张雅星:半滑舌鳎两种leptin基因的体外重组表达和生物活性分析论文

张雅星:半滑舌鳎两种leptin基因的体外重组表达和生物活性分析论文

本文主要研究内容

作者张雅星,王滨,柳学周,徐永江,史宝,姜燕,崔爱君,张正荣,孙冉冉(2019)在《半滑舌鳎两种leptin基因的体外重组表达和生物活性分析》一文中研究指出:根据半滑舌鳎lepa和lepb编码氨基酸序列合成开放阅读框ORF肽段。利用原核表达载体pEQ30成功构建了半滑舌鳎lepa/pQE30和lepb/pQE30重组质粒,分别转化至大肠杆菌M15后,经IPTG诱导获得了N端含6个组氨酸的半滑舌鳎LepA和LepB重组蛋白。获得的重组蛋白大小均为16 ku,37°C下用0.5 mmol/L的IPTG诱导4 h后目的蛋白表达量最高,主要以包涵体形式存在。检测半滑舌鳎LepA和LepB重组蛋白浓度分别为0.3和0.25 mg/mL。Western blot免疫印迹和质谱分析表明,获得的LepA和LepB重组蛋白均具有免疫活性且序列正确。Ni2+-NTA亲和层析柱纯化可获得高纯度的半滑舌鳎LepA和LepB重组蛋白。离体孵育实验表明,获得的半滑舌鳎LepA和LepB重组蛋白能显著抑制半滑舌鳎下丘脑lepa、lepb和gnrh3 mRNA的表达水平,表明获得的重组蛋白具有明显的生物活性。研究结果可为探究leptin在半滑舌鳎生长发育中的调控机制提供重要参考。

Abstract

gen ju ban hua she ta lepahe lepbbian ma an ji suan xu lie ge cheng kai fang yue dou kuang ORFtai duan 。li yong yuan he biao da zai ti pEQ30cheng gong gou jian le ban hua she ta lepa/pQE30he lepb/pQE30chong zu zhi li ,fen bie zhuai hua zhi da chang gan jun M15hou ,jing IPTGyou dao huo de le Nduan han 6ge zu an suan de ban hua she ta LepAhe LepBchong zu dan bai 。huo de de chong zu dan bai da xiao jun wei 16 ku,37°Cxia yong 0.5 mmol/Lde IPTGyou dao 4 hhou mu de dan bai biao da liang zui gao ,zhu yao yi bao han ti xing shi cun zai 。jian ce ban hua she ta LepAhe LepBchong zu dan bai nong du fen bie wei 0.3he 0.25 mg/mL。Western blotmian yi yin ji he zhi pu fen xi biao ming ,huo de de LepAhe LepBchong zu dan bai jun ju you mian yi huo xing ju xu lie zheng que 。Ni2+-NTAqin he ceng xi zhu chun hua ke huo de gao chun du de ban hua she ta LepAhe LepBchong zu dan bai 。li ti fu yo shi yan biao ming ,huo de de ban hua she ta LepAhe LepBchong zu dan bai neng xian zhe yi zhi ban hua she ta xia qiu nao lepa、lepbhe gnrh3 mRNAde biao da shui ping ,biao ming huo de de chong zu dan bai ju you ming xian de sheng wu huo xing 。yan jiu jie guo ke wei tan jiu leptinzai ban hua she ta sheng chang fa yo zhong de diao kong ji zhi di gong chong yao can kao 。

论文参考文献

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自水产学报的张雅星,王滨,柳学周,徐永江,史宝,姜燕,崔爱君,张正荣,孙冉冉,发表于刊物水产学报2019年11期论文,是一篇关于半滑舌鳎论文,原核表达论文,生物活性论文,水产学报2019年11期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自水产学报2019年11期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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