导读:本文包含了四环素诱导表达论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:四环素,基因表达调控,Hsp90α基因,HepG2细胞
四环素诱导表达论文文献综述
尚冰清,周丹,朱宏,刘昱,郭丽丽[1]（2018）在《hsp90α基因四环素诱导调控表达质粒的构建及功能验证》一文中研究指出目的构建Hsp90α基因的单质粒四环素/强力霉素诱导表达系统,并验证其不同表达量对Hep G2肝癌细胞增殖的影响。方法通过PCR,分别从p Retro X-Tet-On Advanced质粒和pc DNA3.1-EGFP质粒中扩增rt TA表达盒和EGFP基因,依次将rt TA和EGFP基因克隆入p TRE-Tight载体中,p Retro X-Tight载体中,获得EGFP标记的Tet-on单质粒系统。基于本系统,构建DOX诱导的Hsp90α表达质粒p Retro X-Hsp90α-EGFPTet-On,然后采用脂质体转染Hep G2细胞,以不同浓度(0,100,500,2500 ng/m L)的DOX诱导,通过荧光显微镜、荧光定量PCR以及Western blot检测EGFP和目的蛋白Hsp90α的表达。结果转染质粒载体后的Hep G2细胞经不同浓度的DOX 24 h后,RT-PCR和Western blot结果显示一致,随着DOX浓度的增大,Hsp90α基因表达量逐渐增加,DOX 500 ng/m L时时,基因表达的水平达到高峰;加入DOX 48 h后,细胞的增殖明显高于对照组,且存在剂量依赖性。结论该研究成功地应用四环素基因表达调控系统调控了Hsp90α基因在HepG2细胞内表达及促肿瘤细胞增殖的功能,为进一步探讨Hsp90α基因与肿瘤的增殖和侵袭之间的关系提供理论基础。(本文来源于《中西医结合心血管病电子杂志》期刊2018年08期）
郇文彬,明鑫,鲍晨沂,洪涛,JUNG,Yong-Sam[2]（2017）在《四环素诱导调控DEC1表达的Vero细胞系的构建及鉴定》一文中研究指出为了构建四环素(tetracycline,Tet)诱导的利用Tet-on诱导表达系统调控的Vero-TR母细胞,建立Tet诱导表达或沉默DEC1的Vero细胞系并加以鉴定。试验将表达Tet阻遏蛋白(Tet repressor protein,TetR)的pc DNA6转染至Vero细胞,通过Blasticidin筛选稳定表达TetR的阳性细胞克隆,即Vero-TetR母细胞系。将克隆有DEC1基因(CDS区的pc DNA4真核表达载体或克隆有特异性靶向DEC1基因的shRNA的p Babe-H1真核表达载体,分别转染至Vero-TR细胞,通过Zeocin或Puromycin筛选诱导表达或沉默DEC1的阳性细胞克隆,命名为Vero-DEC1和VerosiDEC1。利用Western blot检测Vero细胞中Tet诱导表达或沉默DEC1的效果。最后成功构建了Vero-TR、Vero-DEC1和Vero-siDEC1的稳定细胞系,Western blot结果显示DEC1能够在Tet的调控下有效表达或沉默。Vero-TR母细胞系的成功构建为建立其他宿主细胞基因表达或沉默的细胞系提供了重要材料,Vero-DEC1和Vero-siDEC1细胞系的成功构建为研究DEC1在正常或感染等应激情况下的生物学功能奠定了基础。(本文来源于《畜牧与兽医》期刊2017年05期）
虞欣璐[3]（2017）在《Hnf1β和Foxa3四环素诱导型表达载体介导小鼠胚胎成纤维细胞转分化获得肝干细胞及其相关分子机制》一文中研究指出分化成熟的体细胞不经过中间的多能性状态而直接通过转分化转变成其他类型的体细胞或者成体干细胞的过程称作谱系重编程。在小鼠胚胎成纤维细胞(Mouse Embryonic Fibroblast cells,MEFs)中表达肝脏器官发生中起重要作用的两个转录因子Hnf1β和Foxa3,将其诱导为肝干细胞(induced hepatic stem cells,i Hep SCs)的成功,是该研究领域的一项重要成果,然而其重编程过程中所涉及的分子机制却尚不清楚。四环素控制的诱导型表达载体是研究重编程进程的非常有用的工具。