导读:本文包含了钾通道相关蛋白论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:内关,心肌缺血,瞬时外向钾离子通道,蛋白表达
钾通道相关蛋白论文文献综述
王颖,许亚涵,李迪,戴俭宇,王琪格[1]（2016）在《电针内关穴对心肌缺血ASIC3~(-/-)小鼠瞬时外向钾离子通道相关蛋白表达的影响》一文中研究指出目的:探讨电针内关穴对心肌缺血ASIC3基因敲除(ASIC3~(-/-))小鼠心肌细胞瞬时外向钾离子通道相关蛋白Kv1.4、Kv4.2、Kv4.3及KCh IP2表达的影响。方法:ASIC3~(-/-)小鼠36只,随机分为空白组、模型组、内关组、列缺组、足叁里组和非经非穴组,每组6只,皮下注射异丙肾上腺素建立心肌缺血模型。检测小鼠电针治疗前后心电图T波电压的变化,Western blot检测Kv1.4、Kv4.2、Kv4.3和KCh IP2蛋白表达量。结果:治疗后,与模型组相比,内关组、列缺组和足叁里组小鼠T波电压和蛋白表达量均有所回升(P<0.05),其中内关组优于列缺组及足叁里组(P<0.05);非经非穴组与模型组之间无明显差异(P>0.05)。结论:电针内关穴、列缺穴和足叁里穴均可提升心肌缺血ASIC3~(-/-)小鼠心肌细胞瞬时外向钾离子通道相关蛋白的表达,且心包经内关穴的针刺效应优于列缺穴和足叁里穴。(本文来源于《辽宁中医杂志》期刊2016年07期）
许亚涵[2]（2016）在《针刺内关穴对心肌缺血ASIC3~(-/-)小鼠瞬时外向钾通道相关蛋白的影响》一文中研究指出目的:本实验选用ASIC3基因敲除(ASIC3~(-/-))小鼠作为研究对象,药物异丙肾上腺素(ISO)建立心肌缺血模型,探讨不同针刺点对ASIC3~(-/-)小鼠心肌细胞瞬时外向钾离子通道相关蛋白Kv1.4、Kv4.2、Kv4.3及其辅助蛋白KCh IP2表达量的影响,探讨循经取穴针刺对心肌缺血的作用机制。由此验证内关穴改善心肌缺血的循经特异性。材料与方法:健康雄性ASIC3~(-/-)小鼠适应性饲养,随机选取6只作为空白对照组。其余ASIC3~(-/-)小鼠在皮下多点注射盐酸异丙肾上腺素(20 mg/kg)两次(间隔24小时),测量心电图,对比造模前后心电图改变。将造模成功的30只ASIC3~(-/-)小鼠随机分为模型组、内关组、列缺组、足叁里组和非经非穴组,每组6只,同时将空白对照组同法同量注射生理盐水。选用“华佗牌”针灸针(0.19 mm×13 mm)刺入内关组、列缺组、足叁里组和非经非穴组小鼠相应针刺点约2mm,连接电针仪,调整为疏密波,强度2m A,留针20min,连续治疗7天。针刺结束后,采用Western blot检测Kv1.4、Kv4.2、Kv4.3以及辅助蛋白KCh IP2的表达量。结果:1.与空白对照组相比较,模型组小鼠心电图T波均出现明显的病理性改变,变化幅值有统计学意义(P<0.01)。针刺7天后,内关组、列缺组和足叁里组小鼠心电图T波电压异常均有所改善,变化幅度有统计学意义(P<0.05),且变化幅度明显大于列缺组和足叁里组(P<0.05),但较造模前大鼠T波电压值仍有差异(P<0.05);而非经非穴组小鼠的心电图T波变化较模型组变化不显着,无统计学意义(P>0.05)。2.与空白对照组比较,模型组小鼠心肌瞬时外向钾离子通道蛋白Kv1.4、Kv4.2、Kv4.3及辅助蛋白KCh IP2的表达量明显降低,其差异有统计学意义(P<0.01)。电针7天后,与模型组相比较:内关组、列缺组和足叁里组各指标的蛋白表达量增多,差异有统计学意义(P<0.05),且内关组各指标蛋白表达量的升高幅度明显优于列缺组和足叁里组(P<0.05);非经非穴组各指标的蛋白表达量变化不明显(P>0.05)。结论:1.小鼠发生心肌缺血时,心电图T波出现明显改变,电针内关穴、列缺穴和足叁里穴均可改善心电图异常变化,且内关组改善幅度优于列缺组及足叁里组。2.