导读:本文包含了无血清培养法论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:流感病毒,流感样病例,无血清培养液,病毒分离
无血清培养法论文文献综述
史文凤,刘海波[1]（2019）在《无血清培养液流感病毒分离效果分析》一文中研究指出目的对比分析有无血清培养液流感病毒分离效果。方法收集流感哨点医院发病3天内流感样病例咽拭子720份,采用荧光定量PCR法检测流感病毒核酸及分型,犬肾细胞(MDCK)培养法进行病毒分离,细胞病变观察和微量血凝实验(HA)检测病毒是否分离成功并测定HA价。结果 720份标本中病毒核酸阳性130份,阳性率为18.06%。130份阳性标本,采用含血清培养液病毒分离阳性68份,阳性率为52.31%(68/130),其中H1N1亚型6份,H3N2亚型2份,BV亚型58份,BY亚型2份;无血清培养液病毒分离阳性100份,阳性率为76.92%(100/130),其中H1N1亚型12份,H3N2亚型21份,BV亚型63份,BY亚型4份。两种方法分离差异有统计学意义(χ2=17.23,P<0.01),其中含血清培养液培养后无血凝滴度标本32份,用无血清培养液培养后血凝滴度在11～1256,且BV和BY亚型血凝滴度较高。结论无血清培养液较有血清培养液流感病毒分离效果更好。(本文来源于《江苏预防医学》期刊2019年05期）
段永娟,王文天,魏晓晶,杨洋,赵慧娟[2]（2019）在《无血清培养体系对脐带血CD34~+细胞定向红系分化影响的比较》一文中研究指出目的:通过3种无血清红系定向诱导分化培养体系比较,优化培养体系诱导脐带血干/祖细胞(HSPC)体外红系定向分化,以满足基础研究与临床应用。方法:应用磁珠分选脐带血单个核细胞中的CD34~+细胞;分别接种到3种培养体系(1、2、3)中并采用3阶段培养法诱导CD34~+细胞红系定向分化,在分化不同阶段进行细胞计数,瑞氏吉姆萨染色,应用流式细胞术检测细胞表面CD71、CD235a的表达,集落形成能力检测鉴定红系分化的进程。结果:体系2促HSPC增殖能力最强,体系3促红系分化效果最佳。体系2培养的细胞增殖能力均明显高于体系1、2(P <0.05);FACS分析显示,红系表面分子CD71、CD235a在体系3培养的细胞表面表达最高,分化d 15 CD235a+百分率高达(92.23±3.89)%,体系2为(84.67±3.12)%,体系1为(72.17±6.83)%(P <0.05);细胞形态学染色显示,体系3培养的细胞在分化d 12的晚幼红细胞比例为(67.67±2.08)%,是体系2的10.69倍、体系1的25.34倍(P <0.05);造血集落形成实验发现在体系3中d 3-9形成的BFU-E比例逐渐升高(r=0.99, P <0.05),体系3中BFU-E形成比率明显高于体系1、2(P <0.05)。结论:通过比较3种培养体系,筛选出体系3是促进CD34~+细胞体外红系分化最有效的体系,体系2是促增殖最有效的体系。本研究为进一步提高HSPC体外红系增殖与诱导效率奠定了技术基础,也为研究红系分化调控机制提供了体外培养体系。(本文来源于《中国实验血液学杂志》期刊2019年03期）
张童[3]（2019）在《胚胎干细胞无血清培养过程的研究》一文中研究指出胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESCs)具有自我更新和多向分化潜能,在科学研究和临床医学领域具有巨大的应用前景,但要实现其实际应用价值必须克服干细胞数量稀少的瓶颈问题,因此,亟需建立高效、可控的ESCs培养过程。为此,本文以鼠胚胎干细胞(Mouse embryonic stem cells,mESCs)为研究对象,首先考察了饲养层的制备方法、血清对mESCs扩增特性的影响。