导读:本文包含了肠上皮屏障论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:环状RNA,circ-SOD2,肠上皮屏障,溃疡性结肠炎
肠上皮屏障论文文献综述
王婷婷,韩影,高芳芳,叶磊,张育军[1]（2019）在《环状RNA circ-SOD2对肠上皮屏障和溃疡性结肠炎的作用》一文中研究指出目的:探索溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)中环状RNA的表达谱改变,寻找在溃疡性结肠炎中表达发生明显异常的环状RNA,并探讨其对肠上皮细胞屏障功能的影响。方法:挑选5对UC患者炎症结直肠黏膜组织和正常黏膜组织进行环状RNA,芯片检测,筛选溃疡性结肠炎中表达发生改变的环状RNA。使用实时荧光定量PCR在30例UC患者炎症结直肠黏膜组织和正常黏膜组织中进一步验证表达发生明显上调的环状RNA circSOD2。使用炎症因子(LPS、TNF-α和IL1-β)刺激肠上皮细胞系Caco2、NMC460,检测circ-SOD2的表达改变。使用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)实验检测circ-SOD2在UC肠黏膜组织中的细胞定位。构建并合成circ-SOD2过表达载体,将其转染至Caco2细胞后检测Caco2细胞的跨上皮细胞电阻、FITC-右旋糖酐透过率,使用Western blotting检测上皮细胞屏障相关蛋白的表达改变。结果:环状RNA芯片检测后,通过限定条件(差异倍数> 1. 5,P <0. 05),在溃疡性结肠炎受累的结直肠黏膜中共筛选出111个上调、153个下调的circRNA。限定筛选条件:(1)在circRNA表达谱芯片中原始信号值(raw data)> 100;(2)差异表达倍数> 2倍;(3)差异有统计学意义(P <0. 05),筛选出10个差异明显的circRNA,并最终锁定在UC炎症肠黏膜组织中上调倍数最高的circSOD2。进一步扩大样本量在30对溃疡性结肠炎患者炎症和正常肠黏膜组织中使用荧光实时定量PCR技术进行验证,发现circ-SOD2表达明显上调(P <0. 001);使用LPS、TNF-α、IL1-β刺激Caco2、NCM460细胞后,发现circSOD2在刺激后1～7 h的不同时间点均表达上调。荧光原位杂交实验表明circ-SOD2主要表达于肠黏膜组织的肠上皮细胞,而在间质和炎症细胞中表达较少。在Caco2细胞中过表达circ-SOD2后,跨上皮细胞电阻明显下降,FITC-右旋糖酐透过率明显上升,上皮细胞屏障分子闭合蛋白(claudin-8,CLDN-8)表达明显下降(P <0. 05)。结论:溃疡性结肠炎中环状RNA表达出现明显异常,其中在UC中表达上调的circ-SOD2可减弱肠上皮屏障,进而可能导致溃疡性结肠炎发生。(本文来源于《北京大学学报(医学版)》期刊2019年05期）
狄治杉,杨泽俊,朱敏佳,王菲菲,李利生[2]（2019）在《肠神经胶质细胞对肠上皮屏障的调节与功能紊乱疾病》一文中研究指出肠神经胶质是肠神经系统的重要组成部分,其在胃肠道的黏膜中共同组成完整的神经调节体系.肠神经胶质细胞(enteric glial cells, EGCs)分布于肠壁的全层,并通过多条信号转导途径参与到了神经递质和神经调质对肠道功能的调节中.肠神经系统与肠道中的固有神经胶质细胞相互作用,参与上皮功能的调节.上皮细胞具有吸收和分泌的重要功能,同时参与到了肠道的屏障中.研究表明肠神经胶质不仅参与调控胃肠道的运动和上皮屏障功能,还参与形成肠神经元、肠内分泌细胞、免疫细胞和上皮细胞之间的细胞分子桥.本文主要对EGCs在肠道屏障和防御功能中的作用进展加以综述.(本文来源于《世界华人消化杂志》期刊2019年16期）
冯广鑫,吴浩浩,曾名涌[3]（2018）在《海洋微藻源多聚磷酸盐纳米微粒对肠上皮屏障的保护作用》一文中研究指出多聚磷酸盐是益生菌维护肠道健康的主要介质之一。本研究通过DAPl荧光、透射电镜、X-射线能谱及凝胶电泳发现,聚球藻PCC7002细胞中含有大量的多聚磷酸盐纳米微粒(BPNPs),热水抽提可完整地从藻细胞中提取出BPNPs,Sephedex G-100凝胶色谱可将BPNPs与水提物中的有机杂质有效地分离。动态光散射、电镜及能谱扫描等分析表明,BPNPs是一种以多聚磷酸钙镁盐为主要成分的带负电的近似球形颗粒。BPNPs在体外模拟消化过程中约有10%被水解,能够显着增加灌胃小鼠小肠和大肠内容物中多聚磷酸盐的含量,表明其可较好地耐受肠道消化。在Caco-2单层肠上皮细胞模型中,BPNPs可被吸收和转运,并具有促进细胞增殖、增加紧密连接蛋白和热应激蛋白表达、减少肠上皮屏障通透性的作用。在NCM460肠上皮细胞氧化应激模型中,BPNPs可降低胞内超氧自由基水平,增加细胞膜的完整性,并提高细胞的存活率。在小鼠体外灌注肠段氧化应激模型中,BPNPs能够防止氧化损伤引起的肠道组织通透性增加。因此,BPNPs在维护肠道健康方面具有潜在的应用价值。(本文来源于《中国食品科学技术学会第十五届年会论文摘要集》期刊2018-11-07）
