导读:本文包含了转基因烟草悬浮细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:转基因,悬浮细胞系,绿色荧光蛋白(GFP),Baxinhibitor-1
转基因烟草悬浮细胞论文文献综述
刘金娜,张秀清,马秋敏,车英慧,王晓曦[1]（2010）在《转番茄Bax inhibitor-1基因烟草悬浮细胞系的建立》一文中研究指出利用农杆菌侵染获得转番茄Bax inhibitor-1(LeBI-1)基因的抗性烟草植株,进行了PCR鉴定和共聚焦扫描显微镜检测;同时以MS为基本培养基研究植物生长调节剂的最佳配比和浓度对建立野生型和转基因烟草悬浮细胞素的影响。结果表明:PCR鉴定为阳性,并检测到绿色荧光蛋白,而且6-BA浓度在0.2 mg/L、NAA浓度为2.0 mg/L条件下,可建立野生型和转基因烟草稳定的悬浮细胞系。(本文来源于《北方园艺》期刊2010年24期）
兰珊珊[2]（2008）在《H_2O_2对玉米幼苗和表达CaM转基因烟草悬浮细胞脯氨酸代谢的影响》一文中研究指出本文以玉米幼苗和本实验室建立的表达细胞质CaM的转基因烟草悬浮细胞为材料,研究了外源H2O2处理与脯氨酸代谢之间的关系及CaM在其中的调控作用。研究工作主要包括以下两个方面：1、H2O2处理对玉米幼苗脯氨酸代谢的影响我们用40 mmol/L H2O2处理培养了72个小时的玉米幼苗24小时,用以研究外源H2O2处理对玉米幼苗胚芽鞘和胚根中脯氨酸代谢的影响。结果表明：外源H2O2能引起玉米幼苗体内脯氨酸的累积,随着处理时间的延长,脯氨酸含量迅速上升,前期参与这个累积过程的主要是谷氨酸合成途径,到后期脯氨酸合成的鸟氨酸途径也被激活,处理后期脯氨酸的大量累积实质上是两条途径共同作用的结果,同时降解酶脯氨酸脱氢酶(ProDH)的活性也被抑制。此外,我们还利用RT-PCR技术扩增了玉米幼苗吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)基因的一个片断,分析了H2O2处理下P5CS基因表达的强弱。结果与酶活性变化的趋势-致,随着处理时间的延长,P5CS基因的表达量明显增加,表明外源H2O2从基因表达的层面上就调控着P5CS的活性。2、CaM在H2O2诱导的脯氨酸累积中的作用用1 mmol/L H2O2处理表达细胞质CaM转基因烟草H1-2C和对照H02020的悬浮培养细胞,得到的结果与第一部分相似,外源H2O2能引起烟草悬浮细胞中脯氨酸的累积,在这个过程中,降解酶ProDH的活性被抑制,前期参与合成的主要是谷氨酸途径,而后期起主要作用的是鸟氨酸合成途径。在H2O2处理下,CaM水平较高的H1-2C中累积的脯氨酸量高于对照HO2020,加入CaM拮抗剂CPZ可抑制这种效应,说明CaM对H2O2引起的烟草悬浮细胞中脯氨酸的累积具有调控作用。通过对脯氨酸代谢叁种关键酶活性的测定,发现较高的CaM水平对P5CS和ProDH的活性影响不大,但能显着提高OAT的活性且这种效应能被CPZ抑制,说明CaM是通过调控鸟氨酸途径来影响H2O2引起的烟草悬浮细胞中脯氨酸的累积的。以上研究结果表明,外源H2O2能引起玉米幼苗和烟草悬浮细胞中脯氨酸的累积,前期参与脯氨酸合成的主要是谷氨酸途径,后期鸟氨酸途径被激活,同时降解酶活性被抑制。在烟草中CaM对H2O2引起的脯氨酸累积过程具有调控作用,且这种作用是通过对鸟氨酸途径的调控来实现的。(本文来源于《云南师范大学》期刊2008-06-03）
