导读:本文包含了平滑肌源性泡沫细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:依折麦布,瑞舒伐他汀钙,肌,平滑,血管,窖蛋白1
平滑肌源性泡沫细胞论文文献综述
李佳,申晓彧[1]（2019）在《依折麦布与瑞舒伐他汀对平滑肌源性泡沫细胞小凹蛋白-1 mRNA表达的影响》一文中研究指出目的研究依折麦布联合瑞舒伐他汀对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的平滑肌源性泡沫细胞小凹蛋白-1(Caveolin-1) mRNA表达的影响。方法将大鼠胸主动脉VSMCs分为9个组,分别为空白对照组、泡沫细胞组、不同浓度的依折麦布组(3、10、30μmol/L)、不同浓度的瑞舒伐他汀组(0. 1、1. 0、5. 0μmol/L)、联合组(依折麦布30μmol/L+瑞舒伐他汀5. 0μmol/L),油红O染色鉴定泡沫细胞模型,real-time PCR检测各组细胞Caveolin-1 mRNA表达。结果与空白对照组相比,泡沫细胞组Caveolin-1 mRNA表达降低[(0. 248 7±0. 042 0) vs (1. 004 1±0. 017 1)],差异有统计学意义(P <0. 05);与泡沫细胞组相比,不同浓度的依折麦布组[(0. 371 3±0. 025 2)、(0. 489 8±0. 027 9)、(0. 726 1±0. 029 1)]及瑞舒伐他汀组[(0. 460 2±0. 022 8)、(0. 623 7±0. 028 8)、(0. 751 8±0. 043 1)]Caveolin-1 mRNA表达增加,各组间差异有统计学意义(P <0. 05),且呈一定浓度依赖性(P <0. 05);且联合组(0. 937 6±0. 029 7)与单药组比较,Caveolin-1 mRNA表达增加,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论依折麦布及瑞舒伐他汀均促进平滑肌源性泡沫细胞中胆固醇的逆向转运(RCT),此过程可能通过上调Caveolin-1 mRNA的表达实现;且两者联合此作用更显着。(本文来源于《中国医师杂志》期刊2019年04期）
包正阳,孙振,李丽华,王小东,宋娟[2]（2018）在《N~ε-羧甲基赖氨酸通过RAGE促进平滑肌细胞源性泡沫细胞形成》一文中研究指出目的研究Nε-羧甲基赖氨酸(CML)对平滑肌细胞泡沫化中脂质外流的影响,探讨其在促进平滑肌细胞泡沫化中的作用和机制。方法使用组织贴块法从C57BL/6J小鼠主动脉中提取原代血管平滑肌细胞并进行鉴定;将第3~9代的原代平滑肌细胞分为对照组,氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)(50 mg/L)模型组,1、10、100μmol/L的CML与ox-LDL共刺激组,通过NBD-胆固醇流出实验检测CML对泡沫细胞胆固醇流出率的影响,通过胆固醇含量测定试剂盒测定细胞内总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)和胆固醇酯(CE)水平;将原代血管平滑肌细胞分为四组:对照组、ox-LDL模型组、ox-LDL+CML组、RAGE siRNA沉默组(ox-LDL+CML+siRAGE组)并进行刺激,通过Western blot检测糖基化终末产物受体(RAGE)和胆固醇流出调节子ABCA1的表达;通过油红O染色和油红萃取实验检测各组平滑肌细胞泡沫化程度。结果与对照组相比,不同浓度CML明显升高平滑肌细胞内TC、CE和FC的含量;胆固醇流出实验表明胆固醇流出率随CML浓度升高而降低;Western blot实验表明与对照组相比,加入CML后RAGE明显升高,ABCA1明显降低,ox-LDL+CML+siRAGE组RAGE的表达降低,并且ABCA1降低水平减少;油红O染色显示ox-LDL能够促使平滑肌细胞内脂质蓄积,CML能够增强其作用,抑制RAGE表达后CML作用减弱。结论 CML通过RAGE抑制脂质外流,促进平滑肌细胞源性泡沫细胞形成。(本文来源于《中国动脉硬化杂志》期刊2018年07期）
