导读:本文包含了酪蛋白基因座论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:A2牛乳,β-酪蛋白,基因变异,β-酪啡肽-7(BCM-7)
酪蛋白基因座论文文献综述
陈龙,付王艳,方琼燕,唐果,刘论[1]（2019）在《牛乳中β-酪蛋白基因分型及β-酪啡肽-7的研究进展》一文中研究指出牛乳营养丰富,乳蛋白是牛乳中最有营养价值的成分。β-酪蛋白约占乳蛋白总量的30%,A1和A2是β-酪蛋白最常见的两种类型,其中A1型为突变型。β-酪蛋白基因多态性是受常染色体上共显性基因所控制的,可通过蛋白水平或分子水平进行检测。A1型β-酪蛋白在人体内消化酶解后可产生多种特定的氨基酸残基片段,其中β-酪啡肽-7(β-casomorphin-7,BCM-7)是具有阿片活性的七肽物质,推测其可能与1型糖尿病、心血管疾病、自闭症、精神分裂症、消化功能紊乱等人体慢性非传染性疾病的发生有密切联系。本文从β-酪蛋白基因变异和分型方法、BCM-7的生成机制及其对人体健康潜在影响等方面进行了综述,为未来β-酪蛋白和A2型牛乳在乳制品行业的研究开发提供一定参考。(本文来源于《中国乳品工业》期刊2019年08期）
陈雅婷[2]（2019）在《西农萨能奶山羊乳腺α-S1-酪蛋白基因功能的初步研究》一文中研究指出αs1-酪蛋白(Alpha S1 Casein,CSN1S1)是乳蛋白中一种重要的蛋白质,可以为动物体的生长发育提供活性肽、必需氨基酸等营养物质,也能够调节乳腺上皮细胞等多种细胞的生理状态及功能。因此,探究αs1-酪蛋白基因对奶山羊乳蛋白合成的调控作用有极其重要的意义。本研究通过克隆得到奶山羊CSN1S1基因的CDS区,并构建了CSN1S1基因重组腺病毒过表达载体,同时在线设计并合成靶向CSN1S1基因的特异性siRNA。在山羊乳腺上皮细胞中分别对CSN1S1基因进行过表达和干扰,通过RT-qPCR和Western Blot等方法检测乳蛋白相关基因表达量及部分乳蛋白表达量的变化,为进一步明确αs1-酪蛋白基因在乳蛋白合成中的功能奠定一定的理论基础。以下为本研究主要结果:1.采集泌乳盛期西农萨能奶山羊乳腺组织,提取总RNA,根据GenBank中收录的Capra hircus的CSN1S1基因序列(KT253650.1)来设计引物,利用RT-PCR技术克隆得到山羊CSN1S1基因CDS序列,其长度为642bp,编码213个氨基酸。生物信息学分析得出,山羊CSN1S1基因CDS区序列与Ovis aries(FJ440845.1)、Bos taurus(EU908730.1)、Mus musculus(AF275367.1)、Sus scrofa(NM_001004029.2)、Homo sapiens(NM_001890.2)的同源性分别为:98.91%、97.83%、84.87%、92.52%以及85.69%。2.构建含目的基因的同源重组质粒pAdEasy-CSN1S1,转染293A细胞,感染扩增四代得到高滴度腺病毒,滴度为10~8 U/mL。通过不同体积的病毒液感染山羊乳腺上皮细胞,确定病毒最佳感染复数(MOI)为200。病毒感染山羊乳腺上皮细胞48 h后收集细胞总RNA或总蛋白,RT-qPCR结果显示,CSN1S1基因表达量显着上调(P<0.01),CSN2基因表达显着下调(P<0.05),CSN1S2、CSN3、LALBA、BLG的表达水平无显着变化;Western blot结果显示,过表达CSN1S1基因后,αs1-酪蛋白表达量显着升高(P<0.05),β-酪蛋白表达量显着下降(P<0.05),αs2-酪蛋白、κ-酪蛋白及β-乳球蛋白表达水平无显着变化。3.根据CSN1S1基因CDS区序列,设计靶向CSN1S1基因的特异性siRNA,并转染山羊乳腺上皮细胞,筛选得到干扰效率最佳的siR-507(P<0.01)。