导读:本文包含了记忆性淋巴细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:农药,记忆性免疫反应,共刺激分子,凋亡
记忆性淋巴细胞论文文献综述
邵一鸣,杨正丽,赵一帆,李倩,常秀丽[1]（2019）在《百草枯诱导淋巴细胞凋亡导致记忆性免疫损伤》一文中研究指出目的研究百草枯(ParaquatPQ)对记忆性免疫反应的损伤作用。方法将6-8周雌性C57BL/6小鼠随机分成PBS组、2 mg·kg~(-1)PQ组、20 mg·kg~(-1)PQ组,每叁天一次腹腔注射(200μL/只),连续染毒五次,并在首次染毒后的第4天,给予各组部分小鼠皮下注射匙空血蓝蛋白(抗原KLH,Keyhole Limpet Hemocyanin,100μg/只)或溶剂对照(抗原佐剂CFA,Complete Freund adjuvant)以激活初始免疫反应;于90天后再次给予100μg/只KLH/CFA,以诱导记忆性免疫反应。小鼠淋巴结、脾脏和血清取材分别设在五次百草枯染毒后未接受KLH/CFA以及首次注射KLH/CFA后的第4、7、9天和第二次注射KLH/CFA后的第3天。采用流式细胞术检测脾脏、淋巴结中记忆性免疫细胞的数量和淋巴细胞的活化能力;应用ELISA检测血清中IgG、IgM的总水平或抗原特异性抗体anti-KLH IgG的水平。并在第二次注射KLH/CFA的前1天,取各组小鼠的脾脏在体外用KLH/CFA刺激48小时后,采用流式细胞术检测抗原特异性的记忆性免疫细胞的应激能力。结果在静息状态下(未注射KLH/CFA),20 mg·kg~(-1)PQ可以直接降低记忆性免疫细胞的数量(P<0.05)和IgG的总量(P<0.05),而2 mg·kg~(-1)PQ则无明显影响。在初次免疫激活过程中(首次注射KLH后第4、7、9天),2 mg·kg~(-1)PQ和20 mg·kg~(-1)PQ均不影响CD4 T细胞的活化共刺激分子(CD40L,ICOS,OX40)、B细胞的活化共刺激分子(CD40,I-A)以及抗原提成细胞(APC)的活化共刺激分子(CD80,I-A,CD40)的表达(P>0.05);也不影响CD4 T细胞及B细胞表达Ki67的能力(P>0.05)。而在免疫反应的中后期(第7、9天),20 mg·kg~(-1)PQ可使CD4 T细胞及B细胞的凋亡分子caspase-3、AnnexinV表达量增加(P<0.05)。此外,当记忆性免疫反应被激活后(再次注射KLH后的第3天),20 mg·kg~(-1)PQ组所产生的特异性抗体anti-KLHIgG明显减少(P<0.05)。体外实验结果显示,在相同浓度的KLH刺激下,20 mg·kg~(-1)PQ组所产生的抗原特异性的记忆性淋巴细胞表达Ki67的能力明显下降(P<0.05)。结论高剂量(≥20 mg·kg~(-1))PQ暴露,可促进淋巴细胞的凋亡,减少记忆性免疫细胞的生成,进而减弱记忆性免疫反应的应激能力。(本文来源于《中国毒理学会第九次全国毒理学大会论文集》期刊2019-09-17）
陈颖诗,张旭,彭治林,罗海华,张辉[2]（2018）在《糖皮质激素对体外中央记忆性CD8~+ T淋巴细胞的诱导分化作用》一文中研究指出目的:以糖皮质激素对人CD8~+ T淋巴细胞的诱导作用为线索,探究其对体外CD8~+ 中央记忆性T淋巴细胞(central memory T cells,T_(CM))的诱导分化作用,以期为CD8~+ T_(CM)过继性免疫疗法提供新的扩增方案。方法:通过密度梯度离心法分离健康人外周血单个核细胞,经磁珠和流式细胞术分选出初始CD8~+ T细胞,将细胞使用细胞因子激活之后分为对照组和实验组,在实验组中加入不同浓度的2种糖皮质激素(醋酸可的松和氢化可的松),进行体外培养,最后通过流式细胞术检测2组细胞中CD8~+ T_(CM)的诱导分化情况,并通过CFSE染色判断细胞增殖情况,通过早期凋亡试剂Annexin V染色判断药物本身对CD8~+ T细胞的毒性作用。结果:浓度梯度实验发现,1μmol/L醋酸可的松对CD8~+ T_(CM)表现出良好的诱导效果,氢化可的松在0.5μmol/L的诱导效果较好。分别在体外培养的第3天和第6天,CFSE染色法检测细胞的增殖情况,经统计学分析发现实验组和对照组之间的差异无统计学显着性,表明糖皮质激素不影响细胞的自然增殖。Annexin V染色法表明,这2种药物无显着的促进凋亡作用,对淋巴细胞毒性小。结论:糖皮质激素在体外对人CD8~+ T_(CM)具有良好的诱导作用。这为改善过继免疫治疗中T_(CM)的体外扩增提供新的参考方法,并且在理论上加深对糖皮质激素生物学功能的理解。(本文来源于《中国病理生理杂志》期刊2018年09期）