Kim,S,Goel,R,Kumar,A,Qi,Y,Lobaton,G[4]（2018）在《患者肠道微生物群失调与肠上皮屏障功能障碍》一文中研究指出最近的证据表明,在动物模型中,肠道病理学和微生物组与高血压之间存在联系。然而,这种关联在人类中是否存在尚不清楚。因此,该研究的目的是检验高血压患者具有明显特异的肠道微生物组以及肠上皮屏障功能标记物和微生物组组成可以预测收缩压变化的假设。研究者通过鸟枪法宏基因组学分析粪便样本显示微生物分类和功能变化,结果显示高血压患者和对照受试者之间丁酸盐产生存在差异。高血压患者(本文来源于《中华高血压杂志》期刊2018年09期）
谭悦,郑长清[5]（2018）在《整肠生对溃疡性结肠炎小鼠肠上皮屏障的保护作用》一文中研究指出目的探讨整肠生对溃疡性结肠炎小鼠肠道紧密连接蛋白表达以及对氧化应激反应的影响。方法选用雄性8~10周龄C57BL/6小鼠40只,随机分为4组:对照组、模型组(3%DSS)、5-ASA组(3%DSS+5-ASA 200mg/kg灌胃)和整肠生组(3%DSS+联合整肠生及5-ASA灌胃),每组10只,造模7d。观察各组小鼠便血程度、组织学损伤情况,通过投射电镜观察各组肠道上皮间紧密连接改变情况,应用Western blot和RT-PCR的方法,检测小鼠结肠黏膜紧密连接蛋白Occludin、ZO-1、Claudin-2的表达情况。结果 (1)与模型组比较,5-ASA组和整肠生组小鼠便血程度明显减轻,DAI评分显着降低(P<0.05)。整肠生组与5-ASA组比较,便血减轻,DAI评分降低(P<0.05)。(2)电镜显示,对照组肠上皮间紧密连接呈一条致密条带,结构完整,见细胞桥粒,微绒毛光滑、排列整齐,细胞间隙狭窄;模型组肠上皮间紧密连接结构松散、模糊、密度降低,桥粒结构消失,微绒毛稀疏,短缩且长短不一,细胞间隙增宽;各治疗组的紧密连接的破坏情况较模型组有不同程度的改善,整肠生组紧密连接清晰,细胞间隙缩窄,微绒毛排列整齐,出现细胞桥粒。(3)应用Western blot和Real time-PCR法检测,与正常组相比,模型组Occludin、ZO-1蛋白和mRNA表达显着下降,Claudin-2表达显着上调(P<0.05);各治疗组较模型组Occludin、ZO-1蛋白表达上调,Claudin-2蛋白表达下调(P<0.05),整肠生组较单用5-ASA组更明显提高Occludin、ZO-1蛋白和mRNA表达。(4)与正常组相比,模型组MDA含量增高,SOD活性降低,与5-ASA组相比,整肠生组能更显着地降低MDA含量,提高SOD活性(P<0.05)。结论联合应用整肠生通过调节紧密连接蛋白Occludin、ZO-1的表达和降低氧化应激反应,来改善溃疡性结肠炎小鼠肠上皮屏障功能。(本文来源于《中国微生态学杂志》期刊2018年08期）
赵妍[6]（2018）在《CRF-R1在针刺治疗IBS-D中的作用及其介导的肠上皮屏障信号机制研究》一文中研究指出目的:IBS-D是临床常见病及高发病,以肠道症状合并心理异常为重要临床特征。前期多中心RCT证实针刺不仅能改善肠道症状,而且可以调节心理异常,本研究在此基础上,探讨针刺通过降低CRF-R1在中枢及肠道的表达,抑制TNFα-NFκB-MLCK信号通路的活化,恢复紧密连接结构及功能,从而明确针刺疗效及重建肠上皮屏障的相关机制,为针刺治疗IBS-D提供科学依据。方法:以慢性不可预知性温和应激(CUMS)联合番泻叶浸剂灌胃法建立满足肠道症状合并心理异常的IBS-D大鼠模型。将符合入组标准的大鼠按照体重分层,采用抽签法随机分为对照组、模型组、模型+电针组、模型+药物组及模型+NBI-27914组。电针组选取天枢、足叁里、叁阴交、太冲,每次15min。药物组采用2.7mg/mL的匹维溴铵混悬液按10mL/kg灌胃。NBI-27914组给予CRF-R1拮抗剂NBI-27914腹腔注射。14天后以内脏疼痛阈值和腹泻指数评价各组大鼠肠道症状的改变,以高架十字迷宫开臂时间比(OT%)和糖水偏嗜率(SP%)评价各组大鼠焦虑和抑郁样行为的改变。行为学评价结束后取各组大鼠腹主动脉血、下丘脑及结肠段,采用fqRT-PCR法测定下丘脑CRF及CRF-R1 mRNA的相对表达水平,免疫荧光双计数法测定IMMC与CRF-R1的双阳性表达细胞数,Western Blot检测TNFα-NFκB-MLCK信号通路中关键物质的表达水平,免疫组化法检测肠上皮紧密连接蛋白Claudin-1、ZO-1、Occludin的表达,透射电镜法观察肠上皮细胞间连接结构的改变,分光光度法检测血浆DAO活性。结果:给予CUMS联合番泻叶浸剂灌胃14天后,与对照组比较,模型组大鼠内脏疼痛阈值明显降低,腹泻指数显着升高(均P<0.01),高架十字迷宫开臂时间比(OT%)和糖水偏嗜率(SP%)均明显降低(P<0.01,P<0.05),回、结肠均未见有明显的组织病理形态变化。干预14天后,与模型组比较,电针组、药物组及NBI-27914组内脏疼痛阈值明显升高(P<0.05,P<0.01,P<0.01),腹泻指数显着降低,OT%明显升高(均P<0.01),而SP%仅电针组和NBI-27914组明显升高(P<0.05,P<0.01)。