导读:本文包含了器官型脑片培养论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:器官型脑片,OGD,丁苯酞,细胞凋亡
器官型脑片培养论文文献综述
董梅,程树彬,郭彦芳,李钊,李世平[1]（2017）在《器官型脑片培养OGD复氧复糖模型中丁苯酞对于bcl-2/bax、及bim蛋白的调节作用》一文中研究指出目的观察正丁基苯酞(NBP)对乳大鼠大脑皮质器官型脑片的氧糖剥夺模型(OGD)中细胞凋亡bcl-2、bax及bim蛋白的调节作用。方法用生后7 d的SD乳大鼠制备大脑皮质运动区器官型脑片,将培养2 w的脑片随机分为对照组(C组)、模型组(M组)、溶剂对照组(Sc组)和实验组(T组),T组在OGD干预30 min后给予NBP 10μM。将脑片制备OGD模型30 min,部分脑片在NBP干预前后不同时间点(0 h、1 h、24 h、72 h)进行PI染色;部分脑片在NBP干预后6 h用戊二醛固定,做石蜡切片,行HE染色及bcl-2、bax、bim免疫组化染色。结果 PI染色可见C组在不同时间点荧光强度无明显变化,M组、Sc组和T组荧光强度均随时间有不同程度增强,M组和Sc组各时间点荧光强度无明显差异,T组荧光强度较前两者降低,随时间延长,降低幅度增大,尤其是72 h时间点。HE染色C组可见皮质运动区特有的大锥体细胞,结构清晰,M组和T组可见细胞肿胀,细胞核溶解,M组相对明显。免疫组化染色可见在3种染色中M组和T组阳性细胞数均较C组增多,其中bcl-2染色中T组阳性细胞增多更明显,bax和bim染色中M组阳性细胞增多更明显,3种染色中C、M、T各组之间差异均有统计学意义。结论NBP对OGD后的细胞损伤具有保护作用,可能是通过对bcl-2、bax以及bim蛋白的调节减少细胞凋亡。(本文来源于《中风与神经疾病杂志》期刊2017年01期）
吕海侠,焦倩,王丽,马辉,王媛媛[2]（2013）在《移植的大鼠神经干细胞与正常培养器官型脑组织片相互整合及相关分子机制》一文中研究指出目的神经干细胞(neural stem cell,NSCs)移植为脑损伤及神经退行性疾病的治疗带来希望。然而,移植后NSCs的生物学行为以及功能发挥受到体内复杂信号的影响,为了提高NSCs移植效果、更好的促进神经功能重建,对移植细胞与宿主的整合作用及机制的研究逐渐成为焦点。器官型脑组织片保留了与和体内组织相似的神经细胞构筑、复杂的细胞外环境和突触联系,同时具有很强的可操作性,为研究移植物与宿主的相互作用提供了良好的载体。本研究拟在正常培养的器官型脑组织片研究移植的NSCs与宿主组织的整合作用和可能机制。方法将EGFP标记的NSCs移植于体外培养2周后的新生大鼠全脑器官型脑组织片,倒置荧光显微镜下观察移植细胞的存活、迁移以及突起的延伸情况,免疫荧光化学染色鉴定移植细胞的分化种类和突触形成;Western blot检测移植体系中细胞组成比例及与细胞增殖/分化相关信号途径的改变。结果(1)移植的NSCs可在正常培养的脑组织片上存活达30天以上,其中移植于大脑皮质部位的NSCs存活率明显高于纹状体部位;(2)大脑皮质部位移植细胞的突起延伸方向与宿主细胞突起方向一致,其平均长度为149.46±45.74μm,而在纹状体,移植细胞的突起无明显方向性,其平均长度明显较短(58.88±36.66μm,P<0.05);(3)NSCs移植14 d后,除部分细胞仍为nestin阳性以外,可分化为MAP2阳性成熟神经元和GFAP阳性的星形胶质细胞;(4)NSCs移植14 d后,移植体系中β-tubulinⅢ蛋白水平显着增高,GFAP蛋白水平显着降低,移植细胞的突起上有synaptophysin阳性突触囊泡分布;(5)移植体系中JNK磷酸化水平无显着变化,而ERK1/2和p38磷酸化水平显着下调。结论移植NSCs可在正常脑组织中存活并发生成熟分化,大脑不同部位的特异性空间信号对移植细胞的存活和突起延伸有显着地影响;NSCs移植明显促进了神经元再生,降低了胶质生成,可能与移植体系中MAPK信号蛋白的磷酸化水平改变有关。(本文来源于《中国神经科学学会第十届全国学术会议论文摘要集》期刊2013-09-19）