喻勇[3]（2018）在《卡介苗免疫小鼠抗体及CD4~+记忆T淋巴细胞的检测分析》一文中研究指出目的在先后两次卡介苗(BCG)免疫Balb/c小鼠后,检测抗PPD抗体IgG、抗PPD抗体IgM以及CD4+记忆T细胞,以探索其变化发展趋势,为临床诊断结核病以及研究BCG相关的免疫记忆提供实验数据。方法1、将35只雌性Balb/c小鼠,随机分为对照组(注射生理盐水)5只,处理组(皮下注射BCG)30只,其中处理组分为初次免疫组(15只)和再次免疫组(15只)。2、通过间接ELISA法,检测血清中抗PPD抗体IgG、IgM。3、通过免疫组化方法,检测肺和脾脏组织中CD4+记忆T细胞CD3、CD4、CD44、CD62L 的表达。结果1、在初次免疫后第50天,BCG免疫组与对照组抗PPD抗体IgG的OD值均数,其差异具有统计学意义。第60天进行再次免疫,在第65天,BCG免疫组与对照组抗PPD抗体IgG的OD值均数,其差异具有统计学意义。而在整个免疫过程中,初次免疫和再次免疫,BCG免疫组与对照组抗PPD抗体IgM的OD值均数,其差异均无统计学意义。2、肺部切片经免疫组化染色后,可见CD3、CD4、CD44、CD62L阳性细胞主要集中分布于细支气管附近。2.1、各组肺中CD3的免疫组化累积光密度值(IOD)无显着变化(P>0.05)。2.2、各组肺中CD4的IOD值:初次免疫组、再次免疫组均显着高于对照组(P<0.05)。2.3、各组肺中CD44的IOD值:初次免疫组、再次免疫组显着高于对照组(P<0.05),再次免疫组显着高于初次免疫组(P<0.05)。2.4、各组肺中CD62L的IOD值:初次免疫组、再次免疫组均显着高于对照组(P<0.05),再次免疫组显着高于初次免疫组(P<0.05)。3、脾脏切片经免疫组化染色后,可见CD3、CD4、CD44、CD62L阳性细胞主要集中分布于白髓。3.1、各组脾脏中CD3的IOD值:再次免疫组显着高于对照组、初次免疫组(P<0.05)。3.2、各组脾脏中CD4的IOD值无显着变化(P>0.05)。3.3、各组脾脏中CD44的IOD值:初次免疫组、再次免疫组显着高于对照组(P<0.05),再次免疫组显着高于初次免疫组(P<0.05)。3.4、各组脾脏中CD62L的IOD值:再次免疫组均显着高于对照组、初次免疫组(P<0.05)。4、在初次免疫组中,脾脏中CD3、CD4、CD62L的IOD值显着高于肺部(P<0.05)。5、在再次免疫组中,脾脏中CD3、CD4、CD44、CD62L的IOD值显着高于肺部(P<0.05)。结论1、BCG初次免疫Balb/c小鼠后,抗PPD抗体IgG整体呈上升趋势,再次免疫后,可在短期内迅速增多,并在很长一段时间内都维持在一个较高水平。抗PPD抗体IgM无显着变化。2、通过BCG的初次免疫和再次免疫后,小鼠肺部和脾脏中总的CD4+记忆T细胞以及CD4+TCM均有增多,并且脾脏中总的CD4+记忆T细胞以及CD4+TCM均要多于肺部。(本文来源于《湖南师范大学》期刊2018-05-01）
施玲玲[4]（2018）在《记忆性T淋巴细胞亚群和调节性T细胞在MM患者疗效和预后评估中的作用》一文中研究指出目的:1、明确初诊MM患者外周血记忆性T淋巴细胞(memory T lymphocytes,T_m)亚群和调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)的状态;2、分析不同疗效患者外周血中T_m和Tregs的差异;3、分析硼替佐米(Bortezomib,BTZ)和沙利度胺(Thalidomide,TM)两种不同化疗方案对T_m亚群和Tregs的影响;4、进一步探讨T_m亚群和Tregs在疗效和预后评估中的意义。方法:1、本研究共纳入89例MM患者,其中8例未治疗。根据治疗效果,分为治疗有效组(疗效至少达到部分缓解,≥PR)(63例)和无效组(<PR)(18例);根据治疗方案分为BTZ组(38例)和TM组(43例),BTZ组和TM组再各分为治疗有效组无效组。24例初诊患者作为基线组(baseline group),30例健康志愿者作为健康对照组(healthy control group)。2、所有研究对象均于清晨空腹(禁食禁水至少8小时)抽取外周静脉血2mL,流式细胞仪检测T_m亚群和Tregs细胞数,全自动生化分析仪检测外周血Alb、β2-MG、LDH水平。结果:1、初诊MM患者的中央记忆性T细胞(T_(CM))百分比明显降低,而效应记忆性T细胞(T_(EM))百分比明显升高,表现为CD4~+T_(CM)、CD8~+T_(CM)百分比以及CD8~+T_(CM)与CD8~+T_(EM)比值明显低于健康对照组(P<0.05),CD8~+T_(EM)细胞百分比显着高于健康对照组(P<0.05)。2、治疗有效组CD4~+T_(CM)细胞百分比、CD8~+T_(CM)百分比以及CD8~+T_(CM)/T_(EM)比值均较基线组显着升高(P<0.05),而无效组较基线组无显着差异(P>0.05)。有效组的Treg/CD4~+T与基线组相比显着升高(P<0.05)。3、BTZ治疗有效组的CD8~+T_(CM)细胞和Treg/CD4~+T百分比显着升高(P<0.05),而无效组与基线组相比无显着性差异(P>0.05)。TM治疗后有效组的CD8~+T_(CM)细胞百分比和Treg/CD4~+T明显升高(P<0.05),且有效组和健康对照组的CD8~+T_(CM)/T_(EM)比值均显着高于基线组(P<0.05)。4、根据受试者工作特征曲线(ROC曲线),最靠近左上角的一点取为临界值,CD8~+T_(CM)/T_(EM)比值的临界值为0.27,此时判断治疗效果的敏感性为57.1%,特异性为94.1%。提示CD8~+T_(CM)/T_(EM)比值有可能作为患者疗效评价的指标之一。5、MM患者外周血中的CD4~+T_(CM)与血清Alb水平呈显着正相关(P<0.05),与血清β2-MG、LDH水平呈显着负相关(P值均<0.05)。说明CD4~+T_(CM)在预后评价中有一定价值。6、Treg细胞绝对数在治疗前后无显着改变,而Treg/CD4~+在有效组中明显升高,说明Treg/CD4~+可作为判断疗效的指标之一。结论:1、MM患者T_(CM)明显降低,T_(EM)明显升高,这种现象称为免疫耗竭。证实了MM患者处于免疫耗竭状态。2、BTZ和TM治疗有效组的CD4~+T_(CM)、CD8~+T_(CM)百分比以及CD8~+T_(CM)/T_(EM)比值上升,说明两种药物均能使MM患者免疫耗竭得到逆转。3、CD8~+T_(CM)/T_(EM)比值小于0.27时,判断治疗无效的特异性为94.1%。4、CD4~+T_(CM)可考虑作为评价预后的一个指标。5、有效组的Tregs细胞百分比明显升高。可考虑作为评价预后的指标。(本文来源于《蚌埠医学院》期刊2018-05-01）
