咖啡酰辅酶甲基转移酶论文-朱胜琪,徐德宝,王永鑫,冯凯,刘洁霞

咖啡酰辅酶甲基转移酶论文-朱胜琪,徐德宝,王永鑫,冯凯,刘洁霞

导读:本文包含了咖啡酰辅酶甲基转移酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:水芹,OjCCoAOMT基因,序列分析,多重比对

咖啡酰辅酶甲基转移酶论文文献综述

朱胜琪,徐德宝,王永鑫,冯凯,刘洁霞[1](2019)在《水芹咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶基因的克隆与表达特性分析》一文中研究指出[目的]本文旨在研究水芹咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶基因(OjCCoAOMT)的序列及其表达特性,了解该基因在水芹木质素代谢中的作用。[方法]利用RT-PCR技术从水芹中克隆OjCCoAOMT基因,用生物信息学方法对获得的序列进行分析,并利用实时荧光定量PCR技术研究该基因在水芹不同组织以及不同贮藏条件下的表达。[结果]序列分析结果表明:OjCCoAOMT基因包含1个长度为726 bp的开放阅读框(ORF),编码241个氨基酸,蛋白相对分子质量为27.111×10~3,理论等电点为5.38。OjCCoAOMT蛋白属于疏水性蛋白,无序化比例为12.45%,空间结构主要由8个α-螺旋和7个β-折迭组成。多重比对与系统树分析结果表明:OjCCoAOMT蛋白与同科植物欧芹的进化关系最近。实时荧光定量PCR显示,在‘八卦洲水芹’和‘南选八卦洲紫水芹’的叶片及叶柄中OjCCoAOMT基因的表达量差异显着。在室温(25℃)、低温(4℃)和室温黑暗(25℃) 3种贮藏条件下OjCCoAOMT基因表达量差异较大,低温(4℃)下表达量最高。2个品种的基因表达量也具有显着差异。[结论]OjCCoAOMT蛋白有较高的保守性。OjCCoAOMT基因在水芹中的表达具有明显的组织特异性和材料差异性,同时在低温(4℃)条件下表达量最高。(本文来源于《南京农业大学学报》期刊2019年01期)

王宇光,吕笑言,季美超,宫世龙,李海英[2](2018)在《甜菜M14品系咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶提高植物抗逆性功能分析》一文中研究指出为研究甜菜M14品系咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶基因(BvM14-CCoAOMT)的功能,本研究采用叶盘法将M14品系咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶基因转化烟草,获得T1代转基因植株,而后以野生型及转空载体植株为对照,分别在对照、100 mmol/L NaCl、200 mmol/L NaCl、100 mmol/L甘露醇及200 mmol/L甘露醇的培养条件下进行植株的抗逆性分析。研究发现在100、200 mmol/L NaCl盐胁迫条件下,转基因植株的鲜重、木质素含量以及叶绿素含量均显着高于对照植株。此外转基因植株在100 mmol/L甘露醇胁迫条件下根长和叶绿素含量显着高于对照植株,根长和叶绿素含量分别为0.68 cm和0.31 mg/(g·鲜重),而野生型植株的根长和叶绿素含量分别为0.51 cm和0.18 mg/(g·鲜重)。转M14品系咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶基因烟草植株对盐和干旱胁迫具有较强抗性,这为进一步深入研究M14品系咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶基因功能奠定重要基础。(本文来源于《中国农学通报》期刊2018年34期)