正常ASIC3~(-/-)小鼠心肌细胞中,Kv1.4、Kv4.2、Kv4.3通道蛋白及辅助蛋白KCh IP2表达正常,出现心肌缺血时,其表达量明显下降,针刺内关穴、列缺穴、足叁里穴后可增加蛋白表达量,而且内关组小鼠心肌细胞的四种蛋白表达量高于列缺组和足叁里组。3.心包经之内关与肺经之列缺位置毗邻,对心肌瞬时外向钾离子通道蛋白及其相关蛋白的表达量均具有调节;足叁里作为综合调节之大穴亦可调控心肌瞬时外向钾离子通道蛋白及相关蛋白的表达。而数据显示内关穴调节幅度更大,从而可证明内关穴具有经穴特异性。(本文来源于《辽宁中医药大学》期刊2016-06-30）
张晓露[3]（2016）在《电针内关对心肌缺血ASIC3~(-/-)小鼠内向整流钾离子通道相关蛋白表达的影响》一文中研究指出目的:研究电针不同穴位对心肌缺血酸敏感离子通道亚基3基因敲除(ASIC3~(-/-))小鼠心肌细胞内向整流钾离子通道相关蛋白Kir2.1、Kir2.2和Kir2.3表达的影响,在离子通道层面探讨针刺改善心肌缺血的可能机制,并证明经穴的循经特异性在针刺治疗心肌缺血方面的优势。材料与方法:选用SPF级ASIC3~(-/-)小鼠,随机选取6只作为空白组,四肢根部皮下多点位注射生理盐水(20mg/kg)两次,间隔时间为24h。其余ASIC3~(-/-)小鼠采用同样方法注射同等剂量异丙肾上腺素建立心肌缺血模型。检测造模前后心电图,将造模成功的30只小鼠随机分为模型组、内关组、列缺组、足叁里组和非经非穴组,每组6只。电针内关组、列缺组、足叁里组和非经非穴组小鼠相应穴位,空白组和模型组不给予电针治疗。电针采用疏密波,频率为4/20 Hz,强度2mA,每天20min持续7天。观察所有小鼠治疗前后心电图ST段变化,HE染色观察小鼠心肌形态改变,Western blot检测内向整流钾离子通道(即Kir2.1、Kir.2和Kir2.3)相关蛋白表达量。结果:1.造模后,与空白组相比,模型组小鼠ST段幅值增高133.33±51.61%,变化有显着统计学意义(P<0.05)。治疗后,与模型组相比,内关组、列缺组和足叁里组ST值均有明显回落(P<0.05),分别为32.23±26.14%、29.48±71.59%和25.62±71.59%,其中内关组幅值回落最为明显;非经非穴组ST值虽也有所降低(0.55±7.95%),但无统计学意义(P>0.05)。2.造模后,与空白组相比,模型组小鼠Kir2.1、Kir2.2及Kir2.3蛋白表达量分别降低了65.95±25%,62.57±2.33%,63.11±16.67%,且有明显差异(P<0.05)。电针后,各组内Kir亚基蛋白表达量变化趋势一致。内关组、列缺组和足叁里组较模型组均有显着回升(P<0.05),叁组小鼠蛋白表达量变化均值分别为129.15±13.08%,62.27±3.08%及29.95±3.08%,且内关组回升幅度大于列缺组及足叁里组(P<0.05),列缺组大于足叁里组(P<0.05);非经非穴组蛋白表达量与模型组相比虽也有增多(3.69±23.85%),但两者之间无明显差异(P>0.05)。3.治疗后,内关、列缺、足叁里组小鼠心肌纤维增粗、排列紊乱、炎细胞浸润等表现均较模型组减轻,其中内关组减轻最为明显,其次为列缺组,最后为足叁里组。结论:1.电针内关穴、列缺穴及足叁里穴均可降低心肌缺血ASIC3~(-/-)小鼠异常ST段幅值,其中内关穴效果优于列缺穴及足叁里穴,列缺穴优于叁里穴。2.心肌缺血时,ASIC3~(-/-)小鼠Kir2.1、Kir2.2及Kir2.3蛋白表达量下降,电针内关穴、列缺穴及足叁里穴均可改善其降低幅度,且内关穴效果最好。3.针刺可明显改善小鼠心肌缺血状态与Kir2.1、Kir.2和Kir2.3蛋白表达量回升有一定相关性。4.内关穴、列缺穴及足叁里穴均可改善ASIC3~(-/-)小鼠心肌缺血状态,其中内关穴疗效最佳,验证了手厥阴心包经内关穴的循经特异性在治疗心肌缺血方面的优势。(本文来源于《辽宁中医药大学》期刊2016-03-01）