张乐乐[5]（2018）在《CD4~+CD38~+中心记忆T淋巴细胞对HIV感染长期治疗者病毒储存库的贡献研究》一文中研究指出目的:人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染人体后会导致CD4~+T淋巴细胞数目显着下降,最终引发获得性免疫缺陷综合征(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)。抗逆转录病毒治疗(anti-retroviral therapy,ART)虽然可以快速降低患者体内的病毒载量(Viral load,VL),但是一旦停止ART,患者体内的VL会快速反弹,功能性治愈HIV的目标始终无法实现。众多文献表明HIV不能被彻底根除的原因主要是病毒储存库的存在。人体中的多种组织和细胞都参与储存库的建立和维持,包括外周血、淋巴结、中枢神经系统和肠粘膜相关组织中的初始T细胞(na?ve T cell,TNA)、中心记忆T细胞(central memory T cell,TCM)、效应记忆T细胞(effector memory T cell,TEM)、干细胞样记忆T细胞(T stem cell memory,TSCM)、移行记忆T细胞(transitional memory T cell,TTM)等。静息记忆CD4~+T细胞具有长期存活并能使HIV在体内转录沉默的特征,所以使其成为最重要的HIV储存库。CD38和HLA-DR一直被视为HIV的活化标志。目前HIV感染者的静息记忆T细胞主要是用CD45RA~-/RO~+及HLA-DR~-来定义。我们前期分析活化亚群功能时发现HIV感染者的CD4~+TCM上CD38表达显着高于HLA-DR。进一步研究发现,NA?VE、TCM、TEM细胞CD38和HLA-DR亚群的表达有很大差异,未活化的NA?VE细胞表面HLA-DR不表达,但CD38却高表达,储存库重要细胞CD4~+TCM上CD38~+HLA-DR~-表达的比例较高。以往研究也显示,TCM上CD38表达较高。CD38被称作环状ADP核糖水解酶或T10,是一种单链跨膜糖蛋白。在HIV中CD8CD38~+的表达被作为细胞活化的标志。但后续研究发现CD38在CD4~+T细胞和CD8~+T细胞表达的意义是不同的,CD8~+CD38~+亚群是活化细胞,而CD4~+CD38~+亚群代表未成熟细胞。研究显示CD38~+细胞表达病毒储存库标志并且CD38~+还可以促进肿瘤细胞的增殖并抑制其凋亡。而长期存活和稳态增殖正是储存库细胞的重要特点。2014年有学者报道HIV感染者在接受ART治疗1年后,储存库的含量HIV total DNA、2-LTR和HIV integrate DNA在CD38~+与CD38~-上的表达无差异,而且发现在治疗12周后,CD38~+细胞相对于HLA-DR~-CD38~-的病毒半衰期更长。TCM细胞CD38表达的特征如何,是否可作为长期治疗的病毒储存库尚无报道。抗病毒治疗1-2年主要清除活化CD4~+T细胞中的病毒,对于储存库细胞的抑制作用较弱。研究显示随访治疗7年,潜伏感染细胞的储存库含量有一定程度的动态变化,并且发现治疗大于3年的患者其病毒半衰期更短,长期治疗对于清除储存库十分关键。但CD38对HIV感染长期治疗者储存库的贡献尚无研究。本课题拟深入研究CD4~+CD38~+TCM细胞的具体特征及其对病毒储存库的作用,为病毒储存库形成机制及治愈HIV提供新思路。研究方法:研究对象。30例接受ART的HIV感染者:ART>5年,CD4~+T cells>350,VL<50copies/ml。实验方法包括:1、T淋巴细胞绝对值计数。将20μL CD4/CD8/CD3 TriTEST试剂分别加入绝对计数管中,用逆向加样法加入50μL抗凝血,室温避光15分钟,加入免洗溶血素450μL,室温,避光15分钟。用FACSCalibur流式细胞仪上样并用MultiSET软件检测进行自动分析,计算CD4~+、CD8~+T、CD3~+T细胞绝对值及相应比值。2、HIV病毒载量测定。采用Roche公司The COBAS?Ampli Prep?/COBAS?TaqMan?HIV-1 Test,v2.0试剂盒在COBAS?TaqMan?系统进行全自动PCR反应体系制备及病毒载量检测。检测下限为1copy/mL。3、密度梯度离心提取外周血单个核细胞。抽取HIV-1感染者的外周血,将新鲜外周血与磷酸盐缓冲液(Phosphate buffer saline,PBS)按照1:1的比例充分混匀,将混合液缓慢匀速地加入到与全血等量的淋巴细胞分离液液面上,并进行密度梯度离心。密度梯度离心后,小心吸取白膜层。用PBS洗两遍,弃去上清,即为PBMCs。4、CD4~+T细胞负选。细胞提取HIV感染者的新鲜外周血PBMCs,用Stem Cell公司的CD4~+T细胞富集试剂盒阴性选择所需的CD4~+T细胞5、细胞分选。