导读:本文包含了地高辛标记的探针论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:Nkx2.,1基因,RNA探针,全胚胎原位杂交
地高辛标记的探针论文文献综述
张凯丽,孙雨晴,王宇飞,赵虹,郝宇卉[1]（2019）在《地高辛标记Nkx2.1基因RNA探针的制备及应用》一文中研究指出目的制备地高辛(digoxigenin,DIG)标记的Nkx2. 1基因RNA探针,用于小鼠胚胎早期神经管发育关键时期Nkx2. 1基因表达的检测。方法巢式PCR法扩增Nkx2. 1基因,将其克隆至pGEM-T载体;以其为模板,通过Nkx2. 1特异性引物,PCR扩增RNA探针转录模板;采用T7 RNA聚合酶,制备DIG标记的正义、反义Nkx2. 1 RNA原位杂交探针。经全胚胎原位杂交(whole-mount in situ hybridization,WM-ISH)技术分析胚胎8. 5、9. 5、10. 5 d小鼠体内Nkx2. 1基因的表达情况。结果制备的探针浓度为1 521. 986 ng/mL,纯度A260/280=2. 39。Nkx2. 1基因反义探针能高效检测到Nkx2. 1基因在胚胎8. 5、9. 5及10. 5 d小鼠神经系统中表达,正义探针未能检测到表达信号。结论成功制备了特异高效的DIG标记的Nkx2. 1基因RNA原位杂交探针,为进一步研究Nkx2. 1基因在小鼠胚胎组织中的表达,探索其在神经管发育中的作用机制奠定了基础。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2019年08期）
吴小环,刘文林,黄巧瑶,刘强[2]（2019）在《地高辛标记的斑马鱼酪氨酸羟化酶TH2基因RNA探针的制备与鉴定》一文中研究指出斑马鱼(zebrafish)在脊椎动物基因功能的研究中得到广泛应用,并且越来越多地应用到人类遗传疾病的研究中。基因测序发现在直系同源基因中,47%的人类基因与斑马鱼直向同源物具有一对一的关系[1]。此外,斑马鱼体形小、繁殖周期短,可在实验室中进行空间高效维护。在硬骨鱼进化上的基因组重复导致两个旁系同源的斑马鱼酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase, TH)编码基因TH1和TH2,其中TH1主要分布在脑内,TH2则主要分布(本文来源于《基础医学与临床》期刊2019年04期）
刘志贞,加叁叁,张凯丽,孙雨晴,赵虹[3]（2018）在《地高辛标记Ucp2基因RNA探针的制备和应用》一文中研究指出目的:制备用于检测小鼠胚胎早期Ucp2基因表达的地高辛标记的特异性RNA探针。方法:提取小鼠胚胎脑组织总RNA,设计引物,通过RT-PCR方法获取Ucp2基因片段,将其克隆到pGEM-T载体。分别利用Sp6、T7和Ucp2特异性引物,PCR扩增获得转录模板,通过Sp6及T7 RNA聚合酶,获得地高辛标记的正义、反义Ucp2 RNA原位杂交探针。检测标记探针的效价后,通过全胚胎原位杂交分析制备探针的特异性和杂交效果。结果:成功获得Ucp2基因正义、反义探针,反义探针能高效灵敏检测到Ucp2基因在小鼠胚胎Ed9.5、Ed10.5神经系统呈现高表达,而正义探针未能检测到表达信号。结论:成功制备了特异高效的地高辛标记Ucp2 RNA原位杂交探针,为进一步研究Ucp2基因在小鼠胚胎组织中的表达,尤其在神经组织的定位奠定基础。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2018年09期）
刘志贞,张凯丽,孙雨晴,赵虹,郝宇卉[4]（2018）在《地高辛标记Ucp2基因RNA探针的制备和应用》一文中研究指出神经管畸形(Neural Tube Defects, NTDs)是一种主要发生在中枢神经系统的严重先天性出生缺陷,中国山西省发病率统计结果高达19.9‰,已经成为导致新生婴儿先天畸形和残疾的重要原因之一。研究神经管畸形的发生机制,寻找治疗和预防NTDs的方法,已经成为了一个重要的研究课题,具有重要的研究意义。UCP2是线粒体解偶联蛋白家族(UCPs)的一员,位于线粒体内膜上的一类载体蛋白。参与能量代谢、ROS产生、胰岛素分泌调节和脂肪酸代谢等功能活动,与多种重要疾病有密切关系。UCP2在生物体大脑中枢神经系统部位大量存在,并且研究发现脑缺血、脑损伤等神经退行性模型时,UCP2表达上调,具有神经保护作用。