导读:本文包含了翻译调控元件论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:5’非翻译区,翻译调控,翻译起始,酿酒酵母
翻译调控元件论文文献综述
毛玲[1]（2015）在《酿酒酵母翻译调控元件的挖掘与功能表征》一文中研究指出蛋白质的翻译过程是生命最基础的过程之一,其中翻译起始过程是决定蛋白表达水平的重点。近年来研究发现mRNA上5’非翻译区(5’UTR)核苷酸序列能够显着影响蛋白翻译起始,进而调控蛋白表达水平。5’UTR序列含有重要蛋白翻译调控元件,但对5’UTR调控翻译起始机制的研究还比较贫乏。本课题拟以酿酒酵母为对象构建高通量5’UTR元件表征体系,采用随机引物合成的方法人工合成随机5’UTR元件库,通过使用以流式细胞术和测序技术为基础的高通量表征体系,确定不同5’UTR序列对蛋白表达水平的影响,计算分析起上调或下调翻译起始作用的5’UTR序列特点,从而挖掘潜在的序列元件和结构元件,以期揭示5’UTR调控蛋白翻译起始的分子机制。主要工作如下:(1)使用分子克隆的方法构建5’UTR序列表达元件:包括构建以绿色荧光蛋白为信号分子的5’UTR表达载体;构建具有红色荧光蛋白为参比的背景酵母菌株;并采用两种不同表达方式实现了酿酒酵母细胞红色荧光蛋白mCherry和绿色荧光蛋白GFP的共表达,一种方案是先将红色荧光蛋白基因整合到宿主细胞基因组中,得到具有红色荧光的宿主菌,再将绿色荧光蛋白整合到红色荧光蛋白宿主菌株中;另一种方案是将绿色荧光蛋白基因与红色荧光蛋白基因克隆到一个游离型穿梭质粒上,再将表达GFP/mCherry的质粒转化宿主细胞。分析不同表达方案下荧光蛋白的表达特点,结果表明,采用整合型酵母质粒表达mCherry和GFP,所产生的红色荧光和绿色荧光波动范围较窄、信号强度稳定,游离型酵母质粒表达GFP和mCherry,产生的荧光波动范围较宽而更适合文库的构建。(2)选取长度在50 bp左右基因表达效率存在较大差异的5个5’UTR序列,通过酶切连接到5’UTR序列表达载体YIplac211–RPL8A-GFP进行表达测试,结果发现测试5’UTR序列能够显着改变绿色荧光蛋白的表达量。(3)采用易错PCR的方法初步尝试建立“5’UTR序列-蛋白表达量”的一一对应关系,结果发现假阳性率高且突变跨度范围窄。(4)选取一个基因表达效率最高的基因YLR167W为研究对象,使用随机引物合成的方法合成5段长度为89 bp、包含12个随机碱基和酶切位点、保护碱基以及起始密码子的单链DNA。以此单链DNA为模板,PCR扩增中央随机5’UTR序列,形成5段双链5’UTR随机序列DNA文库。采用胞外连接的方法将随机序列DNA与表达载体YCplac33-RPL8A-GFP-mCherry一起转化酿酒酵母宿主菌株W303-1b中。使用流式细胞分选(FACS)技术对表达随机5’UTR序列质粒文库的菌株进行筛选,按照绿色荧光蛋白荧光信号的强弱将细胞分成10个不同的档次,分别收集不同档次的细胞(不少于80万个细胞/收集管)。FACS分析收集不同档次的细胞结果显示,蛋白表达强弱差异在40倍左右。对不同档次的细胞进行简单测序,测定被表达5’UTR序列。建立“5’UTR序列-蛋白表达量”的一一对应关系。(本文来源于《武汉轻工大学》期刊2015-05-01）
