导读:本文包含了血管化组织工程骨论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:脂肪干细胞,血管内皮细胞,联合培养,组织工程骨
血管化组织工程骨论文文献综述
王福科,张红,李彦林,刘流,何川[1]（2019）在《联合培养血管内皮细胞与脂肪干细胞构建组织工程骨异位成骨》一文中研究指出目的探讨将联合培养血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)和脂肪干细胞(adiposederived stem cells,ADSCs)的培养体系作为种子细胞的组织工程骨异位成骨能力。方法采用纤维粘连蛋白复合部分脱蛋白骨(partially deproteinised bone,PDPB)制备部分脱蛋白生物骨(partially deproteinised biologic bone,PDPBB);分离培养18周龄SD大鼠ADSCs及足月妊娠SD大鼠脐血VECs。体外构建3种组织工程骨:PDPBB+VECs(A组)、PDPBB+ADSCs(B组)、PDPBB+联合培养细胞(VECs∶ADSCs为1∶1,C组),以单纯PDPBB为对照组(D组)。细胞移植后10 d行扫描电镜观察细胞在各组支架上的黏附情况。取18周龄SD大鼠48只,随机分为A、B、C、D 4组,每组12只。分别将A、B、C、D 4种支架材料植入相应组别的大鼠股部肌袋,术后2、4、8、12周处死动物行大体观察及HE染色和Masson染色组织学观察,并取Masson染色切片行骨胶原量定量检测。结果扫描电镜观察示,PDPB材料孔隙内部相互连通;纤维粘连蛋白修饰的PDPBB表面大量片状蛋白结晶松散附着于支架表面;复合细胞联合培养10 d后,C组大量细胞与PDPBB附着,细胞相互堆积形成细胞团,多角形细胞和梭形细胞混合分布,细胞沿骨小梁生长,形成细胞层。大体观察示术后2周各组肉芽组织开始长入材料孔隙。C组自4周后材料表面逐渐产生大量白色软骨样物质,表面高低不平。至12周时,A组材料表面血管量增多,材料呈实变;B组材料表面出现少许白色软骨样物质,但材料孔隙未见明显减小;D组材料孔隙大小未见明显减小。组织学观察可见术后2周,各组间骨胶原量比较差异无统计学意义(F=2.551,P=0.088);术后4、8、12周,C组骨胶原量显着高于其余3组,B组高于D组,差异均有统计学意义(P<0.05);A组与B、D组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论联合培养VECs与ADSCs作为种子细胞构建组织工程骨的异位成骨能力最强。(本文来源于《中国修复重建外科杂志》期刊2019年10期）
吴骁伟,尹琎,韦颍昕[2]（2018）在《比格犬内皮祖细胞对组织工程骨的血管化和成骨效果》一文中研究指出目的评估比格犬内皮祖细胞(EPCs)对组织工程骨的血管化和成骨效果。方法将比格犬骨髓来源的骨髓间充质干细胞(BMSCs)和EPCs进行分离、培养、扩增,在β-磷酸叁钙(β-TCP)支架材料上进行接种。将EPCs/BMSCs/TCP、BMSCs/TCP细胞支架复合物和空白TCP分别植入比格犬下肢肌肉内,于术后3、6个月进行CT平扫,计算骨的相对CT值,并于术后6个月取材,行HE染色和免疫组织化学染色观察血管化和成骨效果。结果术后3个月,EPCs/BMSCs/TCP组的相对CT值为(366. 67±19. 51) HU,明显高于BMSCs/TCP组的(163. 00±30. 81) HU (t=2. 10,P=0. 0006);术后6个月, EPCs/BMSCs/TCP组的相对CT值为(553. 34±26. 86) HU,也明显高于BMSCs/TCP组的(241. 34±21. 57) HU (t=2. 11,P=0. 0006); BMSCs/TCP组(t=2. 10,P=0. 0255)和EPCs/BMSCs/TCP组(t=2. 10,P=0. 0006)术后6个月的相对CT值均明显高于该组术后3个月的相对CT值。术后6个月,HE染色显示空白TCP组未见骨结构形成和钙质沉积,EPCs/BMSCs/TCP组和BMSCs/TCP组可见成骨细胞、成熟的骨小梁及钙质沉积。