导读:本文包含了转化体筛选论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:拟南芥,喷洒,筛选,Basta
转化体筛选论文文献综述
张庆霞,魏海蓉,陈新,徐丽,刘庆忠[1]（2013）在《拟南芥转化体筛选中Basta喷洒时期和浓度试验》一文中研究指出为了更加方便有效地利用Basta来筛选带草铵磷(PPT)抗性Bar基因的转基因拟南芥,对不同时期喷洒不同浓度Basta的效果进行了研究。结果表明:拟南芥转化体刚长出2片真叶时对Basta比较敏感,此时开始喷施效果比较好;PPT含量为13.5%的情况下,稀释2 000～4 000倍喷施效果好,此时既可有效筛选出阳性苗,又不会抑制阳性苗的生长;第一次喷施后6天左右移栽阳性苗较好,此时可以明显区分出阳性苗,且移栽后缓苗快、长势好。(本文来源于《山东农业科学》期刊2013年05期）
张好富[2]（2008）在《酿酒酵母Rad52基因转化拟南芥及转化体筛选技术研究》一文中研究指出基因打靶是反向遗传学基因功能研究的重要工具,但在植物转基因过程中,外源基因绝大多数随机插入基因组中,通过同源重组定向插入的概率极低。近年来虽采用了多种方法提高基因打靶的效率,目前仍没有达到实用水平。酿酒酵母转基因主要通过同源重组的方式整合到基因组中,因而具有很高的打靶效率。把酵母等生物的同源重组机制引入植物可能是提高植物基因打靶效率的有效的途径。Rad52蛋白是酵母与同源重组有关的关键酶,而绝大多数植物缺乏Rad52蛋白。本研究的主要目的就是从酵母中克隆出Rad52基因,并把它导入到模式植物拟南芥中,以便进一步研究Rad52基因对植物同源重组及基因打靶效率的影响。目前植物基因打靶的效率非常低,研究基因打靶需要建立非常有效的植物转基因体系。拟南芥转基因可以采用活体(原位)转化法,在转化阶段可以完全不依赖组织培养技术,转化步骤简单、高效。但转基因种子的筛选基本上还依赖于无菌培养,工作量比较大,而且容易污染,造成实验材料的损失。本研究在前人技术的基础上,着重对种子筛选技术做了改进,提出了叁种不依赖于无菌培养的简单、可靠和高效的转基因种子筛选方法。本研究的主要结果如下:1.从酵母基因组中克隆出同源重组关键基因Rad52,构建出农杆菌双元载体,并用农杆菌介导的浸花法(floral dip)导入拟南芥野生生态型Columbia。获得的转基因植株经PCR鉴定证实,Rad52基因已整合到基因组中。2.提出了叁种不依赖无菌培养的拟南芥转基因种子筛选方法。其一是滤纸发芽筛选法,转基因种子在含有筛选剂的1/4MS大量元素液体的滤纸上进行发芽筛选。其二是水琼脂发芽筛选法,用含筛选剂的1/4MS大量元素加0.8%的琼脂固化,由于水琼脂不含蔗糖和其他有机物质,加上抗菌素的作用,细菌不会在短期内繁殖,真菌的繁殖也很有限,从而实现非无菌操作筛选。其叁是筛选剂浸种筛选法,让转基因种子在低温处理和萌发阶段在含筛选剂的1/4MS大量元素的液体中进行,刚萌发的种子转移到营养土中。叁种方法与已有的方法相比都有简单、可靠、高效的特点,解决了拟南芥转化技术中的一个瓶颈问题。(本文来源于《浙江大学》期刊2008-06-01）
转化体筛选论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
基因打靶是反向遗传学基因功能研究的重要工具,但在植物转基因过程中,外源基因绝大多数随机插入基因组中,通过同源重组定向插入的概率极低。近年来虽采用了多种方法提高基因打靶的效率,目前仍没有达到实用水平。酿酒酵母转基因主要通过同源重组的方式整合到基因组中,因而具有很高的打靶效率。把酵母等生物的同源重组机制引入植物可能是提高植物基因打靶效率的有效的途径。Rad52蛋白是酵母与同源重组有关的关键酶,而绝大多数植物缺乏Rad52蛋白。本研究的主要目的就是从酵母中克隆出Rad52基因,并把它导入到模式植物拟南芥中,以便进一步研究Rad52基因对植物同源重组及基因打靶效率的影响。目前植物基因打靶的效率非常低,研究基因打靶需要建立非常有效的植物转基因体系。拟南芥转基因可以采用活体(原位)转化法,在转化阶段可以完全不依赖组织培养技术,转化步骤简单、高效。但转基因种子的筛选基本上还依赖于无菌培养,工作量比较大,而且容易污染,造成实验材料的损失。本研究在前人技术的基础上,着重对种子筛选技术做了改进,提出了叁种不依赖于无菌培养的简单、可靠和高效的转基因种子筛选方法。本研究的主要结果如下:1.从酵母基因组中克隆出同源重组关键基因Rad52,构建出农杆菌双元载体,并用农杆菌介导的浸花法(floral dip)导入拟南芥野生生态型Columbia。获得的转基因植株经PCR鉴定证实,Rad52基因已整合到基因组中。2.提出了叁种不依赖无菌培养的拟南芥转基因种子筛选方法。其一是滤纸发芽筛选法,转基因种子在含有筛选剂的1/4MS大量元素液体的滤纸上进行发芽筛选。其二是水琼脂发芽筛选法,用含筛选剂的1/4MS大量元素加0.8%的琼脂固化,由于水琼脂不含蔗糖和其他有机物质,加上抗菌素的作用,细菌不会在短期内繁殖,真菌的繁殖也很有限,从而实现非无菌操作筛选。其叁是筛选剂浸种筛选法,让转基因种子在低温处理和萌发阶段在含筛选剂的1/4MS大量元素的液体中进行,刚萌发的种子转移到营养土中。叁种方法与已有的方法相比都有简单、可靠、高效的特点,解决了拟南芥转化技术中的一个瓶颈问题。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
转化体筛选论文参考文献
[1].张庆霞,魏海蓉,陈新,徐丽,刘庆忠.拟南芥转化体筛选中Basta喷洒时期和浓度试验[J].山东农业科学.2013
[2].张好富.酿酒酵母Rad52基因转化拟南芥及转化体筛选技术研究[D].浙江大学.2008