导读:本文包含了抑制蛋白酶活性论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:亚麻蛋白,蛋白酶解,抗氧化肽,α-葡萄糖苷酶抑制剂
抑制蛋白酶活性论文文献综述
吴峰[1]（2019）在《亚麻多肽制备及其天然胰蛋白酶抑制剂对α-糖苷酶活性抑制的研究》一文中研究指出植物蛋白质经蛋白酶部分水解后,可获得具有生物活性的多肽诸如抗氧化、降血糖、抗肿瘤、抗高血压、活化细胞免疫机能等多肽,是现代食品和医药领域最热门的研究方向,也是提升植物蛋白利用价值的主要途径。来自各种植物的肽是潜在的抗氧化剂,如棉籽蛋白,乳清蛋白,大豆蛋白等水解多肽,抗氧化肽通过清除自由基等来发挥其能力。目前国内对于亚麻的研究主要集中在亚麻油脂的开发利用,而对于亚麻蛋白质的研究关注较少。我们以亚麻籽粕为原料进行抗氧化肽的制备,比较了不同酸性蛋白酶和中性蛋白酶酶解多肽的得率及多肽的抗氧化能力,结果表明:3.350黑曲酸性蛋白酶的酶解效果最好,多肽得率可达28.52%。通过蛋白酶的单因素和正交实验,确定亚麻多肽制备的最佳工艺条件为:酶解温度60℃、pH2.7、加酶量6500U/g、酶解时间2.5h,此条件下亚麻多肽得率为38.80%。凝胶色谱分析表明,该酶多肽的分子量主要分布在1000Da~7600Da范围内。酶解后的亚麻多肽具有良好的抗氧化能力,当酶解液质量浓度为1.5mg/ml时,DPPH自由基清除率为89.99%,当酶解液质量浓度为0.6mg/ml时,超氧阴离子的清除率为85.57%。糖尿病是人们公认的危害健康的顽疾之一,控制人体肠道中α-葡萄糖苷酶的活性是治疗糖尿病症状的有效方法之一。本实验室前期研究揭示亚麻胰蛋白酶抑制剂(Linum usitatissimum L.LUTI)是亚麻中一种兼具胰蛋白酶抑制剂和α﹣葡萄糖苷酶抑制剂双重活性的多肽。为了进一步研究亚麻双功能多肽的分子结构和抑制糖苷酶和胰蛋白酶活性的构效关系,我们化学合成亚麻双功能多肽基因,并克隆到pGEX-6p-1载体在大肠杆菌BL21中进行重组表达,获得可溶性蛋白GST-LINUS-TI,经GST-Prescission Protease切割后经GST-Spharose4B亲和柱和Sephacryl S-200凝胶柱纯化获得电泳纯的rLUTI,并分析rLUTI对双酶抑制活性,发现rLUTI对两种酶的抑制活性明显高于天然LUTI。利用α-糖苷酶酶活性测定以及凝胶过滤色谱和动态光散射(DLS),分析了亚麻胰蛋白酶抑制剂(LINUS-TI)和α-葡萄糖苷酶之间的关系,进一步证实LINUS-TI不仅能抑制抑制α-葡萄糖苷酶的活性,也可以在LINUS-TI和α-葡萄糖苷酶之间会形成复合物。利用基因定点突变获得rLUTI的T44/A和K45/A突变体,通过对突变体的抑制活性测定,发现它们对α-葡萄糖苷酶抑制活性显着下降,对胰蛋白酶抑制活性高于天然LUTI,对胰蛋白酶抑制活性低于rLUTI。利用ZDOCK服务器进行LINUS-TI和α-葡萄糖苷酶之间的分子对接,发现α-葡萄糖苷酶的12个氨基酸残基(Phe384,Asp392,Lys439,Asp568,Glu707,Asn708,Glu771,Asn772,Ser774,Gly780,Thr781,Glu784)与LINUS-TI的6个氨基酸残基(Ser1,Arg2,Arg3,Asp46,Phe47,Arg48)通过14个氢键(H键)形成界面相互作用。为验证分子对接结果,将LUTI基因及其点突变或缺失突变体基因连接到pET-3a载体上获得重组载体pET-3a-LUTI,转化至大肠杆菌菌株E.coliBL21(DE_3)表达经Q-Sepharose离子交换柱和Superdex75凝胶柱纯化获得电泳纯的野生型LUTI(rLUTI)及其突变体D46/A、F47/A、R48/A和缺失体rLUTI(2-69)、rLUTI(3-69)、rLUTI(4-69)、rLUTI(5-69)的蛋白样品。