病毒包装论文-王世雄,乔健英,刘雪雪,曹相玫

病毒包装论文-王世雄,乔健英,刘雪雪,曹相玫

导读:本文包含了病毒包装论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:异柠檬酸脱氢酶,突变型,野生型,肿瘤

病毒包装论文文献综述

王世雄,乔健英,刘雪雪,曹相玫[1](2019)在《IDH2野生型/突变型基因慢病毒包装及鉴定研究》一文中研究指出目的构建异柠檬酸脱氢酶2(IDH2)野生型/突变型基因慢病毒载体。方法构建IDH2野生型、突变型质粒,采用聚合酶链反应(PCR)进行鉴定;对感染293T细胞,测定病毒滴度;对感染HEK293细胞,观察感染效率。结果 PCR鉴定结果显示,2组重组质粒在1.0~2.0kb间各出现一条明显扩增带,片段大小与IDH2目的片段大小一致(1 359bp)。对感染293T细胞观察发现,48h后绿色荧光的强度和范围明显增加;病毒滴度为:1.0×108 TU/mL。感染HEK293细胞的效率在90%以上。结论 IDH2野生型和突变型慢病毒构建成功,能够高效地感染细胞。(本文来源于《现代医药卫生》期刊2019年19期)

周畅,许常青,许方玮,方圆,陈伟[2](2019)在《KSHV K15P及其突变体的慢病毒包装与稳定细胞株的筛选及其对内皮细胞增殖迁移的影响》一文中研究指出目的包装包含卡波肉瘤相关疱疹病毒(KSHV) K15P及其突变体K15P(YF)基因的慢病毒颗粒,并对此基因在EA.hy926细胞内稳定表达进行研究。方法通过PCR方法扩增获得KSHV K15P、K15P(YF)基因片段,使用限制性内切酶Not I与BamH I酶切和TA克隆法构建T载体与慢病毒表达载体pHAGE-CMV-MCS-K15P-Puro、pHAGE-CMV-MCS-K15P(YF)-Puro,通过lip2000将构建好的慢病毒表达载体与两种辅助包装质粒PSPAX2和pMD2.g共转染HEK 293T细胞,48 h后收集慢病毒。慢病毒感染EA.hy926细胞并通过嘌呤霉素筛选稳定表达株,Western blot检测K15P与K15P(YF)蛋白的表达。Transwell与CCK8实验检测K15P对内皮细胞的增殖迁移影响。结果成功构建慢病毒表达载体,筛选出稳定表达K15P、K15P(YF)蛋白的EA.hy926细胞。在EA.hy926细胞Transwell迁移实验中,与空载体组和K15P突变体组(0.98±0.23)比较, K15P组(2.25±0. 15)的EA. hy926细胞的迁移能力明显增强(P <0. 01),叁组细胞迁移量差异有统计学意义(F=113. 5,P <0. 01);CCK8增殖活性实验中,与空载体组和K15P(YF)组(109. 23±12. 58)比较,K15P组(138. 69±7. 47)的EA. hy926细胞的增殖能力明显增强(P <0. 01),叁组细胞增殖活性差异有统计学意义(F=40. 78,P <0. 01)。结论 K15P蛋白增强了内皮细胞的增殖与迁移,而K15P(YF)突变体的促进细胞增殖迁移能力减弱,提示K15P蛋白可能在KS的发生发展中参与重要作用。(本文来源于《安徽医科大学学报》期刊2019年11期)

[3](2019)在《我国专家首次揭示人类疱疹病毒基因组包装关键机制》一文中研究指出近日,中国科大合肥微尺度物质科学国家研究中心、生命科学学院刘云涛博士、毕国强教授与合作者利用冷冻电镜首次解析了人类疱疹病毒基因组包装的关键机制以及病毒的DNA基因组结构,有助于预防和控制疱疹病毒引发的多种疾病,并有望改造疱疹病毒用于靶向治疗。该研究论文于5月30日在线发表于《自然》杂志。(本文来源于《上海医药》期刊2019年13期)

