导读:本文包含了发育受阻论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:卵母细胞老化,H_2O_2,线粒体,褪黑素
发育受阻论文文献综述
王伟周[1]（2017）在《褪黑素缓解老化卵母细胞体外受精后发育受阻的研究》一文中研究指出高龄妇女接受体外受精(in vitro fertilization,IVF)治疗后的成功率明显偏低。其中,卵母细胞老化造成的胚胎发育能力下降,是导致高龄妇女体外受精后妊娠率低、流产率高的重要原因。因此,寻找能够缓解老化卵母细胞IVF后发育受阻的方法具有重要的意义。本实验以过氧化氢(H_2O_2)处理小鼠卵母细胞建立的氧化应激诱导老化模型为研究对象,研究氧化应激诱导卵母细胞老化后线粒体的相关特征受损与老化卵母细胞IVF后胚胎发育率及质量下降的关系。继而,以老化卵母细胞囊胚发育率和囊胚质量为主要评价指标,并辅于线粒体功能状态,考察褪黑素改善老化卵母细胞IVF胚胎发育率及质量的可行性,为提高临床高龄女性IVF成功率提供实验依据。本研究分别利用10μM、50μM、100μM和150μM不同浓度的H_2O_2处理MII期卵母细胞3 h,建立以氧化应激为特征的卵母细胞老化模型,以未经H_2O_2处理的卵母细胞为对照。各组卵母细胞进行标准的IVF后,观察发育效率。结果显示,随H_2O_2浓度的增加,卵母细胞中的氧化应激程度是明显加剧的。经150μM H_2O_2处理的卵母细胞IVF后,碎裂率相比对照组显着性升高(7.77±4.78%vs.39.32±9.14%,P<0.05);100μM H_2O_2处理后2细胞率相比对照组显着降低(45.63±2.6%vs.54.67±8.27%,P<0.05);当IVF胚胎发育至囊胚阶段时,50μM、100μM处理组囊胚率分别为26.27±0.06%、28.46±3.45%,均显着低于对照组(34.9±1.77%,P<0.05)。这说明老化卵母细胞中的氧化应激,可能会对IVF后胚胎产生持续的影响,造成发育损伤。在许多细胞类型中,老化往往伴随着明显的线粒体功能损伤,因此我们对H_2O_2诱导卵母细胞老化的线粒体功能进行了专门的检测。活性线粒体特异性标记探针Mitotracker Red结果显示老化卵母细胞内活性线粒体丰度明显减少;类似地,通过对线粒体基因组(mitochondrial DNA,mtDNA)拷贝数的绝对定量检测,发现随着H_2O_2处理浓度的升高,卵母细胞mtDNA拷贝数呈现逐渐下降的趋势;此外,使用JC-1探针对线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)检测结果显示,10~100μM浓度下表现出MMP升高的趋势,即超极化现象,这种现象是凋亡早期特征性事件,意味着老化卵母细胞已经启动了凋亡的发生。老化卵母细胞中氧化应激对IVF胚胎的持续影响,提示这一过程是可恢复的。因此,我们尝试在体外培养阶段(in vitro culture,IVC)添加褪黑素(melatonion,MT),通过清除附植前胚胎中的活性氧来缓解老化卵母细胞IVF后的发育损伤。选取了较为温和的100μM H_2O_2浓度诱导卵母细胞老化,分别在培养液中添加10-5 M、10-7 M、10-9 M叁个浓度的褪黑素,评价老化卵母细胞IVF后发育效率和发育质量。结果显示,与老化组(20.87±4.11%)相比,培养液中添加10-9 M褪黑素可以显着恢复囊胚率(29.42±2.39%),达到与青年卵相当的发育水平(38.76±9.43%)。而10-5 M和10-7 M褪黑素添加则未能改善囊胚率(19.87±2.88%、23.35±6.03%)。