导读:本文包含了基因阻断论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:圈卷产色链霉菌,基因阻断,形态分化,尼可霉素
基因阻断论文文献综述
孙军,李敬敬,李月,王川,蔡原[1]（2019）在《圈卷产色链霉菌san7324和san7324L基因阻断对形态分化和尼可霉素产生的影响》一文中研究指出【目的】圈卷产色链霉菌全局性调控基因wblA阻断突变后,尼可霉素不再产生。RNA-seq和转录分析表明san7324基因在野生型菌株中可以正常转录,而在wblA阻断突变株(ΔwblA)中不能转录,为此本文旨在揭示san7324与尼可霉素产生的关系。【方法】利用同源双交换策略对san7324进行基因阻断,而后通过基因遗传回补及对尼可霉素生物合成相关基因的转录分析等方法研究san7324的功能。【结果】在相同培养条件下,阻断突变株Δsan7324与野生型菌株相比失去了合成尼可霉素的能力。我们通过同源比对发现圈卷产色链霉菌中还存在一个与san7324同源的基因san7324L,该基因的阻断导致尼可霉素产量降低。当san7324和san7324L两个基因同时被阻断后,得到的突变株Δsan7324-san7324L生长稀疏而且不能正常发育分化形成灰色表型的孢子或孢子链,只能形成白色表型的气生菌丝,同时也丧失了合成尼可霉素的能力。当这两个基因(san7324-san7324L)回补双突变株后,则恢复了野生型的表型(能形成孢子链并恢复尼可霉素的产生)。进一步的研究初步表明san7324和san7324L的阻断主要影响了尼可霉素生物合成基因簇中途径特异性调控基因sanG的转录水平,从而影响圈卷产色链霉菌的发育分化和尼可霉素的产生。【结论】该结果为链霉菌形态分化与生理代谢关系的研究提供了更多的证据,同时为多效调控基因wblA作用机制的阐明奠定了基础。(本文来源于《微生物学报》期刊2019年02期）
江俊,吴东明,刘腾,许颖[2]（2016）在《干扰SLC39A6基因阻断宫颈癌细胞上皮间质转化的研究》一文中研究指出目的已有研究表明SLC39A6与肿瘤转移能力密切相关,然而其在宫颈癌中表达及其功能尚无明确研究,本文拟通过研究SLC39A6在宫颈癌中表达及其对宫颈癌EMT的功能进行研究。方法通过TCGA数据库中cBio Cancer Genomics Portal工具对SLC39A6在宫颈癌中表达及其与宫颈癌患者的生存期进行相关性分析。通过RNAi技术结合慢病毒技术,对宫颈癌细胞(Hela)中SLC39A6进行稳定干扰,研究SLC39A6基因干扰对宫颈癌细胞上皮间质转化(EMT)及转移能力的影响。结果通过TCGA数据库研究表明SLC39A6与宫颈癌患者生存期呈负相关。干扰SLC39A6可明显抑制宫颈癌细胞上皮间质转化及转移能力。结论 SLC39A6与宫颈癌发生发展密切相关,抑制SLC39A6可抑制宫颈癌细胞转移,表明SLC39A6可作为潜在的宫颈癌诊断标志物及治疗靶点。(本文来源于《第七届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛论文汇编》期刊2016-09-09）
沈凤英,吴伟刚,张艳杰,寇宏达,冀红柳[3]（2015）在《玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63 nsdA_(mgh)基因阻断突变株的构建》一文中研究指出为研究从玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63中克隆到的,与天蓝色链霉菌M 145中的一个重要负调控基因nsd A基因同源的nsdA_(mgh)基因的功能,本文构建了nsd A_(mgh)基因破坏型重组质粒pSRNA2500(pKC1139::1.5 kb nsdA_(mgh)::1.0 kb Km~r),转化ET12567(pUZ8002)获得接合转移供体菌ET12567(pUZ8002,pSRNA2500),通过接合转移将重组质粒导入玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63中。在高温和抗生素双重筛选压力下,筛选得到表型为Am~sKm~r的nsd A_(mgh)基因阻断突变株,通过PCR、Dot bloting和Southern blotting验证了突变株中的nsdA_(mgh)基因已被正确阻断。与出发菌株相比,突变株在摇瓶水平上对棉花黄萎病菌的抑制能力提高了一倍。(本文来源于《生物工程学报》期刊2015年12期）