通过对缺失体和突变体的抑制活性测定,研究发现rLUTI的缺失体rLUTI(2-69)、rLUTI(3-69)、rLUTI(4-69)、rLUTI(5-69)对α-葡萄糖苷酶的抑制活性影响明显下降,胰蛋白酶抑制活性略微上升,rLUTI的D46/A,F47/A,R48/A突变体对α-葡萄糖苷酶的抑制活性影响明显下降,但丧失了对胰蛋白酶的抑制活性。以上结论结论表明亚麻胰蛋白酶抑制剂中N端SXXXP~([1-5])氨基酸序列在维持其双酶抑制活性上发挥着重要作用,特别在α-葡萄糖苷酶抑制活性方面尤为突出,rLUTI第44、45、46、47和48位氨基酸在抑制α-葡萄糖苷酶以及胰蛋白酶活性中的各自发挥的作用存在明显的差异,其中44和45位氨基酸是影响α-葡萄糖苷酶抑制活性的结构位点,46、47和48位氨基酸是影响胰蛋白酶抑制活性的结构位点。(本文来源于《山西大学》期刊2019-06-01）
邹俊哲,林凯,杨旭,谯飞,韩雪[2]（2019）在《植物乳杆菌和蛋白酶协同发酵水解大米蛋白ACE抑制肽高活性组分的氨基酸序列分析》一文中研究指出利用低大米蛋白制备过程发酵水解液中富含大米蛋白和肽。以乳杆菌L2-18+风味蛋白酶/菠萝蛋白酶+胃蛋白酶/酸性蛋白酶分步获得的大米蛋白水解液为研究对象,通过超滤获得小于3 kDa蛋白肽。经阳离子交换、凝胶柱层析和高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)叁步分离纯化,确定出高活性ACE抑制肽组分,IC_(50)值为33.81μg/mL。经液质联用(liquid chromatograph-mass spectrometer,LC-MS)鉴定分析,其多肽序列为VVFFAAAL。(本文来源于《食品研究与开发》期刊2019年08期）
杨雪,李云亮,陆峰,王禹程,黄姗芬[3]（2019）在《超声频率对大米蛋白酶解物及其胃肠模拟消化产物ACE抑制活性的影响》一文中研究指出研究不同的超声频率预处理对大米蛋白酶解产物及其胃肠道模拟消化产物的ACE抑制活性的影响,同时研究不同阶段大米蛋白酶解产物的多肽含量。研究表明,单频、双频顺序及双频同步超声虽然对大米蛋白的水解度均无显着影响(P>0.05),但是均可以显着提高酶解产物的ACE抑制活性(P<0.05)。单频超声20 kHz、双频顺序超声20/35 kHz及双频同步超声20/35 kHz对ACE抑制活性的影响最为明显,与对照组相比,分别增加了35.68%,66.24%和56.17%。双频超声对ACE抑制活性的提高幅度明显高于单频超声,且顺序超声优于同步超声。经胃模拟消化后,不同超声频率预处理均能显着提高蛋白酶解产物的ACE抑制活性。然而过肠模拟消化以后,与对照组相比,不同超声频率预处理对蛋白酶解产物的ACE抑制活性显着升高(P<0.05),然而与胃消化的结果相比则显着降低(P<0.05)。多肽含量测定结果表明,与对照相比,超声显着增加胃模拟消化后大米多肽的含量(P<0.05),而对于肠模拟消化后的大米蛋白含量显着降低(P<0.05)。结论:不同超声频率预处理均可促进大米蛋白酶解物及胃模拟消化后的ACE抑制活性;大米蛋白酶解产物经过胃消化后的多肽含量增加,而经过肠消化后的多肽含量反而降低;双频顺序超声效果优于双频同步超声,更优于单频超声。(本文来源于《中国食品学报》期刊2019年03期）
侯惠静,吴子健,石振鹏,姜宇峰[4]（2019）在《β-甘露糖苷酶酶解对HOVM结构与胰蛋白酶抑制活性的影响》一文中研究指出通过苯酚-硫酸法、8-苯氨基-1-萘磺酸(8-Anilino-1-naphthalenesulfonic acid,ANS)荧光探针法以及圆二色谱法检测分析β-甘露糖苷酶酶解处理鸡卵类黏蛋白(hen-egg ovomucoid,HOVM)上的糖基部分后,HOVM中糖基含量变化与蛋白的表面疏水性、二级结构组成以及HOVM对胰蛋白酶抑制活力之间的关系。研究结果表明:β-甘露糖苷酶酶处理降低了HOVM中糖基部分的含量,会逐步提高HOVM对胰蛋白酶的抑制活力,同时对于二级结构组成的影响不是很显着,但是随着糖基含量的降低,HOVM中无规则卷曲的含量降低与胰蛋白酶的抑制率逐渐增高具有显着的相关性。(本文来源于《食品研究与开发》期刊2019年04期）