电针组、药物组、NBI-27914组IBS-D大鼠下丘脑CRF及CRF-R1mRNA表达水平均显着降低,IMMC与CRF-R1双阳性表达细胞数显着减少,结肠TNF-α、NF-κB蛋白表达水平及MLC蛋白磷酸化水平蛋白表达水平降低,血浆DAO活性降低,Claudin-1、ZO-1平均光密度值增高(均P<0.01),Occludin平均光密度值增高(P<0.05,P<0.01,P<0.01),透射电镜下模型组紧密连接结构模糊,黏附连接、缝隙连接和桥粒均不可见;电针组紧密连接和黏附连接结构清晰,但桥粒数量减少;药物组黏附连接、缝隙连接和桥粒的结构较清晰,但紧密连接之间缝隙增大;NBI-27914组紧密连接、黏附连接、缝隙连接和桥粒均清晰可见,桥粒数目较多。此外,在下调结肠NF-κB蛋白表达水平及上调ZO-1方面,电针优于匹维溴铵(均P<0.01)。结论:1.CUMS联合番泻叶浸剂灌胃法可以成功建立满足肠道症状合并心理异常的IBS-D大鼠模型。2.电针可同时改善IBS-D模型大鼠的肠道症状和心理异常,并且能够重建肠上皮屏障,其抗抑郁、上调ZO-1和下调NF-κB的效果均优于匹维溴铵。3.下调CRF-R1在下丘脑和IMMC上的表达是电针发挥对肠道症状和心理异常双重调节作用的关键靶点。4.抑制CRF-R1介导的TNFα-NFκB-MLCK信号通路活化,上调紧密连接蛋白表达是电针重建肠上皮屏障的重要途径。(本文来源于《成都中医药大学》期刊2018-05-01）
杨明月[7]（2018）在《TL1A对慢性实验性结肠炎小鼠肠上皮屏障的影响与机制及黄芪甲苷干预研究》一文中研究指出炎症性肠病(Inflammatory bowel disease,IBD)是一组肠道炎性疾病的总称,包括溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)和克罗恩病(Crohn's disease,CD),发病率呈逐年上升趋势。其发病机制尚不十分明确,但目前认为可能是环境因素(包括饮食、生活方式等)作用于遗传易感者,在肠道菌群的参与下,启动了难以停止的、发作与缓解交替的肠道免疫反应,产生多种促炎因子,导致肠上皮屏障损伤、溃疡经久不愈和炎性增生等病理改变。肠上皮屏障破坏是炎症性肠病的重要病理改变,肠道炎症释放的促炎因子不仅能通过活化免疫细胞抑制微生物的入侵,同时还可影响紧密连接(Tight junction,TJ)蛋白的表达、分布及组成,进而影响肠上皮屏障功能。肠上皮屏障由肠道上皮细胞构建的单层柱状上皮细胞紧密连接紧密连接在一起,肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)等炎症因子可通过影响细胞骨架调节分子和TJ蛋白重建维持肠上皮屏障,促进肠道上皮细胞凋亡和脱落。肌球蛋白轻链激酶(Myosin light chain kinase,MLCK)是细胞脱落重要的调节因子。鼠实验性结肠炎模型中MLCK表达增加,导致了TJ蛋白下调,上皮屏障功能严重缺失。TNF-α与肠道TJ损伤和肠上皮细胞骨架重塑相关,使肠道通透性增加,同时促进其他炎症因子的释放,如IL-18、IL-17。有研究发现CD和UC患者结肠上皮细胞中Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)表达增多,并且暴露于鞭毛蛋白可致TNF-α表达增加进一步损伤肠上皮屏障功能。肿瘤坏死因子样配体1A(Tumor necrosis factor ligand-related molecule1 A,TL1A)是肿瘤坏死家族(Tumor necrosis family,TNF)成员,IBD易感基因,TL1A与其受体死亡受体3(Death receptor 3,DR3)结合,可以启动一系列免疫反应,例如激活T细胞、固有淋巴细胞、单核巨噬细胞、上皮细胞等产生炎症因子TNF-α、IL-17、IFN-γ等。许多研究表明TL1A是粘膜免疫的主要调节因子,连接了固有免疫和适应性免疫,促进炎症因子产生。有研究表明髓系细胞高表达TL1A转基因小鼠回肠杯状细胞增生,且与小肠IL-13升高相关。另有研究表明,人类肠道粘膜组织包含大量记忆性CD4~+T细胞,其中在屏障表面共表达白介素-18受体α(IL-18Rα)和DR3的一种CD4+T细胞,TL1A刺激后可产生IFN-γ、TNF-α、IL-6、IL-5、IL-13、GM-CSF和IL-22。然而TL1A如何调节肠上皮屏障尚不清楚。本实验采用髓系细胞高表达TL1A转基因(FMS-TL1A-GFP-transg-enic)小鼠构建DSS诱导的慢性实验性结肠炎模型,同时应用Caco-2细胞系建立体外肠上皮细胞屏障模型,在动物和细胞水平探讨TL1A在慢性实验性结肠炎中对肠上皮屏障的影响及其机制,以期为IBD的防治提供新的理论依据。具体实验分为以下四部分:第一部分TL1A对慢性实验性结肠炎小鼠肠上皮屏障的破坏作用目的:探讨TL1A对小鼠慢性实验性结肠炎肠上皮屏障的破坏作用。