员旭红[3]（2017）在《依折麦布联合瑞舒伐他汀对血管平滑肌源性泡沫细胞LXRα-ABCA1基因及蛋白表达的影响》一文中研究指出目的:探讨依折麦布、瑞舒伐他汀及两者联合对LXRα、ABCA1基因及蛋白表达的影响,观察两种药物能否通过LXRα-ABCA1途径减少泡沫细胞胆固醇含量,以及两者联合后能否更有效减少胆固醇蓄积,从而起到抗动脉粥样硬化的作用。方法:培养原代大鼠胸主动脉SMC作为空白对照组,用OX-LDL诱导SMC泡沫化,确定建立OX-LDL模型(泡沫细胞模型),根据实验所需进行分组,空白对照组,OX-LDL模型组(50ug/ml OX-LDL),不同浓度依折麦布组(3.0umol/L、10.0umol/L、30.0umol/L),不同浓度瑞舒伐他汀组(0.1umol/L、1.0umol/L、5.0umol/L),联合组(依折麦布30umol/L+瑞舒伐他汀5.0umol/L),油红O染色鉴定泡沫细胞模型,以RT-PCR检测各组LXRα、ABCA1m RNA的表达,以western-blot检测各组LXRα、ABCA1的蛋白表达情况,以酶荧光法检测各组胆固醇含量的情况。结果:1.依折麦布和瑞舒伐他汀对LXRα、ABCA1m RNA表达的影响:与空白对照组比较,OX-LDL组LXRα、ABCA1m RNA表达显着减少(P<0.01);与OX-LDL组比较,随着依折麦布及瑞舒伐他汀浓度的升高,LXRα、ABCA1m RNA表达均逐渐上调(P<0.01),且呈一定的剂量依赖趋势;2.依折麦布联合瑞舒伐他汀对LXRα、ABCA1基因及蛋白表达的影响:与空白对照组比较,OX-LDL组LXRα、ABCA1基因及蛋白表达显着减少(P<0.01);与OX-LDL组比较,依折麦布组、瑞舒伐他汀组及联合组,LXRα、ABCA1基因及蛋白表达均增加(P<0.01),且联合组与单药组比较,LXRα、ABCA1基因及蛋白表达增加更显着(P<0.01)。3.依折麦布联合瑞舒伐他汀对细胞内胆固醇含量的影响:与空白对照组比较,OX-LDL组总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯的含量显着增加(P<0.01),且CE/TC>50%;与OX-LDL组比较,依折麦布组、瑞舒伐他汀组及联合组,细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量减少(P<0.01),CE/TC比值下降;且联合组与单药组比较,各种胆固醇含量及CE/TC比值下降更显着(P<0.01)。结论:依折麦布、瑞舒伐他汀均能通过LXRα-ABCA1通路,从而减少细胞内胆固醇含量,且两者以最适浓度联合后,LXRα、ABCA1表达进一步上调,细胞内胆固醇含量进一步减少,最终起到更有效的抗动脉粥样硬化的作用。(本文来源于《山西医科大学》期刊2017-05-18）
马倩倩[4]（2017）在《依折麦布联合罗格列酮通过LXRα-ABCA1途径对血管平滑肌源性泡沫细胞胆固醇含量的影响》一文中研究指出目的:研究依折麦布联合罗格列酮对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管平滑肌源性泡沫细胞胆固醇含量的影响,探讨肝X受体α(LXRα)-叁磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)信号通路在其中的作用。方法:正常培养的原代大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)作为空白对照组,利用ox-LDL(50ug/ml)干预VSMCs建立平滑肌源性泡沫细胞模型,然后根据实验要求将泡沫细胞分为泡沫细胞组、不同浓度的依折麦布组(3umol/L,10umol/L,30umol/L)、罗格列酮组(25umol/L)、联合组(30umol/L依折麦布+25 umol/L罗格列酮)。油红O染色鉴定泡沫细胞模型,real-time PCR检测各组细胞LXRα和ABCA1的m RNA表达,Western blot测定各组细胞LXRα和ABCA1蛋白表达,酶荧光法检测各组细胞内总胆固醇(TC)及游离胆固醇(FC)的含量。结果:1.与空白对照组相比,泡沫细胞组LXRα和ABCA1的m RNA表达降低(P<0.05);与泡沫细胞组相比,不同浓度的依折麦布组LXRα和ABCA1的m RNA表达增加(P<0.05),且呈一定浓度依赖性(P<0.05)。2.与空白对照组相比,泡沫细胞组LXRα、ABCA1的m RNA和蛋白表达均降低(P<0.05);与泡沫细胞组相比,依折麦布30umol/L组、罗格列酮组及联合组LXRα、ABCA1的m RNA和蛋白表达增加(P<0.05),且联合组与依折麦布30umol/L组和罗格列酮组相比,LXRα、ABCA1的m RNA和蛋白表达增加更为显着(P<0.05)。