导读:本文包含了家猫血管紧张素转换酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:猫血管紧张素转换酶2(fACE2),家猫,SARS-CoV,受体
家猫血管紧张素转换酶论文文献综述
郭红燕,王冲,郭爱珍,颜邦芬,陈焕春[1]（2007）在《猫血管紧张素转换酶2的叁维结构模拟与真核表达》一文中研究指出家猫能自然及人工感染SARS病毒,本研究旨在探讨家猫ACE2潜在的SARS病毒受体功能。以人血管紧张素转换酶2(ACE2)序列为模板,用同源模建法模拟了家猫ACE2的叁维空间结构,发现家猫ACE2与人ACE2结构十分相似,其结合严重急性呼吸综合症(SARS)病毒囊膜纤突(S)蛋白的关键氨基酸的同源性很高(15/18)。将家猫血管紧张素转换酶2基因N端1-367 aa对应的基因片段及其跨膜区克隆到真核表达载体pcDNA3.1/myc-his(+)B中,构建了表达质粒pcDNA-mA367,转染HeLa细胞,间接免疫荧光检测表明fACE2的N端片段已在细胞膜上成功表达。(本文来源于《华中农业大学学报》期刊2007年01期）
郭红燕[2]（2006）在《家猫血管紧张素转换酶2基因表达、突变体构建及作为SARS-CoV受体的功能研究》一文中研究指出2002年冬天至2003年，我国爆发严重急性呼吸综合症，并迅速传播至全球二十多个国家，导致8000多人感染，将近10％感染者死亡，一种新的冠状病毒(SARS-CoV)是这场疫情的元凶。SARS-CoV的传播与动物有关。2003年，研究人员从果子狸中分离到了SARS病毒，全基因组序列与人类SARS病毒具有99％的同源性。最近研究又发现蝙蝠携带有类SARS-CoV，与人SARS-CoV基因组序列同源性达92％，不过这种病毒不会直接感染人类。野生蝙蝠可能是非典病毒的源头宿主，果子狸只不过是SARS-CoV变异传播链上一个很重要的环节，作为SARS-CoV的中间宿主和重要载体将病毒从野外传染到人类身上。家猫也是SARS-CoV的易感动物。2003年SARS大爆发期间，在香港陶大花园SARS患者家中的宠物猫血清中检测到了SARS-CoV。SARS-CoV人工感染家猫、雪貂也获得成功，病毒能够在家猫体内正常增殖，被感染的家猫能有规律排毒，出现与人类SARS-CoV感染类似的病理变化，并可将病毒传染给与其共同饲养的原本不带毒的动物。 人的血管紧张素转换酶2(ACE2)是SARS-CoV的一个功能性受体，本实验室首次克隆了家猫ACE2基因，为了深入探讨家猫ACE2基因作为SARS-CoV受体及其在SARS传播中的作用，本研究开展了如下工作： (1) 家猫ACE2空间结构建模：家猫ACE2基因编码的氨基酸序列与人ACE2同源性达85％，本研究以人ACE2结构为模板，用同源模建法建立了猫ACE2的叁维空间结构模型，蛋白质对接法模拟了猫ACE2分子与SARS-CoVS的RBD结合。所预测的叁维结构基本在一定程度上能反映出猫ACE2真实的空间构象，预测得到的模型与人ACE2的空间结构非常相似。比较ACE2分子中与SARS-CoV S蛋白受体结合区相接触的18个氨基酸，家猫ACE2只有叁个氨基酸与人ACE2不同，分别为L24Q、E38D与T82M，提示家猫ACE2可能为SARS-CoV的功能性受体。 (2) 家猫ACE2原核表达及与SARS-CoV S1蛋白的结合：人ACE2的受体功能区位于N端，SARS-CoV的受体结合蛋白为其纤突蛋白S1蛋白。为了获得家猫ACE2作为SARS-CoV受体的直接证据，本研究在大肠杆菌BL21(DE3)中表达了家猫ACE2 N端19aa-367aa，并纯化得到重组蛋白。