结果发现:采用丝裂霉素处理制备的饲养层支持mESCs扩增效果优于固定化饲养层;采用明胶代替饲养层同样能支持mESCs稳定扩增并维持未分化状态;培养基血清浓度达5%既能支持mESCs的扩增也能使其维持未分化状态,据此建立了以明胶为饲养层、血清替代物代替血清的mESCs的无血清培养体系,该体系中mESCs的扩增倍数可达到2.95±0.5倍,SSEA-1+细胞比例在80%以上。在此基础上,分别考察了GSK3、MEK及FGFR抑制剂叁类小分子化合物种类及相互作用对mESCs扩增及全能性维持的影响。结果发现:与对照组相比,GSK3抑制剂(BIO及SB-216763)都能促进总细胞增殖,但会明显降低SSEA-1+细胞的比例;MEK和FGFR抑制剂均有利于mESCs的扩增;GSK3抑制剂SB-216763与MEK抑制剂(PD184352、PD0325901)或FGFR抑制剂(SU5402)中的一种或二种组合均可以促进mESCs的扩增;特别是SB-216763+PD0325901+SU5402组合不仅能促进总细胞扩增,还能显着提高SSEA-1+细胞比例,培养3代后总细胞扩增倍数和SSEA-1+细胞的比例可达318.78±47.95和80%以上明显高于对照组的38.89±18.44和70%左右(p<0.05)。其次,采用转瓶在无血清培养体系中考察了mESCs在Cytodex3微载体上的扩增特性,培养到第5天时mESCs扩增倍数最大可达到31.68±7.74倍明显高于静态培养时的17.92±9.80(p<0.05),SSEA-1+细胞比例在85%以上,且AKP染色及Oct4免疫荧光染色均呈阳性,实现了mESCs无血清无饲养层的动态悬浮培养。以上研究结果为胚胎干细胞的规模化制备技术的开发提供了依据。(本文来源于《华东理工大学》期刊2019-05-08）
刘素生[4]（2019）在《抗铁蛋白杂交瘤细胞无血清培养技术研究》一文中研究指出杂交瘤细胞具有无限繁殖和抗体分泌的双重优势,其规模化培养工艺是当前生产抗体产品的重要技术。规模化无血清培养杂交瘤细胞具有简化工艺、降低生产成本、提高抗体产量等优点。本文研究了血清对骨髓瘤及杂交瘤细胞生长的影响,在此基础上研发了适合杂交瘤细胞生长的无血清培养基,并进一步研究了杂交瘤细胞无血清培养基的转瓶扩大培养,主要内容包括以下几个部分:第一,配制含不同血清浓度(10%、7.5%、5%)的DMEM培养基,将生长状态良好、处于对数期的5H2、Sp2/0-Ab、Sp2/0叁种细胞分别以叁种不同的接种密度接种到含上述培养基的12孔细胞培养板中,考查了不同血清浓度、不同接种密度对细胞生长与增殖的影响。通过细胞计数仪测量的数据表明血清浓度对叁种细胞都有较大影响,叁种细胞在10%血清浓度培养基中正常生长而在低血清浓度中不能正常生长,在相同的血清浓度下,具有高细胞接种密度的细胞增殖较快并且倍增时间短。第二,将DMEM培养基、Ham's F-12培养基和RPMI1640培养基按照一定比例配制成基础培养基,在此基础上加入不同量的胰岛素、水解蛋白、转铁蛋白、胆固醇和乙醇胺等成分配制成无血清低蛋白培养基。通过细胞的无血清驯化培养考查了细胞在配制的无血清培养基和市售的无血清培养基中的生长情况,结果表明,配制的Z4培养基与市售培养基有相同的效果,细胞可以正常生长。第叁,用Z4和H-SFM培养基分别进行5H2细胞转瓶批培养,测量培养基中葡萄糖、谷氨酰胺、乳酸、氨及抗体浓度的变化情况。结果表明,H-SFM培养基细胞数量在第5天达到最高点14.57×10~5个/mL,抗体生成速率明显提高,到第7天时抗体浓度为39μg/mL。Z4培养基细胞数量在第6天达到最高点19.87×10~5个/mL,第7天时抗体浓度为56μg/mL。Z4培养基和H-SFM培养基中葡萄糖和谷氨酰胺浓度都呈现下降趋势,乳酸和氨浓度都呈上升趋势,适当提高葡萄糖和谷氨酰胺的起始浓度细胞生长也会有所提升。(本文来源于《河北大学》期刊2019-05-01）