阮祥经[3]（2007）在《转DREB基因烟草悬浮细胞系（BY-2）抗盐和抗渗透胁迫研究》一文中研究指出干旱、盐渍和低温等非生物逆境严重影响了植物的生长和发育。植物能感知、传递逆境胁迫信号,诱导相关功能的基因表达,在生理生化上作出适应性响应。在逆境胁迫下,植物表达的基因分为两类:1.基因编码的产物为一些功能蛋白和酶类,如LEA,水通道蛋白,脯氨酸合成酶等;2.基因编码的产物为传递信号和调控基因表达的转录因子,如bZIP,MYC,DREB等。植物通过多种途径感应环境的变化,并将环境变化转变为细胞内部的信息,经过一系列磷酸化级联反应,将信号传递给转录因子,转录因子启动耐逆基因表达,从而提高植物的耐逆性。转录因子对基因的转录调控起至关重要的作用。近年来,转录因子在农作物抗逆育种中的应用受到了广泛关注。一个转录因子可以调控多个性状相关的基因表达,通过增强一些关键调节因子的作用,可以增强抗逆相关基因在植物中的表达,使植物的抗逆性得到综合性改良。在作物抗非生物逆境育种方面,传统育种方法是通过改良个别性状来提高作物的抗逆性,而分子育种则从改良或增加一个关键的转录因子的调控能力着手,可能是提高作物抗逆性的更为有效的方法和途径。转录因子启动耐逆基因表达,从而提高植物的耐逆性。许多植物基因表达的调控发生在转录水平上,主要受顺式元件和反式因子的调控。拟南芥DREB基因,是一个响应逆境的转录因子,能开启一系列抗性相关基因的表达,在信号的传递、相关功能基因的表达调控以及发育阶段的调控中起着重要的作用。本研究采用基因枪方法,将来自于拟南芥的DREB转录因子基因和诱导型启动子rd29B构建的植物表达载体pBAC128F转入烟草悬浮细胞(BY-2)。本论文的研究工作及得到的主要结果如下:1.以模式细胞系BY-2为靶材料,通过基因枪法获得转DREB基因细胞系。并经除草剂抗性筛选,得到了抗除草剂的稳定细胞系。2.经PCR和PCR-Southern分子检测,DREB转录因子基因已整合到转基因细胞系的基因组中。3.对生长状况基本一致的转基因细胞系及未转基因的对照细胞系进行耐盐及渗透胁迫的抗性分析。结果表明,转基因细胞系在300mmol·L-1 NaCl和15%PEG6000处理14 d后,能够存活并能生长,而对照则生长缓慢。证明DREB基因能够提高转基因细胞系的抗盐、抗渗透胁迫的能力。4.研究了两种不同处理(NaCl、PEG6000)后其悬浮细胞中抗性生理指标(脯氨酸和丙二醛含量及SOD活性)的变化情况。结果表明:正常生长条件下,转基因和野生型(WT)细胞系的各生理指标无明显差异,但经两种因子处理后,转基因和WT细胞系的脯氨酸和丙二醛含量均随胁迫时间的延长而上升,但转基因细胞系脯氨酸含量普遍高于WT,而丙二醛则相反。在不同浓度的NaCl和PEG处理下转基因细胞系的SOD活性普遍高于WT。综上所述,本论文通过转基因手段证明了DRXB转录因子在植物抗逆反应中的作用,同时分析了转基因BY-2生理代谢方面的变化,为阐明DREB基因提高植物抗逆性的作用机理提供了理论基础。并为进一步研究抗逆相关DREB转录因子在单子叶中的表达调控,培育抗逆小麦材料打下基础。(本文来源于《河南农业大学》期刊2007-06-01）
陈军营,阮祥经,杨凤萍,张晓东,陈新建[4]（2007）在《转DREB基因烟草悬浮细胞系(BY-2)的建立及其几个与抗盐和抗渗透胁迫相关指标的检测》一文中研究指出用基因枪法将DREB基因和诱导型启动子rd29B构建的载体pBAC128F转入烟草悬浮细胞。通过除草剂抗性筛选、PCR和PCR-Southern检测,获得转DREB基因的细胞系。以300mmol·L-1NaCl和15%PEG6000处理14d后,转基因细胞系存活并生长,而野生型则接近死亡。转基因细胞系的脯氨酸含量和超氧物歧化酶活性普遍高于野生型的,而丙二醛含量则相反。(本文来源于《植物生理学通讯》期刊2007年02期）
马力耕,周君莉,张素巧,刘强,孙大业[5]（2000）在《细胞外钙调素对转基因烟草悬浮细胞rbcS-GUS基因表达的促进作用》一文中研究指出以转rbcS-GUS报告基因的烟草悬浮培养细胞为材料, 研究了细胞外钙调素对rbcS基因表达的影响. 实验证实培养介质中钙调素浓度与rbcS-GUS基因表达呈现一个在细胞培养初期较低、随后增高、然后再降低的动态变化；而且培养介质中钙调素浓度变化在前, rbcS-GUS基因表达变化在后. 介质中加入外源纯化钙调素可以促进rbcS-GUS基因表达, 而且这种促进作用具有浓度剂量依赖性. 介质中加入不过膜的大分子钙调素抑制剂W7-agarose抑制rbcS-GUS基因表达, 这种抑制作用能被加入外源纯化钙调素完全恢复. 上述结果提供了较直接的证据, 表明钙调素可以在细胞外诱导rbcS基因的表达.(本文来源于《科学通报》期刊2000年19期）