卞镝,田辉,隋月皎,刘玉丽,曹锐[4]（2016）在《电针“内关”对缺血性心肌损伤大鼠钠离子通道相关蛋白的影响》一文中研究指出目的:探讨电针"内关"对缺血性心肌的保护机制,阐明经穴效应循经特异性在心脏器官水平的钠离子通道的响应模式及特征。方法:将60只SPF级雄性大鼠随机分为空白组、模型组、非经非穴组、内关组、列缺组,每组12只。除空白组外,余组皮下注射异丙肾上腺素制备心肌缺血模型。内关组、列缺组、非经非穴组大鼠分别给予相应穴位的疏密波电针治疗,频率为2 Hz/20Hz,强度为2~3mA,每次电针20min,每天1次,连续7d。空白组与模型组仅在每天治疗时抓取固定。应用Western-blot法检测各组大鼠心肌电压-门控钠离子通道alpha(α)亚单位(Nav 1.5)、蛋白酪氨酸激酶(protein tyrosine kinase,PTKs)和蛋白酪氨酸磷酸酶(protein tyrosine phosphatases,PTPs)的蛋白表达水平。结果:模型组Nav 1.5和PTKs蛋白表达水平明显低于空白组(均P<0.01),内关组和列缺组较模型组表达水平增加(均P<0.01),内关组Nav 1.5和PTKs蛋白表达水平高于列缺组(均P<0.01);模型组和非经非穴组PTPs的蛋白表达均明显高于空白组(均P<0.01),内关组和列缺组PTPs的蛋白表达明显下调,均较模型组低(均P<0.01),内关组下调水平优于列缺组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:电针"内关"可能通过下调PTPs、上调Nav 1.5、PTKs的蛋白表达水平实现对钠离子通道电流以及钙超载的调节,进而改善心肌缺血状态,为经穴效应循经特异性理论提供实验基础。(本文来源于《中国针灸》期刊2016年01期）
任莉,沈心远,林吉进[5]（2015）在《蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型11对人类果蝇相关基因钾通道的调控作用》一文中研究指出目的由人类果蝇相关基因(Human ether-a-go-go-related gene,HERG)编码的钾通道电流的改变可引起长QT综合征,HERG钾通道受到蛋白酪氨酸激酶和磷酸酶的调节,且蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型12(protein tyrosine phosphatase non-receptor type 12,PTPN12)具有负性调控HERG钾通道的作用。文中旨在探讨PTPN11对HERG钾通道电生理特性的影响。方法应用PCR技术,构建携带pc DNA3.1-PTPN11-EGFP的质粒;利用脂质体Lipofectamine2000,将各质粒转染进入HEK293细胞;应用膜片钳技术,分别检测对照组(pc DNA3.0-HERG-EGFP单独转染HEK293细胞)、PTPN11过表达组(pc DNA3.0-HERG与pc DNA3.1-PTPN11-EGFP共转染HEK293细胞)以及抑制剂组(pc DNA3.0-HERG与pc DNA3.1-PTPN11-EGFP共转染HEK293细胞基础上加入蛋白酪氨酸磷酸酶抑制剂正钒酸钠)的HERG钾通道的脉冲电流最大电流密度、尾电流最大电流密度及去激活时间常数Tau等。结果成功构建了pc DNA3.1-PTPN11-EGFP质粒。在荧光显微镜下可观察到各组中带有增强型绿色荧光蛋白的质粒表达。膜片钳检测发现,PTPN11过表达组的脉冲电流最大电流密度[(31.85±5.54)p A/p F]、尾电流最大电流密度[(73.82±11.31)p A/p F]较对照组[(45.92±3.18)、(108.43±7.98)p A/p F]均降低(P<0.05);而抑制剂组脉冲电流、尾电流最大电流密度[(48.08±4.32)、(120.06±8.02)p A/p F]较对照组与PTPN11过表达组均明显增大(P<0.05)。