免疫组织化学染色结果显示,EPCs/BMSCs/TCP组的外周、中心和整个支架的血管数量分别为(21. 67±1. 45)、(23. 33±2. 60)和(45. 00±1. 16)支,均明显高于BMSCs/TCP组的(8. 67±0. 88)(t=2. 07,P=0. 0016)、(9. 33±0. 67)(t=2. 07,P=0. 0065)和(18. 00±1. 00)支(t=2. 07,P=0. 001); BMSCs/TCP组与空白TCP组整个支架的血管数量差异无统计学意义[(18. 00±1. 00)支比(16. 67±2. 40)支; t=2. 07,P=0. 636]。EPCs/BMSCs/TCP组的成骨面积为(1 322 000±141300)像素,明显高于BMSCs/TCP组的(874 900±49 430)像素(t=2. 10,P=0. 04)。BMSCs/TCP组边缘区域的成骨面积明显高于中心区域[(170 000±42 320)像素比(613 900±90 290)像素; t=2. 10,P=0. 02]; EPCs/BMSCs/TCP组边缘区域和中心区域的成骨面积差异无统计学意义[(376 400±20 160)像素比(310 400±6917)像素; t=2. 10,P=0. 07]。结论 EPCs作为种子细胞联合BMSCs可在比格犬体内促进组织工程骨的血管化和成骨效果。(本文来源于《中国医学科学院学报》期刊2018年05期）
周苗,曹帅帅,Pedro,Miranda,车月娟,陈晓明[3]（2018）在《预制基于叁维打印的个性化、血管化组织工程骨修复恒河猴下颌骨缺损的实验研究》一文中研究指出研究目的:观察预制基于叁维打印的个性化、血管化组织工程骨和支架原位植入修复恒河猴下颌骨缺损的效果。研究方法:恒河猴进行头颅CT扫描,建立下颌骨节段性缺损的模型,对其孔隙率、孔径大小设计后得到支架的STL文件;采用CAD/CAM制作个性化钛网,作为颌骨内固定装置。将文件导入3D打印机,分别采用低温快速成型和自动注浆技术制作PLGA/TCP和TCP支架,并将两种支架灭菌后复合6mg rhBMP-2植入恒河猴下颌骨节段性缺损。9只成年恒河猴,随机分组对其15个下颌骨节段性缺损进行修复,分为原位修复S-PLGA/TCP组(S-P/T,n=3)、S-TCP组(S-T,n=3)、SPLGA/TCP-BMP组(S-P/T-B,n=3)、和S-TCP-BMP组(S-T-B,n=3),与转移后的预制P-T-B(n=3)共5组。在下颌骨缺损修复术后的4、8、12周采用PET/CT检测支架密度值和18F-FDG摄取值。下颌骨修复术后12周取材,通过血管灌注观察支架的血管化情况,对下颌骨样本进行大体观察、放射学检查、Micro-CT、生物力学和硬组织切片、外形匹配度检查,观察下颌骨修复情况。研究结果:下颌骨缺损修复术后PET/CT显示P-T-B组、S-P/T-B组和S-T-B组均显示18F-FDG明显的浓聚,S-P/T-B组支架密度随着时间延长降低,P-T-B组和S-T-B组支架的密度上升。S-P/T、S-P/T-B、S-T、S-T-B和P-T-B组下颌骨修复12周后匹配度分别为8.2±0.1%、21.2±1.2%、94.7±2.0%、93.5±2.2%和96.0±2.0%。处死后大体观察、Micro-CT和组织学检查显示节段性下颌骨缺损可被转移的组织工程骨瓣P-T-B和原位植入S-T-B组成功修复,S-P/T-B组、S-P/T组和S-T组未能修复下颌骨缺损。血管灌注结果显示背部植入支架由胸背动脉供应,预制转瓣下颌骨侧可见转移的胸背动脉。力学测试结果显示P-P/T组、P-P/T-B组、P-T组抗压强度均比植入前降低,S-T-B组和P-T-B组支架取材时力学性能均比植入前升高,P-T-B组的力学性能显着高于S-T-B组(P<0.05)。研究结论:基于自动注浆技术打印的TCP支架可以预制个性化、血管化组织工程骨,其转移后成功修复恒河猴下颌骨缺损。(本文来源于《第十四次中国口腔颌面外科学术会议论文汇编》期刊2018-10-19）