2008年,Brambrink和Stadtfeld就曾经利用这个体系揭示了MEF重编程为i PSCs细胞的时间进程,他们从整合了Oct4-GFP等位基因及四环素控制元件反式作用因子基因M2rt TA的小鼠中分离MEF细胞,该小鼠所携带的GFP报告基因可以显示内源性Oct4基因的激活情况,并表示细胞重编程的成功。借鉴体细胞重编程机制研究的经验,重编程的时间进程的确定可以说是研究细胞重编程过程中相关机制的研究基础之一,而构建高效可控的双因子慢病毒表达载体则是研究重编程进程的基础,所以四环素控制的Hnf1β和Foxa3表达载体的构建对本课题研究的开展十分重要。细胞重编程过程与胚胎发育和细胞分化过程有一个共同点是细胞都经历原有细胞表观标记的去除和新的细胞特异的表观修饰的建立,其中DNA甲基化与DNA去甲基化导致的细胞DNA甲基化模式的改变被认为是其中具有重要调控作用的机制。近年来多项研究证明Tet家族(Tet1、Tet2、Tet3)可以催化5-甲基胞嘧啶(5-m C)转化为5-羟甲基胞嘧啶(5-hm C),从而实现DNA的主动去甲基化,而大量研究证明,Tet1在体细胞重编程中具有十分重要的作用。本课题着重于Tet家族成员在MEF细胞重编程为i Hep SCs中的作用开展了初步研究。我们首先构建了四环素诱导型的Hnf1β和Foxa3转录因子慢病毒表达载体,感染小鼠成纤维细胞后利用多西环素(doxycycline,Dox)来控制外源双因子的表达并观察细胞重编程的过程。我们利用这两个表达报告基因EGFP和m Cherry的表达载体成功获得了转分化的细胞克隆,通过鉴定发现诱导后的细胞在形态上与i Hep SCs相似,在转录水平上,表达胆管细胞的标志(CK19)、肝胆共同标志(CK18)以及一些肝脏干/前体细胞标志(Dlk1、Sox9、Ep CAM)。该结果证明我们初步建立了四环素控制的MEF细胞转分化为i Hep SCs的诱导体系。另外我们还发现,将获得的重编程细胞培养在撤掉Dox的i Hep SCs培养液中,细胞的干性特征在许多方面发生了变化,提示我们所获得的细胞中,外源基因的表达在其干性维持中起着非常重要的作用。该体系的建立为后续的研究奠定了基础。然后,我们利用q RT-PCR和免疫荧光染色方法证明了Tet家族成员在MEF重编程为i Hep SCs过程中的表达激活,同时也证明了其在i Hep SCs细胞中的表达维持,这些都提示了Tet家族的重要作用。与其表达相一致,细胞中5m C和5hm C的水平也发生了相应的变化。我们将利用Dox诱导表达系统对重编程过程中的细胞在不同的时间点进行取样,对这个过程中Tet表达水平及细胞甲基化和羟甲基化水平的变化规律做深入研究,并揭示该过程中转录组表达变化与甲基化水平变化之间的相关性。总之,本研究中我们建立了四环素诱导型的Hnf1β和Foxa3转录因子慢病毒表达载体并成功地建立了转分化的诱导体系,获得了由MEF细胞转分化而来的诱导型肝干细胞,并初步证明了Tet家族在重编程过程和干细胞干性维持中的重要作用,为后续研究打下了基础。(本文来源于《第二军医大学》期刊2017-05-01）
罗婉月,李天明,于莹,许湄雪,仪宏[4]（2015）在《Ketogulonigenium vulgare四环素诱导表达穿梭质粒的构建》一文中研究指出采用重迭延伸PCR方法合成阻遏蛋白的编码基因tetr和插入操纵基因teto的Ketogulonigenium vulgare山梨糖脱氢酶启动子psndhteto的基因序列,借助宽宿主质粒p BBR1MCS-5,构建四环素诱导表达的穿梭质粒,转化Ketogulonigenium vulgare,获得阳性重组菌株,实现卡那霉素抗性的调控表达,结果表明:培养重组菌株2小时后,添加0.4μg/ml的四环素诱导剂后,能够在含有卡那霉素的培养基中生长,不添加四环素诱导剂的重组菌株不能在含卡那霉素的培养基中生长,确定了最适四环素的诱导浓度为0.6μg/ml。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2015年05期）