干扰CSN1S1基因后,RT-qPCR结果显示,CSN2基因表达水平显着上调(P<0.05),CSN1S2、CSN3、LALBA、BLG基因的mRNA水平无显着变化;Western blot结果显示,αs1-酪蛋白表达量被抑制(P<0.05);β-酪蛋白表达水平显着上调(P<0.05),αs2-酪蛋白、κ-酪蛋白及β-乳球蛋白的表达无明显变化。综上所述,本研究成功克隆得到了奶山羊αs1-酪蛋白基因的CDS区,构建了腺病毒过表达载体,并感染山羊乳腺上皮细胞以过表达CSN1S1基因,可导致CSN2基因的mRNA表达水平及蛋白表达显着下调,干扰αs1-酪蛋白基因能够显着上调CSN2基因及β-酪蛋白表达。本研究为明确CSN1S1基因在西农萨能奶山羊乳腺细胞乳蛋白合成中的调控作用提供理论依据。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2019-04-01）
杜倩男,黄林,金素钰,罗卉卉,周凡莉[3]（2019）在《用PCR-SSCP方法大规模检测九龙牦牛公牛β-酪蛋白基因型的研究》一文中研究指出为了大规模检测β-酪蛋白(β-CN)的不同遗传变异体,试验用Chelex 100树脂从九龙牦牛公牛(n=102)肉中快速提取基因组DNA,用巢式PCR特异性扩增β-CN基因(CSN2)部分片段,并对九龙牦牛公牛CSN2基因型进行单链构象多态性(SSCP)分析和测序验证。结果表明:九龙牦牛公牛中CSN2基因的A1A1、A1A2和A2A2的基因型频率分别为0.069,0.098,0.833,A2A2型(n=85)占绝对优势;A1和A2等位基因频率分别为0.132和0.868。说明PCR-SSCP方法可靠,能大规模检测九龙牦牛β-CN的基因型。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2019年04期）
王会,柴志欣,钟金城,朱江江,张成福[4]（2019）在《牦牛酪蛋白基因家族的克隆及组织表达分析》一文中研究指出本研究旨在克隆牦牛酪蛋白基因家族(CSN1S1、CSN1S2、CSN2和CSN3)的CDS区序列,鉴定其在牦牛不同组织中的表达水平。选取4岁龄左右处于泌乳期的健康类乌齐母牦牛3头,屠宰后分别采集乳腺、心脏、肝脏、骨骼肌组织,分别提取组织总RNA并反转录为cDNA,设计酪蛋白基因家族特异性引物扩增酪蛋白基因家族序列,进行生物信息学分析,并利用实时荧光定量PCR法分别检测酪蛋白家族基因mRNA水平。结果显示,克隆得到CSN1S1、CSN1S2、CSN2和CSN3基因cDNA序列分别为919、832、805和715bp,其CDS区全长分别为645、669、690和585bp,分别编码214、222、259和194个氨基酸残基。类乌齐牦牛酪蛋白基因家族与黄牛亲缘关系最近,其次是印度水牛,而与单胃动物猪的亲缘关系最远。组织表达结果显示,酪蛋白基因家族在组织中广泛表达,其中在乳腺组织中的表达量最高,其次是骨骼肌组织。在乳腺组织中CSN1S1、CSN1S2、CSN2基因之间表达量差异不显着(P>0.05),但CSN2基因表达量显着高于CSN3基因(P<0.05)。以上结果为酪蛋白基因家族在牦牛乳腺蛋白质代谢调控机制的研究提供了参考依据。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2019年01期）