程树斌[3]（2013）在《器官型脑片培养OGD复氧模型中丁苯酞对于bcl-2/bax及bim蛋白的调节作用》一文中研究指出目的：建立大脑皮层的器官型脑片氧糖剥夺模型（Oxygen andGlucose Deprivation,OGD），观察OGD复氧模型中丁苯酞（NBP）对细胞凋亡中bcl-2、bax及bim蛋白的调节作用。方法：用生后7天的SD(Sprague Dawley)乳大鼠，制备大脑皮层运动区的器官型脑片，用膜插件的方法进行体外培养，观察其形态。2周后，将脑片随机分为对照组（C组）、模型组（M组）、溶剂对照组（MT组）和实验组（T10组），每组九片，更换含有Propidium iodide（PI,1μg/ml）的培养液，孵育20min,倒置荧光显微镜下拍照（4X，曝光时间1.038ms，灵敏度ISO1600），后模型组、溶剂对照组和实验组采用厌氧罐氧剥夺，更换无糖培养液（含PI）的方式，进行OGD干预30min,之后更换正常糖含量培养液，溶剂对照组更换同实验组等量溶剂(DMSO)的正常培养液(含PI),实验组更换含NBP（10μM）的正常培养液（含PI），对照组与实验组同一时间更换两次正常培养液。分别在干预前和恢复正常条件后不同时间点（1h、24h、72h），观察PI染色。另外，对照组、模型组和实验组，重复上述干预（培养液不添加PI），复氧6小时后用戊二醛固定，并做石蜡切片，进行HE染色及对各组进行bcl-2、bax、bim蛋白的免疫组化染色。结果：1体外培养的脑片存活良好，未见明显的坏死区域。2周的脑片，进行HE染色，可见正常的细胞结构。2PI染色可见对照组在不同的时间点荧光强度并未发生明显变化(P>0.05)，模型组和溶剂对照组可见荧光强度在OGD复氧1h后有明显增强，之后在24h、72h逐渐增强。两组进行各时间点比较其荧光强度未见明显差异（P>0.05）。3实验组荧光强度也呈现逐渐增强趋势，但与模型组比较，在24h、72h其荧光强度均低于模型组。4免疫组化染色可见对照组、模型组和实验组处理后6小时的石蜡切片中。bcl-2蛋白：模型组和实验组阳性细胞数均增多，实验组增多更明显，叁组差异均具有统计学意义；bax蛋白：模型组和实验组阳性细胞数均增多，模型组增多更明显，叁组之间差异均有统计学意义；bim蛋白：模型组和实验组阳性细胞数均增多，模型组增多更明显，叁组之间差异均有统计学意义。结论：1出生后7天的SD乳鼠可以作为体外脑片培养的脑组织供体，并且可以以此为平台，对脑细胞进行不同条件的刺激来研究神经细胞的不同反应；2OGD模型可以诱导脑片损伤，出现急性的细胞死亡和迟发性细胞凋亡，可以模拟在体的缺血缺氧后脑组织损伤，重复性良好；3NBP对OGD后的细胞损伤具有保护作用，其可能通过对bcl-2、bax以及bim蛋白的调节从而减少细胞的凋亡。(本文来源于《河北医科大学》期刊2013-03-01）
焦倩,章海霞,吕海侠,刘勇[4]（2011）在《新生大鼠器官型脑组织片培养和诱导神经干细胞分化的观察》一文中研究指出目的建立在改良条件下新生大鼠器官型脑组织片培养方法,初步探索空间信号对神经干细胞增殖分化的诱导作用。方法选取新生SD大鼠,以振荡切片机切取200μm脑组织片,以改良的Stoppini方法进行培养,培养不同时间在倒置相差显微镜下对脑组织片进行观察;采用本实验室改良后神经干细胞培养方法分离培养SD大鼠胚胎第14～15天大脑皮质神经干细胞,以CM-DiI对培养第3代细胞进行标记,并移植于体外培养2周后的脑组织片;对移植后CM-DiI阳性标记细胞的存活和分化情况进行观察。结果器官型脑组织片在体外培养体系中存活良好,脑片周围细胞向外迁移;培养2周后,组织片厚度由原来的200μm减小至130μm,原有的细胞构筑发生变化;接受细胞移植后的脑片上可见大量DiI标记细胞,继续培养7 d后,部分标记细胞分化为GFAP阳性星形胶质细胞和β-tubulin III阳性神经元。结论新生大鼠器官型脑组织片体外培养成功,可以作为研究空间信号诱导神经干细胞增殖分化的模型。(本文来源于《南方医科大学学报》期刊2011年08期）
