽宁省2株),在FITC标记的羊抗鼠IgG作用下,呈特异性绿色荧光。结果表明,制备的截短SVCV G蛋白具有良好的免疫原性,利用其所制备的抗体能够识别我国不同SVCV分离株病毒表面天然结构的糖蛋白。

Abstract

yi li chun bing du xie zheng bing du (Spring Virernia of Carp Virus,SVCV)shlj1fen li zhu ji yin zu RNAwei mo ban ,li yong RT-PCRkuo zeng huo de SVCVtang dan bai (Glycoprotein,G)bu fen ji yin xu lie (420 bp),ke long zhi pET-32ayuan he biao da zai ti ,gou jian chong zu zhi li pET-32a-G;jiang chong zu zhi li zhuai ru da chang gan jun Rosettabiao da jun zhu ,li yong SDS-ju bing xi xian an ning jiao dian yong (SDS-PAGE)dui jie duan Gdan bai de biao da ji chun hua qing kuang jin hang jian ce ;jiang chun hua de Gdan bai mian yi xiao shu zhi bei shu kang xie qing ,cai yong mei lian mian yi xi fu (enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)he xi bao jian jie mian yi ying guang kang ti shi yan (Indirect fluorescent antibody test,IFAT)dui kang xie qing jin hang jian ding 。SDS-PAGEjie guo xian shi gai chong zu jie duan Gdan bai yu yu ji da xiao xiang fu (yao wei 35 kDa),yi bao han ti de xing shi biao da ;ELISAjie guo xian shi ,zhi bei de shu kang jie duan Gdan bai xie qing xiao jia wei 1∶80 000;IFATjie guo xian shi ,kang xie qing neng gou shi bie bu tong de ou de SVCVfen li zhu (hei long jiang sheng 3zhu ,liao ning sheng 2zhu ),zai FITCbiao ji de yang kang shu IgGzuo yong xia ,cheng te yi xing lu se ying guang 。jie guo biao ming ,zhi bei de jie duan SVCV Gdan bai ju you liang hao de mian yi yuan xing ,li yong ji suo zhi bei de kang ti neng gou shi bie wo guo bu tong SVCVfen li zhu bing du biao mian tian ran jie gou de tang dan bai 。

论文参考文献

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自淡水渔业的林婧楠,赵景壮,徐黎明,刘淼,任广明,卢彤岩,发表于刊物淡水渔业2019年05期论文,是一篇关于鲤春病毒血症病毒论文,糖蛋白论文,抗血清制备论文,细胞免疫荧光论文,淡水渔业2019年05期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自淡水渔业2019年05期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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