贺小英,荆乾鸽,姜欣颖,袁婷,吴宪[4](2019)在《端粒酶基因的腺病毒包装条件优化及其活性功能验证》一文中研究指出【目的】构建携带人类端粒酶催化亚基基因(hTERT)的腺病毒载体并优化其包装条件,为进一步探究端粒酶与细胞重编程调控间的作用机理提供参考依据。【方法】利用腺病毒载体pAdEasy-1构建携带hTERT基因的重组腺病毒载体,分别采用脂质体法和电转法及不同浓度胎牛血清在HKE293A细胞中进行包装,筛选出最佳病毒包装条件,收集重组腺病毒rAd-hTERT并体外感染小鼠胎儿成纤维细胞,验证重组腺病毒rAd-hTERT的活性功能。【结果】以腺病毒载体pAdEasy-1为骨架质粒,成功构建获得携带hTERT基因的重组腺病毒载体(pAd-hTERT),其最佳病毒包装条件是采用脂质体法结合15%胎牛血清,此条件下收集获得的病毒滴度最高(1×1011IFU/mL)。以携带hTERT基因的腺病毒rAd-h TERT感染小鼠胎儿成纤维细胞72 h后,可扩增出片段大小约3450 bp的目的基因条带,即hTERT基因在小鼠胎儿成纤维细胞中成功表达。【结论】采用脂质体法结合15%胎牛血清包装获得的携带hTERT基因重组腺病毒具有较高病毒滴度,感染小鼠胎儿成纤维细胞能成功表达hTERT基因,进一步证实端粒酶具有蛋白功能的生物学活性。(本文来源于《南方农业学报》期刊2019年06期)

桂运安[5](2019)在《科学家发现人类疱疹病毒基因组包装关键机制》一文中研究指出本报讯( 桂运安)5月30日,国际顶级期刊《自然》在线发表了中国科学技术大学科学家刘云涛、毕国强与合作者的研究论文,他们利用冷冻电镜首次解析了人类疱疹病毒基因组包装的关键机制以及病毒的DNA基因组结构,有助于预防和控制疱疹病毒引发的多种疾病,并有望改(本文来源于《安徽日报》期刊2019-06-06)

吴长锋[6](2019)在《人类疱疹病毒基因组包装关键机制揭示》一文中研究指出科技日报讯 (吴长锋)从中国科大获悉,该校生命科学学院刘云涛博士、毕国强教授与合作者合作,利用冷冻电镜首次解析了人类疱疹病毒基因组包装的关键机制以及病毒的DNA基因组结构。近日《自然》杂志在线发表了该项成果。疱疹病毒是一类在自然界广泛存(本文来源于《科技日报》期刊2019-06-03)

王磊,王海涵[7](2019)在《我国科学家首次揭示人类疱疹病毒基因组包装关键机制》一文中研究指出本报讯(中国青年报·中青在线 王磊 王海涵)近日从中国科学技术大学获悉,中国科大合肥微尺度物质科学国家研究中心、生命科学学院刘云涛博士、毕国强教授与合作者利用冷冻电镜首次解析了人类疱疹病毒基因组包装的关键机制以及病毒的DNA基因组结构,有助于预防(本文来源于《中国青年报》期刊2019-06-03)

杨保国,姚琼[8](2019)在《疱疹病毒基因组包装关键机制被揭示》一文中研究指出本报讯(杨保国 通讯员姚琼)5月30日,《自然》杂志在线发表了中国科大合肥微尺度物质科学国家研究中心、生命科学学院刘云涛博士、毕国强教授与合作者的研究论文。他们利用冷冻电镜首次解析了人类疱疹病毒基因组包装的关键机制及病毒的DNA基因组结构,有助于预防(本文来源于《中国科学报》期刊2019-05-31)

徐靖[9](2019)在《中科大揭示疱疹病毒基因组包装关键机制》一文中研究指出本报合肥5月30日电 (徐靖)近日,中国科学技术大学合肥微尺度物质科学国家研究中心、生命科学学院刘云涛博士和毕国强教授等科研人员利用冷冻电镜首次解析了人类疱疹病毒基因组包装的关键机制以及病毒的DNA基因组结构,有助于预防和控制疱疹病毒引发的多种疾病,(本文来源于《人民日报》期刊2019-05-31)