孙雪飞,于寒松,谷春梅[5]（2018）在《豆浆豆腐中胰蛋白酶抑制因子活性的研究》一文中研究指出豆制品中含有丰富的营养物质,但其中的抗营养因子阻碍人体对营养物质的吸收。分别采用6种不同制浆工艺将5种原料豆进行豆浆、豆腐的制备,测定大豆和豆浆中蛋白含量以及豆浆、豆腐的产量,通过分析不同大豆品种及制浆工艺与豆制品产量及蛋白含量之间的关系,以产量为指标,研究不同大豆品种及其加工工艺对豆制品产量及蛋白含量的影响,选取高产量、高蛋白的豆制品。并采用紫外分光光度计法分别对原料豆、豆浆、豆腐等进行大豆胰蛋白酶抑制因子活性的检测,得出低大豆胰蛋白酶抑制因子活性的品种及加工豆制品的制浆工艺。结果表明,豆制品产量与蛋白含量成正比,不同大豆品种采用不同制浆工艺所制得的豆浆、豆腐中胰蛋白酶抑制因子活性具有显着性差异,为不同大豆品种适用性加工及工业化生产提供理论依据。(本文来源于《食品研究与开发》期刊2018年21期）
张小梅,雷青松,秦波,李麟[6]（2018）在《泛素特异性蛋白酶18抑制IFNα抗HBV活性但并不抑制IFNλ抗HBV的活性（英文）》一文中研究指出干扰素α(IFN-α)是临床最常用的抗乙型肝炎病毒(HBV)药物之一。泛素特异性蛋白酶18(USP18)被证实是抑制IFN-α抗HBV活性的因子,但USP18是否对干扰素λ(IFN-λ)抗HBV有影响还尚未可知。为了明确USP18对IFNλ抗HBV活性的影响,本研究以Hep G2. 2. 15细胞作为乙肝体外模型,采用脂质体转染法分别向细胞转染p EGFP-USP18、PEGFP-N1经48 h,再经IFN-α和IFN-λ处理24 h,分为阴性对照组﹑USP18过表达+IFN-α组﹑空载组+IFN-α组﹑USP18过表达+IFN-λ组﹑空载组+IFN-λ组。采用Western印迹、RT-q PCR和ELISA检测各组的乙肝病毒标志物、STAT1/p STAT1和下游的干扰素刺激基因(ISGs)的表达。结果显示,与阴性对照组和空载组相比,USP18蛋白在过表达组明显升高(P <0. 05),过表达细胞模型构建成功;在IFN-α处理的两组中,空载组中HBs Ag、HBe Ag、HBc Ag及HBV-DNA的表达均低于USP18过表达组,差异有统计学意义(P <0. 05)。而IFN-λ处理组中,乙肝病毒标志物的差异不明显。在IFN-α处理组中,空载组的ISG15、Mx A、IFIT1和p STAT1表达均高于USP18过表达组,差异有统计学意义(P <0. 05),而在IFN-λ处理组中ISGs和p STAT1的表达无明显差异。上述结果证实,USP18可通过抑制JAK/STAT信号通路的激活来减弱IFN-α抗HBV的活性。研究还证实,IFN-λ可发挥抗HBV的作用,USP18不通过JAK/STAT信号通路抑制其抗HBV活性。(本文来源于《中国生物化学与分子生物学报》期刊2018年09期）
穆利霞,谢书越,李伟欣,林光月,邹宇晓[7]（2018）在《家蚕蛹蛋白酶解产物对肿瘤细胞MGC-803的增殖抑制活性鉴定》一文中研究指出以不同蛋白酶酶解制备家蚕蛹蛋白酶解产物(SPPHs),采用MTT比色法检测其对人胃腺癌细胞MGC-803的增殖抑制活性。不同蛋白酶酶解制备SPPHs对MGC-803的增殖抑制作用存在显着差异(P<0.05),其中家蚕蛹蛋白以Alcalase 2.4L酶解的产物(AH)对MGC-803的增殖抑制活性最高,当AH的质量浓度为0.25 mg/m L时,水解度(DH)=25%的AH的抑制活性最高,对MGC-803细胞的增殖抑制率可达到92.74%。Alcalase2.4L酶解家蚕蛹蛋白产物的分子质量也显着影响其对MGC-803细胞的增殖抑制活性,其中分子质量<5 k D组分的抑制率高达91.13%,将该组分经葡聚糖(G-25)凝胶层析后分离出4个组分(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ),组分Ⅱ对MGC-803细胞的增殖抑制率最高(27.5%),但与未分离样品相比,抑制效率显着降低,而其他3个分离组分则无抑制作用。研究结果提示,蚕蛹蛋白酶解产物对肿瘤细胞的体外增殖有抑制作用,并且这种抑制作用可能是由多种组分协同完成。(本文来源于《蚕业科学》期刊2018年04期）