经配体转印试验(ligand blotting assay)和ELISA均证实，重组的fACE2_(19-367)蛋白片段能够与重组的SARS-CoV S1蛋白结合。 (3) 猫ACE2基因的真核表达：为了深入研究猫ACE2基因的受体活性，进一步构建了基因片段的真核表达载体pcDNA-mfA367，间接免疫荧光检测表明家猫ACE2 N端laa-367aa在细胞膜上实现了定位表达。这为深入研究猫ACE2的SARS-CoV受体功能提供了重要工具。(本文来源于《华中农业大学》期刊2006-06-01）
王冲[3]（2005）在《家猫血管紧张素转换酶2基因的cDNA克隆、表达、生物信息学分析及其组织分布研究》一文中研究指出血管紧张素转换酶2(angiotensin-converting enzyme 2,ACE2)是一种金属蛋白酶,它广泛存在于人及动物的心脏、肝脏、肺脏、肾脏、睾丸以及肠道等主要器官中,在调节心脏、肾脏功能及控制血压中起到非常关键的作用,也有研究报道ACE2基因参与糖尿病肾病的病理发展,同时在睾丸组织的特异性表达被认为可能也参与了生殖能力的调节。最近发现,ACE2是严重急性呼吸系统综合症冠状病毒(severe acute respiratory syndrome associated coronavirus,SARS-CoV)的功能性受体。 SARS-CoV的纤突(Spike,S)蛋白能特异识别靶细胞上的ACE2蛋白并与之结合,从而介导病毒侵入靶细胞。业已发现除了人以外,恒河猴、果子狸、家猫、雪貂都是SARS-CoV的易感动物,小鼠、大鼠、果子狸等动物的ACE2同样能介导SARS-CoV感染细胞。有研究表明,多种Ⅰ和Ⅲ型冠状病毒都能够利用家猫中的特异受体从而侵入靶细胞。这些现象都说明家猫有可能在冠状病毒跨种感染以及新冠状病毒的衍生过程中起到重要作用。ACE2蛋白是2000年才鉴定出来的一种新蛋白,对其功能结构还缺乏彻底了解。目前仅对人、小鼠ACE2蛋白有深入研究,对家猫ACE2的研究仍属空白。 本研究克隆并表达了家猫ACE2基因,并对其编码蛋白的理化性质、功能结构进行分析和预测。通过RT-PCR方法检测了ACE2在各主要组织器官中的表达情况,并对部分基因进行了表达研究,具体研究内容如下: 根据已经报道的人及小鼠的ACE2基因mRNAm列设计引物,从家猫肺脏总RNA中分段扩增出家猫ACE2基因mRNA编码区序列。序列分析结果表明,家猫ACE2基因mRNA编码区序列长2418 bp,所编码的蛋白含805个氨基酸残基。经序列比较发现,家猫ACE2基因mRNA编码区序列与人、小鼠及大鼠ACE2基因mRNA编码区序列的同源性分别为86%、84%和84%,氨基酸同源性分别为85%、81%和81%。 利用生物信息学方法对家猫ACE2蛋白的物理化学性质、信号肽、跨膜螺旋、蛋白质二级结构、蛋白质结构域、基序以及蛋白质家族进行预测,同时综合各工具的预测结果对家猫ACE2蛋白的各方面性质进行了分析。与其它几种动物的ACE2相比,猫ACE2的SARS-CoV结合功能区氨基酸与人的同源性最高,提示猫可能在SARS-CoV的传播中起重要作用。 通过RT-PCR方法,检测家猫各组织器官中ACE2蛋白的表达分布,证实家猫主要组织器官中ACE2的表达分布与已经报道的人体分布情况一致。 通过对信号肽、跨膜螺旋的预测,再设计了一对引物特异性扩增信号肽与跨膜螺旋之间的片段。进一步构建原核表达质粒pET-ACE2,在大肠杆菌BL21(DE3)plysS中实现了表达,融合蛋白分子量约为85kD。(本文来源于《华中农业大学》期刊2005-05-01）