Yue,ZHANG,Hai-peng,LV,Cheng-ying,MA,Li,GUO,Jun-feng,TAN[3](2015)在《茶树中咖啡酰辅酶A氧甲基转移酶的基因克隆及其催化活性研究(英文)》一文中研究指出目的:从茶树中克隆一种可以催化表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)生成甲基化EGCG的酶——咖啡酰辅酶A氧甲基转移酶(CCo AOMT),实现甲基化EGCG的酶学合成,为甲基化EGCG的进一步开发利用提供理论依据和技术指导。创新点:本研究首次从茶树中克隆了一条CCo AOMT基因组序列;分析了CCo AOMT基因在不同茶树品种和不同成熟度茶鲜叶中的基因表达规律;证明了CCo AOMT具有催化合成甲基化EGCG的生物活性。方法:采用聚合酶链式反应(PCR)和序列分析获得CCo AOMT的编码序列和基因组序列;采用高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱技术(HPLC-QTOF-MS)分析酶促反应生成的甲基化EGCG产物(图4);采用实时荧光定量PCR分析CCo AOMT基因的表达差异(图5)。结论:本研究从茶树中克隆了CCo AOMT基因的编码序列(738 bp)和基因组序列(2678 bp),明确了该基因具有4个内含子和5个外显子;揭示了CCo AOMT可以催化EGCG生成EGCG4"Me、EGCG3"Me和EGCG3'Me等多种甲基化产物;证明了CCo AOMT具有催化生成甲基化EGCG的活性;并发现该基因的表达量高低与茶鲜叶的成熟度呈正相关关系。(本文来源于《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》期刊2015年02期)

王华美,于延冲,付春祥,周功克,高欢欢[4](2014)在《木质素合成关键酶咖啡酰辅酶A氧甲基转移酶的研究进展》一文中研究指出木质素是植物次生细胞壁的主要组分,其合成涉及多个酶的参与。其中咖啡酰辅酶A氧甲基转移酶(caffeoyl-CoA 3-O-methyltransferase,CCoAOMT)是植物木质素合成中的一个关键酶,能催化咖啡酰辅酶A(caffeoyl-CoA)生成阿魏酰辅酶A(feruloyl-CoA),主要参与G-木质素的合成。本文综述了CCoAOMT的特征、功能及其在木质素生物合成中的调控作用,展望了该基因的研究方法及其在生产中的应用。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2014年02期)

张岗,胡本祥,张大为,陈伟,郭顺星[5](2014)在《铁皮石斛咖啡酰辅酶A氧甲基转移酶基因的分离与表达分析》一文中研究指出目的分离珍稀濒危药用植物铁皮石斛咖啡酰辅酶A氧甲基转移酶(caffeoyl CoA O-methyltransferase,CCoAOMT)基因(DoOMT)并进行生物信息学和表达模式分析。方法采用RT-PCR和RACE技术获取基因cDNA全长;利用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域和叁维建模等分子特性;用DNASTAR 6.0和MEGA 4.0分别进行氨基酸多序列比对和进化关系分析;借助实时定量PCR检测基因表达模式。结果分离到DoOMT(GenBank注册号KF876839),cDNA全长1 005 bp,编码一条由239个氨基酸组成的多肽,相对分子质量为2.708×104,等电点5.03;DoOMT蛋白不含跨膜域和信号肽,具有氧甲基转移酶family 3、甲基转移酶的保守结构域(13~238、31~238)和8个保守基序;DoOMT与植物CCoAOMTs蛋白一致性为49.4%~78.7%,所在分支隶属于CCoAOMTs分子进化的1b类群,与单子叶植物香草亲缘关系最近;DoOMT基因转录本在石斛根、茎、叶器官中为组成型表达,茎中相对表达量较高,为叶中的4.562倍,根和叶中无显着差异。结论铁皮石斛CCoAOMT基因DoOMT的分子特征为进一步研究其在铁皮石斛次生代谢和生长发育过程中的作用奠定基础。(本文来源于《中草药》期刊2014年08期)

