导读:本文包含了位点特异性表达载体论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:低温诱导,wcs120启动子,CinH,RS2位点特异性重组,选择标记基因
位点特异性表达载体论文文献综述
王梅,徐广博,赵惠贤,刘香利[1]（2016）在《低温诱导的位点特异性重组植物表达载体构建及小麦转化》一文中研究指出选择标记基因的剔除是转基因植物商品化种植的重要基础。为建立小麦(Triticum aestivum)低温诱导的位点特异性标记基因删除体系,本研究以小麦西农928基因组DNA为模板,通过PCR扩增获得小麦低温诱导表达wcs120启动子,序列分析表明,该序列与Gen Bank中序列AF031235相比有一段21 bp插入,与AY493570.1序列完全一致。以含有Cin H/RS2单向位点特异性重组系统的植物表达载体p XL5513为框架,成功构建了包含有抗旱相关性基因PYL5(pyrabactin-resistance like gene 5)表达框的低温诱导的位点特异性重组植物表达载体p XL5513-fwcs-RDA;并对小麦绵阳19(M19)幼胚愈伤组织进行基因枪转化,1 745块愈伤组织经筛选分化共获得9株转基因植株,经PYL5基因特异引物PCR检测,6株为阳性植株,低温春化处理后经删除引物PCR检测,6株阳性植株初步证实成功删除了选择标记基因。本研究为利用低温诱导的位点特异性重组系统进行小麦无标记基因转化奠定了基础。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2016年04期）
徐广博[2]（2014）在《诱导删除位点特异性重组植物表达载体构建及其遗传转化》一文中研究指出在植物遗传转化中，为了从大量非转化细胞中获得转化体，选择标记基因起着非常重要的作用。随着越来越多的转基因植物进入环境释放或商品化种植，转基因作物中选择标记基因对生态环境和食品安全的风险问题日益成为国内、国际争议的焦点。因此，遗传转化后如何有效地删除选择基因已成为作物基因工程改良的关键。在标记基因删除的方法中，诱导型位点特异性重组更能节省时间，简化操作，更快的获得无标记基因的转基因植株。本研究克隆了热激启动子hsp18.2和低温诱导的启动子wcs120，构建了诱导表达的CinH/RS2位点特异性重组植物表达载体，并对烟草SR1和小麦绵阳19进行了转化，获得以下的实验结果：（1）热诱导的位点特异性重组植物表达载体构建及烟草转化克隆了拟南芥热激启动子hsp18.2，构建了由热激启动子诱导表达的CinH/RS2位点特异性重组系统植物表达载体pXL5513-hsp，并通过农杆菌转化烟草SR1，成功获得了12株转基因阳性植株，为进一步研究热诱导的CinH/RS2位点特异性重组系统在植物遗传转化中的应用奠定了基础。（2）低温诱导的位点特异性重组植物表达载体的构建及小麦幼胚愈伤组织的转化从小麦西农928中克隆出低温诱导启动子wcs120，并构建由wcs120启动子诱导的CinH/RS2位点特异性重组系统植物表达载体，通过带有（PYR1-LIKE5）PYL5抗旱基因的表达框RD29A-PYL5-nosT的亚克隆，成功构建了带有目的RD29A-PYL5-nosT表达框的低温诱导位点特异性重组植物表达载体；通过基因枪转化小麦绵阳19幼胚愈伤组织，获得了6株带有PYL5基因的转基因阳性植株，为进一步获得无标记基因的转基因小麦奠定了基础。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2014-05-01）
徐广博,李政,赵惠贤,刘香利,赵洁[3]（2013）在《热诱导的位点特异性重组植物表达载体构建及烟草转化》一文中研究指出选择标记基因安全性问题是限制转基因植物商品化种植的重要因素。为了从转基因后代中诱导性剔除选择标记基因,本研究克隆了拟南芥热激蛋白Hsp18.2基因启动子,并构建了Hsp18.2启动子诱导表达的CinH/Rs位点特异性重组删除植物表达载体。结果表明,利用农杆菌介导法进行了烟草转化,转化后的烟草经过除草剂筛选和PCR检测,得到转基因阳性植株。本研究为利用位点特异性重组建立植物无标记基因转化体系奠定了基础。(本文来源于《西南农业学报》期刊2013年05期）
位点特异性表达载体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
在植物遗传转化中，为了从大量非转化细胞中获得转化体，选择标记基因起着非常重要的作用。随着越来越多的转基因植物进入环境释放或商品化种植，转基因作物中选择标记基因对生态环境和食品安全的风险问题日益成为国内、国际争议的焦点。因此，遗传转化后如何有效地删除选择基因已成为作物基因工程改良的关键。在标记基因删除的方法中，诱导型位点特异性重组更能节省时间，简化操作，更快的获得无标记基因的转基因植株。本研究克隆了热激启动子hsp18.2和低温诱导的启动子wcs120，构建了诱导表达的CinH/RS2位点特异性重组植物表达载体，并对烟草SR1和小麦绵阳19进行了转化，获得以下的实验结果：（1）热诱导的位点特异性重组植物表达载体构建及烟草转化克隆了拟南芥热激启动子hsp18.2，构建了由热激启动子诱导表达的CinH/RS2位点特异性重组系统植物表达载体pXL5513-hsp，并通过农杆菌转化烟草SR1，成功获得了12株转基因阳性植株，为进一步研究热诱导的CinH/RS2位点特异性重组系统在植物遗传转化中的应用奠定了基础。（2）低温诱导的位点特异性重组植物表达载体的构建及小麦幼胚愈伤组织的转化从小麦西农928中克隆出低温诱导启动子wcs120，并构建由wcs120启动子诱导的CinH/RS2位点特异性重组系统植物表达载体，通过带有（PYR1-LIKE5）PYL5抗旱基因的表达框RD29A-PYL5-nosT的亚克隆，成功构建了带有目的RD29A-PYL5-nosT表达框的低温诱导位点特异性重组植物表达载体；通过基因枪转化小麦绵阳19幼胚愈伤组织，获得了6株带有PYL5基因的转基因阳性植株，为进一步获得无标记基因的转基因小麦奠定了基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
位点特异性表达载体论文参考文献
[1].王梅,徐广博,赵惠贤,刘香利.低温诱导的位点特异性重组植物表达载体构建及小麦转化[J].农业生物技术学报.2016
[2].徐广博.诱导删除位点特异性重组植物表达载体构建及其遗传转化[D].西北农林科技大学.2014
[3].徐广博,李政,赵惠贤,刘香利,赵洁.热诱导的位点特异性重组植物表达载体构建及烟草转化[J].西南农业学报.2013
标签：低温诱导; wcs120启动子; CinH; RS2位点特异性重组; 选择标记基因;