家猫血管紧张素转换酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
2002年冬天至2003年，我国爆发严重急性呼吸综合症，并迅速传播至全球二十多个国家，导致8000多人感染，将近10％感染者死亡，一种新的冠状病毒(SARS-CoV)是这场疫情的元凶。SARS-CoV的传播与动物有关。2003年，研究人员从果子狸中分离到了SARS病毒，全基因组序列与人类SARS病毒具有99％的同源性。最近研究又发现蝙蝠携带有类SARS-CoV，与人SARS-CoV基因组序列同源性达92％，不过这种病毒不会直接感染人类。野生蝙蝠可能是非典病毒的源头宿主，果子狸只不过是SARS-CoV变异传播链上一个很重要的环节，作为SARS-CoV的中间宿主和重要载体将病毒从野外传染到人类身上。家猫也是SARS-CoV的易感动物。2003年SARS大爆发期间，在香港陶大花园SARS患者家中的宠物猫血清中检测到了SARS-CoV。SARS-CoV人工感染家猫、雪貂也获得成功，病毒能够在家猫体内正常增殖，被感染的家猫能有规律排毒，出现与人类SARS-CoV感染类似的病理变化，并可将病毒传染给与其共同饲养的原本不带毒的动物。 人的血管紧张素转换酶2(ACE2)是SARS-CoV的一个功能性受体，本实验室首次克隆了家猫ACE2基因，为了深入探讨家猫ACE2基因作为SARS-CoV受体及其在SARS传播中的作用，本研究开展了如下工作： (1) 家猫ACE2空间结构建模：家猫ACE2基因编码的氨基酸序列与人ACE2同源性达85％，本研究以人ACE2结构为模板，用同源模建法建立了猫ACE2的叁维空间结构模型，蛋白质对接法模拟了猫ACE2分子与SARS-CoVS的RBD结合。所预测的叁维结构基本在一定程度上能反映出猫ACE2真实的空间构象，预测得到的模型与人ACE2的空间结构非常相似。比较ACE2分子中与SARS-CoV S蛋白受体结合区相接触的18个氨基酸，家猫ACE2只有叁个氨基酸与人ACE2不同，分别为L24Q、E38D与T82M，提示家猫ACE2可能为SARS-CoV的功能性受体。 (2) 家猫ACE2原核表达及与SARS-CoV S1蛋白的结合：人ACE2的受体功能区位于N端，SARS-CoV的受体结合蛋白为其纤突蛋白S1蛋白。为了获得家猫ACE2作为SARS-CoV受体的直接证据，本研究在大肠杆菌BL21(DE3)中表达了家猫ACE2 N端19aa-367aa，并纯化得到重组蛋白。经配体转印试验(ligand blotting assay)和ELISA均证实，重组的fACE2_(19-367)蛋白片段能够与重组的SARS-CoV S1蛋白结合。 (3) 猫ACE2基因的真核表达：为了深入研究猫ACE2基因的受体活性，进一步构建了基因片段的真核表达载体pcDNA-mfA367，间接免疫荧光检测表明家猫ACE2 N端laa-367aa在细胞膜上实现了定位表达。这为深入研究猫ACE2的SARS-CoV受体功能提供了重要工具。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
家猫血管紧张素转换酶论文参考文献
[1].郭红燕,王冲,郭爱珍,颜邦芬,陈焕春.猫血管紧张素转换酶2的叁维结构模拟与真核表达[J].华中农业大学学报.2007
[2].郭红燕.家猫血管紧张素转换酶2基因表达、突变体构建及作为SARS-CoV受体的功能研究[D].华中农业大学.2006
[3].王冲.家猫血管紧张素转换酶2基因的cDNA克隆、表达、生物信息学分析及其组织分布研究[D].华中农业大学.2005
标签：猫血管紧张素转换酶2(fACE2); 家猫; SARS-CoV; 受体;