3.与空白对照组相比,泡沫细胞组细胞内TC、FC和胆固醇酯(CE)的含量均增加(P<0.05),且CE/TC>50%;与泡沫细胞组相比,依折麦布30umol/L组、罗格列酮组及联合组细胞内TC、FC、CE含量均减少,CE/TC比值下降(P<0.05),且联合组与依折麦布30umol/L组和罗格列酮组相比,细胞内TC、FC、CE含量及CE/TC比值降低更为显着(P<0.05)。结论:依折麦布及罗格列酮均可以通过上调LXRα-ABCA1信号通路,促进平滑肌源性泡沫细胞中ABCA1介导的胆固醇逆转运(RCT),减少细胞内蓄积的胆固醇;且两者联合可进一步上调LXRα和ABCA1的表达,促进胆固醇外流,显着降低细胞内胆固醇的含量。(本文来源于《山西医科大学》期刊2017-05-18）
周炜,陈曼华[5]（2016）在《siRNA沉默mfn2表达对睾酮抑制大鼠血管平滑肌源性泡沫细胞形成的影响》一文中研究指出目的研究线粒体融合素2基因(mfn2)在睾酮抑制大鼠血管平滑肌源性泡沫细胞形成过程中的作用。方法设计并化学合成靶向mfn2基因的小分子干扰RNA(siRNA),脂质体法将mfn2-siRNA转染大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs),实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测mfn2 mRNA及蛋白的表达。培养大鼠VSMCs,利用氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导形成泡沫细胞。实验分组:1)对照组;2)睾酮组;3)睾酮+阴性对照siRNA组;4)睾酮+mfn2-siRNA组。后3组预先加入睾酮和(或)siRNA预处理12 h,再与ox-LDL共培养48 h。油红O染色及酶荧光法检测细胞内脂质含量,免疫印迹法检测细胞内Mfn2、清道夫受体CD36和ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)的表达。结果转染mfn2-siRNA后12、24、36和48 h均能有效沉默mfn2 mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。与对照组比较,睾酮组及睾酮+阴性对照siRNA组脂质蓄积减少,总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯的含量均降低(P<0.05),Mfn2和ABCA1表达增加(P<0.05),CD36表达降低(P<0.05),细胞泡沫化受到抑制。与睾酮+阴性对照siRNA组比较,睾酮+mfn2-siRNA组脂质蓄积增加,总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯的含量均增加(P<0.05),Mfn2和ABCA1表达降低(P<0.05),CD36表达增加(P<0.05)。结论睾酮通过调节mfn2及其下游CD36和ABCA1表达,抑制ox-LDL诱导下VSMCs转变为泡沫细胞。(本文来源于《基础医学与临床》期刊2016年10期）
张明杰[6]（2016）在《SIRT1在血管平滑肌源性泡沫细胞迁移中的作用和机制研究》一文中研究指出背景和目的:动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)因可引起缺血性心脏病、脑卒中和外周血管疾病等高发病率和高致死率的疾病而成为全世界范围内人口死亡的首要原因。胆固醇酯和甘油叁酯等中性脂肪以脂滴的形式存在于血管壁细胞内形成泡沫细胞(foam cells,FC)。FC形成脂质条纹以至粥样斑块是AS早期的关键病理环节。既往研究广泛认为AS中FC的主要本源是巨噬细胞。与此同时,AS中还大量存着血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)来源的FC,中晚期病变中尤为显着。值得关注的是,VSMC源性FC主要位于内皮下而不是VSMC通常所在的中膜。因此,从中膜向内膜的迁移是VSMC摄取中性脂质发生泡沫样变不可缺少的一步。VSMC的迁移先于还是与FC的形成同步发生并不十分清楚。氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein, oxLDL) 通常认为是最强的致 AS 因子,且在体内体外研究中皆证实可以促进VSMC发生泡沫化。