转基因烟草悬浮细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文以玉米幼苗和本实验室建立的表达细胞质CaM的转基因烟草悬浮细胞为材料,研究了外源H2O2处理与脯氨酸代谢之间的关系及CaM在其中的调控作用。研究工作主要包括以下两个方面：1、H2O2处理对玉米幼苗脯氨酸代谢的影响我们用40 mmol/L H2O2处理培养了72个小时的玉米幼苗24小时,用以研究外源H2O2处理对玉米幼苗胚芽鞘和胚根中脯氨酸代谢的影响。结果表明：外源H2O2能引起玉米幼苗体内脯氨酸的累积,随着处理时间的延长,脯氨酸含量迅速上升,前期参与这个累积过程的主要是谷氨酸合成途径,到后期脯氨酸合成的鸟氨酸途径也被激活,处理后期脯氨酸的大量累积实质上是两条途径共同作用的结果,同时降解酶脯氨酸脱氢酶(ProDH)的活性也被抑制。此外,我们还利用RT-PCR技术扩增了玉米幼苗吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)基因的一个片断,分析了H2O2处理下P5CS基因表达的强弱。结果与酶活性变化的趋势-致,随着处理时间的延长,P5CS基因的表达量明显增加,表明外源H2O2从基因表达的层面上就调控着P5CS的活性。2、CaM在H2O2诱导的脯氨酸累积中的作用用1 mmol/L H2O2处理表达细胞质CaM转基因烟草H1-2C和对照H02020的悬浮培养细胞,得到的结果与第一部分相似,外源H2O2能引起烟草悬浮细胞中脯氨酸的累积,在这个过程中,降解酶ProDH的活性被抑制,前期参与合成的主要是谷氨酸途径,而后期起主要作用的是鸟氨酸合成途径。在H2O2处理下,CaM水平较高的H1-2C中累积的脯氨酸量高于对照HO2020,加入CaM拮抗剂CPZ可抑制这种效应,说明CaM对H2O2引起的烟草悬浮细胞中脯氨酸的累积具有调控作用。通过对脯氨酸代谢叁种关键酶活性的测定,发现较高的CaM水平对P5CS和ProDH的活性影响不大,但能显着提高OAT的活性且这种效应能被CPZ抑制,说明CaM是通过调控鸟氨酸途径来影响H2O2引起的烟草悬浮细胞中脯氨酸的累积的。以上研究结果表明,外源H2O2能引起玉米幼苗和烟草悬浮细胞中脯氨酸的累积,前期参与脯氨酸合成的主要是谷氨酸途径,后期鸟氨酸途径被激活,同时降解酶活性被抑制。在烟草中CaM对H2O2引起的脯氨酸累积过程具有调控作用,且这种作用是通过对鸟氨酸途径的调控来实现的。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
转基因烟草悬浮细胞论文参考文献
[1].刘金娜,张秀清,马秋敏,车英慧,王晓曦.转番茄Baxinhibitor-1基因烟草悬浮细胞系的建立[J].北方园艺.2010
[2].兰珊珊.H_2O_2对玉米幼苗和表达CaM转基因烟草悬浮细胞脯氨酸代谢的影响[D].云南师范大学.2008
[3].阮祥经.转DREB基因烟草悬浮细胞系（BY-2）抗盐和抗渗透胁迫研究[D].河南农业大学.2007
[4].陈军营,阮祥经,杨凤萍,张晓东,陈新建.转DREB基因烟草悬浮细胞系(BY-2)的建立及其几个与抗盐和抗渗透胁迫相关指标的检测[J].植物生理学通讯.2007
[5].马力耕,周君莉,张素巧,刘强,孙大业.细胞外钙调素对转基因烟草悬浮细胞rbcS-GUS基因表达的促进作用[J].科学通报.2000
标签：转基因; 悬浮细胞系; 绿色荧光蛋白(GFP); Baxinhibitor-1;