使用流式分选仪FACS Aria进行CD4~+TCMCD38~+和CD4~+TCMCD38~-细胞分选。6、流式检测CD4~+CD38~+TCM的特征。将提取的外周血单个核细胞,进行表面染色:CD3-PE-CY7、CD4-APC-CY7、CD38-PE、HLA-DR-APC、CD45RA-FITC、CCR7-Percp–CY5、CD25-PE-CY7、CD69-APC、PD-1-FITC、CD127-APC、Ki-67-Violet,4℃避光30分钟,4度2%FBS洗液,300g,10min,升5降5,4度离心,弃上清,250ulPBS重悬细胞,BD LSRⅡ流式细胞仪及BD FACSDiva TM软件检测并分析CD4~+CD38~+TCM的活化水平等细胞特征。7、DNA提取。将分选的CD4~+T细胞和CD4~+TCM CD38~+和CD4~+TCM CD38~-,用QIAamp blood DNA mini kit按照操作说明提取DNA,溶于50μl无酶水中。8、数字液滴PCR检测HIV total DNA。将提取的DNA样本,采用数字液滴PCR的体系配置及具体反映程序进行检测。RPP30作为HIV total DNA定量的内参。9、敲除CD38的CD4~+T淋巴细胞功能的检测。96孔U底板分别标记好未处理组、对照组及实验组,每孔细胞分别用100ul无血清1640培养基重悬,SIRNA-CD38及SIRNA-NC分别以20nM为转染终浓度,具体转染过程:将100ul的无血清1640培养基溶解si-Control及si-CD38,轻轻震荡,然后加入1μl/0.2million细胞的转染试剂Lipofectamine?RNAiMAX,震荡室温后共孵育20分钟。然后将si-CD38及si-Control加入细胞孔中。放置于培养箱中48小时后检测敲除效率。在96小时检测si-CD38及阴性对照的凋亡(Annexin-V及7-AAD)。5天后检测si-CD38及阴性对照的增殖。增殖的具体过程;将过夜的si-Control及si-CD38两种不同处理的细胞标记Violet Cell Trace(5μM),并且在CD3/CD28beads(1μg/ml)刺激。共培养4天。然后用BD LSR II检测CD4~+T细胞的增殖情况。10、统计学分析。用SPSS17.0统计软件及Graphpad Prism5.0软件进行统计学分析,相关的两组之间的比较用两样本的配对T检验,P<0.05为有统计学意义。结果:1、HIV感染者长期治疗后CD4~+记忆T细胞CD38、HLA-DR表达不同。CD38在TCM和NAIVE细胞上均高表达,并且NA?VE、TCM和TEM上CD38的表达都高于HLA-DR(P<0.001、P<0.001、P=0.009)。NA?VE、TCM、TEM上CD38和HLA-DR亚群的表达有很大差异,CD4~+TCM上CD38~+DR~-表达的比例较高。CD4~+CD38~+与CD4~+HLA-DR~-有相似的TCM表达。2、CD4~+CD38~+TCM具有储存库细胞的特征。CD4~+CD38~+TCM低表达活化分子CD25、CD69,与经典储存库细胞CD4~+HLA-DR~-TCM非常相似,但与活化细胞CD4~+HLA-DR~+有差异(P=0.028、P=0.015)。CD4~+CD38~+TCM储存库标志分子PD-1、KI-67在CD4~+CD38~+TCM的表达高于经典储存库CD4~+HLA-DR~-TCM(P=0.009、P=0.040),但和CD4~+HLA-DR~+无显着差别。CD4~+CD38~+TCM的CD127的表达高于CD4~+HLA-DR~+(P=0.010),但比CD4~+HLA-DR~-TCM低(P=0.003)。3、CD4~+CD38~+TCM与CD4细胞的HIV total DNA具有相关性。CD4~+CD38~+TCM与CD4细胞的HIV total DNA具有正相关(r=0.505,P=0.033),CD4~+CD38~-TCM与CD4细胞的HIV total DNA无相关性。我们又采用负二项回归模型来评价HIV total DNA和CD4~+CD38~+TCM和CD4~+CD38~-TCM的关系,发现CD4~+CD38~+TCM能够预测CD4细胞的HIV total DNA的含量(P=0.018),在用当前CD4~+T细胞和基线CD4~+T细胞校正后依然能够预测(P=0.009,P=014)。4、CD38~+对于储存库TCM的贡献更大。我们用流式细胞仪检测TCM上CD38~+和CD38~-的表达,发现CD38~+的表达均高于CD38~-(P<0.001),然后用数字液滴PCR检测这两群细胞的HIV total DNA,发现CD4~+TCMCD38~+的HIV total DNA含量高于CD4~+TCMCD38~-(P=0.0358)。5、CD38能够促进HIV感染者CD4~+T细胞的增殖和存活并抑制其凋亡。我们首先将HIV感染者CD4~+T细胞的CD38敲除,发现si-CD38组的增殖要显着低于si-Control组(P=0.011)、si-CD38组的7-AAD显着高于si-Control组(P=0.003)、si-CD38组的Annexin-V显着高于si-Control组(P=0.004)。结论:1、CD4~+CD38~+TCM具有储存库特征,对HIV储存库有重要贡献。2、CD38可通过降低CD4~+T细胞的凋亡能力、增高其增殖和存活能力来发挥对HIV储存库重要细胞TCM的作用。(本文来源于《中国医科大学》期刊2018-03-01）