张力,刘超,周昕,谢英,刘树锋[5]（2015）在《四环素诱导肝脏特异表达绿色荧光蛋白转基因斑马鱼模型建立》一文中研究指出目的探索tet-on四环素诱导表达系统在斑马鱼体内应用策略与技术路线,构建四环素诱导肝脏特异表达绿色荧光蛋白的转基因斑马鱼,为条件型功能基因研究及组织特异转基因斑马鱼疾病模型的建立奠定基础。方法构建肝脏特异启动子fabp10启动rt TA蛋白表达的重组质粒pfabp10-rt TA,联合p TRE-Tight-BI-Ac GFP1质粒转染He La细胞后给予doxycycline诱导,Western blot法验证;pfabp10-rt TA联合p TRE-Tight-BI-Ac GFP1质粒注射斑马鱼1-细胞期受精卵后,30μg/m L doxycycline诱导,荧光筛选稳定整合个体。结果共转染pfabp10-rt TA与p TRE-Tight-BI-Ac GFP1的He La细胞经1μg/m L浓度doxycycline诱导培养液诱导,GFP表达量显着高于不加doxycycline培养液对照组;筛选获得的稳定整合斑马鱼幼鱼,在浓度为30μg/m L doxycycline条件下,肝脏明显有绿色荧光表达,对照组幼鱼肝脏位置未有明显绿色荧光。结论 Tet-On四环素诱导表达系统可用于建立四环素调控斑马鱼肝脏特异表达外源基因;利用该技术可建立诱导肝脏表达GFP建立转基因斑马鱼品系,为建立条件型转基因斑马鱼疾病模型、探索肝脏器官发生发育等研究提供良好的模式动物工具。(本文来源于《中国实验动物学报》期刊2015年01期）
吴亮,薛兰兰,王晓,吴腊梅,姜旭淦[6]（2014）在《用四环素诱导调控表达系统构建弓形虫脂肪酸合成酶FABZ缺陷株》一文中研究指出目的构建基于四环素诱导调控表达系统的刚地弓形虫β-酮脂酰ACP合成酶(FABZ)缺陷株。方法从弓形虫基因组中扩增fabz基因并构建四环素调控诱导表达载体pTetO7-Sag1-FABZ-Ty-DHFR,电穿孔法导入弓形虫TATi株,通过乙胺嘧啶抗性和极限稀释法筛选FABZ缺陷株,蛋白质印迹(Western blotting)检测虫体内附加表位标签Ty的表达。在5×105个FABZ缺陷株弓形虫速殖子培养液中加入脱水四环素(终浓度为1μg/ml),Western blotting检测带有Ty标签的FABZ表达情况。结果筛选获得的缺陷株可表达带有Ty标签的转运肽型FABZ和成熟型FABZ。FABZ缺陷株弓形虫速殖子培养液中加入脱水四环素24 h和48 h后,转运肽型FABZ表达量均较对照组显着降低(P<0.05)。结论构建了由脱水四环素调控表达的弓形虫FABZ缺陷株。(本文来源于《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》期刊2014年04期）
郑刚,宋晗,沈学锋,骆文静,陈景元[7]（2014）在《四环素可诱导铜转运体1高表达细胞系的构建及其在脉络丛铜代谢研究中的作用》一文中研究指出目的采用脉络丛上皮细胞系Z310细胞,构建四环素(tetracycline,Tet)可诱导铜转运体1(CTR1)高表达细胞株iZCTR1,验证该模型在血-脑脊液屏障通透性、以及铜离子跨屏障转运研究中的作用和可靠性,并利用该模型研究铅诱导脉络丛铜代谢紊乱的机制。方法大鼠脉络丛上皮细胞系Z310体外培养,采用Invitrogen公司T-REx?系统,将调控质粒和插入CTR1基因的表达质粒转染进入细胞,经稳定筛选后,得到Tet诱导CTR1高表达的细胞株iZCTR1。免疫荧光法检测细胞紧密连接蛋白的表达和分布;Transwell实验检测细胞对大分子的通透性以及铜离子的跨膜转运。在铅染毒实验中,64Cu吸收实验检测细胞铜吸收量;siRNA干涉技术观察CTR1在细胞铜吸收中的作用。结果免疫印迹法和RT-PCR法证实以Tet诱导后,iZCTR细胞CTR1蛋白和mRNA水平均显着增高,表明细胞株构建成功。免疫荧光法结果显示iZCTR1细胞正常表达紧密连接蛋白(occludin,ZO-1);接种于Transwell中后,可以形成完整的屏障结构,抑制葡聚糖等大分子的自由通过。