这些结果表明IVF后培养阶段添加低浓度的褪黑素可以有效恢复和改善老化卵母细胞IVF后的发育能力。接下来,我们发现10-5 M、10-7M、10-9 M褪黑素添加后,囊胚细胞数分别为28.30±10.42%、31.54±9.97%、39.36±9.78%,均与H_2O_2处理老化组(37.91±4.25%)差异不显着。进一步,囊胚凋亡检测结果提示,10-9 M褪黑素添加有降低老化卵IVF囊胚细胞凋亡率的趋势,但差异不显着(2.57%vs.3.18%)。我们意外地发现,10-5 M褪黑素会显着增加囊胚细胞凋亡率(6.97%vs.3.18%,P<0.05),提示高浓度的褪黑素添加会有细胞毒害作用。mtDNA定量结果显示,10-9 M褪黑素添加组与H_2O_2处理老化组相比,能够显着恢复8细胞阶段mtDNA拷贝数。结论:1)100μM H_2O_2诱导卵母细胞老化,卵母细胞内线粒体相关特征受损明显,其中线粒体中ROS水平显着升高,活性线粒体丰度和mtDNA拷贝数降低,膜电位超极化现象明显。2)在IVF后的IVC阶段添加10-9M褪黑素可以恢复H_2O_2引起的线粒体拷贝数降低,提高囊胚率及囊胚质量,从而缓解由H_2O_2诱导的老化卵母细胞体外受精后发育受阻。(本文来源于《中国人民解放军军事医学科学院》期刊2017-05-17）
赵锦程,吴天旻,刘丽花,汪洋,何琳[2]（2014）在《EcR-RNAi和印楝素处理斜纹夜蛾幼虫诱导腹足发育受阻表型(英文)》一文中研究指出蜕皮激素是一种可以诱导一系列变态发育关键过程的昆虫蜕皮调节激素,与蜕皮激素受体结合以后与配体蛋白Usp作用形成一个复合体发挥作用.通过兼并引物克隆获得斜纹夜蛾一个600 bp的EcR cDNAs片段编码200个氨基酸,斜纹夜蛾是东亚地区一种主要的农作物害虫.利用这段序列设计了EcR-dsRNA通过注射幼虫的实验来分析EcR基因在不同发育阶段的功能.同时利用印楝素喂食RNAi注射的幼虫观察其与正常对照组有何发育差异.结果显示EcR RNAi会影响正常的蜕皮过程并导致不完成蛹化,在EcR RNAi注射并喂食印楝素的实验组,幼虫出现生长迟缓、发育进程紊乱和腹足发育不正常等现象,由此推测印楝素和EcR RNAi或许影响了蜕皮级联调控通路,由此引发变态发育过程中组织重建紊乱.(本文来源于《华东师范大学学报(自然科学版)》期刊2014年01期）
谢周涛[3]（2013）在《丙戊酸可致宫内胎儿认知功能发育受阻》一文中研究指出美国FDA告知保健医生,孕妇使用丙戊酸或丙戊酸钠可造成胎儿的认知功能发育受限,这是与孕妇使用其他抗癫痫药比较研究后得出的结果。2009年FDA曾因该药可致神经管缺损发出过警戒信息,现在又增加了对认知功能带来不良后果的警示。此外,FDA还指出,给育龄妇女使用这类药物时应权衡利弊,因为这类药物并不会造成永久性的损伤和死亡。(本文来源于《药物流行病学杂志》期刊2013年01期）
姜雨飞,张燕琴,初晨凤,许颂华,史河秀[4]（2012）在《抑制雌激素受体α使阻滞和非阻滞品系小鼠受精卵体外发育受阻》一文中研究指出目的研究雌激素受体(estrogen receptor,ER)抑制小鼠受精卵体外发育影响,为进一步阐明ERα在小鼠合子基因组激活中的作用奠定基础。方法选用阻滞品系小鼠昆明(kunming,KM)小鼠受精卵进行体外培养观察:(1)ER抑制剂(ICI 182780)培养组:收集受精卵分别置于M16培养液和M16中添加不同浓度ER抑制剂(0.5μM和1μM)的培养液中进行体外培养;(2)ERα特异性抑制剂(MPP)培养组:将受精卵或2-细胞胚分别置于M16培(本文来源于《中华医学会第八次全国计划生育学术会议论文汇编》期刊2012-04-13）
