重组烯醇化酶论文-宋会英

重组烯醇化酶论文-宋会英

导读:本文包含了重组烯醇化酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:NIHSS,丹参川芎嗪注射液,静脉溶栓,重组组织型纤溶酶原激活剂

重组烯醇化酶论文文献综述

宋会英[1](2018)在《丹参川芎嗪注射液联合重组组织型纤溶酶原激活剂静脉溶栓对急性脑梗死患者NIHSS评分及血清神经元特异性烯醇化酶 髓鞘碱性蛋白水平变化的影响》一文中研究指出急性脑梗死(αcute cerebral infarction,ACI)多由血液、血管或血液流动力学异常等因素造成脑部动脉狭窄或闭塞而发病,李玉艳等~([1])研究指出,颅脑损伤患者的脑神经损伤严重程度与血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、髓鞘碱性蛋白(MBP)表达水平密切相关。近些年随着医疗技术水平不断提高,静脉溶栓技术已成为早期ACI患者降低脑神经功能缺损程度的有效治疗措施~([2])。而丹参川芎嗪注射液可扩张冠状动脉血管,改善脑部微循环,同时具有抑制血小板聚集,抗血栓(本文来源于《中国药物与临床》期刊2018年11期)

计红,马莉,杨焕民,李士泽,张虹亮[2](2014)在《表达α-烯醇化酶重组腺病毒的构建及其在籽鹅卵泡颗粒细胞中的过表达》一文中研究指出α-烯醇化酶(α-enolase,ENO1)是一种在细胞质和细胞核中表达的糖酵解酶,主要催化2-磷酸甘油酸脱水,生成含高能磷酸键的磷酸烯醇式丙酮酸。禽类的产蛋性能主要取决于卵巢中卵泡的生长发育水平,颗粒细胞对促进卵泡发育具有重要作用。为了研究ENO1对禽类颗粒细胞功能的影响,本研究首先利用RT-PCR技术,从籽鹅卵巢组织中扩增ENO1基因,克隆至pShuttle-CMV穿(本文来源于《全国动物生理生化第七届全国代表大会暨第十叁次学术交流会论文摘要汇编》期刊2014-07-28)

宁兴旺,谢小兵,朱惠斌,王述湘,葛金文[3](2014)在《α-烯醇化酶重组质粒的构建及其表达形式的研究》一文中研究指出目的:构建α-烯醇化酶(alpha enolase,EN01)重组表达质粒,并研究其表达形式。方法:以人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC)总RNA为模板合成cDNA;根据EN01基因序列,设计上下游引物,以cDNA为模板,经多聚酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)扩增得到目的基因片段EN01;用T4DNA连接酶连接酶切产物和原核表达载体pET28(a),获得重组表达质粒pET28(a)-EN01;将pET28(a)-EN01在BL21(DE3)E.Coli.大肠杆菌中诱导表达,分别取菌液上清和沉淀进行SDS-PAGE电泳,确定重组质粒的表达形式。结果:重组表达质粒pET28(a)-EN01中的EN01测序结果与GeneBank上的序列一致;pET28(a)-EN01以可溶性表达为主。结论:EN01重组质粒的成功构建及其可溶性为主的表达形式的确定,为研究EN01的生物学活性及功能奠定了基础。(本文来源于《第一次全国中西医结合检验医学学术会议暨中国中西医结合学会检验医学专业委员会成立大会论文汇编》期刊2014-06-12)