安琪[6]（2017）在《胞壁酰二肽—抗CD10偶联物体外刺激记忆T淋巴细胞活化的研究》一文中研究指出目的:探讨免疫偶联物胞壁酰二肽(muramyl dipeptide,MDP)-抗CD10偶联物(MDP-Antibody,MDP-Ab)对已接种卡介苗的健康儿童外周血中记忆性T淋巴细胞活化的影响。方法:1、采用Ficoll-Hypaque法分离获得健康儿童外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC),10%胎牛血清的RPMI-1640培养液培养,分为3组:对照组(PBMC 1×106/m L+抗人CD28单克隆抗体0.5μg/m L)、MDP-Ab组(抗人CD28单克隆抗体+MDP-Ab 20μg/m L)、卡介苗(bacillus calmette-guerin,BCG)组(抗人CD28单克隆抗体+BCG 20μg/m L),光学显微镜下观察细胞生长情况及细胞形态;分别于0、12、24、48、72小时收集细胞上清液,ELISA方法检测上清液中干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)水平。2、采集健康儿童外周血与RPMI-1640培养液等体积稀释,分为4组:对照组、MDP-Ab组、BCG组及PHA组(抗人CD28单克隆抗体+PHA 20μg/m L),48小时后收集细胞,流式细胞仪检测细胞表面CD3、CD4、CD45RA、CD69及胞内IFN-γ的表达。结果:1、细胞生长及细胞形态:与对照组相比,培养24小时后MDP-Ab组及BCG组细胞出现细胞聚集,细胞团中细胞形态可辨别。随培养时间延长细胞团的数量均增多,以BCG组最为明显。2、IFN-γ水平:对照组在0、12、24、48、72小时细胞上清液中IFN-γ水平分别为(401.76±17.10)pg/ml、(374.64±24.30)pg/ml、(376.53±28.96)pg/ml、(380.02±29.15)pg/ml、(390.17±33.64)pg/ml,MDP-Ab组在不同培养时间下细胞上清液中IFN-γ水平分别为(402.04±23.22)pg/ml、(421.49±24.09)pg/ml、(456.76±41.99)pg/ml、(479.81±21.43)pg/ml、(449.10±13.66)pg/ml。两因素重复测量资料的方差分析显示,MDP-Ab刺激后IFN-γ的水平明显高于对照组(F刺激=13.19,p=0.02),而培养时间对IFN-γ的水平无显著影响(F时间=1.65,p=0.21);处理因素与培养时间之间存在交互作用(F交互=3.51,p=0.03);对不同时间点两组间IFN-γ的水平进行t检验,MDP-Ab组IFN-γ水平在12h、24h、48h均显着高于对照组(p均<0.05)。BCG组在不同培养时间下细胞上清液中IFN-γ水平分别为(405.34±30.48)pg/ml、(404.98.70±37.08)pg/ml、(444.33±22.94)pg/ml、(502.20±15.52)pg/ml、(517.84±21.54)pg/ml,两因素重复测量资料的方差分析显示,BCG组IFN-γ的水平明显高于对照组(F刺激=5.49,p=0.00),且培养时间对IFN-γ水的水平有显著影响(F时间=26.60,p=0.00),处理因素与培养时间之间存在交互作用(F交互=5.49,p=0.00);对不同时间点两组间IFN-γ的水平进行t检验,BCG组IFN-γ水平在24h、48h、72h均显着高于对照组(p均<0.05)。3、记忆T淋巴细胞胞内IFN-γ表达情况:CD3+CD4+CD45RA-IFN-γ+细胞比例:对照组、MDP-Ab组、BCG组、PHA组分别为(0.010±0.017)%、(0.61±0.20)%、(1.05±0.45)%、(0.27±0.19)%。与对照组相比,MDP-Ab组的CD3+CD4+CD45RAIFN-γ+细胞比例明显升高(t=5.183,p=0.034),而BCG组及PHA组与对照组相比无统计学差异(p均>0.05)。各组表型为CD3+CD4-CD45RA-IFN-γ+的T淋巴细胞均很少甚至不表达。4、记忆T淋巴细胞表面CD69表达情况:⑴CD3+CD4+CD45RA-CD69+细胞比例:对照组、MDP-Ab组、BCG组、PHA组分别为(4.70±1.16)%、(8.99±2.75)%、(13.69±2.79)%、(8.44±3.25)%,MDP-Ab组及BCG组CD3+CD4+CD45RA-CD69+细胞比例均明显高于对照组(p均<0.05),而PHA组与对照组相比无统计学差异(t=1.938,p=0.179);⑵CD3+CD4-CD45RA-CD69+细胞比例:对照组、MDP-Ab组、BCG组、PHA组分别为(1.41±0.31)%、(3.91±1.73)%、(6.76±3.28)%、(5.15±1.79)%,MDP-Ab组及BCG组CD3+CD4-CD45RA-CD69+细胞比例均明显高于对照组(p均<0.05),而PHA组与对照组相比无统计学差异(t=3.601,p=0.067)。⑶CD3+CD4+CD45RA-CD69+与CD3+CD4-CD45RA-CD69+细胞比例比较:MDP-Ab、BCG两组CD3+CD4+CD45RA-CD69+细胞比例分别为(8.99±2.75)%、(13.69±2.79)%,而CD3+CD4-CD45RA-CD69+细胞比例为(3.91±1.73)%、(6.76±3,28)%,两组CD4+活化的记忆性T细胞比例均明显高于CD4-活化的记忆性T细胞比例(p均<0.05)。结论:MDP-Ab能够体外刺激已接种卡介苗的健康儿童记忆性T淋巴细胞分泌IFN-γ,诱导其表达早期活化标志CD69,提示MDP-Ab可以在体外诱导记忆T淋巴细胞的活化,且细胞活化在CD4+细胞中表现更为显着。这种活化效应和BCG刺激后发生的免疫反应相似。这为该偶联物应用于白血病的免疫治疗提供进一步的理论支持。(本文来源于《青岛大学》期刊2017-05-26）