为了进一步证明UCP2与NTDs两者之间的关系并深入探索其中的机制,因此合成制备用于检测小鼠胚胎早期Ucp2基因表达的地高辛标记的特异性RNA探针具有重要意义。我们提取小鼠胚胎脑组织总RNA,设计引物,通过RT-PCR方法获取Ucp2基因片段,将其克隆到pGEM-T载体。分别利用Sp6、T7和Ucp2特异性引物,PCR扩增获得转录模板,通过Sp6及T7 RNA聚合酶,获得地高辛标记的正义、反义Ucp2 RNA原位杂交探针。检测标记探针的效价后,通过全胚胎原位杂交分析制备探针的特异性和杂交效果。通过实验我们成功获得Ucp2基因正义、反义探针,反义探针能高效灵敏检测到Ucp2基因在小鼠胚胎Ed9.5、Ed10.5神经系统呈现高表达,而正义探针未能检测到表达信号。总之,本实验成功制备了特异高效的Ucp2RNA原位杂交探针,为进一步研究Ucp2基因在小鼠胚胎组织中的表达,尤其在神经组织的定位奠定基础。(本文来源于《第八届泛环渤海生物化学与分子生物学会2018年学术交流会论文集》期刊2018-06-30）
郑肖强,陈浩,窦砚国,杨晶,牛晓宇[5]（2016）在《鸭细小病毒地高辛标记探针的制备与应用》一文中研究指出根据GenBank发表的1株鸭细小病毒全基因组序列设计1对特异性引物,利用PCR扩增得到大小为301bp的片段,回收纯化后用地高辛进行标记,制备鸭细小病毒地高辛标记探针。特异性试验表明,该探针仅与鸭细小病毒发生特异性杂交反应,与GPV、MDPV、DcuV、DEV、DHAV-I、H9N2亚型AIV、N-DRV、NDV、TMUV杂交反应均为阴性。敏感性试验表明,该探针对鸭细小病毒核酸的最低检测量为25pg。应用制备的探针对山东、江苏和安徽等地采集的61份患病鸭和30份健康鸭组织进行检测,阳性率分别为97%和0%,与病毒分离结果符合率为98%。上述结果显示,本研究制备的探针特异性强、敏感性高,为该病的诊断和流行病学调查提供可靠的方法。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2016年12期）
蒋骄云,田文斐,冯龙,曲宪成[6]（2016）在《地高辛标记的黄鳝F64基因cRNA探针的制备及其应用》一文中研究指出以黄鳝F64基因序列为模板设计引物,扩增用于c RNA探针合成的模板,构建F64/p GM-T重组质粒并线性化,利用RNA聚合酶体外转录合成正、反义c RNA探针,并对其进行地高辛标记,利用原位杂交方法检测F64基因在黄鳝性腺发育过程中的表达变化情况。结果显示,正义探针未检测到阳性信号,反义探针检测到该基因在黄鳝性腺发育早期不表达,于V期性腺开始表达。研究结果表明,体外转录法可以有效合成c RNA探针,制备的c RNA探针可以准确检测F64基因的时空表达。(本文来源于《生物技术通报》期刊2016年03期）
孙小慧,刘晓凡,赵雅静,马超,刘鹏[7]（2016）在《地高辛标记DNA探针杂交法检测Vero细胞DNA残留量的适用性验证及应用》一文中研究指出目的对地高辛标记DNA探针杂交法检测人用狂犬病疫苗(Vero细胞)DNA残留量进行适用性验证及应用。方法对地高辛标记DNA探针杂交法检测人用狂犬病疫苗(Vero细胞)DNA残留量进行特异性、灵敏度及稳定性验证,并应用该方法检测3批人用狂犬病疫苗(Vero细胞)的DNA残留量。结果地高辛标记探针的标记效率为0.1 pg。验证结果显示探针与非同源DNA无杂交;最低检测限度为1 pg;探针在-20℃放置7个月后,检测灵敏度仍可达到1 pg;3批人用狂犬病疫苗(Vero细胞)中残留DNA含量均符合《中国药典》规定质量控制标准。结论地高辛标记DNA探针杂交法特异性、灵敏度好,结果稳定,适用于人用狂犬病疫苗(Vero细胞)中Vero细胞DNA残留量的检测及疫苗生产过程和其成品的质量控制,对其他以Vero细胞为基质的病毒性疫苗质量控制具有借鉴意义。(本文来源于《微生物学免疫学进展》期刊2016年02期）
蔡晓娜,王鹏,贺晓强,刘立平,陈海容[8]（2014）在《地高辛标记探针检测重组白细胞抑制因子-水蛭肽嵌合蛋白宿主DNA残留量的研究》一文中研究指出重组白细胞抑制因子-水蛭肽嵌合蛋白(recombinant neutrphil inhibitory factor and hirulog hybrid,TNHH)是一种通过基因工程技术改造的新型嵌合蛋白,临床上可用于急性脑栓塞后的脑组织损伤修复,减少脑水肿,防止微小血栓形成从而改善微循环,是一种有前景的心脑血管疾病治疗创新药物,目前已进入临床I、II期研究[1-2]。由于在生产过程(本文来源于《中国医药生物技术》期刊2014年01期）