本研究的目的就是探究oxLDL诱导VSMC源性FC形成过程中迁移能力的改变以及所涉及的分子机制。去乙酰化酶1 (sirtuinl, SIRT1)是哺乳动物内与酵母菌的沉默信息调控因子2(silent information regulator 2,Sir2)同源的蛋白,是组蛋白去乙酰化酶成员之一。SIRT1可以靶定许多下游蛋白从而影响多种病理生理过程,这些蛋白包括:过氧化物酶体增殖物活化受体(peroxisome proliferator-activated receptor,PPAR) -γ、PPAR-γ辅助激活因子(PPAR-y coactivator) -1α、解偶联蛋白(uncoupling protein) -2、肝 X受体(liver X receptor,LXR)和核因子(nuclear factor,NF) -κB 等。SIRT1 使 LXR去乙酰化后可以上调后者的活性,并促进胆固醇逆转运将胆固醇从细胞内排出,最终抑制巨噬细胞源性FC的形成。SIRT1可以通过抑制早衰而防止内皮功能紊乱。SIRT1还可以上调内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitricoxide synthase,eNOS)而改善因高脂饮食受损的血管舒张功能。此外,在稳定斑块、降低胆固醇摄取、抑制巨噬细胞泡沫化以及减轻炎症反应等方面的积极作用使SIRT1成为防治AS的新靶标。然而SIRT1在泡沫化过程中对VSMC迁移的作用却罕有研究报道,因此成为本研究重点探讨的问题。基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)是锌离子依赖的,可以降解细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)中许多组分的蛋白水解酶。MMP-9,也被称为明胶酶B,在AS不稳定斑块中高度表达。MMP-9是VSMC迁移的标志性蛋白。以往的研究证实MMP-9过度表达能够诱使VSMC迁移至血管内膜,而MMP-9-/-小鼠的血管损伤后VSMC迁移和血管损害的程度则明显降低。因此,本研究也检测了 MMP-9的表达以及其潜在调控因子的变化,希望明确VSMC源性FC形成过程中迁移的的分子机制。瞬时受体电位香草醛亚家族 1 (Transient receptor potential vanilloid subfamily member1,TRPV1)已被证实在改善心脑血管疾病(cardiovascular and cerebrovascular diseases,C-CeVD)方面有显着作用。多项研究显示激活TRPV1可通过代谢或自噬等途径减少VSMC内的脂质堆积从而抑制FC的形成。我们前期的研究也证实了激活TRPV1可抑制自发性高血压大鼠轻度炎性的VSMC的增殖。然而,TRPV1在VSMC迁移方面作用的研究很少。本研究中我们探讨了 TRPV1在VSMC源性FC迁移和MMP-9表达方面的作用,并试图了解SIRT1在其中的关键角色,从而希望丰富TRPV1在防治动脉粥硬化方面的保护机制。材料与方法:1.采用组织块贴壁法原代培养雄性C57BL/6J野生型(wild type, WT)小鼠胸主动脉VSMC,并利用免疫荧光和流式细胞技术标记细胞内α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, a-SMA)进行 VSMC 鉴定。2. oxLDL诱导VSMC形成FC,并利用油红O染色和异丙醇萃取法测定细胞内脂质以鉴定FC。3. Transwell实验检测细胞迁移能力。4. SIRT1激活剂SRT1720 (SRT)和拮抗剂尼克酰胺(nicotinamide, Nic)用来调控SIRT1的表达。5. TRPV1激活剂辣椒素(capsaicin,Caps)和拮抗剂辣椒卓平(capsazepin,Capz)用来调控TRPV1的表达。6.蛋白免疫印迹(Westernblot)和免疫荧光分别定量和定性地检测相关蛋白的表达。结果:1. VSMC源性FC的形成伴随着迁移能力和MMP-9蛋白表达的增加。本研究中,油红O染色发现80μg/mL的oxLDL促进了原代培养的VSMC细胞内红色脂滴的堆积,同时细胞内的脂质含量也显着增高,明确了 oxLDL可以诱导VSMC发生泡沫样变而形成FC。Transwell实验结果显示,oxLDL刺激的VSMC与空白对照组细胞相比迁移能力明显增强,而且Western blot结果也表明MMP-9蛋白表达明显升高。