姜雨飞,张燕琴,初晨凤,许颂华,史河秀[5]（2012）在《抑制雌激素受体α使阻滞和非阻滞品系小鼠受精卵体外发育受阻》一文中研究指出目的研究雌激素受体(estrogen receptor,ER)抑制小鼠受精卵体外发育影响,为进一步阐明ERa在小鼠合子基因组激活中的作用奠定基础。方法选用阻滞品系小鼠昆明(kumming,KM)小鼠受精卵进行体外培养观察:(1)ER抑制剂(ICI 182780)培养组:收集受精卵分别置于M16培养液和(本文来源于《中华医学会第六次全国生殖医学学术会议专刊》期刊2012-02-24）
周小程[6]（2009）在《NMDA受体激活在宫内缺氧胎鼠肺发育受阻中的作用》一文中研究指出第一章宫内缺氧对胎鼠发育的影响目的建立宫内缺氧模型,观察宫内缺氧对胎鼠发育的影响,重点了解对胎鼠肺发育的影响。方法1.动物模型的制备及实验分组通过降低母鼠吸入氧浓度至10.5±1.0%,每天持续缺氧8小时,建立宫内缺氧的模型。实验分组为:空气对照组,缺氧2天组,缺氧6天组和缺氧10天组。于孕21天剖宫后对胎鼠进行相关检查。2.一般情况相关检查记录孕鼠体重、胎鼠体重、胎鼠个数、存活率、胎心(右心室/左心室+室间隔即RV/LV+S)等。3.胎盘组织病理学检查留取空气对照组及各缺氧对照组胎盘连同脐带及血管两例,选择标准是该组重量最大和最小者,进行病理学相关检查。4.肺组织相关检查所有胎鼠进行肺湿重称量,取部分胎肺左叶作HE染色、辐射状肺泡计数(RAC)、肺小动脉外径、管壁厚度、管壁厚度/肺小动脉外径(WT%)、血管总面积、管壁面积、管壁面积/总面积(WA%)检测。5.统计学分析试验数据以均数±标准差表示,多组间比较采用单因素方差分析(one-way ANOVA)及SNK-q检验。p＜0.05认为有统计学意义。结果1.胎鼠存活率随着缺氧时间的延长动物的存活率降低(p＜0.01)。2.胎鼠情况不同缺氧天数的胎鼠体重明显低于空气对照组(p＜0.0 1),随缺氧天数增加而进一步降低,右心室/左心室+室间隔(RV/LV+S)均明显高于空气对照组(p＜0.01),不随缺氧天数增加而进一步增加。3.胎肺情况胎肺重量在宫内缺氧2天组即明显降低(p＜0.01),随宫内缺氧天数的增加进一步降低。肺重/体重的比值在缺氧2天组明显降低(p＜0.01),随宫内缺氧天数的增加有增加。4.胎盘组织HE染色空气对照组胎盘绒毛结构正常,各缺氧组与对照组无差异,脐动脉各缺氧组与对照组间无差异。5.胎肺组织HE染色空气对照组肺泡结构规则,排列有序,肺泡间隔分布均匀,肺泡腔未见明显渗出。随着缺氧天数增加,肺泡结构不规则,排列紊乱,肺泡间隔分布不均匀,肺泡腔见明显渗出。空气对照组肺小动脉管壁较薄、管腔较大,缺氧10天组肺小动脉管壁增厚、管腔狭窄(p＜0.01)。6.辐射状肺泡计数(RAC)缺氧2天组即明显降低,随宫内缺氧天数的增加进一步降低。7.肺血管形态测定随着宫内缺氧时间的延长肺血管形态变化,缺氧10天组,其管壁面积/总面积(WA%)、管壁厚度(um)、管壁厚度/肺小动脉外径(WT%)的p＜0.01。结论1.成功建立大鼠宫内缺氧模型。2.宫内缺氧,胎鼠发育受限、胎肺发育不良;并随着宫内缺氧时间的延长,胎鼠发育受限进一步加重。第二章MK-801对不同宫内缺氧所致胎鼠肺发育受阻的作用目的检测对照组及各缺氧组胎肺组织NMDAR表达情况,并观察NMDA受体拮抗剂(MK-801)对宫内缺氧下胎鼠发育的作用。方法1.动物模型的制备及实验分组动物模型同第一章。实验分组为:空气对照组,空气+MK-801组,缺氧对照组,缺氧+MK-801组。2.胎肺组织NMDARmRNA表达对空气对照组及各缺氧对照组部分肺组织进行RNA的提取,进行NMDA1及2A、B、C、D受体mRNA的RealTime-PCR测定(由上海闪晶公司完成)。3.