本文主要研究内容
作者何程铖（2019）在《高纯牛血清白蛋白的纯化制备及两种血清蛋白的定值研究》一文中研究指出：牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)是牛血浆中含量最高的蛋白组分,具有清除自由基、抗凝血及维持血浆渗透压和体液平衡等作用。高纯度牛血清白蛋白的纯化制备对临床药物制品质量控制具有重要意义。本文以市售牛血清白蛋白粗品为原料,建立了层析法制备高纯白蛋白产品的纯化工艺,并进行了工艺放大研究,达到克级制备规模;产品进行了冷冻干燥实验,得到高纯度冻干粉;对纯化的牛血清白蛋白及转铁蛋白进行了表征并采用质量平衡法进行了定值分析。论文建立了一步阴离子交换层析纯化工艺,以牛血清白蛋白粗品为原料制备高纯度牛血清白蛋白;考察了pH梯度洗脱方式、进料pH、蛋白浓度及缓冲液组成等影响因素;确定了最优操作条件:蛋白浓度10 mg/mL,pH为A;层析介质为DEAE Sepharose FF;缓冲液采用醋酸盐体系,平衡缓冲液浓度为20 mM,pH为5.2,洗脱缓冲液浓度为20mM,pH为4.6。在最优分离条件下,电泳检测产品纯度达到99.5%,收率为62%。对工艺进行了放大研究,验证了工艺的可行性和重复性,共制备牛血清白蛋白30克,电泳检测纯度大于99%,为推动纯化工艺进行规模制备提供了基础。为解决白蛋白液体制剂的稳定性问题,进行了冻干研究,优化了冻干条件,添加辛酸钠作为保护剂,保证了冻干后白蛋白分子结构的稳定。对牛血清白蛋白以及转铁蛋白(human transferrin,HTF)进行了表征,分别采用圆二色光谱仪、质谱仪对蛋白的二级结构以及分子量进行鉴定;用邻苯三酚自氧化法对牛血清白蛋白的活性进行了检测;利用转铁蛋白可以增强青蒿琥酯(Artesunate,Art)对癌细胞增殖的抑制作用,检测出青蒿琥酯与转铁蛋白联合用药时细胞存活率比单独作用明显降低,表明转铁蛋白结构完整并保持活性;对产品的水分、主成分及灰分进行测定并采取质量平衡法对两种蛋白进行了定值,牛血清白蛋白纯度为96.71%,其中主成分含量99.70%,含水量2.99%,灰分为0.07%;转铁蛋白纯度为91.21%,其中主成分含量95.86%,含水量4.85%,灰分为0.06%。
Abstract
niu xie qing bai dan bai (bovine serum albumin,BSA)shi niu xie jiang zhong han liang zui gao de dan bai zu fen ,ju you qing chu zi you ji 、kang ning xie ji wei chi xie jiang shen tou ya he ti ye ping heng deng zuo yong 。gao chun du niu xie qing bai dan bai de chun hua zhi bei dui lin chuang yao wu zhi pin zhi liang kong zhi ju you chong yao yi yi 。ben wen yi shi shou niu xie qing bai dan bai cu pin wei yuan liao ,jian li le ceng xi fa zhi bei gao chun bai dan bai chan pin de chun hua gong yi ,bing jin hang le gong yi fang da yan jiu ,da dao ke ji zhi bei gui mo ;chan pin jin hang le leng dong gan zao shi yan ,de dao gao chun du dong gan fen ;dui chun hua de niu xie qing bai dan bai ji zhuai tie dan bai jin hang le biao zheng bing cai yong zhi liang ping heng fa jin hang le ding zhi fen xi 。lun wen jian li le yi bu yin li zi jiao huan ceng xi chun hua gong yi ,yi niu xie qing bai dan bai cu pin wei yuan liao zhi bei gao chun du niu xie qing bai dan bai ;kao cha le pHti du xi tuo fang shi 、jin liao pH、dan bai nong du ji huan chong ye zu cheng deng ying xiang yin su ;que ding le zui you cao zuo tiao jian :dan bai nong du 10 mg/mL,pHwei A;ceng xi jie zhi wei DEAE Sepharose FF;huan chong ye cai yong cu suan yan ti ji ,ping heng huan chong ye nong du wei 20 mM,pHwei 5.2,xi tuo huan chong ye nong du wei 20mM,pHwei 4.6。zai zui you fen li tiao jian xia ,dian yong jian ce chan pin chun du da dao 99.5%,shou lv wei 62%。dui gong yi jin hang le fang da yan jiu ,yan zheng le gong yi de ke hang xing he chong fu xing ,gong zhi bei niu xie qing bai dan bai 30ke ,dian yong jian ce chun du da yu 99%,wei tui dong chun hua gong yi jin hang gui mo zhi bei di gong le ji chu 。wei jie jue bai dan bai ye ti zhi ji de wen ding xing wen ti ,jin hang le dong gan yan jiu ,you hua le dong gan tiao jian ,tian jia xin suan na zuo wei bao hu ji ,bao zheng le dong gan hou bai dan bai fen zi jie gou de wen ding 。dui niu xie qing bai dan bai yi ji zhuai tie dan bai (human transferrin,HTF)jin hang le biao zheng ,fen bie cai yong yuan er se guang pu yi 、zhi pu yi dui dan bai de er ji jie gou yi ji fen zi liang jin hang jian ding ;yong lin ben san fen zi yang hua fa dui niu xie qing bai dan bai de huo xing jin hang le jian ce ;li yong zhuai tie dan bai ke yi zeng jiang qing hao hu zhi (Artesunate,Art)dui ai xi bao zeng shi de yi zhi zuo yong ,jian ce chu qing hao hu zhi yu zhuai tie dan bai lian ge yong yao shi xi bao cun huo lv bi chan du zuo yong ming xian jiang di ,biao ming zhuai tie dan bai jie gou wan zheng bing bao chi huo xing ;dui chan pin de shui fen 、zhu cheng fen ji hui fen jin hang ce ding bing cai qu zhi liang ping heng fa dui liang chong dan bai jin hang le ding zhi ,niu xie qing bai dan bai chun du wei 96.71%,ji zhong zhu cheng fen han liang 99.70%,han shui liang 2.99%,hui fen wei 0.07%;zhuai tie dan bai chun du wei 91.21%,ji zhong zhu cheng fen han liang 95.86%,han shui liang 4.85%,hui fen wei 0.06%。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自天津理工大学的何程铖，发表于刊物天津理工大学2019-07-16论文，是一篇关于牛血清白蛋白论文,转铁蛋白论文,离子交换层析论文,纯化论文,质量平衡法论文,天津理工大学2019-07-16论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自天津理工大学2019-07-16论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
标签：牛血清白蛋白论文; 转铁蛋白论文; 离子交换层析论文; 纯化论文; 质量平衡法论文; 天津理工大学2019-07-16论文;