马莉,孔清华,赵树华,魏云虎,毛炳宇[2]（2009）在《Sox2基因3'非翻译区保守元件对基因表达的调控作用》一文中研究指出转录因子Sox2是脊椎动物早期发育中最早表达的神经系统特异性基因之一,同时在干细胞的维持中也起着关键作用。通过生物信息学分析,作者发现在脊椎动物Sox2mRNA3'非翻译区中存在4段非常保守的富含AU的区域。将这些片段按照不同的组合克隆到GFP和荧光素酶两种报告基因载体中,在非洲爪蟾胚胎和培养细胞中检测了这些片段对报告基因表达的影响。结果显示,Sox2的3'UTR可影响报告基因的表达水平,特别是其中的保守片段2可显着提高报告基因的表达水平,表明Sox23'非翻译区有可能参与Sox2表达的转录后调控。(本文来源于《动物学研究》期刊2009年06期）
于学东,姜涛,陈水平,邓永强,韩剑峰[3]（2008）在《登革4型病毒5′非编码区SLB元件对病毒复制和翻译的调控作用》一文中研究指出目的探讨登革4型病毒5′非编码区SLB元件对病毒复制和翻译的调控作用。方法首先通过mfold3·2软件对登革4型病毒5′端RNA二级结构进行预测,确定了3个突变位点:SLB1,缺失位于短茎环82-87位5′UAR环化序列,并破坏其保守茎环结构;SLB2,在次环引入突变破坏其环状结构(M77G/C);SLB3,突变仅涉及核苷酸,不破坏该次环二级结构(M77-78AG/GA)。然后在含有海肾荧光素酶(Renilla Luciferase,R·luc)报告基因的复制子(DEN-R·luc2A-RP)基础上,利用重迭PCR构建上述突变体。将突变体(包括相关的阳性和阴性对照复制子)分别线性化并体外转录成RNA后,取等量各转录体RNA,以脂质体法分别转染BHK-21细胞。通过间接免疫荧光(IFA)、RT-PCR、R·luc报告基因技术和实时定量RT-PCR对突变体的复制和翻译水平进行检测。结果SLB1突变体的翻译水平并未受到显着影响,但其复制水平出现显着下调。SLB2突变体的翻译水平亦未受到显着影响,但其复制水平受到完全抑制;SLB3突变体的复制和翻译水平均受到了完全抑制。结论登革4型病毒5′非编码区SLB元件对基因组RNA复制和翻译具有重要的调控作用。(本文来源于《解放军医学杂志》期刊2008年07期）
白雪源,陈香美,傅博[4]（2007）在《人SDCT2β mRNA 3′非翻译区基因表达负调控元件的鉴定及其对mRNA稳定性的影响》一文中研究指出为了阐明 SDCT2β3’-UTR 的 AU 富含区序列是否在基因表达调控中发挥作用,我们首先通过生物信息学分析发现在 SDCT2βmRNA 的3’端非翻译区内存在0．58kb 的 AU 富含区(AU-rich region．AUR),其中包括3个 AU 富含元件(AU-rich element,ARE),然后将 SDCT2β的 AU 富含区 DNA 片段插入报告基因 GFP 表达载体 pcDNA-GFP 的下游构建 pcDNA-GFP-AUR 表达载体并转染 HKC、HEK293和 LLC-PK1细胞,用流式细胞仪检测细胞中 GFP 的表达情况．(本文来源于《遗传学进步与人口健康高峰论坛论文集》期刊2007-11-01）
卢杰,张珈敏,林美娟,曹旭,胡远扬[5]（2007）在《RNA病毒翻译调控元件——内部核糖体进入位点(IRES)》一文中研究指出真核生物大多数蛋白质合成采用了依赖帽子结构的翻译起始方式.但一组缺乏帽子结构的RNA病毒的蛋白质合成起始是依赖其5′端非翻译区(untranslated region,UTR)翻译调控的顺式作用元件———内部核糖体进入位点(internal ribosome entry site,IRES).它们能够在一些反式作用因子的辅助下,招募核糖体小亚基到病毒mRNA的翻译起始位点.目前,依赖IRES元件翻译起始的RNA病毒在哺乳动物,无脊椎动物及植物中均有发现.因此,对RNA病毒IRES元件的深入研究,不仅有助于阐明相关疾病的发生机理,而且为工业应用和疾病治疗提供借鉴意义.本文对RNA病毒IRES元件发现、分类、结构与功能等作了综述.(本文来源于《中国生物化学与分子生物学报》期刊2007年07期）