董佳慧[4](2014)在《叁种来源的α-烯醇化酶重组表达及单克隆抗体的制备》一文中研究指出烯醇化酶是一种高度保守的蛋白质,最早作为糖酵解过程的关键酶为大家所熟知,它能够分别在糖酵解和糖异生过程中催化磷酸甘油酸(PGA)和磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)之间的相互转化。除了在糖酵解过程中控制能量产生以适应机体需求,不同生物体内的α-烯醇化酶在不同的组织部位有不同的功能。大量临床数据表明α-烯醇化酶作为自身抗原成分参与类风湿关节炎的治病过程,类风湿关节炎患者血清中环瓜氨化肽抗体以及抗瓜氨化烯醇酶抗体的形成等这些对抗瓜氨化蛋白抗体的阳性反应与类风湿性关节炎关系密切。然而α-烯醇化酶自身抗体是否直接参与类风湿关节炎的诱发目前还不清楚,本文旨在研究α-烯醇化酶特异性单克隆抗体以用于类风湿关节炎的诊断和治疗。本文通过从大肠杆菌、牙龈卟啉单胞菌和人类基因组中通过PCR扩增获得叁种不同来源的enolase,利用分子克隆技术构建重组表达质粒,以进行原核表达。将可溶性表达的叁种蛋白作为抗原,免疫小鼠,间接ELISA法检测制备的这叁种抗体血清效价,采用杂交瘤技术制备烯醇化酶特异性单克隆抗体。研究结果如下:1.从大肠杆菌、牙龈卟啉单胞菌和人类基因组中通过PCR扩增得到叁种来源的enolase基因,构建了重组表达质粒pET-Eno、pET-Peno和pET-Heno,并在宿主大肠杆菌中BL21(DE3)诱导表达。经SDS-PAGE分析,检测到高效的可溶性表达。通过比较不同诱导条件下的表达趋势,得到最优表达条件:37℃,0.5 mM IPTG,6 h。2.将含有重组质粒的大肠杆菌中BL21(DE3)诱导6h时集菌,高压破碎取上清制样,将样品进行SDS-PAGE。采用4℃预冷的KC1染色,切下目的条带,碾磨成糊状用生理盐水稀释至0.1 mg/mL,作为抗原皮下多点注射,免疫Balb/c小鼠。间隔两周免疫,共免疫4次,每次免疫前尾部静脉取血。间接ELISA法检测血清中抗体效价,选择效价高者用于单克隆抗体的制备。3.单克隆抗体的制备:取对数生长期的小鼠骨髓瘤细胞SP2/0和高效价免疫小鼠的脾细胞在50%PEG1500作用下进行融合,融合12 h添加HAT选择培养基,10-15天后取上清液用双抗夹心ELISA法(2μg/mL羊抗小鼠IgG为包被抗体,HRP标记兔抗小鼠IgG为捕获抗体)筛选阳性克隆,筛选到一株特异性结合的烯醇化酶特异性单克隆抗体。(本文来源于《华中师范大学》期刊2014-05-01)

计红,王江璐,张伟宏,郭景茹,杨焕民[5](2013)在《表达α-烯醇化酶重组腺病毒的构建及其在籽鹅卵泡颗粒细胞中的过表达》一文中研究指出为构建表达籽鹅α-烯醇化酶(ENO1)基因的重组腺病毒,本研究利用RT-PCR技术,从籽鹅卵巢组织中扩增ENO1基因,克隆至pShuttle-CMV穿梭载体中,并利用I-CeuI与I-SceI将ENO1基因的表达框切下,连接到腺病毒骨架的pAdxsi载体中。采用PacⅠ酶切,将其线性化,并转染至293(R)细胞进行病毒的包装,制备重组腺病毒。实验结果显示,制备的表达ENO1重组腺病毒的滴度达到1.1×1011pfu/mL。将重组腺病毒感染籽鹅卵泡颗粒细胞后,荧光定量RT-PCR与western blot检测显示细胞中ENO1基因和蛋白表达水平显着高于正常细胞(p<0.05),这些结果为研究ENO1生物学活性及功能奠定了基础。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2013年01期)