PTPN11过表达组去激活时间常数Tau[(622.16±46.49)ms]较对照组[(440.70±49.49)ms]明显升高(P<0.05)。结论 PTPN11对心脏HERG钾通道的电流具有负性调控作用,而酪氨酸磷酸酶抑制剂能逆转PTPN11过表达的HERG钾通道电流的减小,这一发现为应用HERG钾通道的某些调控酶作为治疗长QT综合征的治疗思路提供了一定的理论基础。(本文来源于《医学研究生学报》期刊2015年11期）
孟祥宇[6]（2015）在《循经取穴针刺对心肌缺血大鼠模型ATP敏感性钾通道和蛋白激酶相关基因调控作用影响的研究》一文中研究指出目 的：该实验采用能酸异丙肾上腺素制造心肌缺血大鼠模型,运用RT-PCR检测技术,通过观察针刺不同经脉穴位对心肌缺血大鼠模型心肌细胞ATP敏感钾通道(KATP通道)基因Kir6.1、Kir6.2及其结合蛋白SUR2A、SUR2B和蛋白激酶PKA、PKG、PKCβ2的mRNA表达水平的影响,从ATP敏感钾通道及蛋白激酶基因表达差异角度,探讨电针内关穴抗心肌缺血在细胞膜离子通道基因表达层面的作用机制,求证经穴效应的循经特异性,为临床针刺治疗心肌缺血提供相应的借鉴。材料与方法：72只健康雄性SD大鼠(SPF级),自由摄取饮用矿泉水和普通清洁级饲料,以适应性喂养7天。应用随机数字表法,从72只大鼠中随机抽取10只,作为对照组。其余62只大鼠,连续2天采用皮下多点位注射异丙肾上腺素以建立心肌缺血大鼠模型,对照组10只大鼠在相同位置注射等量的生理盐水,并于造模前、后检测各组大鼠心电图。剔除造模不成功(心电图不合格或死亡者)的22只大鼠,将剩下的40只大鼠随机分为4组,即：模型组、内关组、列缺组、非经非穴组,每组10只。在清醒状态下,对内关组、列缺组、非经非穴组大鼠的相应穴位进行电针治疗,每日1次,连续7天。对照组和模型组的大鼠,不施加针刺,但每天都采用同样的抓取和固定,以排除人为的干扰因素。治疗结束后,再次检测各组大鼠心电图。采用断脊法,将各组大鼠处死,开胸以获得心肌组织。采用实时荧光定量PCR (RT-PCR)技术,检测心肌细胞KATP通道相关基因Kir6.1、Kir6.2、SUR2A、SUR2B和蛋白激酶PKA、PKG、PKCβ2以及参考基因GAPDH表达的变化,进行统计学处理。结 果：1.治疗前后,各组大鼠左心室肌细胞Kir6.1、Kir6.2、SUR2A、SUR2B mRNA表达情况：与对照组比较：模型组的各目的基因(Kir6.1、Kir62、SUR2A、SUR2B) mRNA相对表达量明显升高,具有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较：内关组、列缺组各目的基因(Kir6.1、Kir6.2、SUR2A、SUR2B)的相对表达量明显降低,具有统计学意义(P<0.05)；非经非穴组各目的基因(Kir6.1、Kir6.2、SUR2A、SUR2B) mRNA的相对表达量无明显变化,没有统计学意义(P>0.05)。与内关组比较：列缺组、非经非穴组各目的基因(Kir6.1、Kir6.2、SUR2A、SUR2B) mRNA的相对表达量明显升高,有统计学意义(P<0.05)。与列缺组比较：非经非穴组各目的基因(Kir6.1、Kir6.2、SUR2A、 SUR2B) mRNA的相对表达量明显升高,具有统计学意义(P<0.05)。2.治疗前后,各组大鼠左心室肌细胞PKA、PKG、PKCβ2mRNA表达情况：与对照组比较：模型组目的基因(PKA、PKG、PKCβ2) mRNA的相对表达量明显升高,具有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较：内关组、列缺组各目的基因(PKA、 PKG、PKCβ2)的相对表达量明显降低,具有统计学意义(p<0.05)；非经非穴组各目的基因(PKA、PKG、PKCβ2) mRNA的相对表达量无明显变化,没有统计学意义(p>0.05)。