左晓洁[5]（2011）在《大鼠器官型脑片的培养》一文中研究指出目的:建立大鼠正常器官型培养脑片模型,并对器官型脑片中的大锥体细胞进行鉴定。器官型脑片培养成功后,可在此基础上建立各种疾病的器官型脑片模型,探讨疾病的发生发展机制及规律。方法:本实验应用millicell-CM insert微孔膜插入式培养技术以及由最小培养基MEM,马血清,Hanks’液组成的培养液成功培养了大鼠器官型脑片,并用抗非磷酸化神经微丝单克隆抗体(SMI-32单克隆抗体)进行免疫组化染色,对器官型脑片和在体脑组织的大锥体细胞进行鉴定,根据在体脑皮层的大锥体细胞对器官型脑片的大锥体细胞进行定位及形态比较,在200×镜下测定3个随机视野中5 mm×5 mm目镜测微尺面积下的SMI-32阳性大锥体细胞的数目,对培养两周、叁周、四周的脑片之间大锥体细胞计数并比较。结果1大鼠器官型培养脑片存活率达80%以上,可存活一个月以上。2在体大脑皮层内,第V层细胞为大锥体细胞层,细胞胞体呈现多角形或者椭圆形,胞浆着色浅,有的呈空泡状,树突或不明显,轴突较长,伸向皮层。3培养脑片中,按照在体皮层大椎体细胞所分布的位置,可见在大脑皮层深部,第V层细胞呈锥体形或者多角形,胞体直径25~50μm,每个细胞的胞体颜色均一,胞浆着色深,树突明显,都有一个长的轴突伸向皮层,轴突较长。随着培养时间的延长,细胞的横向突起增长变多。4培养2、3、4周的脑片中的大锥体细胞计数分别为28.50±4.34、27.83±4.40、27.67±3.55,各时点皮层锥体细胞计数无显着差异(P>0.05)。结论:本实验应用millicell-CM insert微孔膜插入式培养技术以及由最小培养基MEM,马血清,Hanks’液组成的培养液成功培养了大鼠器官型脑片,摸索并明确了其生长过程中对温度、培养液酸碱度、糖含量及氧气浓度的要求,最佳培养环境条件为:37℃,培养液PH值为7.2-7.4,糖含量27.76g/L ,气体配比为5%CO2+95%空气,湿度为99%。培养周期为2周。用抗非磷酸化神经微丝单克隆抗体(SMI-32单克隆抗体)对器官型脑片中的大锥体细胞进行鉴定,为缺氧缺糖器官型脑片、运动神经元病、神经变性病以及脑外伤性疾病器官型脑片模型的建立提供了坚实的科学基础。(本文来源于《河北医科大学》期刊2011-03-01）
徐专,孔岩,曹碧茵,刘春风[6]（2008）在《大鼠中脑黑质器官型培养脑片与在体发育黑质结构的形态学比较》一文中研究指出目的探讨大鼠中脑黑质器官型脑片的体外培养方法,比较不同时间离体培养黑质脑片与在体发育黑质结构的形态学变化。方法选出生当天(P0)SD大鼠随机分为在体对照组及脑片培养组,培养组用乙醚麻醉,迅速断头取脑,倒置显微镜下剥离软脑膜,腹面向上水平放置于振动切片机的载物台上。以正中隆起(本文来源于《第十一届全国神经病学学术会议论文汇编》期刊2008-08-01）
石娇,于维军,祝素文,孙桂媛[7]（2006）在《器官型脑片培养液对BMSCs向神经元样细胞分化的诱导作用》一文中研究指出目的在体外培养大鼠骨髓间充质干细胞(bone mesenchymalstem cells,BMSCs),观察BMSCs的形态特征和分类,并诱导其向神经细胞分化,探讨BMSCs向神经细胞诱导分化的可能性和条件。方法取大鼠骨髓,用直接贴壁法培养、传代,取第3代细胞(P3)进行CD34,CD71免疫细胞化学染色鉴定。BMSCs(P3)诱导前24h加1ug.L-1碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)以促分裂。再以脑片培养液作为条件培养液进行诱导,随后进行Nissl、神经元特异性烯醇化酶(NSE),胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学染色。结果BMSCs中含有较小的长梭形细胞,较大的扁平细胞及中等大小的圆形细胞,经鉴定CD34阴性,CD71弱阳性;诱导后BMSCs中长梭形细胞形态呈神经元样外形,Nissl的表达上调,NSE阳性,GFAP阴性。较大的扁平细胞形态变化不明显。结论BMSCs中含有多种细胞,细胞放置于脑片培养液微环境中可以分化为神经细胞,具有治疗神经系统疾病的潜能。(本文来源于《中国组织化学与细胞化学杂志》期刊2006年03期）