李宁毅[4]（2018）在《应用细胞片层技术构建血管化组织工程骨的实验研究》一文中研究指出研究目的:应用细胞片层(膜片)技术,结合血管发生与血管生成方法以期构建出具有初步骨结构血管化的组织工程骨,并用此骨修复犬下颌骨骨缺损,为骨缺损修复提供新思路研究方法:本研究个阶段进行,第一阶段完成体外实验,包括1.BMSCs的分离、培养与细胞片层的制备2.DBM的制备3.BMSCs细胞片层复合体的构建.。第二阶段完成将DBM/rhBMP-2/BMSCs/BMSCs细胞片层复合体植入犬背阔肌下,观察细胞片层复合体异位成骨情况。。第叁阶段完成将其细胞片层包裹的BMSCs/PLGA/VEGF复合体植入犬一侧下颌骨缺损中,观察研究细胞片层复合体修复下颌骨缺损的情况。研究结果:第一阶段:1、细胞片层制备:原代犬骨髓基质干细胞培养,第24小时可见少量细胞贴壁,呈椭圆形或多形性生长;第72h可见多数细胞伸展贴壁;第7天可见细胞集落形成,呈漩涡状或辐射状生长;第12天细胞完全融合,呈漩涡状,细胞界限不清,呈长梭形; 2、DBM的制备:扫描电镜下观察可见DBM呈叁维立体网孔结构,孔隙率约为75%,孔隙直径为89.4—454.2μm,平均孔隙直径为(250.11±98.89)μm,成正态性分布。3、BMSCs细胞片层复合体的构建:细胞片层接种到DBM上3天后,电镜下可见细胞片层附着于DBM上,细胞活性良好。接种5天后,可见细胞片层开始向周围支架爬行生长;接种后7天,细胞片层生长迅速,周围支架部分被细胞片层覆盖。第二阶段组织学观察:复合体植入4周,实验侧DBM内部孔隙区可见类骨质形成,有骨小梁形成,骨小梁周围有较多骨母细胞及毛细血管。对照侧成骨稀少,血管少,骨小梁间纤维化。随着时间延长,实验侧成骨质量明显优于对照侧。至植入16周,实验侧骨小梁规则,大量板层骨连接成片,可见哈弗氏系统血管密度减少,骨髓腔内有血管生成,可见红骨髓,可见进入标本的较粗大的动静脉。,对照侧部分骨小梁边缘有少数骨母细胞,可见板层骨形成,骨血管较丰富,纤维化较明显,髓腔内有脂肪,无红骨髓。第叁阶段组织学观察:植入后4周,实验侧:可见少量新生骨组织,骨小梁纤细,可见纤维性骨痂、多核巨细胞。血管丰富。骨断端处纤维母细胞及新生血管较多。对照侧:新生骨较实验侧少,血管丰富,骨小梁纤细,不规则,可见肉芽组织。随着时间延长,实验测成骨逐渐趋向于正常骨,至第16周,实验侧成骨,骨小梁粗大,哈弗氏小管较丰富,周围有同心圆排列的板层样骨。骨细胞多且状态良好,可见红骨髓。骨髓腔中血管丰富。有较多钙盐沉积。对照侧成骨骨小梁较粗,可见哈弗氏系统,但较实验组少。研究结论:本课题采用细胞片层技术与传统支架塑形相结合的方法构建组织工程骨。应用犬BMSCs细胞片层包裹含有rhBMP-2、VEGF生长因子的PLGA/BMSCs复合体支架,成功构建组织工程骨,修复下颌骨缺损。新生的组织工程骨既有骨小梁和红骨髓组成的松质骨成分也有哈弗氏系统板层骨等密质骨成分,血管丰富,具有良好的硬度。为大块的颌骨缺损修复有良好供血的有正常骨结构和一定功能的组织工程骨提供了新的方法和依据。(本文来源于《第十四次中国口腔颌面外科学术会议论文汇编》期刊2018-10-19）
王怀玺[5]（2018）在《负载BFP-1的β-TCP支架复合EPCs构建血管化组织工程骨修复兔股骨干节段性骨缺损的研究》一文中研究指出目的:1、探讨骨形成肽-1(BFP-1)对兔外周血内皮祖细胞(EPCs)增殖、迁移和成血管功能的影响及可能的分子机制。2、研究β-磷酸叁钙支架(β-TCP)负载BFP-1的体外释放规律,观察EPCs在负载BFP-1的β-TCP支架上的活性和增殖情况。3、探讨负载BFP-1的β-TCP支架复合自体EPCs构建的血管化组织工程骨β-TCP/BFP-1/EPCs用于修复兔股骨干节段性骨缺损的血管生成和骨生成的效果。方法:1、应用密度梯度离心法和贴壁培养法分离、培养兔外周血EPCs,并对EPCs进行表型和功能的鉴定。选用第叁代EPCs,用不同浓度的BFP-1(100,200,300μg/ml)干预EPCs 1至7天,使用CCK8比较细胞的增殖情况;应用Transwell检测不同浓度的BFP-1对EPCs迁移能力的影响;检测不同浓度的BFP-1对EPCs在Matrigel上形成血管样结构的影响。2、使用不同浓度的BFP-1处理EPCs 1天和3天后,采用荧光定量PCR检测成血管相关基因VEGF、VEGFR2、e NOS和ALK-1的表达;通过western blot检测不同浓度的BFP-1作用于EPCs 1天后Smad 1/5蛋白的表达。