蒋元维[4]（2012）在《刺糖多孢菌S04-41 relA基因阻断株的构建及其对功能的影响》一文中研究指出多杀菌素(spinosyns)是一种新型生物杀虫剂,是由土壤放线菌刺糖多孢菌(Saccharopolyspora spinosa)经有氧发酵产生的次级代谢产物,其主要活性成分A和D,合称为spinosad,能有效防治大部分鳞翅目、直翅目、双翅目和鞘翅目害虫,且具有杀虫活性高,杀虫谱广,和环境友好性等特点。目前,野生的刺糖多孢菌合成多杀菌素的能力相对较弱,国内外研究者们一直致力于菌种改良,采用的策略从传统的诱变育种向利用代谢工程原理进行定向遗传改造转变。本研究以促进刺糖多孢菌多杀菌素合成能力为目的,采用基因工程手段,开展relA基因阻断研究,对刺糖多孢菌(Saccharopolyspora spinosa) S04-41进行了菌种改良。relA基因编码、指导合成Re1A蛋白,它催化合成胞内生理效应分子(p)ppGpp,一方面可介导细菌在环境胁迫下引发应激反应；另一方面在菌株生长从对数期向稳定期转变的这一过渡期中,作为全局性调控因子在基因的复制、转录和翻译水平上调节生理代谢,广泛抑制菌体生长相关基因的表达,同时促进稳定期相关基因的表达,从而影响次级代谢产物的合成种类、产量及合成时间。本研究以野生菌株刺糖多孢菌(Saccharopolyspora spinosa)S04-41基因组DNA为模板,PCR扩增得到1.15kb relA部分基因片段,酶切连接于pOJ260上,构建重组载体pOJ260-relA,电转化大肠杆菌S17-1,经结合转移进入刺糖多孢菌S04-41中,通过同源重组整合于染色体上,得到了一株遗传性能稳定的relA基因阻断菌株。PCR鉴定正确的接合子命名为SP-relA。较出发菌株,突变株SP-relA多杀菌素A和D生物合成量分别提高了1.84、1.43倍,产生了一红褐色色素沉着物质,生长速度加快了,且提前进入稳定期。然而,突变株SP-relA的整体生长趋势同野生菌株一致,其菌落表观形态也无明显差异。总之,本研究为进一步进行刺糖多孢菌菌种改良提供了一定价值的信息,围绕多杀菌素生物合成代谢途径,通过表达特异性途径的正调节子或阻断特异性途径负调节子来增加多杀菌素生物合成通量,通过上调前体生物合成的关键酶来增加前体供给,以及减少spinosad以外的多杀菌素组分的生成等手段,提高刺糖多孢菌的多杀菌素合成能力。(本文来源于《湖南师范大学》期刊2012-06-01）
陈艳萍[5]（2012）在《默诺霉素产生菌relA基因和nsdA基因阻断的研究》一文中研究指出默诺霉素(moenomycin)是一类磷酸糖脂类抗生素,主要用于动物生长促进剂,斑堡链霉菌和加纳链霉菌为主要生产菌。relA基因是首先于大肠杆菌中发现的一个多效调控因子,后来也在链霉菌中被发现,编码(p)ppGpp合成酶。随后的研究发现relA基因存在于多种链霉菌中且序列高度保守,对链霉菌抗生素的合成和产孢形态分化均有调控作用。nsdA是首先在天蓝色链霉菌(Streptomyces coelicolor)中发现的一个全局性负调节基因,对天蓝色链霉菌的形态分化与抗生素的合成有负调控作用,随后的研究发现在多种链霉菌中nsdA均保守存在。基于链霉菌代谢调控网络的复杂性,relA和nsdA基因普遍性和多效性,本实验研究的目的是利用基因同源重组技术阻断斑堡链霉菌(Streptomyces bambergiensis)和加纳链霉菌(Streptomyces ghanaensis) relA基因和nsdA基因,研究它们对形态分化及次级代谢产物默诺霉素生物合成的影响。根据基因组序列已知的天蓝色链霉菌A(3)2relA和nsdA基因的保守序列设计引物,从斑堡链霉菌和加纳链霉菌总DNA中扩增得到它们的relA和nsdA基因,通过生物信息学分析发现,与其他链霉菌相比,斑堡链霉菌relA基因序列相似性可达83.55%以上,加纳链霉菌relA基因序列相似性可达85.37%以上；斑堡链霉菌nsdA基因序列相似性高达86.39%,加纳链霉菌nsdA基因序列相似性高达87.52%。为进一步研究relA和nsdA基因在斑堡链霉菌和加纳链霉菌中的功能,本研究以pKC1139为出发载体构建了同源重组质粒pKQRK, pKBRK分别阻断加纳链霉菌和斑堡链霉菌中的relA基因；pKQNK, pKBNK分别阻断加纳链霉菌和斑堡链霉菌中的nsdA基因。