2. oxLDL降低了 SIRT1蛋白的表达而促进了 VSMC源性FC的迁移和MMP-9蛋白的高表达。oxLDL刺激VSMC 24小时后SIRT1蛋白的表达明显降低。本实验用SRT和Nic调控SIRT1蛋白的表达,SRT (1μM)可以上调WT-VSMC和oxLDL刺激的VSMC表达 SIRT1,100μM 的 Nic 显着降低了 SRT 上调的 SIRT1。Western blot 和 Transwell实验结果显示相较于单独oxLDL作用,同时予以SRT刺激VSMC后可以上调SIRT1蛋白的表达和下调MMP-9蛋白的表达,而且该效应被SIRT1的拮抗剂Nic所阻断。3. SIRT1可能通过抑制NF-κB信号通路而抑制VSMC源性FC迁移和MMP-9蛋白表达。oxLDL刺激的VSMC表达磷酸化的IκBα (p-IKBα)和核内NF-κB p65蛋白明显增加。相较于单独oxLDL作用,同时予以SRT刺激VSMC后下调了 p-IκBα和核内p65蛋白的表达,而且该效应被SIRT1的拮抗剂Nic所阻断。NF-κB抑制剂BAY 11-7082也显着地降低了 MMP-9蛋白的表达。4. Caps激活TRPV1可抑制VSMC源性FC的迁移和MMP-9蛋白的表达。分别应用TRPV1激动剂Caps和抑制剂Capz来调控TRPV1的表达。Caps呈浓度依赖性地增加TRPV1蛋白的表达而降低MMP-9蛋白的表达。相较于单独oxLDL作用,同时予以Caps刺激VSMC后可以下调MMP-9蛋白的表达和细胞的迁移,而且该效应被TRPV1的拮抗剂Capz所阻断。5. Caps激活TRPV1可上调SIRT1蛋白的表达以及抑制NF-κB信号通路。Caps激活TRPV1呈浓度依赖性地上调VSMC源性FC SIRT1的水平。与对照组相比,Caps刺激VSMC后可以上调SIRT1蛋白的表达,而且该效应被TRPV1的拮抗剂Capz所阻断;Caps刺激VSMC后也可以增加因oxLDL下调的SIRT1蛋白。与单独oxLDL作用相比较,同时予以Caps刺激VSMC后下调了 p-IκBα和核内NF-κB p65蛋白的表达,而且该效应被Capz所阻断。结论:本研究表明oxLDL诱导VSMC源性FC的形成伴随着细胞迁移能力和MMP-9蛋白表达的升高,且证实其与SIRT1的降低和NF-1κB信号通路的增强有关。Caps激活TRPV1后可通过增强SIRT1表达和减弱NF-1κB信号而抑制VSMC源性FC的迁移。泡沫化和表型转化是VSMC参与AS发生发展的关键环节。本研究表明SIRT1是改善VSMC功能的潜在干预靶标,并丰富了 TRPV1在防治AS方面的保护作用。近年来的研究表明白藜芦醇等SIRT1的激活剂已经在AS动物和细胞模型中显示出了保护作用。即使临床结果并不稳定和一致,维持较高水平的SIRT1可能对防治AS有益。(本文来源于《第叁军医大学》期刊2016-05-01）
郭露,张莉莉[7]（2015）在《TLR4介导的ABCA1表达下调促进平滑肌源性泡沫细胞形成》一文中研究指出背景、目的动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)导致的心脑血管疾病是当今人类死亡死亡的首要原因。AS的发生与发展是一个多因素在多层次上相互综合作用的过程,被认为是一种慢性炎症性疾病。AS是各种炎症损伤致使血管壁发生炎症-增殖反应,该反应过程包括内皮的损伤,血管平滑肌细胞发生增殖、迁移以及分泌细胞外基质、炎症因子等诸多环节。AS以巨噬细胞或平滑肌细胞摄取脂质成分形成泡沫细胞为主要特征,在AS的中(本文来源于《中华医学会第十八次全国神经病学学术会议论文汇编（下）》期刊2015-09-18）
尹延伟,张莉莉[8]（2015）在《TLR4抑制ABCG1表达促进平滑肌源性泡沫细胞形成机制研究》一文中研究指出目的血管平滑肌细胞(VSMC)是中晚期动脉粥样硬化病变中泡沫细胞的主要来源,但平滑肌源性泡沫细胞形成的具体机制尚不明确。我们之前的研究发现Toll样受体4(TLR4)可促进动脉粥样硬化病变中平滑肌源性泡沫细胞的形成,其主要机制为TLR4可抑制与细胞胆固醇逆转录(RCT)密切相关的ATP结合盒转运子A1(ABCA1)的功能,进而抑制VSMC RCT过程,最终导致泡沫细胞形成。ATP结合盒转运体G1(ABCG1)是关系RCT(本文来源于《中华医学会第十八次全国神经病学学术会议论文汇编（下）》期刊2015-09-18）