一般情况相关检查同第一章。4.胎盘组织病理学检查同第一章。5.肺组织相关检查同第一章。6.统计学分析试验数据以均数±标准差表示,多组间比较采用单因素方差分析(one-way ANOVA)及SNK-q检验。p＜0.05认为有统计学意义。结果1.胎肺组织NMDAR表达空气对照组,胎鼠肺组织以NMDAR2D表达为主;随着宫内缺氧时间的延长,胎肺组织各NMDAR表达均增高,于缺氧6天表达最高(p＜0.01),其中NMDAR2D表达最显着;在缺氧10天,肺组织各NMDAR表达与空气对照组比较无差异。2.胎鼠存活率MK-801可明显地提高各缺氧组的存活率(p＜0.01)。3.胎鼠情况加入MK-801,减轻了缺氧所致胎鼠体重下降。各空气+MK-801组与空气对照组比较,胎鼠体重要轻于后者(p＜0.01)。加入MK-801,减轻了缺氧所致RV/LV+S(%)下降。各空气+MK-801组与空气对照组比较,RV/LV+S(%)要大于后者(p＜0.01)。4.胎肺组织HE染色各缺氧+MK-801组较缺氧组肺泡数量增加,肺泡结构规则,排列有序,肺泡腔红细胞渗出减少。各空气+MK-801组较空气组肺泡数量减少,肺泡结构不规则,排列紊乱,肺泡间隔无明显变化,可见肺泡腔明显红细胞渗出。缺氧+MK-801组与缺氧对照组比,肺小动脉改变不明显,空气+MK-801组与空气对照组比,肺小动脉改变不明显。5.辐射状肺泡计数(RAC)加入MK-801,减轻了缺氧所致RAC下降。各空气+MK-801组与空气对照组比较,RAC值小于后者(p＜0.01)。6.肺血管形态测定缺氧+MK-801组较缺氧组,肺血管形态有改善。缺氧10天+MK-801组与缺氧10天组比,管壁面积/血管总面积(WA%)、管壁厚度(um)、管壁厚度/肺小动脉外径(WT%)的p＜0.05。空气+MK-801组与空气对照组比肺血管形态无差异。结论1.首次观察NMDAR在正常及缺氧胎鼠肺发育中的表达情况2.首次发现MK-801对宫内缺氧下胎鼠发育有保护作用,重点观察到MK-801对宫内缺氧下胎鼠肺组织发育的保护作用3.单独使用MK-801对胎鼠发育有毒性作用(本文来源于《中南大学》期刊2009-06-01）
王铭杰[7]（2009）在《NMDA受体的激活在高氧暴露后新生大鼠肺损伤和肺泡发育受阻中的作用及机制研究》一文中研究指出氧疗是临床上抢救治疗各种危重病人的重要措施之一。然而新生儿期长期吸入高浓度氧,可引起以中性粒细胞浸润为特征的弥漫性肺泡损害和以肺泡发育受阻及肺组织纤维化改变为主的慢性肺损伤。NMDA受体是谷氨酸受体的重要亚型,NMDA受体的过度激活可引起神经细胞内Ca~(2+)超载和Na~+蓄积,从而导致神经细胞的急性肿胀、迟发性坏死和凋亡。近年来发现在外周肺组织同样存在NMDA受体的表达,并参与急性肺损伤及弥漫性肺泡炎症反应。本室前期实验采用95%高浓度氧气持续暴露,成功建立了高氧致新生大鼠肺损伤模型。在此模型基础上证实高氧诱导肺组织释放内源性谷氨酸增加及NMDA受体表达增强,MK-801可减轻高氧诱导的新生大鼠肺损伤及炎症浸润程度,减轻持续高氧诱导的肺泡发育受阻及胶原的沉积,提示NMDA受体参与高氧诱导的慢性肺损伤的发生。但是NMDA受体参与高氧暴露后引起的新生大鼠肺泡发育受阻及肺组织纤维化的具体阶段及其机制尚不清楚。本实验将在整体及细胞水平深入探讨NMDA受体在高氧致新生大鼠慢性肺损伤中的作用及其机制。实验分为四部分:第一章:不同高氧暴露时间对新生大鼠的影响目的比较不同持续时间高氧暴露对新生大鼠肺组织的影响,选择较为理想的高氧致新生大鼠慢性肺损伤模型。方法孕22天顺产分娩新生大鼠生后2-4小时内编号并随机分为3组:空气对照组,7天高氧+亚高氧组,3天高氧+空气组。