3、采用冷冻干燥法将BFP-1负载至β-TCP支架上制作β-TCP/BFP-1支架复合体,应用酶标仪检测BFP-1自β-TCP支架上的释放性能;将EPCs接种于β-TCP/BFP-1支架复合体上,体外培养1至10天,使用共聚焦显微镜观察EPCs在支架复合体上的活性和增殖情况。4、采用负载BFP-1的β-TCP支架与自体外周血EPCs复合构建血管化的组织工程骨(β-TCP/BFP-1/EPCs),并构建组织工程骨β-TCP/EPCs、β-TCP/BFP-1和β-TCP,比较研究其对新西兰大白兔股骨干节段性骨缺损的修复效果。5、术后4周和12周对各组动物进行Microfil血管造影、Micro-CT血管扫描和组织学免疫组化染色,评估组织工程骨内的血管生成情况。6、术后4周和12周对各组兔子进行X线片、Micro-CT骨扫描和组织学切片检查,评估组织工程骨内的骨生成情况,并于术后12周时进行叁点弯曲试验评估骨修复的力学效果。结果:1、兔外周分离出的EPCs能够形成“铺路石”样排列,细胞表面分子标记VEGFR2和v WF荧光染色阳性,EPCs可摄取Dil-Ac-LDL且能与FITC-UEA-1结合。2、不同浓度的BFP-1均对EPCs的增殖无不良影响。BFP-1可促进EPCs的迁移和形成血管样结构,上调EPCs基因VEGF、VEGFR2、e NOS和Alk-1的表达,并使其Smad1/5蛋白磷酸化的水平升高,以200μg/ml的浓度效应最为显着。3、β-TCP支架能够吸附BFP-1,其结合的BFP-1在经历短期的突释后能够缓慢稳定释放长达28天。β-TCP支架具有较好的细胞相容性,EPCs可以在β-TCP支架上正常的生长和增殖。EPCs在构建的β-TCP/BFP-1复合体上可以正常生长,细胞能够保持较高的增殖活性。4、Micro-CT血管扫描显示构建的β-TCP/BFP-1/EPCs组织工程骨在术后4周和12周的血管体积分数和血管面积值均显着高于β-TCP/EPCs组、β-TCP/BFP-1组和β-TCP组。CD34免疫组化分析显示β-TCP/BFP-1/EPCs组在术后4周和12周的新生血管密度均较β-TCP/EPCs组、β-TCP/BFP-1组和β-TCP组的高。5、术后12周的X线片评分和Micro-CT骨扫描分析结果显示构建的β-TCP/BFP-1/EPCs组的新生骨量明显高于β-TCP/EPCs组、β-TCP/BFP-1组和β-TCP组。H&E染色示在植入4周和12周后β-TCP/BFP-1/EPCs组的骨移植物与断端自体骨交界区的整合最为致密。4周和12周时硬组织切片Van-Gieson染色见β-TCP/BFP-1/EPCs组的新骨生成面积显着高于β-TCP组、β-TCP/BFP-1组和β-TCP/EPCs组,同时β-TCP/BFP-1/EPCs组支架的降解量明显多于β-TCP/EPCs组、β-TCP/BFP-1组和β-TCP组。生物力学结果示β-TCP/BFP-1/EPCs组的最大载荷和最大弯曲应力显着高于与β-TCP/BFP-1组、β-TCP/EPCs组和β-TCP组。结论:1、应用密度梯度离心法和贴壁培养法可获得高纯度、足量的内皮祖细胞。2、BFP-1具有促EPCs成血管的作用,且BFP-1通过ALK-1/Smad信号通路介导其促EPCs成血管的效能。3、β-TCP支架能够相对缓释BFP-1,负载BFP-1的β-TCP支架具有较好的细胞相容性并能支持EPCs的增殖。4、构建的β-TCP/BFP-1/EPCs血管化组织工程骨具有较好的组织相容性,在体内有较强的促血管生成效应,同时有较好的成骨效能,修复负重区大段骨缺损的效果可靠,这种复合构建血管化组织工程骨的方式简单、有效,具有较好的临床应用前景。(本文来源于《华中科技大学》期刊2018-05-01）