尹延伟[9]（2015）在《TLR4上调ACAT1表达促进平滑肌源性泡沫细胞形成的机制研究》一文中研究指出背景和目的:动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是一种动脉血管进行性堵塞的慢性疾病。AS作为多种心脑血管疾病发生的病理基础,目前其已经成为世界范围内引起死亡的主要原因之一。世界卫生组织数据显示在2008年全球有将近1730万患者死于心血管疾病,而到2030年,因心血管疾病死亡的人数将增加至2330万。因此,积极探讨AS发生与发展的具体机制对AS相关性疾病的防治具有重要的指导意义。泡沫细胞的形成是AS病变发生与发展过程中至关重要的病理事件。AS病变过程中泡沫细胞主要来源于巨噬细胞及血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cell,VSMC)。酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1(Acyl-coenzyme A:cholesterol acyltransferase 1,ACAT1)是细胞内一种可将游离胆固醇转变成胆固醇酯的酶,其在AS病变中泡沫细胞的形成过程中发挥重要的作用。ACAT1在人体内表达比较广泛,例如其在巨噬细胞和VSMC的内质网上均有表达。目前关于ACAT1参与巨噬细胞源性泡沫细胞形成的机制研究有很多,其中一个被广泛接受的机制是炎症反应通过上调ACAT1的表达促进巨噬细胞内脂质聚积,最终导致泡沫细胞的形成。然而,相比巨噬细胞而言,目前关于平滑肌源性泡沫细胞形成的具体机制研究很少,尤其是ACAT1是否参与了平滑肌源性泡沫细胞的形成过程仍不清楚。AS病变的发生与发展涉及多个复杂的病理过程,受多种信号通路的调节,其中慢性炎症反应是AS病变发生与发展的一大病理基础。Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)是启动免疫和炎性反应的重要膜受体,其在体内引发炎症反应方面发挥至关重要的作用,有研究显示其参与AS病变的发生与发展过程。例如最近有研究发现过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)可通过影响TLR4介导的炎症反应抑制血小板衍生的生长因子诱导的VSMC增殖与迁移。此外,也有研究发现肺炎衣原体可以通过干扰PPARγ激活上调细胞内ACAT1表达,进而促进低密度脂蛋白引起的巨噬细胞源性泡沫细胞形成。而需要注意的是肺炎衣原体的细胞膜中主要成分是TLR4的特异性配体脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS),其与TLR4结合后可以触发炎症反应的激活,诱导炎性细胞因子表达,如白介素-1(interleukin-1)、il-6和肿瘤坏死因子α(tumournecrosisfactorα,tnf-α)。以上研究结果提示了我们pparγ、tlr4和acat1在泡沫细胞形成中的重要作用,因此,基于以上研究我们假设pparγ可以通过干扰tlr4介导的炎症反应进而下调acat1的表达,最终抑制平滑肌源性泡沫细胞的形成。材料与方法:本研究分为在体实验和离体实验两大部分。c57bl/6j背景野生型(wt)小鼠、apoe基因敲除(apoe-/-)小鼠、tlr4基因敲除(tlr4-/-)小鼠和acat1基因敲除(acat1-/-)小鼠被应用于在体实验;原代培养的vsmc来源于c57bl/6j背景wt小鼠、acat1-/-小鼠和tlr4-/-小鼠,被应用于离体实验。1.应采用苏木精-伊红(he)染色法确定小鼠主动脉粥样硬化斑块的形成情况;2.应用油红o染色法检测离体vsmc泡沫细胞形成情况;3.应用酶法测定法检测离体vsmc内总胆固醇含量;4.应用含有acat1cdna的腺病毒载体转染离体vsmc上调细胞中acat1的表达;5.应用tlr4配体lps和tlr4抑制剂eritoran分别上调和下调离体vsmc中tlr4表达;6.应用髓样分化因子88(myeloiddifferentiationfactor88,myd88)和核因子κb(nuclearfactor-kappab,nf-κb)的sirna化学片段转染离体vsmc,下调细胞内myd88和nf-κb表达;7.应用过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisomeproliferator-activatedreceptorγ,pparγ)配体罗格列酮(rosiglitazone,rsg)和pparγ抑制剂gw9662分别上调和下调离体vsmc中pparγ表达;8.