iZCTR细胞以Tet诱导CTR1高表达后,细胞铜吸收量比对照组显着增加;而在Transwell实验中,Tet诱导的CTR1高表达导致Transwell内、外槽间铜离子跨屏障转运的双向减少,提示非极性细胞在Transwell中对铜离子的转运是非定向的。在铅染毒实验中,10μM铅可引起细胞内铜的蓄积以及CTR1表达水平的上调;而当铅联合Tet处理后,细胞铜吸收量比单独铅染毒或Tet处理均进一步增高。结论在本实验中,利用Tet可诱导表达系统所构建的iZCTR1细胞仍保留着脉络丛上皮细胞的基本特征,表达紧密连接蛋白并可在Transwell中形成单层细胞屏障结构,可用于屏障通透性的研究。然而,在铜离子转运实验中,iZCTR1细胞对铜的转运未表现出特定的方向性,提示非极性细胞可能并不适用于利用Transwell屏障模型进行的金属离子转运研究。而在细胞铜吸收实验中,由于Tet诱导可在短时间内上调iZCTR1细胞CTR1表达水平,能够证实CTR1在细胞铜吸收、以及在铅所致细胞铜蓄积中的作用,并较好地排除了其它因素的影响。(本文来源于《中国毒理学会第四届中青年学者科技论坛论文集》期刊2014-08-13）
李建,宁静,陈西锐,宋成艳,雷安民[8]（2014）在《小鼠H1foo基因四环素诱导表达系统的构建与表达》一文中研究指出卵母细胞特异性连接组蛋白H1foo(Linker histone H1foo)是连接组蛋白H1(Histone 1)在卵母细胞中特异性表达的1个亚型,H1foo在卵母细胞减数分裂和成熟发育过程中起着不可替代的作用,而且H1foo也参与了重编程过程。为了在体细胞中进一步研究H1foo的功能,本试验通过采用四环素诱导表达载体系统,用PCR的方法扩增了小鼠的H1foo基因和四环素诱导表达系统(Tet-on)的启动子区。用双酶切和连接等方法将上述元件连接到真核表达载体pVenus上,构建了重组质粒pVenus-tet-CMV-H1foo。双酶切和测序结果显示,片段连接正确,且全长测序正确。本试验所构建的四环素诱导的小鼠H1foo真核表达系统有助于人们在体细胞中更好地探讨H1foo在特定时间的作用和功能。(本文来源于《畜牧兽医学报》期刊2014年05期）
李建[9]（2014）在《H1foo基因在小鼠卵母细胞中的表达及H1foo基因四环素诱导表达载体的构建》一文中研究指出连接组蛋白H1foo作为一种特殊的连接组蛋白亚型，其在卵母细胞成熟过程中发挥着重要作用，在GV期的卵母细胞中干扰H1foo的正常表达会引发卵母细胞周期阻滞，从而明显降低卵母细胞的成熟率。另外，在核移植过程中，供体核进入去核的卵母细胞之后，供体核上体细胞型的连接组蛋白H1会迅速地被卵母细胞型的连接组蛋白H1foo置换下来。截止到目前，这种连接组蛋白的置换现象已经在爪蟾，小鼠和牛等不同物种的核移植过程中被观察到，但其具体发生机制还没有完全研究清楚。这种快速置换现象可能对于供体核的重编程过程来讲是至关重要的。为进一步地来研究连接组蛋白H1foo在卵母细胞成熟进程中所发挥的作用，本实验成功构建了小鼠H1foo基因的真核表达载体，并通过在小鼠卵母细胞中超表达H1foo-Venus来观察H1foo的表达上调后对卵母细胞成熟情况及纺锤体形态所产生的影响。同时，为了探索H1foo促进卵母细胞成熟的分子机制，我们对MPF在H1foo上的潜在靶点（T-298）进行了定点突变；另外我们在真核表达载体pH1foo-Venus的基础上结合Tet-On诱导表达系统构建了小鼠H1foo基因四环素诱导的真核表达载体，并在体细胞中进行了诱导表达。试验结果如下：1.本试验利用RT-PCR技术成功从小鼠卵巢组织中克隆得到H1foo CDS全长序列。荧光显微镜观察结果表明构建的真核表达载体pH1foo-Venus可以在细胞中正确表达及定位。在此基础上利用小鼠pH1foo-Venus真核表达载体和pVenus空载体，体外转录获得其mRNA,通过显微注射的方法将mRNA导入小鼠卵母细胞中，在卵母细胞的核区可以观察到H1foo-Venus荧光蛋白的表达和定位。在小鼠卵母细胞中超表达H1foo-Venus和Venus后，H1foo-Venus注射组中卵母细胞的成熟率（54.3%）明显高于Venus注射组（36.25%）。H1foo在T-298位的点突变对H1foo在小鼠卵母细胞中的表达定位没有产生影响。