宫世龙[6](2013)在《甜菜M14品系咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶基因功能的研究》一文中研究指出甜菜M14品系是二倍体栽培甜菜与野生白花甜菜杂交及回交得到附加有野生白花甜菜第9号染色体的单体附加系。经鉴定甜菜M14品系具有耐盐、耐寒、耐旱、无融合生殖等抗性,推测甜菜M14品系所表现出来的优良性状可能与第9号染色体有关。前期的工作中,实验室以甜菜M14品系为材料,栽培甜菜为对照,共获得了差异表达的ESTs共298个,差异表达蛋白71个。通过比对得到8在蛋白质水平及转录组水平均差异表达的蛋白质。本试验研究的甜菜M14品系咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶基因(3vM14-CCoAOMT)就是其中之一。前期工作表明,与二倍体栽培甜菜相比,该蛋白在甜菜M14品系中上调表达2.06倍。咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶(CCoAOMT)是木质素合成的关键甲基转移酶之一,对植物的生长发育具有重要的作用,多数的报道称CCoAOMT基因与植物的防御机制有关,随后发现CCoAOMT基因的表达同样受环境因子的诱导,植物在干旱和高盐胁迫下,有CCoAOMT基因表达增强的现象。本试验是基于实验室的前期工作基础之上,克隆出甜菜M14品系BvM14-CCoAOMT基因,对该基因在提高木质素含量及对非生物胁迫抗性方面进行深入研究。首先,利用RACE技术获得了BvM14-CCoAOMT基因cDNA全长,共计1107bp。通过ORF分析,该序列包含最大完整的读码框为714bp,编码237个氨基酸,序列分析表示该蛋白有多个SAM结合位点及甲基转移酶家族高度保守残基;通过实时荧光定量PCR对BvM14-CCoAOMT基因在甜菜M14品系根、茎、叶、花组织中的表达情况进行了分析,结果显示该基因在植物体的各个组织中均有表达,并且在茎中的表达量最高。其次,构建了BvM14-CCoAOMT基因的原核表达载体,在0.5mmol/L IPTG、37℃的诱导条件下BvM14-CCoAOMT蛋白的表达量最大;Western Blot结果呈现阳性,说明BvM14-CCoAOMT融合蛋白能够正确表达。以转空质粒的菌株作为对照,对转BvM14-CCoAOMT基因的BL21(DE3)菌体蛋白进行酶活力测定,说明菌体蛋白具有CCoAOMT酶活性。再次,构建了pCAMBIA1300-BvM14-CCoAOMT-gpf融合表达载体,在烟草瞬时表达,亚细胞定位结果显示BVM14-CCoAOMT-gfp融合蛋白定位在烟草细胞的细胞质中。最后,构建了BvM14-CCoAOMT基因的真核表达载体,并转化到模式植物烟草当中使其过量表达,对To代转基因植株进行了木质素含量的测定及底物酶活力的测定。对T1代阳性转基因幼苗在NaCl和甘露醇胁迫下对幼苗的表型进行测定。生理指标方面进行了叶绿素含量测定、质膜透性测定、木质素含量的测定及酶活力的测定,结果显示转BvM14-CCoAOMT基因的植株要比野生型植株好的多。以上结果证实甜菜M14品系BvM14-CCoAOMT基因的过量表达能够提高烟草对干旱、高盐胁迫的抗性。(本文来源于《黑龙江大学》期刊2013-05-08)

朱树亮[7](2012)在《维吉尼亚链霉菌IBL-14中咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶的基因功能鉴定》一文中研究指出维吉尼亚链霉菌IBL-14(S. virginiae IBL-14)是本实验分离筛选出的一株能有效降解薯蓣皂素等甾体化合物的新型菌株。前期的研究工作,表明其代谢途径中有2个新颖的反应,C25位叔碳羟基化和C6位的甲氧基化。本课题致力于研究C6位的甲氧基化反应。通过对维吉尼亚链霉菌IBL-14的全基因测序结果的分析和筛选,推测IBL-14中的咖啡酰辅酶A氧甲基转移酶可能参与C6位的甲氧基化反应。因此研究该系列的酶,对S. virginiae IBL-14代谢薯蓣皂素途径中C6位甲氧基化反应机理的研究有重要意义。本课题筛选了IBL-14中的叁种咖啡酰辅酶A氧甲基转移酶基因进行研究,取得的成果如下:(1)成功构建了宿主为Escherichia coli JM109(DE3)叁株咖啡酰辅酶A氧甲基转移酶重组菌株,并通过投加底物咖啡酸,对发酵产物的分析鉴定了其活性和功能。(2)对其酶学性质进行了生物信息学分析,氨基酸组成,等电点和分子量,疏水性,二级和空间结构的预测以及构建了系统进化树。(3)对模拟得到的结构进行分子动力学模拟优化。综上所述,本论文研究了S. virginiae IBL-14中的咖啡酰辅酶A氧甲基转移酶的酶学性质,致力于揭示C6位的甲氧基化反应作用机理,(本文来源于《安徽大学》期刊2012-04-01)