许丽萍,白文成,刘杨,韩润林[6](2012)在《链球菌表面烯醇化酶重组蛋白多克隆抗体的制备》一文中研究指出制备M6型GAS表面烯醇化酶抗体。皮下多点注射GAS表面烯醇化酶重组蛋白(rSEN)免疫家兔,采用亲和层析纯化免疫血清,通过SDS-PAGE、ELISA、Western-Blot等方法检测抗体的特异性,并初步用制备的抗体检测了M6血清型GAS表面烯醇化酶的表达。制备的抗体蛋白纯度较高,检测的特异性较强,用制备的抗体可以检测到活体菌表面的烯醇化酶。成功制备并纯化得到了GAS表面烯醇化酶多克隆抗体。(本文来源于《内蒙古农业大学学报(自然科学版)》期刊2012年01期)

王仕钦,李芳秋,史利宁,孔小祥,陆静芬[7](2011)在《白念珠菌烯醇化酶免疫优势肽段的重组表达与鉴定》一文中研究指出目的构建白念珠菌重组烯醇化酶蛋白免疫优势肽段Eno-380P的基因表达工程菌,诱导表达并检测其抗原性。方法以白念珠菌C1标准株基因组DNA作为模板,设计一对特异引物,用PCR法扩增出Eno-380P的编码基因,以pET28a(+)为载体,构建重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导重组融合蛋白表达。用抗his标签的单克隆抗体和白念珠菌抗体阳性的病人血清进(本文来源于《中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编》期刊2011-05-24)

许丽萍,白文成,刘杨,代霄燕,李培峰[8](2011)在《链球菌表面烯醇化酶及其变异体重组蛋白的表达纯化》一文中研究指出目的:表达并纯化M6型GAS表面烯醇化酶以及其敲除C末端赖氨酸残基重组蛋白(rSEN和rSENΔ434-435)。方法:克隆了M6型GAS ATCC32175的SEN基因以及SENΔ434-435基因,与pASK-IBA37载体连接后,表达蛋白并用亲和层析色谱纯化重组蛋白;通过酶促反应实验测定了重组蛋白的生物活性。结果:2种基因克隆条件稳定,蛋白表达量大,且纯化方法可靠,纯化的重组蛋白具有较高的生物活性。结论:成功表达并纯化了rSEN和rSENΔ434-435蛋白。(本文来源于《内蒙古农业大学学报(自然科学版)》期刊2011年01期)

王仕钦,曹王丽,李芳秋,孔小祥,史利宁[9](2010)在《白念珠菌烯醇化酶重组蛋白质的制备及鉴定》一文中研究指出目的制备具有高免疫原性的白念珠菌重组烯醇化酶蛋白质。方法以白念珠菌C1标准株基因组DNA作为模板,用PCR法扩增烯醇化酶的全长DNA序列,以pET28a(+)为载体,构建重组表达质粒,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导重组融合蛋白质表达。用抗his标签的单克隆抗体和白念珠菌抗体阳性的病人血清进行western blot鉴定,亲和层析柱纯化重组蛋白质。结果获得了含白念珠菌烯醇化酶全长基因的重组表达载体和相应工程菌株,经IPTG诱导后能高效表达重组融合蛋白质。经已含抗体的病人血清进行western blot鉴定,表明诱导的重组蛋白质有良好的免疫原性。结论成功克隆了白念珠菌烯醇化酶全长基因并在大肠埃希菌中获得高效表达;重组蛋白质具有良好的免疫原性。(本文来源于《临床检验杂志》期刊2010年05期)