王英杰[5]（2016）在《牦牛α_(s1)-酪蛋白与α_(s2)-酪蛋白基因的多态性分析》一文中研究指出牦牛乳中酪蛋白具有极高的营养价值,αs1-酪蛋白和αs2-酪蛋白是酪蛋白的主要组成成分。哺乳动物αs1-酪蛋白(CSN1S1)和αs2-酪蛋白(CSN1S2)基因普遍存在遗传多样性,并与动物群体分化和地域分布密切相关。迄今为止,对于荷斯坦奶牛和黄牛CSN1S1和CSN1S2基因的多态性研究较多,而牦牛CSN1S1和CSN1S2基因DNA水平多态研究较少。为了揭示牦牛CSN1S1和CSN1S2基因的遗传多样性,本文以4个牦牛品种(大通牦牛、甘南牦牛、天祝白牦牛和帕里牦牛)为研究对象,利用混合DNA池测序的方法检测了牦牛CSN1S1和CSN1S2基因的SNP,并用HRM的方法进行分型,以期探讨CSN1S1和CSN1S2基因在牦牛品种中的遗传多样性,为牦牛乳的开发利用提供科学依据。1.牦牛CSN1S1基因的遗传多样性在4个牦牛品种中共检测出3个SNPs,分别是T14962C、C19638T、C26201A,其中T14962C位于第4外显子区,C19638T位于第9外显子区,C26201A位于第17外显子区。卡方检验表明,在所分析的牦牛品种中,除C19638T位点外,T14962C和C26201A位点均处于哈代-温伯格平衡状态(P>0.05)。在C19638T位点,帕里牦牛处于哈代-温伯格不平衡状态(P<0.05)。遗传多态性指标(PIC、He和Ne)显示,CSN1S1基因的3个SNPs位点在大多数牦牛品种中均处于低度多态。由3个SNPs构建出7种单倍型,其中单倍型CTA的频率在4个牦牛品种中最高。2.牦牛CSN1S2基因的遗传多样性在4个牦牛品种中共检测出2个SNPs,分别是T6150C和G10912A,其中T6150C位于第3外显子区,G10912A位于第11内含子区。卡方检验表明,在所分析的牦牛品种中,在位点T6150C处,天祝白牦牛处于哈代-温伯格不平衡状态(P<0.05)。而在位点G10912A处4个牦牛品种均处于哈代-温伯格平衡状态(P>0.05)。遗传学分析表明,CSN1S2基因的2个SNPs位点在大多数牦牛品种中处于低度多态。由2个SNPs构建出4种单倍型,CG单倍型在所研究的4个牦牛品种中个体数最多。(本文来源于《西北民族大学》期刊2016-05-01）
李辉,刘庆友,石德顺[6]（2016）在《不同来源β-酪蛋白基因启动子调控人IFNα-2b基因的表达效率》一文中研究指出【目的】为获得高启动效率的乳腺特异启动子,对荷斯坦奶牛、娟姗牛和奶水牛的β-酪蛋白基因启动子进行比较研究。【方法】对Genbank中所收录的荷斯坦奶牛、娟姗牛和水牛β-酪蛋白基因启动子序列进行比对分析,按照保守序列分别设计启动子区和3′端ploy A序列引物,同时设计人IFNα-2b基因和EGFP-Neo筛选序列引物并引入预先设计的酶切位点以方便载体构建。采集静脉血液,提取基因组DNA。PCR克隆β-酪蛋白基因启动子区和3′端ploy A区,同时以实验室保存质粒为模板克隆人IFNα-2b基因和EGFP-Neo筛选序列。测序正确后,将各片段按设计顺序依次插入p MD18-T骨架中,构建成p HSTBCNp-IFN,p JSBCNp-IFN和p SNBCNp-IFN乳腺特异表达载体。将各载体转染Bcap-37细胞,经G418筛选出稳定整合的转基因细胞系。用胰岛素(1 mg·L-1),转铁蛋白因子(1 mg·L-1),氢化可的松(1 mg·L-1)和PRL(250IU·L-1)联合对转基因细胞系进行诱导,然后用PCR、Western blotting、QRT-PCR技术和ELISA方法分别在m RNA水平和蛋白质水平检测IFNα-2b的表达。【结果】PCR后获得了荷斯坦奶牛、娟姗牛和水牛β-酪蛋白基因启动子区,长度分别为5 219、5 244和5 216 bp,其中包括了第一外显子,第一内含子和部分第二外显子,部分第二外显子的51个碱基编码17个氨基酸的信号肽序列。克隆了1 166 bp的ploy A区序列。最终将构建的3个乳腺特异表达载体转染Bcap-37细胞并经过G418筛选后,获得了3个转基因细胞系。经激素诱导后,PCR、Western blotting、QRT-PCR和ELISA检测发现3个转基因细胞系都表达了IFNα-2b基因,并且发现娟姗牛β-酪蛋白基因启动子在调控IFNα-2b基因的表达上效率较高,在m RNA水平和蛋白质水平上显着高于其他两个启动子(P<0.05)。【结论】娟姗牛β-酪蛋白基因启动子在调控外源基因表达上具有较高的效率,是具有应用前景的乳腺特异性启动子。所构建的表达载体为IFNα-2b转基因动物乳腺生物反应器的制备奠定基础。(本文来源于《中国农业科学》期刊2016年05期）