方法:应用髓系细胞高表达TL1A转基因(Tansgenic,Tg)小鼠与C57BL/6野生型(Wild type,WT)小鼠通过饮用葡聚糖硫酸钠(Dextran sulfate sodium,DSS)建立小鼠慢性实验性结肠炎模型,评估小鼠炎症改变,检测肠上皮屏障通透性,透射电镜观察肠上皮屏障破坏情况。结果:与DSS/WT组小鼠相比,DSS/Tg组小鼠结肠炎症更严重,且透射电镜观察发现肠上皮屏障破坏更为显着,肠上皮屏障通透性显着增加。结论:采用髓系细胞高表达TL1A的Tg小鼠和具有相同遗传背景的WT小鼠成功构建了DSS诱导的慢性实验性结肠炎模型;TL1A加重慢性实验性结肠炎模型小鼠的肠道炎症;TL1A可能通过加重肠上皮屏障的破坏、增加肠粘膜通透性促进慢性实验性结肠炎的发生发展。第二部分TL1A破坏慢性实验性结肠炎小鼠肠上皮屏障的体内外机制目的:探讨TL1A高表达对小鼠慢性实验性结肠炎中的肠上皮屏障破坏作用的体内外机制。方法:检测肠组织中TNF-αmRNA含量、TL1A和ZO-1、occludin、Claudin-1,2,3、JAM-A的mRNA表达情况,检测结肠组织中TL1A和ZO-1、occludin、JAM-A、Claudin-1,2,3、MLC、p-MLC、髓样分化因子88(Myeloid differentiation factor 88,MyD88)和TNF受体相关因子6(TNF receptor associated factor 6,TRAF6)的蛋白定量表达。应用慢病毒转染的方法转染Caco-2细胞系,建立体外肠上皮屏障,测定TEER值,FITC-D通透率测定,透射电镜观察Caco-2单层细胞屏障的超微结构。检测Caco-2单层细胞中TL1A和ZO-1、occludin、MLC、p-MLC、MyD88和TRAF6的蛋白定量表达,检测TL1A和ZO-1、occludin的mRNA表达情况。结果:与DSS/WT组小鼠相比,DSS/Tg组小鼠结肠组织中TNF-αmRNA表达显着增加,与DSS/WT组相比,DSS/Tg组小鼠ZO-1、occludin、JAM-A、Claudin-1,3 mRNA表达显着降低,同时ZO-1、occludin、JAM-A、Claudin-1,3蛋白表达降低,Claudin-2、p-MLC、MyD88和TRAF6蛋白表达升高。Caco2+LV-TNFSF15+TNF-α和Caco2+LV-TNFSF15+LPS组分别与Caco2+TNF-α和Caco2+LPS组相比体外Caco-2单层细胞肠上皮屏障通透性显着增加,肠上皮屏障破坏加重,紧密连接蛋白破坏加重,p-MLC、MyD88和TRAF6蛋白表达显着增加。结论:TL1A影响了结肠上皮中TJ的表达;TL1A可能通过TNF-α介导的MLCK/p-MLC通路引起TJ蛋白的表达变化,促进肠上皮屏障的破坏;TL1A可能通过LPS介导的MyD88/TRAF6通路影响TJ蛋白的表达,破坏肠上皮屏障。第叁部分ASIV通过修复肠道上皮屏障改善髓系TL1A高表达小鼠的结肠炎症目的:探讨黄芪甲苷(Astragalosides IV,ASIV)对TL1A小鼠慢性实验性结肠炎肠上皮屏障的保护作用及机制研究。方法:应用髓系细胞高表达TL1A转基因(Tansgenic,Tg)小鼠与C57BL/6 WT小鼠通过饮用DSS建立小鼠慢性实验性结肠炎模型和体外Caco-2单层细胞模型,应用ASIV治疗。检测肠上皮屏障通透性,透射电镜观察肠上皮屏障破坏情况、TNF-α的表达变化、紧密连接蛋白及p-MLC、MyD88、TRAF6表达变化。结果:与DSS/Tg组小鼠相比,DSS/Tg/ASIV组小鼠结肠炎症减轻,且透射电镜观察发现肠上皮屏障破坏减轻,肠上皮屏障通透性显着降低,TNF-α表达减少,TJ破坏,p-MLC、MyD88、TRAF6减少。结论:ASIV可能通过促进肠上皮屏障修复缓解慢性结肠炎的发生发展。(本文来源于《河北医科大学》期刊2018-04-01）
肖勘[8]（2017）在《TGF-β1在断奶仔猪肠上皮屏障损伤修复中的作用及其信号通路解析》一文中研究指出本文旨在研究TGF-β1在断奶仔猪肠上皮屏障损伤修复中的作用,并解析其信号通路。通过体内实验研究仔猪断奶后肠黏膜TGF-β1及受体、紧密连接的发育性变化以及与MAPKs和Smads信号通路的关系,再通过日粮添加TGF-β1试验研究TGF-β1对断奶猪肠上皮屏障损伤模型的保护作用以及对MAPKs和Smads信号通路的影响;在此基础上通过建立体外猪肠上皮屏障损伤模型,研究TGF-β1在肠上皮屏障修复中的作用,并利用通路阻断剂和RNA干扰技术,抑制或者沉默关键MAPK或Smads信号,检测它们相对应通路关键蛋白的表达变化以及对肠上皮细胞紧密连接的影响,探讨两条通路之间的串话,阐明TGF-β1/Smads/MAPKs信号通路在肠上皮屏障损伤修复中的作用,解析肠上皮屏障修复的关键调节靶点,为在分子水平开展仔猪肠道健康的营养调控研究提供理论依据,为营养防治仔猪断奶应激开辟一条新思路。主要研究结果如下:1.