与内关组比较：列缺组、非经非穴组各目的基因(PKA、PKG、PKCβ2) mRNA的相对表达量明显升高,具有统计学意义(P<0.05)。与列缺组比较：非经非穴组各目的基因(PKA、PKG、PKCβ2) mRNA的相对表达量明显升高,具有统计学意义(p<0.05)结 论：1.电针内关穴、列缺穴降低心肌细胞KATP (Kir6.1、Kir6.2、SUR2A、SUR2B) mRNA和蛋白激酶(PKA、PKG、PKCβ2) mRNA表达量的作用较非经非穴明显,表明电针内关穴、列缺穴都具有抗心肌缺血的效果；2.电针内关穴降低心肌细胞KATP (Kir6.1、Kir6.2、SUR2A、SUR2B) mRNA和蛋白激酶(PKA、PKG、PKCβ2) mRNA表达量的作用较列缺穴明显,表明电针内关穴抗心肌缺血的效果优于列缺穴；3.电针手厥阴心包经内关穴抗心肌缺血具有循经特异性；4.电针内关穴降低心肌缺血大鼠心肌细胞KATP (Kir6.1、Kir6.2、SUR2A、SUR2B) mRNA基因表达量的结果,与以往文献中成药冠心康干预结果相反,提示电针内关穴抗心肌缺血机理可能是干预启动了机体自我修复的内源性保护机制,促进了机体自身调节机能的良性转归。(本文来源于《辽宁中医药大学》期刊2015-11-01）
李迪[7]（2015）在《电针内关穴对心肌缺血大鼠ATP敏感性钾离子通道相关蛋白的影响》一文中研究指出目的：本项实验以异丙肾上腺素制备大鼠心肌缺血模型,观察不同针刺点对心肌缺血大鼠心肌细胞ATP敏感性钾离子通道相关蛋白Kir6.1、Kir6.2、SUR2A、SUR2B及其辅助蛋白PKA、PKC、PKG表达量的调控作用,探究针刺改善心肌缺血缺氧状态的可能机制,验证针刺治疗心肌缺血的循经特异性。材料与方法：健康雄性SPF级SD大鼠72只,随机抽取10只作为对照组,于四肢内侧根部皮下一次性多点位注射生理盐水两次(间隔24小时)；其余62只大鼠采用同样方式注射异丙肾上腺素(85mg/kg)制备动物模型。根据造模前后心电图改变,将造模成功的40只大鼠随机分成模型组、内关组、列缺组、非经非穴组,每组10只。采用“华佗牌”针灸针(0.20mm×25mm)刺入各组大鼠相应穴位皮下约2m。待大鼠稳定后,接电针仪,施以疏密波,频率(2-20)Hz,电流强度以大鼠前肢出现轻微颤动为宜。留针20分钟,每日1次,连续7次。对照组与模型组不进行针刺。采用Western Blot检测技术检测大鼠心肌细胞Kir6.1、Kir6.2、SUR2A、SUR2B以及PKA、PKC、PKG的蛋白表达量。结果：1.与对照组比较,模型组大鼠心电图T波电压明显降低,变化有统计学意义(P<0.05)。与造模后相比,内关组和列缺组大鼠心电图T波电压均有回升,变化有统计学意义(P<0.05),且内关组大鼠心电图T波电压升高幅度明显大于列缺组(P<0.05)；非经非穴组大鼠心电图T波电压的变化与模型组无统计学意义(P>0.05)。2.与对照组比较,模型组大鼠心肌细胞Kir6.1、Kir6.2、SUR2A、SUR2B的蛋白表达量均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,内关组和列缺组蛋白表达均显着降低(P<0.05),非经非穴组蛋白表达降低不显着(P>0.05)。与列缺组比较,内关组蛋白表达显着降低(P<0.05)。3.与对照组比较,模型组大鼠心肌细胞PKA、PKC、PKG的蛋白表达量均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,内关组和列缺组蛋白表达均显着降低(P<0.05),非经非穴组蛋白表达降低不显着(P>0.05)。与内关组比较,列缺组蛋白表达显着回升(P<0.05)。