应用酶联免疫吸附实验(enzyme-linkedimmunosorbentassay,elisa)检测在体及离体il-1β、il-6和tnf-α表达;9.应用免疫印迹(westernblot)检测tlr4、myd88、nf-κbp65、磷酸化的iκbα(phosphorylatediκbα,p-iκbα)和acat1的表达;此外,免疫荧光技术也被用于检测离体vsmc中acat1的表达;结果:1.acat1在as斑块形成和oxldl诱导的平滑肌源性泡沫细胞形成中的作用⑴.高脂(highfat,hf)饮食显着上调apoe-/-小鼠主动脉acat1的表达,并导致apoe-/-小鼠主动脉形成明显的as斑块。而对于apoe和acat1双基因敲(apoe/acat1-/-)小鼠,hf饮食并不能有效诱导其as斑块的形成。⑵.oxldl呈时间依赖性的上调离体培养vsmc中acat1的表达,在第48h达到顶峰。此外,oxldl刺激导致体外培养vsmc发生泡沫化。acat1高表达进一步促进oxldl引起的vsmc中脂质堆积,而acat1缺乏显着抑制oxldl引起的vsmc中脂质堆积。2.tlr4在as斑块形成和oxldl诱导的平滑肌源性泡沫细胞形成中的作用⑴.hf饮食显着上调apoe-/-小鼠主动脉中tlr4及炎性细胞因子的表达,包括il-1β、il-6和tnf-α,同时促进apoe-/-小鼠as斑块形成。而对于apoe/tlr4-/-小鼠,hf饮食不能诱导炎性细胞因子的表达和as斑块形成。⑵.oxldl呈时间依赖性的上调离体培养vsmc中tlr4的表达,最大效应在24h时出现,且同时应用oxldl与lps可进一步增加vsmc中tlr4的表达。此外,oxldl显着促进炎性细胞因子包括il-1β、il-6和tnf-α的表达,且lps可进一步增强以上效应。在wt型vsmc中应用lps激活tlr4可进一步增加oxldl引起的脂质蓄积。而对于tlr4-/-型vsmc,oxldl与lps并不能显着增加vsmc中的脂质蓄积,且二者也不能有效上调炎性细胞因子的表达。3.tlr4与acat1在调节as斑块形成和平滑肌源性泡沫细胞形成中的关系⑴.hf饮食可显着上调apoe-/-小鼠主动脉中acat1的表达,而对于apoe/tlr4-/-小鼠,hf饮食并不能有效地上调其主动脉中acat1的表达。⑵.在wt型vsmc中激活或抑制tlr4可分别促进和抑制由oxldl引起的acat1表达上调。而对于tlr4-/-型vsmc,oxldl和lps刺激均不能有效上调acat1表达。⑶.在wt型vsmc中激活和抑制tlr4表达可分别促进和阻碍oxldl诱导的泡沫细胞形成。然而,acat1缺陷会损害以上tlr4效应;对于acat1缺陷的vsmc,tlr4激活或抑制对泡沫细胞的形成没有明显的影响。而acat1缺陷并不影响vsmc中tlr4的表达。⑷.oxldl单独应用或联合lps刺激可显着上调wt型vsmc中myd88、nf-κbp65和p-iκbα的表达水平。而对于tlr4-/-型vsmc,oxldl和/或lps刺激并不能有效地诱导myd88、nf-κbp65和p-iκbα的表达。myd88缺陷损害oxldl和/或lps诱导的nf-κbp65、p-iκbα和acat1的表达。nf-κbp65缺陷也损害oxldl和/或lps诱导的acat1的表达。4.pparγ在as斑块形成和oxldl诱导的平滑肌源性泡沫细胞形成中的作用⑴.激活PPARγ可显著抑制HF饮食喂养的ApoE-/-小鼠AS斑块的形成。此外,ApoE-/-小鼠主动脉中由HF饮食诱导的TLR4、炎性细胞因子和ACAT1的表达也被PPARγ激活所显著抑制。与此相反,激活PPARγ对Apo E/TLR4-/-小鼠AS斑块的形成及炎性细胞因子和ACAT1表达无明显影响。此外,TLR4缺陷并不影响体内PPARγ的表达。⑵.在WT型VSMC中激活或抑制PPARγ可分别抑制或促进由ox LDL引起的细胞内脂质聚积。而在TLR4-/-型VSMC中,无论是激活PPARγ还是抑制PPARγ,对VSMC泡沫化无明显影响。此外,PPARγ活化和抑制可分别抑制和促进WT型VSMC中TLR4、炎性细胞因子、MyD88、NF-κB p65、p-IκBα和ACAT1的表达水平。而对于TLR4-/-型VSMC,PPARγ活化和抑制并不能有效地影响TLR4介导的炎症反应和ACAT1的表达。同时,和体内PPARγ的表达一样,TLR4缺陷并不影响PPARγ的表达。结论:本研究提供的证据显示在AS病变过程中ox LDL刺激可以通过激活TLR4/MyD88/NF-κB炎症信号通路上调VSMC中ACAT1的表达,并最终促进平滑肌源性泡沫细胞的形成。此外,PPARγ可以通过抑制上述炎症信号通路抑制ox LDL诱导的平滑肌源性泡沫细胞的形成。我们的研究阐明了PPARγ、TLR4和ACAT1在平滑肌源性泡沫细胞形成过程中的病理作用,为AS防治提供了潜在的干预靶点。(本文来源于《第叁军医大学》期刊2015-05-01）