仔猪断奶后肠黏膜TGF-β1、紧密连接的发育性变化以及与MAPKs和Smads信号通路的关系早期断奶使肠上皮屏障受损,TGF-β1在仔猪肠上皮屏障损伤修复中是否发挥作用还未见报道,目前还未见TGF-β1及其相关信号通路在仔猪断奶后的发育性变化的研究。本试验选用21日龄断奶仔猪为试验对象,21日龄断奶,分别于断奶前、断奶后3天、7天和14天屠宰仔猪取样,每次6头。结果表明:1)与断奶前相比,仔猪空肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度在断奶后3天、7天显着降低(P<0.05),随后逐渐恢复,断奶后14天与断奶前差异不显着(P>0.05);仔猪空肠上皮细胞跨膜电阻在断奶后3天、7天显着降低(P<0.05),荧光素异硫氰酸酯-葡聚糖(fluorescein isothiocyanate dextran,FD4)的通透性断奶后3天、7天显着提高(P<0.05),断奶后14天仍没有恢复至断奶前水平。2)空肠紧密连接蛋白occludin、claudin-1在断奶后3天、7天和14天显着降低(P<0.05),ZO-1蛋白在断奶后3天、7天显着降低(P<0.05)。3)空肠黏膜细胞因子TNF-α和IL-6mRNA在断奶后3天、7天显着升高(P<0.05),IFN-γmRNA在断奶后3天显着升高(P<0.05),IL-6和IFN-γ mRNA至断奶后14天恢复至正常水平,而TNF-α mRNA依然显着高于断奶前水平(P<0.05);促炎因子TNF-α、IL-6和IFN-γ含量与mRNA趋势保持一致,均在断奶后3天、7天显着升高(P<0.05),断奶后14天IL-6和IFN-γ恢复至正常水平。4)空肠黏膜TGF-β1和IL-10mRNA的表达在断奶后3天、7天和14天均无显着差异(P>0.05),IL-10含量在断奶后无显着变化(P>0.05);而TGF-β1的含量却在断奶后3天、7天显着增加(P<0.05),并在断奶后7天达到顶峰,至断奶后14天恢复至正常水平。5)TGF-β1总蛋白在断奶后3天和7天显着升高(P<0.05),在断奶后14天恢复至断奶前水平,断奶后3天绒毛中的TGF-β1显着减少(P<0.05),而隐窝中的TGF-β1在断奶3天后显着增加(P<0.05),断奶后7天均恢复正常;TGF-β受体R1、TGF-β受体R2、smad2、smad3、smad4和smad7的mRNA表达在断奶后3天、7天和14天均无显着差异(P>0.05);而空肠上皮中TGF-β受体R2在断奶后3天显着升高,隐窝中TGF-β受体R2在断奶3天,7天显着降低;TGF-β受体R1在断奶后3天、7天均显着升高,而隐窝中受体R1在断奶后没有变化;TGF-β受体R2蛋白在断奶后3天显着升高(P<0.05),断奶后7天达到顶峰(P<0.05),随后在断奶后14天下降至断奶前水平,而TGF-β受体R1的蛋白表达在断奶后3天、7天和14天均无显着变化(P>0.05),磷酸化smad2和smad3的表达在断奶后3天、7天显着增加(P<0.05),14天后恢复至断奶前水平。6)p-p38、p-JNK在断奶后3天、7天显着升高(P<0.05),p-ERK1/2在断奶后3天显着升高,随后恢复至断奶前水平。结果提示:断奶使仔猪肠屏障受损,通透性增加明显先于形态学变化,断奶降低了紧密连接蛋白Occludin、Claudin-1和ZO-1蛋白的表达,在断奶后2周没有恢复;TGF-β1在断奶后含量显着升高,TGF-β1及其受体在断奶后肠绒毛和隐窝中的表达与分布发生变化,这可能与断奶后肠形态与屏障功能的变化有关;TGF-β1及其经典smads信号通路和MAPK信号通路在断奶后被激活。2.TGF-β1对LPS诱导的断奶仔猪肠道屏障损伤模型的修复作用及其分子机制本实验以35日龄断奶仔猪为研究对象,腹腔注射Escherichia coli LPS建立肠道屏障损伤模型,研究体外添加TGF-β1是否对仔猪肠屏障损伤后修复有作用。本试验采用富含TGF-β1的浓缩乳清蛋白粉(5%的WPC)代替TGF-β1,TGF-β1的添加量为3ppm。试验选取18头35日龄的平均体重为9.5kg的断奶仔猪随机分为叁组,每组6个重复:(1)对照组:基础日粮+生理盐水(2)LPS组:基础日粮+LPS(3)LPS+TGF-β1组:TGF-β1+LPS。于试验第19天,试验组猪注射1000μg/kgBWLPS,对照组注射等量的无菌生理盐水,4h后屠宰,取样后检测。结果表明:1)与对照组相比,LPS显着降低了空肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度比值和空肠上皮细胞跨膜电阻(P<0.05),提高了 FD4通透性(P<0.05),饲粮中添加TGF-β1缓解了 LPS导致的空肠绒毛和绒毛高度/隐窝深度比值的降低,提高了空肠上皮细胞跨膜电阻(P<0.05),降低了 FD4通透性(P<0.05)。2)LPS刺激降低了肠黏膜紧密连接蛋白Occludin,Claudin-1和ZO-1的表达(P<0.05),而添加TGF-β1能显着提高紧密连接蛋白Occludin,Claudin-1和ZO-1的表达(P<0.05)。