何玉林韦含宁乔永超（桂林医学院微生物学教研室广西桂林541004）
【摘要】目的研究艾滋病患者经有效抗病毒治疗后B细胞、NK细胞及T细胞变化特征。方法采用流式细胞术技术检测外周血B细胞、NK细胞及T淋巴细胞计数，评价不同组艾滋病患者免疫学应答特征的差异，进而分析免疫学无应答的发生机制。结果两组患者经抗病毒治疗后NK细胞、B细胞计数都有逐步增高，在抗病毒治疗初期增高更显著。B细胞增长在两组中存在差异，免疫学无应答组患者增长快于免疫学应答组。结论经抗病毒治疗后，CD4+T淋巴细胞计数的增长可分为两期，早期快速增长以记忆表型CD4+T淋巴细胞为主;后期主要为纯真细胞的持久增长。
【关键词】艾滋病抗病毒免疫细胞
【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2013）01-0152-01
1资料与方法
1.1一般资料
研究对象为2003年以来就诊的55例经ELISA方法HIV抗体初筛阳性并经过WesternBlot方法确证的HIV/AIDS患者。入选患者经规律抗逆转录病毒治疗2年以上，规律随诊，随诊期间留取完整的病历资料及血液标本[1]。
1.2使用的材料与设备
胎牛血清(40nmfiltered，美国HyClone公司)，二甲基亚矾(DMSO)(美国Sigma公司)，聚蔗糖一泛影葡胺分层液(淋巴细胞分离液，Ficoll)(TBD生物技术开发中心)，配制PBS的生化试剂为国产分析纯试剂，均购自北京北化精细化学品有限公司[2]。
BDFACSCanto流式细胞仪(美国BD公司)，LXJ-IIB型低速大容量离心机(上海安亭科学仪器厂)，37℃～100℃温度可调孵育箱(NAPCO公司)，纯水仪(Millipore公司)，85-2型恒温磁力搅拌器(上海司乐仪器厂)，MS-1型微型涡旋混合器(广州仪科实验室技术有限公司)，一次胜细胞培养瓶(美国Corning公司)。
2治疗的结果
2.1受试者治疗的基本情况（见以下表）
表1受试者基本情况
组别INR组（n=11）IR组（n=15）P值
年龄41.9±10.836.1±8.40.153
性别（男：女）8:37:80.246
基线血浆病毒载量（pVL）4.850±0.4814.556±0.80.355
基线CD4+T淋巴细胞计数37±36172±870.001
*与本组患者基线时均值相比有显著差异
2.2CD4+淋巴细胞计数
在基线及经抗病毒治疗后各随访点两组患者CD4+T淋巴细胞计数如表3。比较两组患者CD4+T淋巴细胞计数有统计学差异(p<0.05)。
表2两组艾滋病患者各随访点CD4+淋巴细胞计数
GroupCD4+T淋巴细胞计数CD8+T淋巴细胞计数
INR组IR组INR组IR组
Baseline37±36172±87511±293707±328
1月58±56*219±57*438±297647±372
3月80±45*289±99*593±205788±318
6月115±63*295±94*586±236719±255
9月109±47*304±72*607±226707±245
12月134±93*352±99*674±230*745±287
18月161±68*369±77*754±319*716±271
24月188±110*400±86*700±295*707±259
30月195±47*426±93*771±272*714±302
36月191±55*409±97*621±271*682±282
*与基线水平比较出现显著差异的随访点，p<0.05。
3讨论
本研究通过对经有效抗逆转录病毒治疗后免疫学应答艾滋病患者及免疫学无应答患者长达3年的纵向研究，比较了淋巴细胞各亚群比例、数量的差异，探讨免疫学无应答发生机制及预警因素[3]。通过对这两群患者的对照研究，也可以在平衡病毒学因素的前提下，即血浆病毒载量均经有效控制时，比较免疫学应答的差异，进而阐述艾滋病免疫学发病机制。
基于艾滋病免疫重建理论，本研究同样发现经抗病毒治疗后CD4+T淋巴细胞出现了早期的快速增长期及后期的缓慢增长期。早期快速增长得益于记忆CD4+T淋巴细胞的重分布，而后期的缓慢增长则主要来自于纯真表型CD4+T淋巴细胞的增长。两组患者NK细胞增长速度相似，而B细胞在两组中都有增高，与以往文献中报道相似[4]。本研究发现在免疫学无应答组好于免疫学应答组，这可能是机体代偿作用的结果。
参考文献
[1]Barre-SinoussiF,ChermannJ-C,ReyF,NugeyreMT,ChamaretS,GruestJ,etal.IsolationofaT-lymphotropicretrovirusfromapatientatriskforacquiredimmunedeficiencysyndrome(AIDS).Science1983;220:868-871.
[2]DanielC.DisruptingT-cellHomeostasis:howHIV-1infectionCausesDisease.AIDSRev2003;5:172-177.
[3]DouekD,BrenchleyJ,BettM,etal.HIVpreferentiallyinfectsHIV-specificCD4+T-cellss.Nature2002;417:95-8.
[4]ChunandT,CarrthL,FinziD,etal.QuantificationoflatenttissuereservoirstotalbodayviralloadinHIV-1infection.Nature1997;387:183-8.