张卓伯,王玉凯,金冬梅,商慧芳,徐严明[8]（2006）在《Wistar乳鼠中脑黑质器官型脑片培养的实验研究》一文中研究指出目的探索Wistar乳鼠中脑黑质器官型脑片培养的方法,以更接近在体状态的体外培养方法研究PD的病因和发病机制。方法Wistar乳鼠中脑黑质器官型脑片培养每只乳鼠在中脑黑质区切取300μm脑片5片,置Millicell-CM微孔膜上和6孔培养板中培养。根据培养时间随机平均分为4组。培养24h后加入终浓度为10μmol/LAra-C抑制胶质细胞的生长。将上述终止培养后的脑片分别进行原位冰冻切片和石蜡切片,再行常规HE染色、TH免疫组化染色;同时行TH原位免疫组化和透射电镜观察。结果倒置显微镜观察,在7~8天以后脑片的厚度由原来的350μm减为150μm左右。培养3天后脑片中的细胞逐渐清晰可见。细胞呈圆形或叁角形,大小不等,边界清楚完整。自培养第2天开始在脑片腹侧正中裂隙中及脑片周围的沟裂中出现液体流动—“微血流”现象。组织切片观察可见,在整个培养过程中培养脑片的器官型细胞构架保持完好。HE染色可见各培养时间组神经元数量和形态结构正常。各时间组脑片中神经元的超微结构正常,胞浆内含有丰富的线粒体、粗面内质网、高尔基氏体和分泌颗粒,生物膜完整。结论Wistar乳鼠中脑黑质器官型脑片培养是一种研究帕金森病发病机制的良好的方法。它可在有胶质细胞存在的状态下接受干预因素的影响,较之帕金森病的细胞模型更接近在体状态,而较之动物模型更容易控制非干预因素。活力检测显示,各时间组脑片中神经元的活力正常,生长状态良好。TH是DA神经元的主要标志。各时间组的TH阳性神经元数目及形态均无明显差异。说明该培养方法较好地保持了脑片中DA神经元的存活。(本文来源于《华西医学》期刊2006年02期）
石娇,于维军,孙桂媛,祝素文[9]（2006）在《新生大鼠大脑皮质、纹状体及中脑黑质器官型脑片培养》一文中研究指出目的探索大脑皮质、纹状体及黑质密部器官型脑片的体外培养。方法选出生2d内的W istar乳鼠,取大脑皮质、纹状体及黑质致密部,切成300μm厚的脑片,共同转至带有M illicell微孔膜插件的培养皿中。分别培养0d、10d、20d和30d,倒置显微镜观察,酪氨酸羟化酶(TH)免疫荧光染色及激光共聚焦显微镜下检测脑片摄取溴化已啶(EB)能力。结果黑质密部多巴胺能神经元(TH阳性)及突起逐渐长入纹状体中,约20d左右,纹状体及黑质致密部脑片长在一起,脑片中所有细胞EB染色呈阴性,说明无坏死细胞。培养30d时,脑片约10%神经元呈EB染色阳性,细胞变性坏死。结论培养20d内脑片已经形成多巴胺能神经元从黑质密部到纹状体通路,可用于帕金森病等神经退行性疾病研究的组织模型。(本文来源于《解剖科学进展》期刊2006年01期）
廖晓梅,张迎春,王建枝[10]（2005）在《温度对不同年龄大鼠海马器官型脑片长期培养中细胞活性和tau蛋白表达的影响》一文中研究指出探讨在海马器官型脑片的长期培养过程中,温度对不同年龄大鼠的海马脑片细胞活性和tau蛋白表达的影响,并以此为依据建立一种研究tau相关疾病的模型.选用出生后1周、2周、4周和8周的Wistar大鼠制备海马器官型脑片,培养温度分别为34℃和37℃,培养时间为21d,在培养过程中,检测培养基中的乳酸脱氢酶的含量以判断脑片的活性,采用免疫印迹技术检测细胞骨架蛋白tau的含量的变化.结果如下:(1)温度对海马脑片的细胞活性影响:34℃较37℃能在较长的时间内保持细胞活性,而在同一培养温度时,不同年龄鼠的脑片的细胞活性变化趋势一致;(2)温度对海马脑片的tau蛋白表达的影响:成年鼠(4周和8周)的海马脑片tau蛋白在34℃时能维持较长时间的稳定表达,而在37℃时tau的表达量随培养时间的延长而显着下降,且随鼠龄的增加,这种影响越明显.温度对1周和2周龄乳鼠的海马脑片tau蛋白的表达无影响.结论为:34℃培养条件下,4周和8周龄大鼠制备的海马器官型脑片能更长时间维持脑片的活性和tau蛋白的稳定表达,从而可望成为研究与tau蛋白相关疾病(如老年性痴呆)的理想模型.(本文来源于《中国生物化学与分子生物学报》期刊2005年05期）