车媛媛[7]（2016）在《吉兰—巴雷综合征患者循环记忆性滤泡辅助性T淋巴细胞亚群的变化及其意义》一文中研究指出背景:吉兰-巴雷综合征(Guillain–Barre′syndrome,GBS)是一种世界性分布的免疫介导的急性炎症性周围神经系统疾病。尽管其发病率比较低(0.001-0.002%)且多数病程具有自限性,仍有少数严重病例可见轴突变性碎裂并呈现较高的致残率(15%)和死亡率(5%)。国内外的研究报道均指出,依据受损神经纤维的类型可将GBS进行亚型分类,包括:急性炎症性脱髓鞘性多发神经根神经病(acute inflammatory demyelinating polyneuropathies,AIDP)、急性运动轴索性神经病(acute motor axonal neuropathy,AMAN)、急性运动感觉轴索性神经病(acute motor-sensory axonal neuropathy,AMSAN)、Miller Fisher综合征(Miller Fisher syndrome,MFS)、急性泛自主神经病(acute panautonomic neuropathy)和急性感觉神经病(acute sensory neuropathy,ASN)等。其中欧洲和北美大约90%的病例为AIDP,亚洲及中南美AMAN和AMSAN两型多见。不同亚型之间免疫学发病机制存在差异。AMAN、AMSAN和MFS发病与神经节苷脂自身抗体产生有关,其中大约95%的MFS患者中抗GQ1b自身抗体阳性,而AIDP则主要表现为CD4+辅助性T细胞诱导巨噬细胞及补体活化进而引起周围神经脱髓鞘反应。大量研究表明不同亚型GBS的发病机制、临床病程、严重程度和结局具有高度各异性。其中,2014年张洪亮研究团队在对中国北方地区GBS亚型临床数据统计分析后指出与神经节苷脂自身抗体相关的GBS亚型具有更严重的临床症状和更差的预后。2015年张刚等人对中国西南地区170例GBS患者疾病严重程度做了回顾性研究并得出结论AMAN亚型预后较AIDP更差。上述研究结果提示我们体液免疫异常表现在某些GBS亚型的发病过程中,可能是多数重症GBS的重要免疫学发病机制。滤泡辅助性T细胞(Follicular helper T cells,Tfh),是定位于淋巴滤泡中的一类CD4和CXCR5双阳性的T淋巴细胞亚群,这群细胞在健康人外周血中占CD4阳性T淋巴细胞百分比为(11.9±0.38)%,目前已知的Tfh细胞记忆性标记物包括CD45RA-/CD45RO+。Tfh细胞的主要功能为辅助B淋巴细胞参与体液免疫。依据表面分子标记物CXCR3和CCR6的不同表达可以将Tfh分成Tfh1(CXCR3+CCR6-)、Tfh2(CXCR3-CCR6-)和Tfh17(CXCR3-CCR6+)叁种不同的细胞亚群,据报道这些细胞亚群在B细胞的分化、成熟以及免疫球蛋白类别转换过程中起着各自不同的信息传递作用。国内外大量的实验研究证实Tfh细胞数量变化、分子表达异常及其亚群细胞分布失衡与许多自身免疫病的发生、发展和转归有关。目前,Tfh细胞在GBS发病机制中的研究未见报道。目的:研究外周血记忆性滤泡辅助性T细胞(CD4+CXCR5+CD45RA-)及其亚群Tfh1(CXCR3+CCR6-)、Tfh2(CXCR3-CCR6-)和Tfh17(CXCR3-CCR6+)在GBS两个发病率高的亚型AIDP和AMAN疾病进程中的数量变化、表面分子ICOS/PD-1表达水平、细胞亚群的分布比率。探讨上述细胞的变化在GBS发病早期对机体体液免疫状态的影响和调控途径,为未来发展个性化临床治疗提供理论依据。方法:本研究收入急性期吉兰-巴雷综合征患者36例,其中应用免疫球蛋白治疗后的重症患者7例,以及年龄、性别相匹配的体检人群18例作为对照组。根据2012年修订的国际通用临床神经电生理学诊断标准将36名急性期GBS患者进行AIDP/AMAN亚型分组,同时参照休斯功能分级量表(HFGS)和医学研究理事会(MRC)评分标准对全部患者的疾病严重程度进行评估。应用淋巴细胞提取技术和流式细胞技术检测急性期(acute phase)GBS患者及应用免疫球蛋白治疗后平台期(plateau phases)患者、对照组(Control subjects,CS)外周血中Tfh细胞表面标记物CD4/CXCR5/CD45RA/CCR6/CXCR3/ICOS/PD-1以及B细胞表面标记物CD19/CD27/CD38/CD20的表达水平。流式分选获得健康人和AMAN患者外周血B细胞、记忆性Tfh2细胞和Tfh17细胞,并通过体外共培养系统验证患者记忆性Tfh亚群细胞辅助B细胞分化及抗体分泌的功能变化。