7天高氧+亚高氧组持续维持≥95%高氧暴露7天后改为持续60%亚高氧暴露至生后21天;3天高氧+空气组为持续≥95%高氧暴露3天后接受常压空气;空气对照组置于同一室内,接受常压空气。观察各组一般情况及死亡率,分别在生后3天,7天,14天,21天后在各组随机抽取实验动物处死,进行体重、肺重、肺指数及肺湿重/干重(W/D)的测定;支气管肺泡灌洗检测LDH活性、蛋白含量和白细胞计数;同时检测肺组织HYP含量及肺组织形态检查计算RAC值。结果1.高氧7天+亚高氧组生存能力低,发育落后,死亡率高,持续高氧暴露3天时,肺组织W/D,BALF中LDH活性、蛋白含量、白细胞计数均显着升高;持续高氧暴露7天时肺指数开始明显升高,而W/D、蛋白含量、白细胞计数进一步升高,LDH活性虽有所下降但仍然高于空气对照组,第14天肺指数进一步升高,而W/D、LDH活性、蛋白含量、白细胞计数虽有所下降,但仍显着高于空气对照组。持续高氧暴露7天后可以显着增加胶原沉积,14天后更为明显。肺组织形态学检查发现持续高氧暴露3天后可见肺泡内初学及炎症细胞浸润,持续高氧暴露7天时,可见肺泡内出血及肺泡炎症细胞浸润明显增加,肺间隔增宽,肺组织正常结构局灶性破坏,局部肺结构紊乱,终末气腔明显扩张、小肺泡数量减少。持续高氧暴露14天时,肺间隔更宽,肺间质大量血性渗出,肺组织正常结构破坏,终末气腔扩张更为明显、小肺泡数量更少。2.高氧3天+空气组一般情况与空气对照组比较无明显差别,存活率低于空气对照组但高于持续高氧暴露组,停止高氧暴露4天(生后7天)除肺指数及W/D外,BALF中LDH活性、蛋白含量及白细胞计数均与对照组无显着差异,且均显着低于持续高氧暴露组;停止高氧暴露11天(生后14天),上述所有指标均与空气对照组无明显差异。HYP在停止高氧暴露11天(生后14天)后虽然低于持续高氧组,但开始显着高于空气对照组,在21天后增加更为明显。形态学检查发现停止高氧暴露4天(生后7天)时肺泡内则少见炎性渗出,与空气对照组无明显区别,14天时出现肺泡间隔增宽,21天时形成明显的纤维增生。结论1.持续高氧3天可以引起新生大鼠肺组织急性肺损伤及肺泡炎症的发生。随持续高氧暴露时间越长,新生大鼠急性高氧性肺损伤程度越重。2.在持续高氧7天后改为60%亚高氧继续暴露至生后14天,肺急性损伤及肺泡炎症相对减轻,而胶原沉积、肺泡发育受阻进一步加重。所有动物均不能存活至21天。3.3天短暂的高氧后,随生后时间延长虽然停止高氧暴露肺脏仍然会逐渐出现肺泡发育受阻及肺纤维化为特点的慢性损伤改变。第二章:高氧不同阶段应用MK-801对3天高氧暴露所致新生大鼠肺发育受阻及胶原沉积的影响目的比较在高氧致新生大鼠肺损伤不同阶段应用MK-801对肺损伤的影响,探寻NMDA受体在高氧致新生大鼠慢性肺损伤发生发展中的作用方法孕22天顺产分娩新生大鼠生后2-4小时内编号并随机分为六组:空气对照组,空气+MK-801 A组(出生1-3天使用MK-801),空气+MK-801 B组(出生8-10天使用MK-801),高氧组,高氧+MK-801A组(高氧暴露同时使用MK-801),高氧+MK-801 B(高氧暴露停止4天后开始使用MK-801)组。其中高氧组、高氧+MK-801A组和高氧+MK-801 B组新生大鼠生后即置于≥95%氧仓中持续高氧暴露3天后接受常压空气;空气+MK-801 A组和高氧+MK-801 A组新生大鼠生后1天开始每日腹腔注射MK-801 0.05mg/kg,连用3天;空气+MK-801 B组和高氧+MK-801 B组在生后8开始每日腹腔注射MK-801 0.05mg/kg,连用3天。分别在生后的第3天,第7天,第14天,第21天处死动物。