将这些重组质粒分别转化大肠杆菌ET12567(pUZ8002)获得接合转移供体菌,通过属间接合转移分别导入加纳链霉菌和斑堡链霉菌中。得到的接合转移子在高温和卡那霉素抗性双重筛选压力下,完成染色体上目的基因的阻断,实验得到斑堡链霉菌relA阻断突变株1203,加纳链霉菌relA阻断突变株0613,斑堡链霉菌nsdA阻断突变株0107,并通过PCR及测序验证relA和nsdA基因已分别被正确阻断。与出发菌株相比,在摇床发酵水平上斑堡链霉菌relA阻断突变株1203默诺霉素产量提高了18.59倍；斑堡链霉菌nsdA阻断突变株0107默诺霉素产量提高了22.41倍；而加纳链霉菌relA阻断突变株0613默诺霉素的产量大幅度降低,为出发菌株产量的55.5%。为了排除由于极性效应或其他位点突变造成的影响,进行了遗传互补实验,扩增含有完整目的基因的DNA片段酶切后连接到整合载体pIJ8630-ermE*P的对应酶切位点,构建用于遗传互补的重组质粒pIJBN,经过属间结合转移进入nsdA阻断菌株斑堡链霉菌0107。在相同条件下培养,nsdA基因阻断菌株0107的遗传互补菌S.bambergiensis0204恢复到野生株的状态,进一步证明nsdA突变株的变化是由于目的基因的阻断引起的。以上研究表明nsdA基因参与了斑堡链霉菌形态分化和次级代谢抗生素合成的调控途径,并起负调控作用；relA基因参与斑堡链霉菌和加纳链霉菌形态分化和次级代谢抗生素合成的调控途径,其调控模式因种的差异而不同。(本文来源于《浙江工业大学》期刊2012-04-01）
王广林,张金池,王群,王以光[6]（2012）在《Sterptomyces rochei 4089的L基因阻断变株的构建及功能研究》一文中研究指出运用同源重组技术破坏了一株格尔德霉素产生菌Sterptomyces rochei 4089的L基因,该基因编码氧化还原酶。以Sterptomyces rochei 4089基因组总DNA为模板,PCR扩增AHBA-KLM基因簇,采取Red/ET重组技术,构建L基因阻断质粒pKC1139-KLM-KmR。采用大肠杆菌与链霉菌的结合转移将阻断质粒含AHBA-KLM基因簇和Kan表达单元的3.0 kb线性片段转化Sterptomyces rochei 4089菌株,在卡纳霉素的平板上筛选卡纳霉素抗性转化子,经PCR检测分离到L基因阻断突变菌株。对原、变株的发酵液进行TLC和HPLC分析显示,Sterptomyces rochei 4089基因组中的L基因失活后,导致该菌株不能合成安莎类抗生素格尔德霉素。通过阻断L基因,为筛查这类放线菌产生安莎类抗生素提供了明确的组分指示作用。(本文来源于《生物学杂志》期刊2012年01期）
周秀敏,陶敏,徐红,李大鹏[7]（2010）在《乙肝病毒X基因阻断降低肝癌细胞HepG2.215与纤维连接蛋白的黏附》一文中研究指出目的探讨乙肝病毒X基因(HBX)在肝细胞癌(HCC)侵袭转移中的作用。方法利用psiRNA-hH1neo质粒,构建针对HBX的shRNA表达载体psiRNA1、psiRNA2、psiRNA3,转染肝癌细胞株HepG2.215,用荧光定量PCR仪检测siRNA对HBX mRNA表达的抑制作用,用Western blot法检测siRNA对HBX蛋白表达的抑制作用。以Transwell小室测定HepG2.215细胞与纤维连接蛋白(Fn)的体外黏附能力。结果成功构建shRNA表达载体,shRNA表达载体均可不同程度地抑制HBX的表达,其中psiRNA1对HBX的抑制作用最强,对HBX mRNA抑制率达80.27%,对HBX蛋白的抑制率为65.59%;细胞体外黏附能力受到明显抑制,在培养至48、72h后,对照组和转染组跨膜细胞数分别为442.6±57.1vs376.4±55.2和588.2±70.1vs513.6±68.5,两时相点均有明显差异(P<0.05)。结论阻断HBX的表达可明显抑制肝癌细胞HepG2.215的体外侵袭性生长。(本文来源于《苏州大学学报(医学版)》期刊2010年03期）
[8]（2010）在《基因阻断,可迫癌细胞“老死”》一文中研究指出据新华社专电美国科学家17日说，通过阻断一种名为Skp2的基因，能够使癌细胞老化并死亡。这一发现或许能为治疗癌症提供一种新方法。 美国哈佛大学医学院基因学家皮耶尔·保罗·潘多尔菲介绍，阻断癌细胞中的Skp2基因能够触发“衰老进程”，迫使癌(本文来源于《新华每日电讯》期刊2010-03-22）