酶联免疫吸附试验(ELISA)用于检测外周血、脑脊液和细胞共培养上清液中细胞因子IL-21的表达水平,流式微球阵列(CBA)用于检测细胞因子IL-17A,IFN-γ,TNF,IL-10,IL-6,IL-4和IL-2的表达水平以及免疫球蛋白Ig G/Ig A/Ig M的含量,散射比浊法检测脑脊液免疫球蛋白和总蛋白的含量。结果:1.GBS分组包括:24名AMAN和12名AIDP,其中HFGS评分≥4的7名重症GBS全部来源于AMAN组。2.AMAN组患者外周血中CD4+CXCR5+CD45RA-Tfh细胞频数以及Tfh1(CXCR3+CCR6-),Tfh2(CXCR3-CCR6-)和Tfh17(CXCR3-CCR6+)亚群细胞频数均比正常对照组显着升高。而总Tfh及其亚群细胞频数在AIDP组和正常对照组之间差异无显着性。3.AMAN组患者外周血中记忆性Tfh2和Tfh17亚群细胞比率较正常对照组和AIDP组均有不同程度的升高,且(Tfh2+Tfh17)/Tfh1比率变化与疾病严重程度和外周血浆细胞数量正相关。4.AMAN患者外周血记忆性Tfh2和Tfh17亚群细胞表面诱导性协同刺激分子(ICOS)的表达水平较正常对照组和AIDP组升高,相反地,其表面免疫抑制性受体程序性死亡分子1(PD1)的表达水平较正常对照组下降。5.在体外共培养实验中,经过6天的共培养,实验组的活性B细胞(CD3-CD4-)及浆细胞(CD38+CD20-)比例较对照组升高,且培养上清中免疫球蛋白Ig M和Ig G浓度同比升高。6.给予大剂量免疫球蛋白冲击治疗,每公斤体重每天用量0.4g连续5天,且病程进入平台期(发病两周以上)后重症GBS患者外周血中CD4+CXCR5+CD45RA-Tfh细胞总数降低,其中以Tfh17数量下降最为显着,其次是Tfh1,而Tfh2频数变化不明显。同时,亚群分布比率(Tfh2+Tfh17)/Tfh1下降,伴有血清细胞因子IL-21浓度降低。7.免疫球蛋白治疗后重症GBS患者外周血ICOS+Tfh1细胞比例下降;ICOS+Tfh2细胞和PD1+Tfh2细胞比例均下降。8.免疫球蛋白治疗前后重症GBS患者外周血浆细胞(CD3-CD4-CD38+CD20-)比例变化不明显。结论:1.本实验阐释了循环记忆性滤泡辅助性T细胞不同细胞亚群数量变化、细胞表面分子异常表达及其亚群细胞分布失衡在GBS病程中的临床意义,提示AMAN患者体内过度活化的体液免疫应答可能与循环记忆性Tfh亚群细胞数量变化和功能异常有关。2.体外共培养实验结果验证了AMAN患者外周血记忆性Tfh2和Tfh17亚群细胞与正常对照组相比具有更强的协同诱导B细胞分化和抗体分泌的能力。3.重症GBS患者应用免疫球蛋白(IVIg)治疗后外周血中浆细胞比例未见明显下降可能与记忆性Tfh2和Tfh17亚群细胞异常活化状态未被显着抑制有关。寻找有效抑制记忆性Tfh2和Tfh17亚群细胞的方法,进而有效调控病理状态下过度活化的Tfh-B细胞轴,或可成为未来重症AMAN的新型治疗手段。(本文来源于《吉林大学》期刊2016-05-01）
吴海刚[8]（2014）在《CD44和端粒在抗肿瘤活性记忆T淋巴细胞产生中的作用》一文中研究指出最新的临床研究表明,难治性转移性黑色素瘤患者在接受化疗手段去除内源性淋巴细胞后,接受自体抗肿瘤TIL(肿瘤浸润淋巴细胞)的抗肿瘤过继性细胞免疫治疗并结合注射大剂量IL-2,50%患者的肿块可显着消退;研究还发现,抗肿瘤过继性细胞治疗可能是一个更有效的肿瘤治疗方法,然而,人们对接受抗肿瘤过继性细胞免疫治疗的肿瘤患者体内的抗肿瘤TIL中的记忆性T细胞群的作用并没有明确研究。基于“高表达的CD44是小鼠记忆细胞最可靠的标志”这一科学依据,我们推测,接受抗肿瘤过继性细胞免疫治疗的患者体内,CD44在抗肿瘤TIL中的记忆性T细胞群的建立和维持方面起着重要的作用。本文为了证实这一推测,主要做了以下研究:(1)通过荧光激活细胞分选(FACS)分析方法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)克隆方法,确定CD44异构体在抗肿瘤活性肿瘤浸润淋巴细胞中的人记忆T细胞上的表达,以便理解CD44是否可用于肿瘤浸润淋巴细胞中记忆T细胞的鉴别;(2)确定CD44的表达与细胞信号转导途径经CD44配体(如透明质酸,纤连蛋白,硫酸软骨素、胶原蛋白)结合刺激和大量T细胞扩增后的调控在维持抗肿瘤活性肿瘤浸润淋巴细胞中的记忆T细胞的作用;(3)确定CD44表达与端粒长度的关系在抗肿瘤活性肿瘤浸润淋巴细胞中记忆T细胞的生成和维持的作用。由于体外调控记忆T细胞的产生和维持可能有效改进抗肿瘤过继性细胞免疫治疗的疗效,因此研究CD44表达和端粒长度在接受抗肿瘤过继性细胞免疫治疗的患者体内,抗肿瘤活性TIL中记忆T细胞的生成和维持作用有助于提高肿瘤免疫治疗效果。研究结果表明:(1)用于肿瘤免疫治疗的抗肿瘤TIL高度表达CD44,所表达的CD44异构体主要是CD44标准型;(2)抗肿瘤TIL中还存在着具有CD62L和CD27阳性标记的记忆性T细胞,而且这些记忆性T细胞表达高水平的CD44。由此可说明,CD44可以用作为记忆性T细胞的标记。进一步的研究显示,肿瘤免疫治疗效果明显受CD44阳性标记的记忆性T细胞数量降低的影响,此外,这种CD44阳性记忆性T细胞的消失与染色体端粒长度的缩短密切相关。研究结果证明,体外调控肿瘤细胞免疫治疗的抗肿瘤免疫细胞CD44的表达水平以及确保染色体端粒长度,有助于明显提高肿瘤免疫治疗效果,具有重要的理论意义和临床应用价值。本研究的创新点在于首次发现CD44可以用作为记忆性T细胞的标记,染色体端粒长度决定记忆性T细胞的活性,这两者可显着影响肿瘤免疫治疗效果。(本文来源于《浙江工业大学》期刊2014-12-01）