3)与LPS组相比,添加TGF-β1有效抑制LPS刺激导致的肠黏膜炎症因子 TNF-α,IL-1β,IL-6 和 IL-8mRNA 的升高(P<0.05)。4)与对照组和 LPS组相比,饲粮中添加TGF-β1提高了肠道TGF-β1蛋白和磷酸化smad2/3蛋白的表达以及smad4和smad7mRNA的水平(P<0.05)。5)与对照组相比,LPS刺激提高了磷酸化p38、JNK的表达,饲粮中添加TGF-β1显着降低了 LPS刺激导致的磷酸化p38、JNK的升高,提高了磷酸化ERK1/2的表达(P<0.05)。结果提示:饲粮中添加TGF-β1能有效缓解LPS导致的肠道形态与屏障功能的损伤,提高紧密连接蛋白的表达,降低炎症因子的表达,激活经典的smads和MAPKs信号通路。因此TGF-β1通过影响了 smads和MAPKs信号通路对损伤的断奶仔猪的肠道完整性发挥保护作用。3.TGF-β1对TNF-α诱导的IPEC-J2细胞肠上皮屏障损伤模型的修复作用本实验旨在研究TGF-β1对TNF-α诱导的肠上皮屏障损伤模型的作用及其可能的作用机制,探索smads和MAPK信号通路是否参与TGF-β1保护肠上皮屏障过程。本实验采用transwell细胞培养体系,利用TNF-α构建体外猪的肠上皮细胞IPEC-J2的损伤模型,研究TGF-β1对肠上皮屏障功能、紧密连接蛋白和smads以及MAPK信号通路的影响。结果表明:1)与对照组相比,TNF-α处理细胞48小时后显着降低了肠上皮细胞跨膜电阻(TER)(P<0.05),显着提高了细胞间FD4通透性(P<0.05),而TGF-β1预处理显着缓解了 TNF-α诱导的肠上皮细胞跨上皮电阻的降低和FD4通透性的增加(P<0.05)。2)与对照组相比,TNF-α处理细胞48小时显着降低了紧密连接蛋白ZO-1和Occludin蛋白的表达(P<0.05),提高了 Occludin、ZO-1 和 Claudin-2 在细胞质中的分布(P<0.05),降低了 Occludin和ZO-1蛋白在细胞骨架相关蛋白中的分布,提高了 Claudin-2在细胞骨架相关蛋白中的分布(P<0.05);TGF-β1预处理显着降低了 Occludin、ZO-1和Claudin-2在细胞质中的分布(P<0.05),提高了 Occludin和ZO-1在细胞骨架相关蛋白中的分布(P<0.05),降低了 Claudin-2在细胞骨架相关蛋白中的分布(P<0.05);TGF-β1预处理显着缓解了 TNF-α诱导ZO-1和Occludin蛋白表达的降低(P<0.05)。3)与对照组相比,TNF-α单独处理或TGF-β1单独处理对TβR1,TβR2,smad2,smad3,smad4 和 smad7 的 mRNA 表达无显着作用(P>0.05),TGF-β1 预处理显着增加了 smad4 和 smad7 的 mRNA(P<0.05);TNF-α 单独处理或TGF-β1单独处理对TβR1,TβR2蛋白以及磷酸化smad2、3的表达无显着影响(P>0.05),而TGF-β1预处理显着增加了 TβR2蛋白和磷酸化smad2/3蛋白的表达(P<0.05),并且显着增加了磷酸化smad2/3的核移位(P<0.05)4)与对照组相比,TNF-α处理48小时显着增加了 p-JNK/JNK,p-p38/p38和p-ERK/ERK比值(P<0.05),而TGF-β1预处理显着降低了 TNF-α导致的p-JNK/JNK和p-p38/p38的增加(P<0.05),显着提高了 p-ERK/ERK的表达(P<0.05)。本章实验结果表明,TGF-β1缓解了 TNF-α诱导的肠上皮屏障损伤,保护了肠上皮屏障,抑制了 TNF-α对紧密连接蛋白的破坏,激活了 smads和MAPK信号通路。结果提示:TGF-β1对TNF-α诱导的IPEC-J2细胞肠上皮屏障损伤模型有保护作用,smads和MAPK信号通路可能参与了其保护过程。4.MAPKs与Smads信号通路介导了 TGF-β1对TNF-α诱导IPEC-J2细胞肠上皮屏障损伤模型的保护作用本实验旨在研究MAPKs与Smads信号通路在TGF-β1保护肠上皮屏障过程中的作用,探索smads和MAPK信号通路参与TGF-β1保护肠上皮屏障的分子机制。本实验采用transwell细胞培养体系,在TNF-α构建的肠上皮细胞IPEC-J2的损伤模型基础上,利用MAPK抑制剂(SB203580,SP60025,PD98059)和smad2/3通路抑制剂(SB431542)建立阻断模型,研究抑制MAPK和smads通路后TGF-β1对肠上皮屏障功能、紧密连接蛋白和smads以及MAPK信号通路的影响。结果表明:1)与TNF-α组相比,预处理P38信号通路抑制剂SB203580和JNK信号通路抑制剂SP60025对TGF-β1介导的对肠上皮跨膜电阻(TER)和FD4通透性没有显着影响(P>0.05),但ERK通路抑制剂PD98059处理细胞后显着抑制了TGF-β1诱导的肠上皮细胞跨膜电阻的增加(P<0.05)和FD4通透性的降低(P<0.05),SB4β1542预处理后显着抑制了 TGF-β1对肠上皮细胞跨膜电阻TER的增加和FD4通透性的降低(P<0.05)。