薛杰,苗永旺[7]（2015）在《牛科物种β-酪蛋白基因的研究进展》一文中研究指出β-酪蛋白(CSN2)是牛科物种乳中重要的酪蛋白之一,对维持乳的理化特性具有重要作用。论文对普通牛、水牛和山羊的CSN2基因结构与功能、近年发现的变异类型及CSN2基因变异与生产性状的关联进行了综述,并对该基因在研究中存在的问题进行了总结和展望。(本文来源于《家畜生态学报》期刊2015年10期）
屈兵兵,金素钰,蒋忠荣,刘曦,黄林[8]（2015）在《昌台牦牛κ-酪蛋白基因重复片段多态性的快速检测》一文中研究指出分析昌台牦牛κ-酪蛋白基因重复片段多态性.用Chelex-100方法从昌台牦牛(n=100)全乳中提取基因组DNA,利用PCR对κ-酪蛋白基因第四外显子部分片段进行扩增,通过非变性PAGE及银染确定κ-酪蛋白基因重复片段多态性.结果显示昌台牦牛κ-酪蛋白基因重复片段存在A和B两种等位基因,基因频率分别为0.094,0.906,B等位基因包含12 bp的重复片段.AB型个体17个,BB型个体73个.昌台牦牛κ-CN基因重复片段等位基因B为优势等位基因.(本文来源于《西南民族大学学报(自然科学版)》期刊2015年05期）
任皓威,李春,刘宁,顾鑫[9]（2015）在《中国人乳β-酪蛋白基因克隆表达及生物信息学分析》一文中研究指出文献显示:牛β-酪蛋白(CSN2)目前有12种遗传变种,提示人类中也可能存在这种现象。为探究中国人乳β-酪蛋白是否与NCBI数据库中该种蛋白的1级结构具有差异性,验证作者先前对中国人乳β-酪蛋白氨基酸序列的分析,采集正常中国女性乳腺组织,提取总RNA,并以其为模板,通过RT-PCR方法扩增人乳β-酪蛋白的编码区(CDS)基因,连接T载体测序,然后提交至Gen Bank(登录号:KF 751868)。与NCBI上人β-酪蛋白的核苷酸序列比较,所得人乳β-酪蛋白CDS序列同源性达到100%,说明该基因在不同人种间具有高度保守性。由其核苷酸序列及推导的氨基酸序列进行生物信息学分析,结果:理论等电点(p I)5.52,该蛋白质不存在跨膜结构,具有较强的疏水区域。连接重组质粒和PET-30a-GST载体后,转化大肠杆菌BL21(DE3)获得表达菌株,37℃诱导4 h,目标重组蛋白以包涵体形式表达,通过Ni2+-NTA柱纯化重组蛋白,经SDS-PAGE验证,成功构建原核表达载体PET-30a-GST-CSN2,并获得重组人乳β-酪蛋白。这为进一步研究中国人乳β-酪蛋白奠定良好的基础。(本文来源于《中国食品学报》期刊2015年08期）
皮文辉,梁龙,唐红,张译元,郭延华[10]（2014）在《利用TALE-TFs在小鼠成纤维细胞中激活β-酪蛋白基因启动子表达载体》一文中研究指出目的利用TALE-TFs,在小鼠成纤维细胞中激活β-酪蛋白基因启动子,为检测β-酪蛋白基因启动子—目的基因表达框的表达结果,提供一种检测途径。方法将构建的TALE-TFs和β-酪蛋白基因启动子—Red报告基因质粒电转染进入小鼠成纤维细胞,通过荧光显微镜直接观察报告基因表达情况。结果与结论利用TALE人工转录因子,在小鼠成纤维细胞中能够激活β-酪蛋白基因启动子表达框,为替代乳腺上皮细胞表达验证系统提供了新的途径。(本文来源于《中国实验动物学报》期刊2014年05期）
酪蛋白基因座论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