吕思霖[9]（2014）在《记忆型CD8阳性T淋巴细胞快速发挥效应功能需要早期代谢过程向糖酵解转变》一文中研究指出接触过抗原的记忆型T细胞通过固有的动力学获得效应功能;但是,这些细胞的代谢需求并不清楚。本文作者发现效应性记忆型(effector memory,EM)T细胞能够快速产生IFN-gamma,是通过T细胞抗原受体(T cell antigen receptor,TCR)和共刺激分子CD28的激活,或者是类似的作用方式,而这种激活过程与糖酵解的增加相关。EM CD8+T cells的叁磷酸甘油醛脱氢酶活性在早期明显增加,早于增殖开始,这点与相同处理的静息T细胞不同。CD28信号通过丝苏氨酸激酶Akt发挥功能,代(本文来源于《生理科学进展》期刊2014年02期）
王晶慧,吴标,黄玲,王登宇,王树军[10]（2013）在《不同临床阶段乙型肝炎患者外周CD8~+T淋巴细胞免疫记忆应答水平的比较》一文中研究指出目的比较急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎初治和慢性乙型肝炎后肝硬化患者CD8~+T淋巴细胞在数量和免疫记忆应答水平上的差异。方法收集上海交通大学医学院附属第叁人民医院2012年6月至2012年12月期间住院HBV感染患者共40例,既往均未进行抗病毒治疗。通过流式细胞术(FCM)和酶联免疫标记法(Elispot)检测患者CD8~+T淋巴细胞的免疫应答。结果不同类型乙型肝炎患者外周CD8~+记忆性T淋巴细胞在数量和应答水平上都呈现出不同的格局:和正常人群相比,叁个不同阶段乙型肝炎患者外周未致敏CD8~+T淋巴细胞的比例均显着降低,而CD45RA~-CD8~+记忆/活化型T淋巴细胞的比例则显着增高,而且在肝硬化阶段未致敏淋巴细胞比例降低更为明显,记忆/活化淋巴细胞比例升高更为明显;和慢性乙型肝炎初治患者相比,肝硬化阶段外周CD8~+T淋巴细胞不仅在数量上显着减少,同时在功能上也呈现低反应性,其分泌IFN-γ的能力也基本丧失。结论乙型肝炎发展至肝硬化阶段,大多数外周CD8~+T淋巴细胞具有向记忆/活化型细胞分化的趋势;在免疫清除阶段,患者CD8~+T淋巴细胞或是记忆CD8~+T淋巴细胞仍然具有一定的有效应答能力,当发展至肝硬化阶段,则CD8~+T淋巴细胞功能明显降低。这种细胞功能的丧失与病毒清除能力减低及疾病的慢性化进展可能存在一定关联。因此,提高慢性乙型肝炎患者中免疫记忆/活化型CD8~+T淋巴细胞的比例和功能可能成为延缓HBV慢性感染导致的肝硬化和肝衰竭的策略之一。(本文来源于《肝脏》期刊2013年06期）
记忆性淋巴细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:以糖皮质激素对人CD8~+ T淋巴细胞的诱导作用为线索,探究其对体外CD8~+ 中央记忆性T淋巴细胞(central memory T cells,T_(CM))的诱导分化作用,以期为CD8~+ T_(CM)过继性免疫疗法提供新的扩增方案。方法:通过密度梯度离心法分离健康人外周血单个核细胞,经磁珠和流式细胞术分选出初始CD8~+ T细胞,将细胞使用细胞因子激活之后分为对照组和实验组,在实验组中加入不同浓度的2种糖皮质激素(醋酸可的松和氢化可的松),进行体外培养,最后通过流式细胞术检测2组细胞中CD8~+ T_(CM)的诱导分化情况,并通过CFSE染色判断细胞增殖情况,通过早期凋亡试剂Annexin V染色判断药物本身对CD8~+ T细胞的毒性作用。结果:浓度梯度实验发现,1μmol/L醋酸可的松对CD8~+ T_(CM)表现出良好的诱导效果,氢化可的松在0.5μmol/L的诱导效果较好。分别在体外培养的第3天和第6天,CFSE染色法检测细胞的增殖情况,经统计学分析发现实验组和对照组之间的差异无统计学显着性,表明糖皮质激素不影响细胞的自然增殖。Annexin V染色法表明,这2种药物无显着的促进凋亡作用,对淋巴细胞毒性小。结论:糖皮质激素在体外对人CD8~+ T_(CM)具有良好的诱导作用。这为改善过继免疫治疗中T_(CM)的体外扩增提供新的参考方法,并且在理论上加深对糖皮质激素生物学功能的理解。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
记忆性淋巴细胞论文参考文献
[1].邵一鸣,杨正丽,赵一帆,李倩,常秀丽.百草枯诱导淋巴细胞凋亡导致记忆性免疫损伤[C].中国毒理学会第九次全国毒理学大会论文集.2019
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[5].张乐乐.CD4~+CD38~+中心记忆T淋巴细胞对HIV感染长期治疗者病毒储存库的贡献研究[D].中国医科大学.2018
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[8].吴海刚.CD44和端粒在抗肿瘤活性记忆T淋巴细胞产生中的作用[D].浙江工业大学.2014
[9].吕思霖.记忆型CD8阳性T淋巴细胞快速发挥效应功能需要早期代谢过程向糖酵解转变[J].生理科学进展.2014
[10].王晶慧,吴标,黄玲,王登宇,王树军.不同临床阶段乙型肝炎患者外周CD8~+T淋巴细胞免疫记忆应答水平的比较[J].肝脏.2013