尹延伟,张莉莉[10]（2015）在《Toll样受体4在平滑肌源性泡沫细胞形成中作用》一文中研究指出目的血管平滑肌细胞(VSMC)是中晚期动脉粥样硬化病变中泡沫细胞的主要来源,我们前期研究发现动脉粥样硬化病变中VSMC的TLR4表达增多,并可促进VSMC的增殖迁移和炎性因子的分泌。但TLR4是否同样具有促进VSMC源性泡沫细胞形成的作用,目前尚不清楚。我们假设TLR4同样能够通过抑制VSMC的RCT过程进而导致泡沫细胞的形成,并通过5个实验来验证以上假说。方法雄性C57BL/6J背景6-8周龄野生型小鼠与TLR4基因敲除小鼠,分别于以上两种小鼠主动脉(本文来源于《第十五次中国脑血管病大会2015论文汇编》期刊2015-04-10）
平滑肌源性泡沫细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的研究Nε-羧甲基赖氨酸(CML)对平滑肌细胞泡沫化中脂质外流的影响,探讨其在促进平滑肌细胞泡沫化中的作用和机制。方法使用组织贴块法从C57BL/6J小鼠主动脉中提取原代血管平滑肌细胞并进行鉴定;将第3~9代的原代平滑肌细胞分为对照组,氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)(50 mg/L)模型组,1、10、100μmol/L的CML与ox-LDL共刺激组,通过NBD-胆固醇流出实验检测CML对泡沫细胞胆固醇流出率的影响,通过胆固醇含量测定试剂盒测定细胞内总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)和胆固醇酯(CE)水平;将原代血管平滑肌细胞分为四组:对照组、ox-LDL模型组、ox-LDL+CML组、RAGE siRNA沉默组(ox-LDL+CML+siRAGE组)并进行刺激,通过Western blot检测糖基化终末产物受体(RAGE)和胆固醇流出调节子ABCA1的表达;通过油红O染色和油红萃取实验检测各组平滑肌细胞泡沫化程度。结果与对照组相比,不同浓度CML明显升高平滑肌细胞内TC、CE和FC的含量;胆固醇流出实验表明胆固醇流出率随CML浓度升高而降低;Western blot实验表明与对照组相比,加入CML后RAGE明显升高,ABCA1明显降低,ox-LDL+CML+siRAGE组RAGE的表达降低,并且ABCA1降低水平减少;油红O染色显示ox-LDL能够促使平滑肌细胞内脂质蓄积,CML能够增强其作用,抑制RAGE表达后CML作用减弱。结论 CML通过RAGE抑制脂质外流,促进平滑肌细胞源性泡沫细胞形成。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
平滑肌源性泡沫细胞论文参考文献
[1].李佳,申晓彧.依折麦布与瑞舒伐他汀对平滑肌源性泡沫细胞小凹蛋白-1mRNA表达的影响[J].中国医师杂志.2019
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[5].周炜,陈曼华.siRNA沉默mfn2表达对睾酮抑制大鼠血管平滑肌源性泡沫细胞形成的影响[J].基础医学与临床.2016
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[7].郭露,张莉莉.TLR4介导的ABCA1表达下调促进平滑肌源性泡沫细胞形成[C].中华医学会第十八次全国神经病学学术会议论文汇编（下）.2015
[8].尹延伟,张莉莉.TLR4抑制ABCG1表达促进平滑肌源性泡沫细胞形成机制研究[C].中华医学会第十八次全国神经病学学术会议论文汇编（下）.2015
[9].尹延伟.TLR4上调ACAT1表达促进平滑肌源性泡沫细胞形成的机制研究[D].第叁军医大学.2015
[10].尹延伟,张莉莉.Toll样受体4在平滑肌源性泡沫细胞形成中作用[C].第十五次中国脑血管病大会2015论文汇编.2015