陈虎,何新华,罗聪,杨丽涛,张保青[8](2012)在《龙眼咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶(DLCCoAOMT)基因的克隆和表达分析》一文中研究指出【目的】克隆龙眼咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶(DLCCoAOMT)基因,分析其序列特征和在低温胁迫下不同组织中的表达情况并进行原核表达研究。【方法】采用RT-PCR和RACE技术从龙眼叶片中克隆DLCCoAOMT基因,用生物信息学方法对获得的氨基酸序列进行分析,利用荧光定量PCR研究DLCCoAOMT基因在不同组织中的表达。【结果】克隆得到DLCCoAOMT基因,GenBank登录号为JN093023。该cDNA全长993 bp,具有1个744 bp的完整开放阅读框(ORF),编码247个氨基酸。序列分析表明,DLCCoAOMT编码的氨基酸序列与其它植物的CCoAOMT蛋白有很高的相似性。系统进化树分析显示,龙眼DLCCoAOMT与桦木属的CCoAOMT蛋白亲缘关系较近。利用荧光定量技术进行组织表达模式分析发现,DLCCoAOMT基因在根、茎、叶中均有表达。总体上表达量在根和茎中较多,叶中较少,随着低温胁迫时间延长,DLCCoAOMT基因在各组织的表达量也发生变化。原核表达结果表明,DLCCoAOMT基因在大肠杆菌中获得表达。【结论】从龙眼中克隆到咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶基因,该基因可能参与调控低温胁迫。(本文来源于《中国农业科学》期刊2012年01期)

张烨[9](2011)在《柠条锦鸡儿咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶基因cDNA和gDNA全长克隆及生物信息学分析》一文中研究指出木质素是植物次生细胞壁的主要组成成分,它是一种在地球上含量丰富程度仅次于纤维素的高分子有机聚合物。木质素对植物本身和人类的生产、生活都有着重要的影响。咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶(CCoAOMT)是依赖S-腺苷甲硫氨酸(SAM)的甲基转移酶,在木质素生物合成过程中起到了重要的催化作用。本研究利用RT-PCR和RACE技术首次从柠条锦鸡儿中克隆得到了两个编码CCoAOMT的cDNA序列和一个gDNA全序列,两个cDNA序列分别命名为CkCCoAOMT-C和CkCCoAOMT-G,推测它们都属于柠条锦鸡儿CCoAOMT基因家族,gDNA序列包含5个外显子和4个内含子。生物信息学分析结果表明:CCoAOMT-C与CCoAOMT-G都应属于亲水性蛋白,其分子量分别约为28,012.12D和27,970.08D,理论等电点分别为5.55和5.54;两个蛋白都由247个氨基酸残基组成,但在第125和134位氨基酸残基上存在差异,同样两者的二级结构和叁级结构也存在不同程度的差异。CkCCoAOMT-C和CkCCoAOMT-G都具有Methyltransf_3结构域和SAM结合位点,因此它们属于O-甲基转移酶家族。针对CkCCoAOMT-C和CkCCoAOMT-G两个基因构建过表达载体并转化野生型拟南芥,经筛选分别得到3个CkCCoAOMT-C转基因纯合体株系和6个CkCCoAOMT-G转基因纯合体株系。利用半定量RT-PCR检测转基因纯合体植株中目的基因表达量,发现所有株系中的目的基因均有不同程度的表达。(本文来源于《内蒙古农业大学》期刊2011-05-01)

