200940上海市第一人民医院宝山分院上海谢骊
由于分子生物学技术的迅猛发展，人们对乙肝病毒（ＨＢＶ）相关抗体，尤其是抗-HBs的临床意义有了新的认识。就此本院门诊收集122例ＨＢＶ相关抗体阳性血清，应用全自动荧光定量ＰＣＲ仪来检测血清ＨＢＶ－ＤＮＡ（拷贝/mL）与相关抗体间的关系。分析如下：
资料与方法
1.资料
选择2009年1月到2010年2月间125例未接种过乙肝疫苗。乙肝相关抗体阳性者，设Ａ，Ｂ，Ｃ三组。对照组15名，选取曾接种过乙肝疫苗后抗-ＨＢs（+）者。
2.方法
血清中相关抗体检测用ＥＬＩＳＡ法，试剂由上海科华公司提供。血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ（拷贝/mL）的检测用美国ABI公司生产的7500全自动荧光定量PCR仪,试剂由深圳凯杰公司提供，按说明书进行操作。
结果
血清ＨＢＶ－ＤＮＡ检测结果
参考值＜420拷贝/mL，Ａ组与Ｂ组比较，Ｐ＞0.05；Ｂ组与Ｃ组比较，Ｐ＞0.05；Ａ组与Ｃ组比较，Ｐ＞0.05。均无显著性差异；Ａ，Ｂ，Ｃ三组与对照组比较，Ｐ＜0.01，差异显著。
讨论
应用美国ABI公司生产的7500全自动荧光定量PCR仪检测血中ＨＢＶ－ＤＮＡ，具有很好的重要性，特异性，较高灵敏度和较宽的线性范围（102-1012）[1]。该仪器具有全自动核酸纯化分装系统，可消除纯化过程中的污染。检测血液中ＨＢＶ－ＤＮＡ数量，可直接反映血液中ＨＢＶ颗粒的数量[2]。本文研究结果，Ａ组ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率10％，与文献[3]报道接近（11.8％），Ｂ组23％，Ｃ组12.5％，对照组检出率0％；Ｂ组的ＨＢＶ－ＤＮＡ检出的拷贝/mL值，明显高于Ａ组和Ｃ组，但统计学处理后Ｐ＞0.05，无显著差异。ＡＢＣ三组与对照组比较，Ｐ＜0.01，差异显著。这结果使得抗-ＨＢs的特定临床意义的传统解释与ＨＢＶ－ＤＮＡ检出结果出现不相符的状况。在抗-ＨＢs出现后肝细胞中的病毒复制仍可持续，即所谓“潜隐性病毒基因组”[4]，因此，该抗体的出现并不能表示ＨＢＶ复制停止，而是复制水平的降低[4]。近年来文献报道抗-ＨＢs可以单独或（和）ＨＢsAg同时存在于与ＨＢＶ感染相关的慢性肝病患者血清中，这些患者体内可能有ＨＢＶ存在和复制[5]，认为其可能原因：①ＨＢ-ＶＭ模式的转变过程中，抗-ＨＢs的滴度较低；②先后感染了不同ＨＢＶ亚型，抗-ＨＢs仅能中和血清中的同型病毒；③Ｓ基因变异。这些变异株仍具有致病性和传染性[3]。据有作者认为，自然感染者血清中任何ＨＢＶ抗体的出现都提示有ＨＢＶ的存在和复制[5]。因近年来在肝移植手术时多次发现，移植抗-ＨＢｃ阳性健康成人肝脏后，受者不久即出现严重乙型肝炎，提示核心抗体阳性具有ＨＢＶ复制的潜在能力[6]。近年来文献报道，输血者输血后肝炎有20％是ＨＢＶ感染所致。抗-ＨＢs，抗-ＨＢｅ。抗-ＨＢｃ三者阳性无需重视的概念应该逐渐更正[6]。因此，今后需加强ＨＢsAg阴性的ＨＢＶ感染的检测，有必要改进ＨＢｓＡｇ检测方法和ＰＣＲ检测ＨＢＶ-ＤＮＡ方法的标准化，追踪观察，更进一步明确ＨＢＶ-ＤＮＡ低水平复制的临床意义及做好传染源的管理，有效控制乙型肝炎的传播。
[参考文献]
[1]陶志华、陈晓东、王忠永等.乙型肝炎病毒ＤＮＡ荧光定量ＰＣＲ的建立与应用[Ｊ]．临床检验杂志，2002，20（5）；282-284。
[2]王豪.乙型肝炎病毒检测指标的临床意义[Ｊ]．卫生部继续教育培训班学员通讯，2002，3：9-11。
[3]黄利华.ＨＢＶ血清标志物特殊模式的再认识[Ｊ]。国外医学：流行病学传染病学分册，2002，29：84-86。
[4]吕娇健、孙慧伶、朱梦飞等.抗-ＨＢs阳性ＨＢＶ-ＤＮＡ检测和肝活检的临床意义[Ｊ]。临床肝胆病杂志，2002，18：60。
[5]何晋德、全文斌、邹磊等。正常人血清中乙型肝炎病毒相关抗体与其ＤＮＡ间关系的研究[Ｊ]。中华内科杂志，2000，39：618-619。
[6]贾克明、加强乙型肝炎治疗的研究[Ｊ]中华内科杂志，2000，39：797-798。