曹帅帅,周苗,Miranda,耿远明,车月娟[6]（2017）在《预制基于叁维打印的个性化、血管化组织工程骨修复恒河猴下颌骨缺损的实验研究》一文中研究指出目的:观察预制基于叁维打印的个性化、血管化组织工程骨和支架原位植入修复恒河猴下颌骨缺损的效果。方法:9只成年恒河猴,随机分组对其15个下颌骨节段性缺损进行修复。恒河猴进行头颅CT扫描,将扫描数据依次导入Mimics、Geomagic、Catia,建立下颌骨节段性缺损的模型,采用切割功能分割20 mm长的下颌骨段,对其孔隙率、孔径大小设计后得到颌骨生物打印支架的STL文件;采用计算机辅助设计和控制铣床制作个性化钛网,作为颌骨内固定装置和控制成骨形状。将文件导入3D打印机,分别采用低温快速成型和自动注浆技术制作PLGA/TCP和TCP支架,并将两种支架灭菌后复合6mg rh BMP-2后保存。在预制实验中,将支架分为4个组:预制PLGA/TCP组(P-P/T,n=3)、预制TCP组(P-T,n=3)、预制PLGA/TCP-BMP组(P-P/T-B,n=6)和预制TCP-BMP组(P-T-B,n=6)植入恒河猴的背阔肌中。在植入后的4、8、12周,采用PET/CT等手段观察其异位骨诱导能力,探讨其构建个性化、血管化组织工程骨瓣的可能性。在植入后12周,使用Geomagic 13.0对支架的成骨形态和植入前匹配对比,将未成功构建的组织工程骨瓣的P-P/T、P-T、P-P/T-B和部分P-T-B组取材后行Micro-CT、生物力学、外形匹配度和硬组织切片检查;将剩余成功预制的P-T-B组织工程骨瓣,以胸背动静脉为蒂转移修复下颌骨节段性缺损。下颌骨缺损植入复合和未复合rh BMP-2的叁维打印PLGA/TCP和TCP,分为S-PLGA/TCP组(S-P/T,n=3)、S-TCP组(S-T,n=3)、S-PLGA/TCP-BMP组(S-P/T-B,n=3)、和S-TCP-BMP组(S-T-B,n=3),与转移后的预制P-T-B(n=3)共5组,修复下颌骨缺损。在下颌骨缺损修复术后的4、8、12周采用PET/CT检测异位和原位支架密度值和18F-FDG摄取值。所有恒河猴在下颌骨修复术后12周取材,使用Geomagic 13.0对下颌骨修复情况和术前进行拟合对比并计算匹配度。处死恒河猴时通过血管灌注观察3D打印支架的血管化情况;对下颌骨样本进行大体观察、放射学检查、Micro-CT、生物力学和硬组织切片、外形匹配度检查。结果:3D打印技术构建出外形匹配、叁维多孔结构的个性化恒河猴下颌骨支架。PET/CT结果显示,植入P-P/T和P-T组支架后4周可见18F-FDG浓聚,随着时间延长而降低,P-P/T组支架密度随着实验延长而降低,P-T组支架密度基本保持不变。力学检测结果显示支架压强较植入前下降,Micro-CT和组织学检查显示,在背阔肌内未见明显的异位骨形成。P-P/T-B和P-T-B组植入4、8、12周后钛网内有18F-FDG浓聚,8周时达到最高峰,随着时间延长P-P/T-B支架材料密度随之降低、P-T-B支架密度随时间逐渐升高。组织学证实,P-T-B组植入背阔肌内有活跃的异位骨形成。软件拟合后证实成功构建的组织工程骨和原支架外形匹配度高达95.2±2.2%,体内预制的方法可在背阔肌内构建出个性化、血管化组织工程骨P-T-B。下颌骨缺损修复术后PET/CT显示P-T-B组、S-P/T-B组和S-T-B组均显示18F-FDG明显的浓聚,S-P/T-B组和S-T-B组在8周时18F-FDG浓聚达到最高,P-T-B组在下颌骨缺损修复后核素浓聚降低,S-P/T-B组支架密度随着时间延长降低,P-T-B组和S-T-B组支架的密度上升。S-P/T、S-P/T-B、S-T、S-T-B和P-T-B组下颌骨修复12周后匹配度分别为8.2±0.1%、21.2±1.2%、94.7±2.0%、93.5±2.2%和96.0±2.0%。处死后大体观察、Micro-CT和组织学检查显示节段性下颌骨缺损可被转移的组织工程骨瓣P-T-B和原位植入S-T-B组成功修复,S-P/T-B组、S-P/T组和S-T组未能修复下颌骨缺损。血管灌注结果显示背部植入支架由胸背动脉供应,预制转瓣下颌骨侧可见转移的胸背动脉。力学测试结果显示P-P/T组、P-P/T-B组、P-T组抗压强度均比植入前降低,S-T-B组和P-T-B组支架取材时力学性能均比植入前升高,P-T-B组的力学性能显着高于S-T-B组(P<0.05)。结论:基于自动注浆技术打印的TCP支架可以预制个性化、血管化组织工程骨,其转移后成功修复恒河猴下颌骨缺损。基于叁维打印的预制组织工程骨修复恒河猴下颌骨缺损优于叁维打印支架原位植入。低温快速成型的PLGA/TCP支架异位成骨效果差,原位植入也不能修复下颌骨缺损。(本文来源于《第十五次全国口腔医学计算机应用学术研讨会会议手册》期刊2017-06-29）