任民[9]（2009）在《基因阻断治肥胖》一文中研究指出享受美食却不发胖是许多食客的梦想。香港加洲大学柏克莱分校博士候选人王凯峰成功发现脂肪转换基因DNA-PK，并通过基因治疗成功在白老鼠身上阻截40%热量转化成脂肪，估计5至10年后，可发展成人体疗法或口服药，治疗肥胖症。 王凯峰与实验团队(本文来源于《大众卫生报》期刊2009-04-02）
郝坡,刘北忠,孟凡萍,欧阳峰,王东生[10]（2008）在《人K562细胞糖皮质激素受体基因阻断模型的建立》一文中研究指出目的利用腺病毒载体介导的RNAi技术,建立糖皮质激素受体基因阻断的人K562细胞模型。方法将针对糖皮质激素受体发挥RNAi效应的合成寡核苷酸序列连入含有绿色荧光蛋白基因的腺病毒穿梭质粒pRNAT-H1·1/Adeno中,在含有pAdEasy-I病毒骨架的BJ5183大肠菌内进行同源重组;重组体通过脂质体介导转染293T细胞,并在293细胞内包装为具有感染能力的病毒颗粒,通过反复感染扩增病毒以达感染靶细胞的适当滴度,通过绿色荧光表达来监测腺病毒扩增;应用Western blot法检测人K562细胞感染病毒后糖皮质激素受体蛋白的表达。结果重组腺病毒穿梭质粒psiGR/Adeno和重组腺病毒pAdEasy-siGR的成功构建;转染腺病毒载体的293T细胞表达绿色荧光,随着时间逐渐增强并且出现明显的细胞病变效应,经过3轮扩增,病毒达到合适的滴度;受腺病毒感染的K562细胞内糖皮质激素受体蛋白表达明显降低。结论可以成功构建针对糖皮质激素受体基因的RNAi腺病毒载体,为进一步研究糖皮质激素受体的生物学功能奠定基础。(本文来源于《广东医学》期刊2008年06期）
基因阻断论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的已有研究表明SLC39A6与肿瘤转移能力密切相关,然而其在宫颈癌中表达及其功能尚无明确研究,本文拟通过研究SLC39A6在宫颈癌中表达及其对宫颈癌EMT的功能进行研究。方法通过TCGA数据库中cBio Cancer Genomics Portal工具对SLC39A6在宫颈癌中表达及其与宫颈癌患者的生存期进行相关性分析。通过RNAi技术结合慢病毒技术,对宫颈癌细胞(Hela)中SLC39A6进行稳定干扰,研究SLC39A6基因干扰对宫颈癌细胞上皮间质转化(EMT)及转移能力的影响。结果通过TCGA数据库研究表明SLC39A6与宫颈癌患者生存期呈负相关。干扰SLC39A6可明显抑制宫颈癌细胞上皮间质转化及转移能力。结论 SLC39A6与宫颈癌发生发展密切相关,抑制SLC39A6可抑制宫颈癌细胞转移,表明SLC39A6可作为潜在的宫颈癌诊断标志物及治疗靶点。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
基因阻断论文参考文献
[1].孙军,李敬敬,李月,王川,蔡原.圈卷产色链霉菌san7324和san7324L基因阻断对形态分化和尼可霉素产生的影响[J].微生物学报.2019
[2].江俊,吴东明,刘腾,许颖.干扰SLC39A6基因阻断宫颈癌细胞上皮间质转化的研究[C].第七届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛论文汇编.2016
[3].沈凤英,吴伟刚,张艳杰,寇宏达,冀红柳.玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63nsdA_(mgh)基因阻断突变株的构建[J].生物工程学报.2015
[4].蒋元维.刺糖多孢菌S04-41relA基因阻断株的构建及其对功能的影响[D].湖南师范大学.2012
[5].陈艳萍.默诺霉素产生菌relA基因和nsdA基因阻断的研究[D].浙江工业大学.2012
[6].王广林,张金池,王群,王以光.Sterptomycesrochei4089的L基因阻断变株的构建及功能研究[J].生物学杂志.2012
[7].周秀敏,陶敏,徐红,李大鹏.乙肝病毒X基因阻断降低肝癌细胞HepG2.215与纤维连接蛋白的黏附[J].苏州大学学报(医学版).2010
[8]..基因阻断,可迫癌细胞“老死”[N].新华每日电讯.2010
[9].任民.基因阻断治肥胖[N].大众卫生报.2009
[10].郝坡,刘北忠,孟凡萍,欧阳峰,王东生.人K562细胞糖皮质激素受体基因阻断模型的建立[J].广东医学.2008