蒋春明,杜建民,刘占利,陈丽琼,冯梅[10](2009)在《重组人促红细胞生成素对幼年大鼠癫痫持续状态后血清神经元特异性烯醇化酶、S-100β蛋白和髓鞘碱性蛋白变化的影响》一文中研究指出目的通过观察重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rHuEPO)对幼年大鼠癫癎持续状态(status epilepsy,SE)后24h血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S-100β蛋白和髓鞘碱性蛋白(MBP)表达的影响,以观察其在癫癎性脑损伤可能作用。方法采用氯化锂-匹鲁卡品点燃Sprague-Dawley(SD)大鼠制成SE模型,将40只19~21d日龄SD大鼠随机分为正常对照组(A组)、SE组(B组)、rHuEPO预处理+SE组(C组)、rHuEPO组(D组),每组10只。在SE后24h取血,测定血清中NSE、S-100β、MBP含量的变化。结果与A、D组相比,B组幼年大鼠血清NSE、S-100β、MBP浓度均显着升高(P<0.05),而C组大鼠血清仅NSE、S-100β浓度显著升高;与B组比较,C组NSE、S-100β、MBP均有显着下降(P<0.05)。结论rHuEPO可降低癫癎后神经组织损伤指标表达,对癫癎性脑损伤可能具有早期保护作用。(本文来源于《第六届江浙沪儿科学术会议暨儿科学基础与临床研究进展学术班论文汇编》期刊2009-11-26)

重组烯醇化酶论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

α-烯醇化酶(α-enolase,ENO1)是一种在细胞质和细胞核中表达的糖酵解酶,主要催化2-磷酸甘油酸脱水,生成含高能磷酸键的磷酸烯醇式丙酮酸。禽类的产蛋性能主要取决于卵巢中卵泡的生长发育水平,颗粒细胞对促进卵泡发育具有重要作用。为了研究ENO1对禽类颗粒细胞功能的影响,本研究首先利用RT-PCR技术,从籽鹅卵巢组织中扩增ENO1基因,克隆至pShuttle-CMV穿

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

重组烯醇化酶论文参考文献

[1].宋会英.丹参川芎嗪注射液联合重组组织型纤溶酶原激活剂静脉溶栓对急性脑梗死患者NIHSS评分及血清神经元特异性烯醇化酶髓鞘碱性蛋白水平变化的影响[J].中国药物与临床.2018

[2].计红,马莉,杨焕民,李士泽,张虹亮.表达α-烯醇化酶重组腺病毒的构建及其在籽鹅卵泡颗粒细胞中的过表达[C].全国动物生理生化第七届全国代表大会暨第十叁次学术交流会论文摘要汇编.2014

[3].宁兴旺,谢小兵,朱惠斌,王述湘,葛金文.α-烯醇化酶重组质粒的构建及其表达形式的研究[C].第一次全国中西医结合检验医学学术会议暨中国中西医结合学会检验医学专业委员会成立大会论文汇编.2014

[4].董佳慧.叁种来源的α-烯醇化酶重组表达及单克隆抗体的制备[D].华中师范大学.2014

[5].计红,王江璐,张伟宏,郭景茹,杨焕民.表达α-烯醇化酶重组腺病毒的构建及其在籽鹅卵泡颗粒细胞中的过表达[J].中国预防兽医学报.2013

[6].许丽萍,白文成,刘杨,韩润林.链球菌表面烯醇化酶重组蛋白多克隆抗体的制备[J].内蒙古农业大学学报(自然科学版).2012

[7].王仕钦,李芳秋,史利宁,孔小祥,陆静芬.白念珠菌烯醇化酶免疫优势肽段的重组表达与鉴定[C].中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编.2011

[8].许丽萍,白文成,刘杨,代霄燕,李培峰.链球菌表面烯醇化酶及其变异体重组蛋白的表达纯化[J].内蒙古农业大学学报(自然科学版).2011

[9].王仕钦,曹王丽,李芳秋,孔小祥,史利宁.白念珠菌烯醇化酶重组蛋白质的制备及鉴定[J].临床检验杂志.2010

[10].蒋春明,杜建民,刘占利,陈丽琼,冯梅.重组人促红细胞生成素对幼年大鼠癫痫持续状态后血清神经元特异性烯醇化酶、S-100β蛋白和髓鞘碱性蛋白变化的影响[C].第六届江浙沪儿科学术会议暨儿科学基础与临床研究进展学术班论文汇编.2009

标签:;  ;  ;  ;  

重组烯醇化酶论文-宋会英
下载Doc文档

猜你喜欢