2)与TNF-α组相比,P38信号通路抑制剂SB203580和JNK信号通路抑制剂SP60025处理后,TGF-β1预处理对肠上皮紧密连接蛋白的表达无显着影响(P>0.05),而ERK通路抑制剂PD98059处理细胞后显着降低了 TGF-β1预处理对紧密连接蛋白Occludin和ZO-1的保护作用,降低了 Occludin和ZO-1蛋白的表达(P<0.05),SB431542预处理后显着抑制了TGF-β1介导的紧密连接蛋白Occludin和ZO-1的增加(P<0.05)。3)与TGF-β1+TNF-α相比,添加p38抑制剂SB203580和JNK抑制剂SP60025处理后TGF-β1对TNF-α损伤后48小时后紧密连接蛋白Occludin、ZO-1和Claudin-2在细胞质和细胞骨架蛋白中的分布无显着影响(P>0.05),添加ERK1/2抑制剂PD98059和smads信号通路抑制剂SB431542后显着减弱了 TGF-β1对TNF-α损伤后的紧密连接蛋Occludin、ZO-1和Claudin-2分布的影响,降低了 Occludin和ZO-1在细胞骨架相关蛋白中的分布(P<0.05),增加了 Occludin和ZO-1在细胞质中的表达(P<0.05),增加了Claudin-2在细胞骨架相关蛋白的表达(P<0.05);抑制剂预处理对Claudin-1的分布均无显着影响(P>0.05)。4)对smads信号通路的检测发现,ERK通路抑制剂PD98059处理后显着抑制了TGF-β 1预处理对smad2和smad3磷酸化的表达的增加和smad4和smad7mRNA的增加(P<0.05),显着降低了 TGF-β1诱导的smad2/3核移位(P<0.05),对TβR1,TβR2蛋白的表达无显着影响(P>0.05);SB431542预处理后显着降低了磷酸化smad2/3的表达和核移位,且抑制了 TGF-β1介导的TβR2蛋白和smad4和smad7 mRNA的增加(P<0.05),P38信号通路抑制剂SB203580和JNK信号通路抑制剂SP60025预处理对smads信号通路无显着影响(P>0.05)。5)与TNF-α组相比,TGF-β1预处理显着增加了聚合体smad2/3/4的形成(P<0.05);与TNF-α+TGF-β1组相比,p38抑制剂SB203580和JNK抑制剂SP60025预处理对聚合体smad2/3/4的形成无显着区别,而ERK1/2抑制剂PD98059和smads信号通路抑制剂SB431542预处理后显着降低了聚合体smad2/3/4的形成(P<0.05)。6)对MAPK信号通路的检测发现,SB203580、SP60025和PD98059抑制剂处理后显着降低了相应的磷酸化通路的表达(P<0.05),但是经典smads信号通路抑制剂(SB431542)处理后显着降低了p-ERK/ERK的比值(P<0.05)。结果表明·.抑制P38和JNK信号通路对TGF-β1介导的肠上皮保护作用没有影响,抑制ERK信号通路能部分抵消TGF-β1对肠屏障的保护作用,经典smads信号通路在TGF-β1保护肠屏障过程中起重要作用,并且ERK信号通路可能通过与smad2和smad3的交叉对话来介导对肠上皮屏障的修复作用。结果提示:smads和MAPK信号通路在TGF-β1介导的肠上皮损伤修复过程中发挥重要作用,并且这种作用可能是通过smad2/3和ERK信号通路的协同作用来实现。5.SiRNA沉默ERK与Smads关键基因研究TGF-β1对IPEC-J2细胞肠上皮屏障的影响本实验旨在研究ERK与Srmads信号通路在TGF-β1介导的肠上皮屏障保护作用过程中的相互作用的分子机制。在前期工作建立的TNF-α损伤肠上皮屏障模型的基础上,采用siRNA干扰的方法沉默smad2、smad3和ERK基因建立沉默模型,研究沉默ERK和smad2、smad3基因表达后TGF-β1对肠上皮屏障功能、紧密连接蛋白和smads以及ERK信号通路的影响。结果表明:1)与TNF-α组比,沉默ERK信号通路后,TGF-β1对肠上皮细胞IPEC-J2肠上皮跨膜电阻(TEER)和FD4通透性的保护作用部分消失(P<0.05);沉默smad2和smad3后,TGF-β1对肠上皮细胞IPEC-J2肠上皮跨膜电阻(TEER)和FD4通透性的保护作用亦显着降低(P<0.05)。2)与 TNF-α+TGF-β1 组相比,沉默 smad2 和 smad3 后,TGF-β1对紧密连接连接蛋白occludin、ZO-1的作用显着降低(P<0.05);敲除ERK后,TGF-β1对紧密连接连接蛋白Occludin、ZO-1的保护作用显着减小(P<0.05)。3)沉默ERK、smad2、smad3基因后,TGF-β1预处理对TβR1和TβR2蛋白的表达无显着影响(P>0.05);与TNF-α+TGF-β1相比,沉默smad2、smad3后显着降低了 TGF-β1预处理对磷酸化smad2/3的表达(P<0.05);敲除ERK亦显着降低了磷酸化smad2/3的表达且抑制了 smad2/3的核移位(P<0.05)。