结论：1.心肌缺血时,大鼠心电图T波电压明显降低,针刺内关穴和列缺穴均可以有效地改善T波电压的异常改变,且内关穴的疗效明显优于列缺穴。2.正常大鼠的心肌细胞中,Kir6.1、Kir6.2、SUR2A、SUR2B的蛋白表达量较低；心肌缺血时,其表达量明显升高,针刺内关穴和列缺穴均可以有效地降低其升高幅度,且内关穴的疗效明显优于列缺穴。3.心肌缺血时,作为ATP敏感性钾离子通道的辅助蛋白,PKA、PKC、PKG的表达量明显升高,针刺内关穴和列缺穴均可以有效地降低其升高幅度,且内关穴的疗效明显优于列缺穴。4.手厥阴心包经的内关穴和手太阴肺经的列缺穴所处的部位相近,对ATP敏感性钾离子通道相关蛋白及其辅助蛋白的表达量均具有调节作用,且内关穴的疗效优于列缺穴,从而证明了内关穴的经穴特异性。(本文来源于《辽宁中医药大学》期刊2015-03-01）
陈雄飞[8]（2011）在《离子通道相关蛋白FXYD6的真核表达和功能区的原核表达及纯化》一文中研究指出目的构建离子通道相关蛋白FXYD6的真核表达载体pcDNA~(TM)3.1/myc-His(-) B- FXYD6,瞬时转染哺乳动物细胞293T细胞,并检测其目的蛋白表达和在细胞中的定位情况,为进一步的动物实验研究打下基础。构建功能区原核表达载体pET-28a(+)-FXYD6-ex,并诱导其在原核细胞中表达,对表达出的功能区重组蛋白进行纯化,以进一步制备该蛋白不同表位的抗体,为研究FXYD6蛋白的组织分布和的具体功能奠定基础。方法用全长FXYD6 cDNA序列分别扩增FXYD6全长序列和其功能区片段FXYD6-ex,扩增产物插入到克隆质粒载体pMD18-T Simple中,将连接产物载化到克隆宿主大肠杆菌Trans10中进行TA扩增,抽提质粒,将质粒和真核表达载体pcDNA~(TM)3.1/myc-His(-) B空载体用限制性内切酶双酶切,DNA电泳,目的片段回收与纯化,全长序列目的片段插入到酶切后的空载体pcDNA~(TM)3.1/myc-His(-) B中,功能区目的片段插入到以相同限制性内切酶双酶切后的表达质粒载体pET28a(+)中,两种重组质粒重新转化到大肠杆菌Trans10扩增质粒,抽提质粒,经PCR电泳和测序证实两种质粒正确。重组质粒pcDNA~(TM)3.1/myc-His(-) B-FXYD6瞬时转染哺乳动物细胞293T细胞,用western blot检测其目的蛋白表达,其所长并用细胞免疫荧光检测目的蛋白的细胞分布情况。重组质粒pET28a(+)-FXYD6-ex转化宿主大肠杆菌Rossetta,异丙基-β-8-D硫代半乳糖(IPTG)诱导功能区重组蛋白表达,镍柱纯化,用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)凝胶和western blot检测,鉴定功能区重组蛋白表达及纯化情况。结果本实验成功构建了真核表达载体pcDNA~(TM)3.1/myc-His(-) B-FXYD6,并实现了其在293T细胞的表达, FXYD6主要分布在细胞质和细胞膜上。成功构建了原核表达载体pET28a(+)-FXYD6-ex,通过IPTG诱导实现了该蛋白功能区在大肠杆菌Rossetta中的高表达,用镍柱纯化后的重组蛋白纯度达90%。结论1、本研究成功完成了离子通道相关蛋白FXYD6真核表达载体pcDNA~(TM)3.1 /myc-His(-) B-FXYD6的构建并实现了它的真核表达, FXYD6蛋白主要分布在细胞质和细胞膜上。2、本研究也实现了它的功能区的原核表达及纯化,纯化后的重组蛋白为后续制备该蛋白单克隆抗体库及进一步研究其具体功能奠定了良好基础。(本文来源于《辽宁医学院》期刊2011-03-01）