张明英,袁佳佳,张晓茹,邢文,白洁[10](2019)在《不同转染方法包装慢病毒感染人白血病细胞的比较研究》一文中研究指出白血病研究中常需要在细胞中进行慢病毒介导的基因过表达或者敲降,但慢病毒生产方法存在成本高、对悬浮细胞感染效率低等问题。为解决这些问题,通过比较利用线性聚乙烯亚胺(linear polyethylenimine,LPEI)和脂质体两种转染方法包装成的慢病毒对白血病细胞的感染能力,以及感染后对细胞生物学特性的影响,确定不同转染方法在白血病实验研究中的有效性和安全性。在相同条件下利用LPEI和脂质体产生慢病毒颗粒,比较发现用LPEI转染法包装的慢病毒滴度略高。根据病毒感染复数和慢病毒滴度分别感染3种白血病细胞系(K562、HL60和HEL),两种方法间感染白血病细胞系效率无差别。在感染不同细胞系时两种不同转染方法对细胞增殖略有影响,但对其他生物学特性比如细胞诱导分化和克隆形成能力的影响是一致的。因此在白血病相关研究中,转染试剂LPEI包装慢病毒方法可以成为更加经济实用的选择。(本文来源于《生物技术进展》期刊2019年03期)

病毒包装论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的包装包含卡波肉瘤相关疱疹病毒(KSHV) K15P及其突变体K15P(YF)基因的慢病毒颗粒,并对此基因在EA.hy926细胞内稳定表达进行研究。方法通过PCR方法扩增获得KSHV K15P、K15P(YF)基因片段,使用限制性内切酶Not I与BamH I酶切和TA克隆法构建T载体与慢病毒表达载体pHAGE-CMV-MCS-K15P-Puro、pHAGE-CMV-MCS-K15P(YF)-Puro,通过lip2000将构建好的慢病毒表达载体与两种辅助包装质粒PSPAX2和pMD2.g共转染HEK 293T细胞,48 h后收集慢病毒。慢病毒感染EA.hy926细胞并通过嘌呤霉素筛选稳定表达株,Western blot检测K15P与K15P(YF)蛋白的表达。Transwell与CCK8实验检测K15P对内皮细胞的增殖迁移影响。结果成功构建慢病毒表达载体,筛选出稳定表达K15P、K15P(YF)蛋白的EA.hy926细胞。在EA.hy926细胞Transwell迁移实验中,与空载体组和K15P突变体组(0.98±0.23)比较, K15P组(2.25±0. 15)的EA. hy926细胞的迁移能力明显增强(P <0. 01),叁组细胞迁移量差异有统计学意义(F=113. 5,P <0. 01);CCK8增殖活性实验中,与空载体组和K15P(YF)组(109. 23±12. 58)比较,K15P组(138. 69±7. 47)的EA. hy926细胞的增殖能力明显增强(P <0. 01),叁组细胞增殖活性差异有统计学意义(F=40. 78,P <0. 01)。结论 K15P蛋白增强了内皮细胞的增殖与迁移,而K15P(YF)突变体的促进细胞增殖迁移能力减弱,提示K15P蛋白可能在KS的发生发展中参与重要作用。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

病毒包装论文参考文献

[1].王世雄,乔健英,刘雪雪,曹相玫.IDH2野生型/突变型基因慢病毒包装及鉴定研究[J].现代医药卫生.2019

[2].周畅,许常青,许方玮,方圆,陈伟.KSHVK15P及其突变体的慢病毒包装与稳定细胞株的筛选及其对内皮细胞增殖迁移的影响[J].安徽医科大学学报.2019

[3]..我国专家首次揭示人类疱疹病毒基因组包装关键机制[J].上海医药.2019

[4].贺小英,荆乾鸽,姜欣颖,袁婷,吴宪.端粒酶基因的腺病毒包装条件优化及其活性功能验证[J].南方农业学报.2019

[5].桂运安.科学家发现人类疱疹病毒基因组包装关键机制[N].安徽日报.2019

[6].吴长锋.人类疱疹病毒基因组包装关键机制揭示[N].科技日报.2019

[7].王磊,王海涵.我国科学家首次揭示人类疱疹病毒基因组包装关键机制[N].中国青年报.2019

[8].杨保国,姚琼.疱疹病毒基因组包装关键机制被揭示[N].中国科学报.2019

[9].徐靖.中科大揭示疱疹病毒基因组包装关键机制[N].人民日报.2019

[10].张明英,袁佳佳,张晓茹,邢文,白洁.不同转染方法包装慢病毒感染人白血病细胞的比较研究[J].生物技术进展.2019

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