另外，免疫荧光染色结果显示超表达H1foo对卵母细胞中纺锤体的形成没有影响，纺锤体可以正常组装，形态表现正常。2.本试验成功构建了小鼠H1foo基因的四环素诱导表达载体，转染细胞后在特定的时间加入四环素进行诱导，荧光显微镜观察结果显示所构建的诱导表达载体实现成功表达。本试验结果表明：所构建的小鼠H1foo真核表达载体在小鼠卵母细胞中成功表达和定位；在小鼠卵母细胞中超表达H1foo后可以明显促进卵母细胞的成熟；超表达H1foo对于卵母细胞中纺锤体的形成没有明显影响；H1foo在T-298位的点突变对H1foo在卵母细胞中的定位未产生影响；小鼠H1foo基因的真核表达载体和四环素诱导表达载体构建成功；所构建的H1foo基因的四环素诱导表达载体在体细胞中可以实现时间上的调控表达；这为我们进一步研究H1foo在卵母细胞周期进程中的作用机制奠定了基础。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2014-05-01）
李梅[10]（2014）在《B族G蛋白偶联受体PAC1四环素诱导可控表达系统的构建及应用》一文中研究指出目的： PAC1是神经肽垂体腺苷酸环化酶激活多肽(Pituitary adenylate cyclaseactivating polypeptide，PACAP)的特异性受体，属于B族G蛋白偶联受体，介导PACAP的神经递质、神经调质、神经保护及调控神经再生等生物学功能，其生理性及病理学高表达与其所介导的保护细胞、抗细胞氧化损伤及抗细胞凋亡作用密切相关。Tet-on表达调控系统是目前最理想应用最广泛的真核生物基因表达调控系统，能够高效、严格地调控目的基因的表达。为了深入了解PAC1的功能，构建PAC1可调控表达的细胞系，本课题通过优化的Tet-on真核表达调控系统实现PAC1在中国仓鼠卵巢（Chinese hamster ovary，CHO）细胞的强力霉素(doxycycline，Dox)依赖的可控表达，初步探讨PAC1的表达水平与其所介导的细胞增殖活性和抗凋亡活性之间的关系。方法：通过对实验室保存的质粒pEYFP-PAC1-EYFP进行双酶切得到编码PAC1和增强型黄色荧光蛋白(EYFP, enhanced yellow fluorescent protein)的融和基因PAC1-EYFP，将融和基因PAC1-EYFP克隆到四环素反应元件pTRE-Tight载体上，获得重组表达载体pTRE-PAC1-EYFP；基因测序鉴定正确后将改进后新型的四环素调节元件载体pTet-on advanced和反应元件载体pTRE-PAC1-EYFP依次转入CHO细胞中；遗传霉素G418和潮霉素(Hygromycin)依次筛选含有两个元件的阳性克隆PAC1-Tet-CHO，使用梯度浓度四环素衍生物强力霉素Dox诱导PAC1-EYFP表达，48h后荧光观察及Westernblot检测PAC1表达水平，并通过检测不同表达水平PAC1-EYFP的细胞增殖活性和抗缺血清诱导凋亡活性及相关指标，包括胞内第二信使cAMP基础水平，抗凋亡蛋白Bcl-2（B celllymphoma/leukemia-2）的表达水平与凋亡蛋白Caspase-3的活性等，尝试揭示PAC1不同表达水平与其所介导的细胞增殖活性和抗凋亡活性之间的关系。结果：本研究利用Tet-on表达调控系统，成功地构建了重组表达载体pTRE-PAC1-EYFP，并成功筛选出抗G418和抗潮霉素的细胞系PAC1-Tet-CHO。荧光检测和Westernblot结果显示，PAC1-Tet-CHO细胞系可实现Dox依赖的PAC1-EYFP可控表达、并且具有良好诱导性及传代稳定性。PAC1-Tet-CHO细胞系在传10代后仍能稳定地可控表达PAC1-EYFP。