陈雄飞,周宁新[9]（2010）在《离子通道相关蛋白FXYD6功能区的原核表达及纯化》一文中研究指出目的构建FXYD6蛋白功能区(FXYD6-ex)的原核表达质粒,并诱导FXYD6-ex在原核细胞中表达与纯化,以进一步研究FXYD6功能。方法用全长FXYD6 cDNA扩增FXYD6-ex,扩增产物插入克隆质粒载体pMD18-T Simple并用限制性内切酶酶切,将目的片段插入以限制性内切酶切后的表达质粒载体pET28a(+)中,经PCR电泳和测序证实后转化宿主大肠杆菌Rossetta,异丙基-β-8-D硫代半乳糖(IPTG)诱导重组蛋白表达,镍柱纯化重组蛋白,十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)凝胶和Western blot检测鉴定蛋白表达及纯化情况。结果成功构建pET28a(+)-FXYD6-ex大肠杆菌表达载体,并实现该蛋白在大肠杆菌中的高表达,分离纯化的产物纯度达90%。结论本研究成功对FXYD6-ex进行原核表达及纯化;此为后续制备该蛋白抗体库及进一步研究其具体功能奠定了良好基础。(本文来源于《山东医药》期刊2010年51期）
王飞,殷玉华,贾锋,江基尧[10]（2010）在《R-型钙通道阻滞剂对大鼠蛛网膜下腔出血后脑动脉钙通道相关蛋白的影响》一文中研究指出目的研究蛛网膜下腔出血(SAH)后脑动脉R-型钙通道的表达情况,并探讨R-型钙通道阻滞剂——SNX-482对脑动脉收缩相关蛋白的作用。方法 20只雄性SD大鼠,随机分为假手术组、SAH组、SAH+尼莫地平组、SAH+SNX-482组,每组5只。采用大鼠鞍上池注射自体动脉血法制备SAH模型,其后第1、2日每天向假手术组和SAH组的脑池内注射25μl等渗盐水,向SAH+尼莫地平组和SAH+SNX-482组注射25μl尼莫地平或SNX-482。第3日取脑动脉标本,后经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白印迹半定量检测R-型钙通道蛋白和调宁蛋白(calponin)的表达水平,经尿素甘油-聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白印迹检测肌球蛋白轻链2(MLC2)磷酸化百分比。结果①假手术组、SAH组、SAH+尼莫地平组和SAH+SNX-482组R-型钙通道蛋白相对量分别为0.38±0.08、0.86±0.07、0.66±0.11和0.72±0.09,假手术组的蛋白相对量均低于其他叁组(P<0.05);②上述各组calponin相对量分别为2.32±0.14、0.54±0.17、0.75±0.19和1.42±0.15,各组间差异均具有统计学意义(P<0.05);③上述各组MLC2磷酸化百分比依次为12.2±2.8、41.0±3.2、36.1±2.8和25.3±1.9,除SAH和SAH+尼莫地平两组外,其余各组间差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 R-型钙通道阻滞剂可抑制SAH大鼠脑动脉的calponin降解和MLC2磷酸化的程度,其作用强于L-型钙通道阻滞剂尼莫地平。(本文来源于《中国脑血管病杂志》期刊2010年06期）
钾通道相关蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:本实验选用ASIC3基因敲除(ASIC3~(-/-))小鼠作为研究对象,药物异丙肾上腺素(ISO)建立心肌缺血模型,探讨不同针刺点对ASIC3~(-/-)小鼠心肌细胞瞬时外向钾离子通道相关蛋白Kv1.4、Kv4.2、Kv4.3及其辅助蛋白KCh IP2表达量的影响,探讨循经取穴针刺对心肌缺血的作用机制。由此验证内关穴改善心肌缺血的循经特异性。材料与方法:健康雄性ASIC3~(-/-)小鼠适应性饲养,随机选取6只作为空白对照组。其余ASIC3~(-/-)小鼠在皮下多点注射盐酸异丙肾上腺素(20 mg/kg)两次(间隔24小时),测量心电图,对比造模前后心电图改变。