倪志勇,吕萌,范玲[10](2010)在《棉花咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶基因的克隆及特征分析》一文中研究指出根据棉花纤维特异表达cDNA文库得到的咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶基因EST序列设计引物,采用RT-PCR技术从棉花中克隆了一个CCoAOMT基因,命名为GhCCoAOMT2。GhCCoAOMT2基因cDNA(GenBank登录号为FJ376606)具有一个747 bp的开放阅读框,5′非编码区为12 bp,3′非编码区为243 bp,编码248个氨基酸,预测分子量约为28.023 kD,等电点为5.39。GhCCoAOMT2基因组序列长度为1 442 bp,包含4个外显子和3个内含子。氨基酸同源分析发现,GhCCoAOMT2与来自毛白杨、烟草和苎麻的CCoAOMT同源性较高。半定量RT-PCR检测表明,GhCCoAOMT2基因在棉花各个组织中都有表达,其中茎部的表达量最高。原核表达分析表明,最佳诱导表达条件为0.2 mmol/LIPTG在37℃下诱导6 h。(本文来源于《西北植物学报》期刊2010年06期)

咖啡酰辅酶甲基转移酶论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

为研究甜菜M14品系咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶基因(BvM14-CCoAOMT)的功能,本研究采用叶盘法将M14品系咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶基因转化烟草,获得T1代转基因植株,而后以野生型及转空载体植株为对照,分别在对照、100 mmol/L NaCl、200 mmol/L NaCl、100 mmol/L甘露醇及200 mmol/L甘露醇的培养条件下进行植株的抗逆性分析。研究发现在100、200 mmol/L NaCl盐胁迫条件下,转基因植株的鲜重、木质素含量以及叶绿素含量均显着高于对照植株。此外转基因植株在100 mmol/L甘露醇胁迫条件下根长和叶绿素含量显着高于对照植株,根长和叶绿素含量分别为0.68 cm和0.31 mg/(g·鲜重),而野生型植株的根长和叶绿素含量分别为0.51 cm和0.18 mg/(g·鲜重)。转M14品系咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶基因烟草植株对盐和干旱胁迫具有较强抗性,这为进一步深入研究M14品系咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶基因功能奠定重要基础。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

咖啡酰辅酶甲基转移酶论文参考文献

[1].朱胜琪,徐德宝,王永鑫,冯凯,刘洁霞.水芹咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶基因的克隆与表达特性分析[J].南京农业大学学报.2019

[2].王宇光,吕笑言,季美超,宫世龙,李海英.甜菜M14品系咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶提高植物抗逆性功能分析[J].中国农学通报.2018

[3].Yue,ZHANG,Hai-peng,LV,Cheng-ying,MA,Li,GUO,Jun-feng,TAN.茶树中咖啡酰辅酶A氧甲基转移酶的基因克隆及其催化活性研究(英文)[J].JournalofZhejiangUniversity-ScienceB(Biomedicine&Biotechnology).2015

[4].王华美,于延冲,付春祥,周功克,高欢欢.木质素合成关键酶咖啡酰辅酶A氧甲基转移酶的研究进展[J].基因组学与应用生物学.2014

[5].张岗,胡本祥,张大为,陈伟,郭顺星.铁皮石斛咖啡酰辅酶A氧甲基转移酶基因的分离与表达分析[J].中草药.2014

[6].宫世龙.甜菜M14品系咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶基因功能的研究[D].黑龙江大学.2013

[7].朱树亮.维吉尼亚链霉菌IBL-14中咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶的基因功能鉴定[D].安徽大学.2012

[8].陈虎,何新华,罗聪,杨丽涛,张保青.龙眼咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶(DLCCoAOMT)基因的克隆和表达分析[J].中国农业科学.2012

[9].张烨.柠条锦鸡儿咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶基因cDNA和gDNA全长克隆及生物信息学分析[D].内蒙古农业大学.2011

[10].倪志勇,吕萌,范玲.棉花咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶基因的克隆及特征分析[J].西北植物学报.2010

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