吴莎莎,王蕾,石亚伟[8]（2018）在《具有抑制糖苷酶和胰蛋白酶双重活性的亚麻多肽的大肠杆菌重组表达及其活性分析》一文中研究指出亚麻胰蛋白酶抑制剂(Linum usitatissimum L.LUTI)是亚麻中一种兼具胰蛋白酶抑制剂和α-葡萄糖苷酶抑制剂双重活性的多肽。文章将LUTI基因连接在pGEX-6p-1载体上获得重组载体pGEX-6p-1-LUTI,转化至大肠杆菌菌株E.coliBL21(DE3)表达,经GST-Sepharose4B、Prescission Protease酶切GST标签、Sephacryl S-200凝胶层析,获得分子量大小为8kDa电泳纯的重组LUTI(rLUTI)。经抑制活性测定,相比天然的LUTI,rLUTI对胰蛋白酶和α-葡萄糖苷酶抑制活性明显提升。二硫键存在与否对两种酶的抑制活力均有影响。利用定点突变技术获得rLUTI的C4/A,C49/A,C4、49/A突变体,进一步双酶抑制活性及CD结构分析显示,rLUTI的C4/A、C49/A及C4、49/A突变体对胰蛋白酶抑制活性影响尤为明显,α-葡萄糖苷酶的抑制活性略微下降;其中rLUTI的C49/A及C4、49/A突变体完全丧失了对胰蛋白酶的抑制活性。C4/A的突变对rLUTI的二级结构影响最为明显,导致α螺旋结构含量的降低。以上结果表明rLUTI第4位氨基酸Cys是影响其二级结构的关键位点,第49位氨基酸Cys则在维持其双酶抑制活性上发挥着重要作用,特别在胰蛋白抑制活性方面尤为突出。(本文来源于《山西大学学报(自然科学版)》期刊2018年01期）
王桃梅,赵俊香,陈琨,陶秀娟,高清菡[9]（2018）在《枸杞蛋白酶解液对ACE活性的抑制作用及其对高血压大鼠的降压效果研究》一文中研究指出目的研究枸杞蛋白经酶解后产物对血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)活性的抑制作用及其对自发性高血压大鼠的降压效果。方法以N-(3[2-呋喃]丙烯酰)-苯基丙氨酸-甘氨酸-甘氨酸(FA-Phe-Gly-Gly,FAPGG)作为ACE的底物,用全波长酶标仪于340nm波长下,对枸杞蛋白酶解液的ACE活性抑制率进行测定。并选用10～11周龄、体重240～280g、收缩压(SBP)>180mmHg的SPF级雄性自发性高血压大鼠(SHR组)45只,对枸杞蛋白酶解液的降压效果进行检测。SPF鼠随机分为SHR模型组、阳性对照组、枸杞蛋白酶解液的低剂量组(40mg·kg~(-1))、中剂量组(80mg·kg~(-1))和高剂量组(100mg·kg~(-1)),每组各9只。正常Wistar-Kyoto(WKY组)大鼠9只为对照组。WKY组和SHR模型组给予相应剂量的蒸馏水,阳性对照组给予10mg·kg~(-1)卡托普利。连续灌胃9周。给药前后测量大鼠血压和体重,实验结束后取大鼠心脏、肺脏、脾脏、肝脏及肾脏,称重并计算各脏器系数。结果枸杞蛋白酶解液对ACE的抑制率为(90.01±3.03)%。各组SHR的进食量、心脏、肝脏及肾脏的脏器系数均高于WKY组;SHR模型组、阳性对照组、中剂量组和高剂量组的大鼠体重增加值均低于WKY组(P均<0.05);WKY组大鼠第4周和第8周时的心率低于实验前(P<0.05);在第0周至第8周,SHR模型组、阳性对照组、中剂量组和高剂量组大鼠SBP和DBP均高于WKY组(P均<0.05),阳:性对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组大鼠的血压随服药时间延长而呈下降趋势(P<0.01)。不同时间点枸杞蛋白酶解液低、中、高剂量组之间的SBP和DBP差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论枸杞蛋白酶解液对ACE的活性具有抑制作用;能够降低心脏、肝脏及肾脏的脏器系数,对心、肾功能有一定的保护作用;并通过抑制ACE的活性达到降低自发性高血压大鼠SBP的作用。(本文来源于《宁夏医科大学学报》期刊2018年01期）