张丽,王文芳,郭芸,邓丹琪,黄雅亮[5]（2019）在《无血清培养体系分离培养人脐带间充质干细胞》一文中研究指出目的用体外无血清培养体系分离培养人脐带间充质干细胞。方法取1例足月妊娠剖宫产健康胎儿脐带,采用组织块贴壁培养,使用无血清培养体系培养获得人脐带间充质干细胞。通过形态学观察,成脂、成骨、成软骨诱导分化能力检测及流式细胞术免疫表型检测进行鉴定。结果组织块贴壁培养6天后可见细胞从组织块边沿爬出;培养15天后,达到80%汇合,生长状况良好,细胞呈梭形,为典型的成纤维细胞形态,极性整齐排列,集落呈涡旋状,形态较均一。传代培养的第叁代细胞CD29、CD44、CD90、CD105均为阳性表达,不表达CD34和CD45,均具有成脂、成骨、成软骨分化的能力。结论无血清培养体系组织块贴壁法分离培养人脐带间充质干细胞法成功率高,其生物学特性稳定,并能消除由未确定的病原体引起的风险。(本文来源于《皮肤病与性病》期刊2019年01期）
陈小燕,吴应强,赵逵,朱蓉[6]（2019）在《结肠癌Caco-2细胞株无血清培养技术研究》一文中研究指出目的探索人结肠癌Caco-2细胞株肿瘤干细胞的分选方法。方法应用无血清悬浮培养法培养Caco-2细胞,产生肿瘤细胞球,并对肿瘤细胞球从形态学、分化、自我更新及交替培养等方面进行鉴定。结果 Caco-2细胞在无血清培养基(SFM)中可存活,24 h后可产生少量体积较小松散的悬浮肿瘤球,肿瘤球体积随时间延长而增大;将肿瘤球接种于完全培养基中12 h后细胞贴壁生长,细胞形态与传统培养形成的单细胞层无明显差异,重新消化贴壁细胞后再次悬于SFM中24～72 h后仍可形成悬浮细胞球,其形态与原代相同。结论结肠癌Caco-2细胞在SFM中可生成悬浮肿瘤细胞球,采用无血清悬浮培养法可达到富集肿瘤干细胞的目的。(本文来源于《现代医药卫生》期刊2019年02期）
张春雨[7]（2019）在《动物细胞无血清培养技术研究进展》一文中研究指出随着生命科学的不断发展,动物细胞培养技术已经越来越成熟,并且使其在实际应用方面也得到了充分利用。在科学水平进步的同时,为了使生物细胞培养技术更加适应社会的发展,让其有效的利用到医药产业与生命科学的研究当中,已经成为了目前细胞工程的重要发展目标。所以,本篇文章主要对动物细胞的种类和特点进行了介绍,并且对其在生物制药中的现状进行分析,有效的推动了细胞工程与生物制药的发展进程。在20世纪70年代中期,佐藤等科学(本文来源于《农民致富之友》期刊2019年02期）
阿尔祖古丽,马桂兰,阿依木古丽,乔自林[8]（2018）在《动物细胞无血清培养技术研究进展》一文中研究指出生物医药是21世纪的朝阳产业,动物细胞无血清培养技术在生物医药领域中发挥着重要作用。无血清培养技术包括无血清培养基的开发、适应细胞株的驯化以及细胞规模化培养技术等关键技术,以细胞生物反应器高密度培养技术作为基础的细胞无血清悬浮培养技术推动了生物制药的快速发展。(本文来源于《甘肃畜牧兽医》期刊2018年10期）
夏肖雪,吕正梅,张守兵[9]（2018）在《大鼠毛囊干细胞体外无血清培养体系的建立》一文中研究指出建立大鼠毛囊干细胞的体外无血清培养体系。使用化学成分确定的Knock Out血清替代物(KSR)代替现有毛囊干细胞生长培养基中的胎牛血清,比较两种培养基培养的毛囊干细胞的形态特点和生长情况;通过毛囊重建实验证明该无血清培养基能够在体外维持毛囊干细胞的"干性";检测无血清培养基培养的毛囊干细胞中α6-整合素、角蛋白K14和P63的表达情况。毛囊干细胞在该无血清培养基中可正常生长并表达上述蛋白,将其移植到裸鼠背部,能够重建含毛囊皮肤。建立了大鼠毛囊干细胞的体外无血清培养体系并重建有毛皮肤,为毛囊干细胞的临床研究和应用提供了理论基础和技术支持。(本文来源于《安徽医科大学学报》期刊2018年10期）