器官型脑片培养论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的神经干细胞(neural stem cell,NSCs)移植为脑损伤及神经退行性疾病的治疗带来希望。然而,移植后NSCs的生物学行为以及功能发挥受到体内复杂信号的影响,为了提高NSCs移植效果、更好的促进神经功能重建,对移植细胞与宿主的整合作用及机制的研究逐渐成为焦点。器官型脑组织片保留了与和体内组织相似的神经细胞构筑、复杂的细胞外环境和突触联系,同时具有很强的可操作性,为研究移植物与宿主的相互作用提供了良好的载体。本研究拟在正常培养的器官型脑组织片研究移植的NSCs与宿主组织的整合作用和可能机制。方法将EGFP标记的NSCs移植于体外培养2周后的新生大鼠全脑器官型脑组织片,倒置荧光显微镜下观察移植细胞的存活、迁移以及突起的延伸情况,免疫荧光化学染色鉴定移植细胞的分化种类和突触形成;Western blot检测移植体系中细胞组成比例及与细胞增殖/分化相关信号途径的改变。结果(1)移植的NSCs可在正常培养的脑组织片上存活达30天以上,其中移植于大脑皮质部位的NSCs存活率明显高于纹状体部位;(2)大脑皮质部位移植细胞的突起延伸方向与宿主细胞突起方向一致,其平均长度为149.46±45.74μm,而在纹状体,移植细胞的突起无明显方向性,其平均长度明显较短(58.88±36.66μm,P<0.05);(3)NSCs移植14 d后,除部分细胞仍为nestin阳性以外,可分化为MAP2阳性成熟神经元和GFAP阳性的星形胶质细胞;(4)NSCs移植14 d后,移植体系中β-tubulinⅢ蛋白水平显着增高,GFAP蛋白水平显着降低,移植细胞的突起上有synaptophysin阳性突触囊泡分布;(5)移植体系中JNK磷酸化水平无显着变化,而ERK1/2和p38磷酸化水平显着下调。结论移植NSCs可在正常脑组织中存活并发生成熟分化,大脑不同部位的特异性空间信号对移植细胞的存活和突起延伸有显着地影响;NSCs移植明显促进了神经元再生,降低了胶质生成,可能与移植体系中MAPK信号蛋白的磷酸化水平改变有关。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
器官型脑片培养论文参考文献
[1].董梅,程树彬,郭彦芳,李钊,李世平.器官型脑片培养OGD复氧复糖模型中丁苯酞对于bcl-2/bax、及bim蛋白的调节作用[J].中风与神经疾病杂志.2017
[2].吕海侠,焦倩,王丽,马辉,王媛媛.移植的大鼠神经干细胞与正常培养器官型脑组织片相互整合及相关分子机制[C].中国神经科学学会第十届全国学术会议论文摘要集.2013
[3].程树斌.器官型脑片培养OGD复氧模型中丁苯酞对于bcl-2/bax及bim蛋白的调节作用[D].河北医科大学.2013
[4].焦倩,章海霞,吕海侠,刘勇.新生大鼠器官型脑组织片培养和诱导神经干细胞分化的观察[J].南方医科大学学报.2011
[5].左晓洁.大鼠器官型脑片的培养[D].河北医科大学.2011
[6].徐专,孔岩,曹碧茵,刘春风.大鼠中脑黑质器官型培养脑片与在体发育黑质结构的形态学比较[C].第十一届全国神经病学学术会议论文汇编.2008
[7].石娇,于维军,祝素文,孙桂媛.器官型脑片培养液对BMSCs向神经元样细胞分化的诱导作用[J].中国组织化学与细胞化学杂志.2006
[8].张卓伯,王玉凯,金冬梅,商慧芳,徐严明.Wistar乳鼠中脑黑质器官型脑片培养的实验研究[J].华西医学.2006
[9].石娇,于维军,孙桂媛,祝素文.新生大鼠大脑皮质、纹状体及中脑黑质器官型脑片培养[J].解剖科学进展.2006
[10].廖晓梅,张迎春,王建枝.温度对不同年龄大鼠海马器官型脑片长期培养中细胞活性和tau蛋白表达的影响[J].中国生物化学与分子生物学报.2005