蔡玉兴,刘慧中,胡优敏,张建华,金玉杰[10]（2017）在《莨菪烷类化合物拮抗M_3受体、抑制中性粒细胞弹性蛋白酶活性的研究》一文中研究指出目的·设计、合成5个新莨菪烷类化合物,测试其拮抗M3受体、抑制中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)的活性,初步分析2种活性的构效关系。方法·对莨菪烷母核的C-3α位、N原子进行结构改造,以3α-羟基莨菪烷(A0)为起始物,合成A1~A3、B1、C1。选取豚鼠气道环为测试样本,通过离体组织功能实验,测试目标物对M3受体的拮抗活性。利用NE催化底物PGlu-Pro-ValPNA的水解反应,测定有色产物硝基苯胺(PNA)的吸光度值[D(405 nm)],获得目标物对NE的抑制活性。结果·5个新化合物对M3受体都具有较强的拮抗作用,其中A2的拮抗活性最大,拮抗参数pA_2(M_3)=9.004;并且A2对NE具有较明显的抑制作用(抑制率Y_(A2)=20.29%)。结论·在莨菪烷母核的C-3α位引入强吸电子基团磺酰基和大体积疏水基团时,有利于同时提高化合物拮抗M_3受体、抑制NE的活性。(本文来源于《上海交通大学学报(医学版)》期刊2017年08期）
抑制蛋白酶活性论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
利用低大米蛋白制备过程发酵水解液中富含大米蛋白和肽。以乳杆菌L2-18+风味蛋白酶/菠萝蛋白酶+胃蛋白酶/酸性蛋白酶分步获得的大米蛋白水解液为研究对象,通过超滤获得小于3 kDa蛋白肽。经阳离子交换、凝胶柱层析和高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)叁步分离纯化,确定出高活性ACE抑制肽组分,IC_(50)值为33.81μg/mL。经液质联用(liquid chromatograph-mass spectrometer,LC-MS)鉴定分析,其多肽序列为VVFFAAAL。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
抑制蛋白酶活性论文参考文献
[1].吴峰.亚麻多肽制备及其天然胰蛋白酶抑制剂对α-糖苷酶活性抑制的研究[D].山西大学.2019
[2].邹俊哲,林凯,杨旭,谯飞,韩雪.植物乳杆菌和蛋白酶协同发酵水解大米蛋白ACE抑制肽高活性组分的氨基酸序列分析[J].食品研究与开发.2019
[3].杨雪,李云亮,陆峰,王禹程,黄姗芬.超声频率对大米蛋白酶解物及其胃肠模拟消化产物ACE抑制活性的影响[J].中国食品学报.2019
[4].侯惠静,吴子健,石振鹏,姜宇峰.β-甘露糖苷酶酶解对HOVM结构与胰蛋白酶抑制活性的影响[J].食品研究与开发.2019
[5].孙雪飞,于寒松,谷春梅.豆浆豆腐中胰蛋白酶抑制因子活性的研究[J].食品研究与开发.2018
[6].张小梅,雷青松,秦波,李麟.泛素特异性蛋白酶18抑制IFNα抗HBV活性但并不抑制IFNλ抗HBV的活性（英文）[J].中国生物化学与分子生物学报.2018
[7].穆利霞,谢书越,李伟欣,林光月,邹宇晓.家蚕蛹蛋白酶解产物对肿瘤细胞MGC-803的增殖抑制活性鉴定[J].蚕业科学.2018
[8].吴莎莎,王蕾,石亚伟.具有抑制糖苷酶和胰蛋白酶双重活性的亚麻多肽的大肠杆菌重组表达及其活性分析[J].山西大学学报(自然科学版).2018
[9].王桃梅,赵俊香,陈琨,陶秀娟,高清菡.枸杞蛋白酶解液对ACE活性的抑制作用及其对高血压大鼠的降压效果研究[J].宁夏医科大学学报.2018
[10].蔡玉兴,刘慧中,胡优敏,张建华,金玉杰.莨菪烷类化合物拮抗M_3受体、抑制中性粒细胞弹性蛋白酶活性的研究[J].上海交通大学学报(医学版).2017
标签：亚麻蛋白; 蛋白酶解; 抗氧化肽; α-葡萄糖苷酶抑制剂;