李靖[7]（2017）在《基于3D打印与静电纺织技术的血管化组织工程骨构建》一文中研究指出目的:利用3D打印技术及高压静电纺织技术联合构建组织工程支架-细胞复合物,并通过体内外实验验证其在构建血管化组织工程骨中的优势。方法:利用医学图像叁维重建软件(Mimics)及3D打印机将断层扫描数据(CT)进行处理、编辑制作成个性化叁维立体模型,在模型打印的同时利用同轴高压静电纺织技术制备芯层为P3HB4HB、壳层为PVA与人骨髓间充质干细胞的(PVA-细胞)/P3HB4HB纤维。将一次成型的支架-细胞复合物向成骨方向诱导14日,植入前复合内皮细胞。体外实验中通过力学测试观察经3D打印技术制作的P3HB4HB外部支架的力学性能;通过光镜、透射电镜、亲水性实验及扫描电镜观察经静电纺织技术制备的PVA/P3HB4HB支架的微观结构及生物相容性;通过扫描电镜、DAPI免疫荧光染色、吖啶橙免疫荧光染色以及CCK-8实验观察细胞在支架结构中的黏附、增殖情况;体内实验中将支架-细胞复合物作为实验组,不含细胞的支架材料作为对照组,标本分别于12周与24周后取出,行HE、VonKossa、天狼星红、马松叁色、CD31免疫组织化学及Ⅰ型胶原免疫组织化学染色,观察支架-细胞复合物成骨及血管的能力。结果:利用3D打印技术能够制造外观个性化很强的模型,模型能够为组织工程支架提供一定的力学支撑;通过扫描电镜及亲水性实验可观察到通过静电纺织技术制备的PVA/P3HB4HB支架具有较高的孔隙率、良好的生物相容性及仿生细胞外基质的叁维立体结构;利用吖啶橙免疫荧光染色、DAPI免疫荧光染色、扫描电镜及CCK-8可显示细胞与支架复合后仍具有增值、分化的能力,实现了材料与细胞的一次成型与精确种植;在体内实验中,分别对实验组12周和24周的标本行HE染色、Von Kossa染色、天狼星红染色、马松叁色染色、CD31免疫组织化学染色、Ⅰ型胶原免疫组织化学染色,结果均呈阳性,并随着时间的延长骨组织及血管结构的数量及质量明显增加,对照组阴性。结论:利用3D打印技术及高压静电纺织技术联合构建的支架-细胞复合物具有一定的力学性能及仿生细胞外基质结构的结构与功能,通过复合内皮细胞后,能够在体内构建出含血管的组织工程骨。(本文来源于《贵州医科大学》期刊2017-05-26）
王继猛[8]（2017）在《骨损伤修复中H型血管的分布和作用及血管束神经束联合植入组织工程骨修复羊大段胫骨缺损的研究》一文中研究指出骨组织是一个高度血管化和神经化的组织。无论在正常的骨损伤修复过程中还是在应用组织工程骨修复骨缺损的情况下,及时和丰富的血管再生是保证骨损伤正常修复和组织工程骨存活的基础。最近有文献报道在小鼠骨发育过程中存在两种血管内皮细胞亚型,即高表达CD31和Emcn的H型内皮细胞和低表达CD31和Emcn的L型内皮细胞。这两种内皮细胞亚型具有不同的形态、分布和功能特征。其中H型内皮细胞在介导小鼠骨发育成血管和成骨偶联的过程中起着重要作用。本研究第一部分对H型血管在正常成年大鼠长骨中的分布以及在正常和骨质疏松大鼠骨损伤修复中的分布和变化规律进行研究,目的是对H型血管在骨损伤修复中的地位和作用获得更深入的认识。通过研究我们发现,在正常成年大鼠长骨中也存在H型血管并特异的分布在靠近干骺端和骨内膜的骨小梁表面这些成骨活动活跃的部位;在正常大鼠骨损伤的修复过程中,H型血管在损伤后第3d即出现大量增生和分布;随着修复时间的进展,H型血管的量逐渐减少,但特异性的分布在靠近生长前沿的新生骨小梁的表面,在远离生长前沿的骨小梁表面分布显着减少;作为对照,在骨质疏松大鼠骨损伤修复的各个时期,H型血管增生的量均显着减少,并且未发现其特异性高分布,新生骨小梁数量和厚度显着减少且结构紊乱。结合以往的文献推测H型血管具有支持大鼠骨发育和骨损伤修复中新生骨小梁生长的作用,骨质疏松大鼠骨损伤修复中H型血管数量的显着减少是其成骨量少的重要原因。此外,我们还研究了在正常和骨质疏松大鼠骨损伤修复中成血管相关因子Hif-1α、VEGFA和成骨因子BMP2、Osterix转录水平的变化。研究发现在骨损伤后第3d,骨质疏松组Hif-1α和VEGFA的转录水平显着高于正常组;但在术后第7d和第14d,骨质疏松组Hif-1α和VEGFA的转录水平显着低于正常组;骨质疏松组成骨因子BMP2和Osterix的转录水平在术后3d、7d和14d均显着低于正常组;研究提示骨质疏松大鼠在损伤修复期成血管和成骨因子转录水平的显着降低也是其成血管和成骨量低下的原因。