αs1-酪蛋白(Alpha S1 Casein,CSN1S1)是乳蛋白中一种重要的蛋白质,可以为动物体的生长发育提供活性肽、必需氨基酸等营养物质,也能够调节乳腺上皮细胞等多种细胞的生理状态及功能。因此,探究αs1-酪蛋白基因对奶山羊乳蛋白合成的调控作用有极其重要的意义。本研究通过克隆得到奶山羊CSN1S1基因的CDS区,并构建了CSN1S1基因重组腺病毒过表达载体,同时在线设计并合成靶向CSN1S1基因的特异性siRNA。在山羊乳腺上皮细胞中分别对CSN1S1基因进行过表达和干扰,通过RT-qPCR和Western Blot等方法检测乳蛋白相关基因表达量及部分乳蛋白表达量的变化,为进一步明确αs1-酪蛋白基因在乳蛋白合成中的功能奠定一定的理论基础。以下为本研究主要结果:1.采集泌乳盛期西农萨能奶山羊乳腺组织,提取总RNA,根据GenBank中收录的Capra hircus的CSN1S1基因序列(KT253650.1)来设计引物,利用RT-PCR技术克隆得到山羊CSN1S1基因CDS序列,其长度为642bp,编码213个氨基酸。生物信息学分析得出,山羊CSN1S1基因CDS区序列与Ovis aries(FJ440845.1)、Bos taurus(EU908730.1)、Mus musculus(AF275367.1)、Sus scrofa(NM_001004029.2)、Homo sapiens(NM_001890.2)的同源性分别为:98.91%、97.83%、84.87%、92.52%以及85.69%。2.构建含目的基因的同源重组质粒pAdEasy-CSN1S1,转染293A细胞,感染扩增四代得到高滴度腺病毒,滴度为10~8 U/mL。通过不同体积的病毒液感染山羊乳腺上皮细胞,确定病毒最佳感染复数(MOI)为200。病毒感染山羊乳腺上皮细胞48 h后收集细胞总RNA或总蛋白,RT-qPCR结果显示,CSN1S1基因表达量显着上调(P<0.01),CSN2基因表达显着下调(P<0.05),CSN1S2、CSN3、LALBA、BLG的表达水平无显着变化;Western blot结果显示,过表达CSN1S1基因后,αs1-酪蛋白表达量显着升高(P<0.05),β-酪蛋白表达量显着下降(P<0.05),αs2-酪蛋白、κ-酪蛋白及β-乳球蛋白表达水平无显着变化。3.根据CSN1S1基因CDS区序列,设计靶向CSN1S1基因的特异性siRNA,并转染山羊乳腺上皮细胞,筛选得到干扰效率最佳的siR-507(P<0.01)。干扰CSN1S1基因后,RT-qPCR结果显示,CSN2基因表达水平显着上调(P<0.05),CSN1S2、CSN3、LALBA、BLG基因的mRNA水平无显着变化;Western blot结果显示,αs1-酪蛋白表达量被抑制(P<0.05);β-酪蛋白表达水平显着上调(P<0.05),αs2-酪蛋白、κ-酪蛋白及β-乳球蛋白的表达无明显变化。综上所述,本研究成功克隆得到了奶山羊αs1-酪蛋白基因的CDS区,构建了腺病毒过表达载体,并感染山羊乳腺上皮细胞以过表达CSN1S1基因,可导致CSN2基因的mRNA表达水平及蛋白表达显着下调,干扰αs1-酪蛋白基因能够显着上调CSN2基因及β-酪蛋白表达。本研究为明确CSN1S1基因在西农萨能奶山羊乳腺细胞乳蛋白合成中的调控作用提供理论依据。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
酪蛋白基因座论文参考文献
[1].陈龙,付王艳,方琼燕,唐果,刘论.牛乳中β-酪蛋白基因分型及β-酪啡肽-7的研究进展[J].中国乳品工业.2019
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[9].任皓威,李春,刘宁,顾鑫.中国人乳β-酪蛋白基因克隆表达及生物信息学分析[J].中国食品学报.2015
[10].皮文辉,梁龙,唐红,张译元,郭延华.利用TALE-TFs在小鼠成纤维细胞中激活β-酪蛋白基因启动子表达载体[J].中国实验动物学报.2014
标签：A2牛乳; β-酪蛋白; 基因变异; β-酪啡肽-7(BCM-7);