将造模成功的30只ASIC3~(-/-)小鼠随机分为模型组、内关组、列缺组、足叁里组和非经非穴组,每组6只,同时将空白对照组同法同量注射生理盐水。选用“华佗牌”针灸针(0.19 mm×13 mm)刺入内关组、列缺组、足叁里组和非经非穴组小鼠相应针刺点约2mm,连接电针仪,调整为疏密波,强度2m A,留针20min,连续治疗7天。针刺结束后,采用Western blot检测Kv1.4、Kv4.2、Kv4.3以及辅助蛋白KCh IP2的表达量。结果:1.与空白对照组相比较,模型组小鼠心电图T波均出现明显的病理性改变,变化幅值有统计学意义(P<0.01)。针刺7天后,内关组、列缺组和足叁里组小鼠心电图T波电压异常均有所改善,变化幅度有统计学意义(P<0.05),且变化幅度明显大于列缺组和足叁里组(P<0.05),但较造模前大鼠T波电压值仍有差异(P<0.05);而非经非穴组小鼠的心电图T波变化较模型组变化不显着,无统计学意义(P>0.05)。2.与空白对照组比较,模型组小鼠心肌瞬时外向钾离子通道蛋白Kv1.4、Kv4.2、Kv4.3及辅助蛋白KCh IP2的表达量明显降低,其差异有统计学意义(P<0.01)。电针7天后,与模型组相比较:内关组、列缺组和足叁里组各指标的蛋白表达量增多,差异有统计学意义(P<0.05),且内关组各指标蛋白表达量的升高幅度明显优于列缺组和足叁里组(P<0.05);非经非穴组各指标的蛋白表达量变化不明显(P>0.05)。结论:1.小鼠发生心肌缺血时,心电图T波出现明显改变,电针内关穴、列缺穴和足叁里穴均可改善心电图异常变化,且内关组改善幅度优于列缺组及足叁里组。2.正常ASIC3~(-/-)小鼠心肌细胞中,Kv1.4、Kv4.2、Kv4.3通道蛋白及辅助蛋白KCh IP2表达正常,出现心肌缺血时,其表达量明显下降,针刺内关穴、列缺穴、足叁里穴后可增加蛋白表达量,而且内关组小鼠心肌细胞的四种蛋白表达量高于列缺组和足叁里组。3.心包经之内关与肺经之列缺位置毗邻,对心肌瞬时外向钾离子通道蛋白及其相关蛋白的表达量均具有调节;足叁里作为综合调节之大穴亦可调控心肌瞬时外向钾离子通道蛋白及相关蛋白的表达。而数据显示内关穴调节幅度更大,从而可证明内关穴具有经穴特异性。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
钾通道相关蛋白论文参考文献
[1].王颖,许亚涵,李迪,戴俭宇,王琪格.电针内关穴对心肌缺血ASIC3~(-/-)小鼠瞬时外向钾离子通道相关蛋白表达的影响[J].辽宁中医杂志.2016
[2].许亚涵.针刺内关穴对心肌缺血ASIC3~(-/-)小鼠瞬时外向钾通道相关蛋白的影响[D].辽宁中医药大学.2016
[3].张晓露.电针内关对心肌缺血ASIC3~(-/-)小鼠内向整流钾离子通道相关蛋白表达的影响[D].辽宁中医药大学.2016
[4].卞镝,田辉,隋月皎,刘玉丽,曹锐.电针“内关”对缺血性心肌损伤大鼠钠离子通道相关蛋白的影响[J].中国针灸.2016
[5].任莉,沈心远,林吉进.蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型11对人类果蝇相关基因钾通道的调控作用[J].医学研究生学报.2015
[6].孟祥宇.循经取穴针刺对心肌缺血大鼠模型ATP敏感性钾通道和蛋白激酶相关基因调控作用影响的研究[D].辽宁中医药大学.2015
[7].李迪.电针内关穴对心肌缺血大鼠ATP敏感性钾离子通道相关蛋白的影响[D].辽宁中医药大学.2015
[8].陈雄飞.离子通道相关蛋白FXYD6的真核表达和功能区的原核表达及纯化[D].辽宁医学院.2011
[9].陈雄飞,周宁新.离子通道相关蛋白FXYD6功能区的原核表达及纯化[J].山东医药.2010
[10].王飞,殷玉华,贾锋,江基尧.R-型钙通道阻滞剂对大鼠蛛网膜下腔出血后脑动脉钙通道相关蛋白的影响[J].中国脑血管病杂志.2010