组织工程骨血管化和神经化程度不足是制约其向临床应用转化的重要原因。有学者发现将动静脉环或动静脉束移植入组织工程骨来修复骨缺损可以显着促进组织工程骨血管化和骨缺损的修复。另有学者发现将感觉神经束离断后移植入组织工程骨中也能起到与血管束植入相同的促成骨效果,其中的原因可能是移植入的神经束本身具有滋养血管,而且感觉神经束的植入可以通过CGRP、NPY和SP等外分泌递质的释放促进种子细胞的存活和成骨。据此,裴国献教授提出了组织工程骨血管化和神经化同步构建的理论。本研究第二部分通过分别将隐血管束与隐神经束同时植入组织工程骨、单纯隐血管束植入组织工程骨和单纯应用组织工程骨修复绵羊胫骨3cm大节段骨缺损,在术后3个月分别通过X线平片、微米X射线扫描后叁维重建、生物力学检测以及VG染色评价各组骨缺损的修复效果和生物力学功能。结果显示,隐血管束和隐神经束联合植入组成骨量和材料的降解率均显着高于其他两组,并且获得了较其他两组更好的生物力学功能的恢复。本研究的结果提示组织工程骨血管化和神经化同步构建对于促进组织工程骨成骨和力学功能的恢复具有重要作用。(本文来源于《第四军医大学》期刊2017-05-01）
刘欢,周炜,赵铱民[9]（2015）在《内皮祖细胞与骨髓间充质干细胞构建血管化组织工程骨的研究进展》一文中研究指出组织工程骨早期血管化是促进形成新生骨的先决条件,骨髓间充质干细胞(BMSCs)是成骨细胞的起源,体外诱导条件下可分化为成骨细胞,是组织工程骨常用的种子细胞,但很难解决组织工程骨血管化的问题。内皮祖细胞(EPCs)作为内皮细胞前体细胞,已应用于多种缺血组织模型的血管再生研究。目前已有研究者将其引入组织工程骨构建体系,为解决组织工程骨血管化问题提供了新思路和方法。(本文来源于《医学综述》期刊2015年23期）
张馨月,李焰,李晨军[10]（2015）在《颌面部及牙周组织工程骨的血管化和成骨策略》一文中研究指出背景:颌面部骨缺损以及牙周组织缺损是影响人类功能和美观的重要疾病之一,组织工程骨成为了修复颌面部骨和牙周组织缺损的主要手段。目前已形成了种子细胞及细胞共培养、支架材料、微环境叁者复合以构建组织工程骨的基本模式,将组织工程骨进行预血管化并促进其快速成骨可以减少植入物的坏死、吸收,提升骨缺损修复的成功概率。目的:归纳总结近5年内组织工程骨在口腔颌面部及牙周组织上的研究新进展。方法:对CNKI数据库和Pub Med数据库2010年至2015年文献进行检索,中文检索关键词为:颌面;组织工程骨;骨再生;血管化;基因修饰;种子细胞;支架材料;微环境,英文检索词为:oral and maxillofacial,bone tissue engineering,bone regeneration,vascularization,Genetic modification,Seed cells,Support material,Micro environment。排除无关性研究、重复性研究,保留68篇中英文文献进行归纳总结。结果与结论:组织工程骨在修复口腔颌面部及牙周缺损上的应用得到了巨大发展,在叁维结构的支架材料上加载基因修饰的种子细胞可以有效的促进血管化进程,提高成骨效应,增加颌骨缺损修复术的成功概率。此外,在牙槽嵴缺损处或新鲜拔牙窝处植入组织工程骨材料,可以有效的恢复和保存牙槽嵴高度和宽度,为后续的修复治疗保证了良好的骨条件。在植入组织工程骨后,可在缺损处加载不同的外部环境刺激,可以通过调节细胞外基质成分或信号通路来改变血管化进程,而血管化是建立有效血循环,保证植入支架成功的前提条件。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2015年42期）