流式细胞术，ELISA以及MTT法检测不同表达水平PAC1-EYFP细胞的增殖活性和抗缺血清诱导凋亡活性及相关指标的结果均显示：在正常培养条件下，PAC1-EYFP表达水平越高，细胞增殖活性越强，具有较高的胞内cAMP水平；而在缺血清培养条件下，即没有PAC1配体激活的情况下，PAC1-EYFP表达水平高的细胞具有较高的抗凋亡活性、较高的细胞残留活性以及较高的抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平和较低的凋亡蛋白Caspase-3的活性；显示了PAC1可赋予CHO细胞其表达水平依赖的增殖活性和抗缺血清诱导凋亡活性，并且PAC1可能具有非配体依赖激活的抗凋亡固有活性。结论：本研究通过Tet-on表达调控系统成功构建了Dox依赖的PAC1可控表达系统，发现PAC1具有赋予细胞其表达水平依赖的细胞增殖活性和抗缺血清诱导凋亡的活性，并显示PAC1具有非配体依赖激活的固有活性。研究结果不仅助于阐明过表达PAC1的生理学与病理学的作用机理，而且为以PAC1为靶点的药物开发提供新的研究平台和理论依据。(本文来源于《暨南大学》期刊2014-05-01）
四环素诱导表达论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为了构建四环素(tetracycline,Tet)诱导的利用Tet-on诱导表达系统调控的Vero-TR母细胞,建立Tet诱导表达或沉默DEC1的Vero细胞系并加以鉴定。试验将表达Tet阻遏蛋白(Tet repressor protein,TetR)的pc DNA6转染至Vero细胞,通过Blasticidin筛选稳定表达TetR的阳性细胞克隆,即Vero-TetR母细胞系。将克隆有DEC1基因(CDS区的pc DNA4真核表达载体或克隆有特异性靶向DEC1基因的shRNA的p Babe-H1真核表达载体,分别转染至Vero-TR细胞,通过Zeocin或Puromycin筛选诱导表达或沉默DEC1的阳性细胞克隆,命名为Vero-DEC1和VerosiDEC1。利用Western blot检测Vero细胞中Tet诱导表达或沉默DEC1的效果。最后成功构建了Vero-TR、Vero-DEC1和Vero-siDEC1的稳定细胞系,Western blot结果显示DEC1能够在Tet的调控下有效表达或沉默。Vero-TR母细胞系的成功构建为建立其他宿主细胞基因表达或沉默的细胞系提供了重要材料,Vero-DEC1和Vero-siDEC1细胞系的成功构建为研究DEC1在正常或感染等应激情况下的生物学功能奠定了基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
四环素诱导表达论文参考文献
[1].尚冰清,周丹,朱宏,刘昱,郭丽丽.hsp90α基因四环素诱导调控表达质粒的构建及功能验证[J].中西医结合心血管病电子杂志.2018
[2].郇文彬,明鑫,鲍晨沂,洪涛,JUNG,Yong-Sam.四环素诱导调控DEC1表达的Vero细胞系的构建及鉴定[J].畜牧与兽医.2017
[3].虞欣璐.Hnf1β和Foxa3四环素诱导型表达载体介导小鼠胚胎成纤维细胞转分化获得肝干细胞及其相关分子机制[D].第二军医大学.2017
[4].罗婉月,李天明,于莹,许湄雪,仪宏.Ketogulonigeniumvulgare四环素诱导表达穿梭质粒的构建[J].中国生物工程杂志.2015
[5].张力,刘超,周昕,谢英,刘树锋.四环素诱导肝脏特异表达绿色荧光蛋白转基因斑马鱼模型建立[J].中国实验动物学报.2015
[6].吴亮,薛兰兰,王晓,吴腊梅,姜旭淦.用四环素诱导调控表达系统构建弓形虫脂肪酸合成酶FABZ缺陷株[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志.2014
[7].郑刚,宋晗,沈学锋,骆文静,陈景元.四环素可诱导铜转运体1高表达细胞系的构建及其在脉络丛铜代谢研究中的作用[C].中国毒理学会第四届中青年学者科技论坛论文集.2014
[8].李建,宁静,陈西锐,宋成艳,雷安民.小鼠H1foo基因四环素诱导表达系统的构建与表达[J].畜牧兽医学报.2014
[9].李建.H1foo基因在小鼠卵母细胞中的表达及H1foo基因四环素诱导表达载体的构建[D].西北农林科技大学.2014
[10].李梅.B族G蛋白偶联受体PAC1四环素诱导可控表达系统的构建及应用[D].暨南大学.2014