张显升,任艳,魏艳丽,李红梅,王少杰[6]（2004）在《小RNA病毒蛋白翻译调控元件研究进展》一文中研究指出真核生物的起始复合物并不是在起始AUG处形成 ,而是在mRNA的 5′末端形成 ,其识别信号就是 5′末端的帽子结构。小RNA病毒科成员RNA 5′末端没有帽子结构 ,而有一个病毒编码的小蛋白质与基因组共价相连。小RNA病毒的蛋白翻译起始于 5′非翻译区中的内部顺式调控元件 ,称为内部核糖体进入位点 (IRES)。口蹄疫病毒 (foot and mouthdiseasevirus,FMDV)是该科病毒的典型代表 ,引起偶蹄动物的急性接触性传染病。完整FMDV含有单链正股RNA、衣壳蛋白及少量装配过程中夹带的非结构蛋白和宿主细胞肌动蛋白 ,其基因组RNA全长约 8 5kb ,可直接作为信使RNA。对IRES的一、二级结构进行了比较 ,对IRES与翻译起始因子的相互作用以及对病毒毒力的影响作了综述(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2004年06期）
曹诚,李平,李杰之,石成华,马清钧[7]（2000）在《霍乱毒素A基因内部翻译调控元件具有翻译起始功能》一文中研究指出通过大肠杆菌体外转录－体外翻译系统，证明霍乱毒素A基因内部的翻译调控元件具有翻译起始功能，且其翻译起始效率较ctxA基因高得多．当ctxA的起始密码突变时，从该元件起始的翻译效率下降，说明基因内翻译起始效率受ctxA翻译起始的调控。结果进一步证实了霍乱毒素A、B亚基比例表达调控的翻译弱化－翻译偶联机理。(本文来源于《遗传学报》期刊2000年07期）
翻译调控元件论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
转录因子Sox2是脊椎动物早期发育中最早表达的神经系统特异性基因之一,同时在干细胞的维持中也起着关键作用。通过生物信息学分析,作者发现在脊椎动物Sox2mRNA3'非翻译区中存在4段非常保守的富含AU的区域。将这些片段按照不同的组合克隆到GFP和荧光素酶两种报告基因载体中,在非洲爪蟾胚胎和培养细胞中检测了这些片段对报告基因表达的影响。结果显示,Sox2的3'UTR可影响报告基因的表达水平,特别是其中的保守片段2可显着提高报告基因的表达水平,表明Sox23'非翻译区有可能参与Sox2表达的转录后调控。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
翻译调控元件论文参考文献
[1].毛玲.酿酒酵母翻译调控元件的挖掘与功能表征[D].武汉轻工大学.2015
[2].马莉,孔清华,赵树华,魏云虎,毛炳宇.Sox2基因3'非翻译区保守元件对基因表达的调控作用[J].动物学研究.2009
[3].于学东,姜涛,陈水平,邓永强,韩剑峰.登革4型病毒5′非编码区SLB元件对病毒复制和翻译的调控作用[J].解放军医学杂志.2008
[4].白雪源,陈香美,傅博.人SDCT2βmRNA3′非翻译区基因表达负调控元件的鉴定及其对mRNA稳定性的影响[C].遗传学进步与人口健康高峰论坛论文集.2007
[5].卢杰,张珈敏,林美娟,曹旭,胡远扬.RNA病毒翻译调控元件——内部核糖体进入位点(IRES)[J].中国生物化学与分子生物学报.2007
[6].张显升,任艳,魏艳丽,李红梅,王少杰.小RNA病毒蛋白翻译调控元件研究进展[J].中国生物工程杂志.2004
[7].曹诚,李平,李杰之,石成华,马清钧.霍乱毒素A基因内部翻译调控元件具有翻译起始功能[J].遗传学报.2000