王莹,徐燕,庞罡,叶兴如,何家林[10]（2018）在《无血清培养下富血小板纤维蛋白提取液对牙髓干细胞增殖分化的影响》一文中研究指出目的:在无血清培养条件下,使用富血小板纤维蛋白提取液(platelet-rich fibrin extract,PRFe)对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)增殖及分化的影响。方法:从健康志愿者的阻生齿中分离培养hDPSCs,经细胞形态和流式细胞技术对其鉴定。实验组中使用含PRFe不含胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)的α-最低必须培养基(α-minimal essential medium,α-MEM),对照组中使用含10%FBS的α-MEM。噻唑蓝(methyl thiazol tetrazolium,MTT)法检测培养1~7d的细胞增殖情况。成骨能力的测定采用碱性磷酸酶染色,实时荧光定量聚合酶链式反应(real time quantitive-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)、骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)和runt相关转录因子2(runt-related transcription factor-2,RUNX-2)的表达。结果:hDPSCs高表达CD44、CD90和CD105,低表达CD34和CD45。两种培养基培养细胞形态相似,实验组的细胞形态更为纤长。随着诱导时间的增加,两组的成骨分化能力均上调(P<0.05),实验组成骨分化能力强于对照组(P<0.05)。结论:适宜浓度PRFe能够维持hDPSCs增殖分化。(本文来源于《口腔医学研究》期刊2018年07期）
无血清培养法论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:通过3种无血清红系定向诱导分化培养体系比较,优化培养体系诱导脐带血干/祖细胞(HSPC)体外红系定向分化,以满足基础研究与临床应用。方法:应用磁珠分选脐带血单个核细胞中的CD34~+细胞;分别接种到3种培养体系(1、2、3)中并采用3阶段培养法诱导CD34~+细胞红系定向分化,在分化不同阶段进行细胞计数,瑞氏吉姆萨染色,应用流式细胞术检测细胞表面CD71、CD235a的表达,集落形成能力检测鉴定红系分化的进程。结果:体系2促HSPC增殖能力最强,体系3促红系分化效果最佳。体系2培养的细胞增殖能力均明显高于体系1、2(P <0.05);FACS分析显示,红系表面分子CD71、CD235a在体系3培养的细胞表面表达最高,分化d 15 CD235a+百分率高达(92.23±3.89)%,体系2为(84.67±3.12)%,体系1为(72.17±6.83)%(P <0.05);细胞形态学染色显示,体系3培养的细胞在分化d 12的晚幼红细胞比例为(67.67±2.08)%,是体系2的10.69倍、体系1的25.34倍(P <0.05);造血集落形成实验发现在体系3中d 3-9形成的BFU-E比例逐渐升高(r=0.99, P <0.05),体系3中BFU-E形成比率明显高于体系1、2(P <0.05)。结论:通过比较3种培养体系,筛选出体系3是促进CD34~+细胞体外红系分化最有效的体系,体系2是促增殖最有效的体系。本研究为进一步提高HSPC体外红系增殖与诱导效率奠定了技术基础,也为研究红系分化调控机制提供了体外培养体系。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
无血清培养法论文参考文献
[1].史文凤,刘海波.无血清培养液流感病毒分离效果分析[J].江苏预防医学.2019
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