血管化组织工程骨论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的评估比格犬内皮祖细胞(EPCs)对组织工程骨的血管化和成骨效果。方法将比格犬骨髓来源的骨髓间充质干细胞(BMSCs)和EPCs进行分离、培养、扩增,在β-磷酸叁钙(β-TCP)支架材料上进行接种。将EPCs/BMSCs/TCP、BMSCs/TCP细胞支架复合物和空白TCP分别植入比格犬下肢肌肉内,于术后3、6个月进行CT平扫,计算骨的相对CT值,并于术后6个月取材,行HE染色和免疫组织化学染色观察血管化和成骨效果。结果术后3个月,EPCs/BMSCs/TCP组的相对CT值为(366. 67±19. 51) HU,明显高于BMSCs/TCP组的(163. 00±30. 81) HU (t=2. 10,P=0. 0006);术后6个月, EPCs/BMSCs/TCP组的相对CT值为(553. 34±26. 86) HU,也明显高于BMSCs/TCP组的(241. 34±21. 57) HU (t=2. 11,P=0. 0006); BMSCs/TCP组(t=2. 10,P=0. 0255)和EPCs/BMSCs/TCP组(t=2. 10,P=0. 0006)术后6个月的相对CT值均明显高于该组术后3个月的相对CT值。术后6个月,HE染色显示空白TCP组未见骨结构形成和钙质沉积,EPCs/BMSCs/TCP组和BMSCs/TCP组可见成骨细胞、成熟的骨小梁及钙质沉积。免疫组织化学染色结果显示,EPCs/BMSCs/TCP组的外周、中心和整个支架的血管数量分别为(21. 67±1. 45)、(23. 33±2. 60)和(45. 00±1. 16)支,均明显高于BMSCs/TCP组的(8. 67±0. 88)(t=2. 07,P=0. 0016)、(9. 33±0. 67)(t=2. 07,P=0. 0065)和(18. 00±1. 00)支(t=2. 07,P=0. 001); BMSCs/TCP组与空白TCP组整个支架的血管数量差异无统计学意义[(18. 00±1. 00)支比(16. 67±2. 40)支; t=2. 07,P=0. 636]。EPCs/BMSCs/TCP组的成骨面积为(1 322 000±141300)像素,明显高于BMSCs/TCP组的(874 900±49 430)像素(t=2. 10,P=0. 04)。BMSCs/TCP组边缘区域的成骨面积明显高于中心区域[(170 000±42 320)像素比(613 900±90 290)像素; t=2. 10,P=0. 02]; EPCs/BMSCs/TCP组边缘区域和中心区域的成骨面积差异无统计学意义[(376 400±20 160)像素比(310 400±6917)像素; t=2. 10,P=0. 07]。结论 EPCs作为种子细胞联合BMSCs可在比格犬体内促进组织工程骨的血管化和成骨效果。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
血管化组织工程骨论文参考文献
[1].王福科,张红,李彦林,刘流,何川.联合培养血管内皮细胞与脂肪干细胞构建组织工程骨异位成骨[J].中国修复重建外科杂志.2019
[2].吴骁伟,尹琎,韦颍昕.比格犬内皮祖细胞对组织工程骨的血管化和成骨效果[J].中国医学科学院学报.2018
[3].周苗,曹帅帅,Pedro,Miranda,车月娟,陈晓明.预制基于叁维打印的个性化、血管化组织工程骨修复恒河猴下颌骨缺损的实验研究[C].第十四次中国口腔颌面外科学术会议论文汇编.2018
[4].李宁毅.应用细胞片层技术构建血管化组织工程骨的实验研究[C].第十四次中国口腔颌面外科学术会议论文汇编.2018
[5].王怀玺.负载BFP-1的β-TCP支架复合EPCs构建血管化组织工程骨修复兔股骨干节段性骨缺损的研究[D].华中科技大学.2018
[6].曹帅帅,周苗,Miranda,耿远明,车月娟.预制基于叁维打印的个性化、血管化组织工程骨修复恒河猴下颌骨缺损的实验研究[C].第十五次全国口腔医学计算机应用学术研讨会会议手册.2017
[7].李靖.基于3D打印与静电纺织技术的血管化组织工程骨构建[D].贵州医科大学.2017
[8].王继猛.骨损伤修复中H型血管的分布和作用及血管束神经束联合植入组织工程骨修复羊大段胫骨缺损的研究[D].第四军医大学.2017
[9].刘欢,周炜,赵铱民.内皮祖细胞与骨髓间充质干细胞构建血管化组织工程骨的研究进展[J].医学综述.2015
[10].张馨月,李焰,李晨军.颌面部及牙周组织工程骨的血管化和成骨策略[J].中国组织工程研究.2015