4)沉默smad2、smad3和ERK后均显着降低了 smad2/3/4聚合体的形成(P<0.05)。结果表明,smads与ERK/MAPK信号通路在TGF-β1对肠上皮屏障的保护作用过程中协同作用,两条信号通路之间存在交叉对话,并且对话位点是通过smad2/3磷酸化连接相互作用。结果提示:smads与ERK/MAPK信号通路共同介导了TGF-β1对肠上皮屏障的保护作用。综上所述,TGF-β1在断奶仔猪肠上皮屏障损伤修复中发挥重要作用,smads和MAPKs信号通路协同调控肠上皮屏障从而缓解了肠道损伤。体内外肠上皮损伤模型中添加TGF-β1能缓解肠上皮屏障的损伤,保护了肠上皮屏障的完整性。TGF-β1能通过促进肠上皮紧密连接蛋白的表达与分布来保护细胞肠上皮屏障,ERK/MAPK与Smads信号通路在此过程中产生了串话。因此,本实验明确了TGF-β1在断奶仔猪肠上皮屏障损伤修复中的作用,并且smad2/3与ERK/MAPK之间存在协同作用。(本文来源于《浙江大学》期刊2017-10-20）
肖露,崔婷,李莹莹,高媛,李廷玉[9]（2017）在《孕期开始的持续维生素A缺乏加重LPS诱导的仔鼠肠上皮屏障功能障碍》一文中研究指出目的探讨孕期维生素A(VA)缺乏对LPS诱导的仔鼠肠上皮屏障功能障碍的影响。方法构建孕期开始的VA正常(VAN)和VA缺乏(VAD)母鼠模型,其子代(仔鼠)于6周龄时给予脂多糖(LPS)灌胃诱导肠道感染。高效液相色谱法(HPLC)检测血清视黄醇水平;ELISA试剂盒检测仔鼠血清二胺氧化酶(DAO)浓度;采用RT-PCR和Western blot技术测定RA受体(RARβ)、Toll样受体4和紧密连接蛋白ZO-2的变化。结果 VA营养水平与LPS处理均是血清视黄醇的影响因素(P<0.000 1和P=0.035 9),但影响血清视黄醇水平的主要因素是VA营养水平(P<0.000 1)。同时,VA水平与LPS处理也均是血清DAO水平的影响因素(P=0.048 1和P<0.000 1),但LPS是引起DAO水平升高的主要因素(P<0.000 1)。此外,VAD仔鼠结肠黏膜组织中的RARβ、TLR4和ZO-2的mRNA和蛋白表达水平均较VAN组显着降低。LPS处理后,RARβ的表达水平在VAN组进一步降低,VAD仔鼠结肠黏膜组织中TLR4和ZO-2的表达水平始终低于VAN组。结论孕期开始的持续的VA缺乏主要降低血清视黄酸水平及ZO-2的表达,LPS处理上调血清DAO水平及肠上皮细胞TLR4的表达,而RARβ的表达水平受到VAD及LPS的交互作用,提示VA缺乏可能会降低仔鼠肠道的天然免疫调节能力,降低肠道屏障功能,从而影响肠道的抗感染能力。(本文来源于《免疫学杂志》期刊2017年10期）
蔡丽婷,何琼,艾修云,陈振峰,智发朝[10]（2017）在《β-arrestin2通过破坏肠上皮屏障功能而促进小鼠肠炎》一文中研究指出目的观察β-arrestin2对小鼠肠炎进展的影响,并从肠上皮屏障功能方面探讨β-arrestin2作用机制。方法用葡聚糖硫酸钠(DSS)制备小鼠急性肠炎模型,将实验对象分为3组:野生型对照(WT)组、野生型肠炎(WT+DSS)组和β-arrestin2~(-/-)肠炎(KO+DSS)组。比较β-arrestin2在WT组和WT+DSS组结肠中m RNA和蛋白表达水平;比较WT+DSS组和KO+DSS组的体重下降程度、疾病活动指数、脾脏重量、结肠长度及病理学表现、肠上皮FITC-D渗透率及紧密连接蛋白(occludin,claudin1,ZO-1)表达水平。结果β-arrestin2在WT+DSS组小鼠结肠中的m RNA和蛋白水平高于WT组;相比于WT+DSS组,KO+DSS组体重下降程度小(P<0.05),疾病活动度轻(P<0.05),脾脏肿大和结肠缩短程度小,病理学评分更低(P=0.002),肠上皮渗透率更低(P=0.009),occludin和claudin1蛋白表达水平更高,ZO-1在两组间无明显差异。结论β-arrestin2可能通过破坏肠上皮屏障而促进小鼠肠炎。(本文来源于《实用医学杂志》期刊2017年14期）
肠上皮屏障论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
肠神经胶质是肠神经系统的重要组成部分,其在胃肠道的黏膜中共同组成完整的神经调节体系.肠神经胶质细胞(enteric glial cells, EGCs)分布于肠壁的全层,并通过多条信号转导途径参与到了神经递质和神经调质对肠道功能的调节中.肠神经系统与肠道中的固有神经胶质细胞相互作用,参与上皮功能的调节.上皮细胞具有吸收和分泌的重要功能,同时参与到了肠道的屏障中.研究表明肠神经胶质不仅参与调控胃肠道的运动和上皮屏障功能,还参与形成肠神经元、肠内分泌细胞、免疫细胞和上皮细胞之间的细胞分子桥.本文主要对EGCs在肠道屏障和防御功能中的作用进展加以综述.
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
肠上皮屏障论文参考文献
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