谭荣荣,毛迎新,龚自明[9]（2013）在《地高辛标记DNA探针对茶园NPV的检测》一文中研究指出研究合成了茶尺蠖核型多角体病毒(Ectropis oblique nuclear polyhedrosis virus,EcobNPV)的地高辛标记DNA探针,采用斑点杂交检测茶园几种核型多角体病毒。结果表明,以含EcobNPV克隆片段的大肠杆菌菌液为样品时,斑点杂交检测灵敏度为80 CFU/μL。以感染病毒致死的茶尺蠖幼虫为试材,提取病毒基因组DNA,采用斑点杂交法检测均得到强的杂交信号。斑点杂交检测可有效区分茶园中几种核型多角体病毒,表明地高辛标记DNA探针的特异性好。(本文来源于《湖北农业科学》期刊2013年23期）
王超,刘庚,张林波[10]（2013）在《地高辛标记核酸探针检测重组人白细胞介素1受体颉颃剂中DNA残余量的研究》一文中研究指出试验旨在建立重组人白细胞介素1受体颉颃剂(interleukin-1receptor antagonist,IL-1ra)原液中宿主菌DNA残余量的检测方法。以重组白细胞介素1受体颉颃剂工程菌基因组DNA为模板,优化试验条件,借助超声波手段,制备地高辛标记的核酸探针,并以此探针进行狭缝杂交及显色反应。结果显示,在24批次重组人IL-1ra原液中,每人份使用剂量的宿主DNA残余量均小于10ng。结果表明,该方法灵敏度较高、特异性较强、重复性较好、操作步骤安全且较为方便,可用于重组人IL-1ra原液及半成品的DNA残余检测。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2013年11期）
地高辛标记的探针论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
斑马鱼(zebrafish)在脊椎动物基因功能的研究中得到广泛应用,并且越来越多地应用到人类遗传疾病的研究中。基因测序发现在直系同源基因中,47%的人类基因与斑马鱼直向同源物具有一对一的关系[1]。此外,斑马鱼体形小、繁殖周期短,可在实验室中进行空间高效维护。在硬骨鱼进化上的基因组重复导致两个旁系同源的斑马鱼酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase, TH)编码基因TH1和TH2,其中TH1主要分布在脑内,TH2则主要分布
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
地高辛标记的探针论文参考文献
[1].张凯丽,孙雨晴,王宇飞,赵虹,郝宇卉.地高辛标记Nkx2.1基因RNA探针的制备及应用[J].中国生物制品学杂志.2019
[2].吴小环,刘文林,黄巧瑶,刘强.地高辛标记的斑马鱼酪氨酸羟化酶TH2基因RNA探针的制备与鉴定[J].基础医学与临床.2019
[3].刘志贞,加叁叁,张凯丽,孙雨晴,赵虹.地高辛标记Ucp2基因RNA探针的制备和应用[J].中国生物工程杂志.2018
[4].刘志贞,张凯丽,孙雨晴,赵虹,郝宇卉.地高辛标记Ucp2基因RNA探针的制备和应用[C].第八届泛环渤海生物化学与分子生物学会2018年学术交流会论文集.2018
[5].郑肖强,陈浩,窦砚国,杨晶,牛晓宇.鸭细小病毒地高辛标记探针的制备与应用[J].中国兽医学报.2016
[6].蒋骄云,田文斐,冯龙,曲宪成.地高辛标记的黄鳝F64基因cRNA探针的制备及其应用[J].生物技术通报.2016
[7].孙小慧,刘晓凡,赵雅静,马超,刘鹏.地高辛标记DNA探针杂交法检测Vero细胞DNA残留量的适用性验证及应用[J].微生物学免疫学进展.2016
[8].蔡晓娜,王鹏,贺晓强,刘立平,陈海容.地高辛标记探针检测重组白细胞抑制因子-水蛭肽嵌合蛋白宿主DNA残留量的研究[J].中国医药生物技术.2014
[9].谭荣荣,毛迎新,龚自明.地高辛标记DNA探针对茶园NPV的检测[J].湖北农业科学.2013
[10].王超,刘庚,张林波.地高辛标记核酸探针检测重组人白细胞介素1受体颉颃剂中DNA残余量的研究[J].中国畜牧兽医.2013