进行体重、肺重、肺指数及肺湿重/于重(W/D)的测定;支气管肺泡灌洗检测LDH活性、蛋白含量和白细胞计数;同时检测肺组织HYP含量:检测肺组织病理学形态检查,计算RAC值;在在后21天时进行肺功能的检测。结果1.高氧暴露1-3d时应用MK-801(高氧+MK-801 A组),可以减轻高氧导致的生后3天及7天肺泡损伤及弥漫性炎症反应,降低生后3天及7天高氧致W/D及肺指数的升高,降低生后14天及21天高氧致HYP含量的升高,改善高氧致肺纤维化程度及肺泡发育受阻,改善高氧所致生后21天时肺顺应性的下降。2.高氧暴露3d后至生后8-10d应用MK-801(高氧+MK-801 B组),HYP含量、肺顺应性在生后14天和/或21天明显低于高氧组,但高于高氧+MK-801 A组;RAC值高于高氧组,低于高氧+MK-801 A组。结论首次发现NMDA受体阻断剂MK-801对高氧致新生大鼠肺损伤的保护作用除了减轻早期细胞损伤及炎症反应外,还可以直接抑制高氧诱导的肺组织胶原沉积及肺泡发育受阻。提示NMDA受体的激活参与了高氧诱导的慢性肺损伤的发展。第叁章:NMDA受体的激活对人胎肺成纤维细胞胶原分泌和自身降解的影响目的:检测NMDA受体在人胎肺成纤维细胞上的表达,并观察其在人胎肺成纤维细胞胶原分泌与自身降解中的作用。方法1.免疫组织化学及免疫荧光染色法检测人胎肺成纤维细胞NMDAR1,NR2D表达,实时定量PCR方法(Real Time PCR)检测人胎肺成纤维细胞NR1和NR2A,NR2B、NR2C和NR2D受体亚单位mRNA表达。2.直接细胞计数法及MTT检测不同浓度谷氨酸或NMDA对人胎肺成纤维细胞增殖的影响。3.检测不同浓度谷氨酸或NMDA对人胎肺成纤维细胞培养上清液中HYP的影响。4.ELISA法检测NMDA对人胎肺成纤维细胞培养上清液中Ⅰ,Ⅲ型胶原及MMP-1,TIMP-1分泌的影响结果1.正常人胎肺成纤维细胞上存在NMDARs mRNA表达,并且五种受体表达程度并不相同,以NMDAR2A及NMDAR2D表达最强,随后依次为NMDAR2C、NMDA2B和NMDAR1。免疫组化及免疫荧光显人胎肺成纤维细胞存在NMDAR1及NR2D的表达。2.直接细胞计数显示在试验72小时后1mM谷氨酸及1mM NMDA组与其他组相比明显促进人胎肺成纤维细胞增殖,1mM谷氨酸显着高于1mM NMDA组,10mM谷氨酸组与其他组相比抑制增殖。其余各组无显着差异。MTT法显示1mM谷氨酸组与对照组相比MTT值明显增加,MK-801可抑制1mM谷氨酸引起的MTT增加。1mM NMDA组MTT值明显低于1mM谷氨酸组,并与对照组比无显着差异。单独加入MK-801组与对照组及加入NMDA培养细胞无显着差异。3.人胎肺成纤维细胞上清液中HYP的测定显示1mM NMDA组与对照组比较显着增高,1mM谷氨酸组与对照组比较显着增高,NMDA组显着高于谷氨酸组。MK-801可以抑制NMDA或谷氨酸诱导的HYP的升高。4.正常培养人胎肺成纤维细胞存在基础的Ⅰ/Ⅲ型胶原及MMP-1/TIMP-1分泌。NMDA组与对照组比较,Ⅰ/Ⅲ型胶原含量及TIMP-1分泌显着增加,对MMP-1分泌无显着影响。MK-801可以显着抑制NMDA诱导的Ⅰ/Ⅲ型胶原含量及TTMP-1分泌的增加。单独应用MK-801与对照组比较Ⅰ型胶原含量显着降低,对Ⅲ型胶原及MMP-1/TIMP-1的正常分泌无显着影响。结论1.人胎肺成纤维细胞存在NMDA受体表达,以NR2A,NR2D表达最强。2.首次发现谷氨酸可以促进人胎肺成纤维细胞增殖。3.NMDA受体激活可以促进人胎肺成纤维细胞胶原分泌增加和自身降解的减少第四章:NMDA受体激活促进人胎肺成纤维细胞胶原和TIMP-1分泌的细胞内信号转导途径目的:研究NMDAR在人胎肺成纤维细胞胶原分泌及降解中的细胞信号转导通路,论证NMDAR在人胎肺成纤维细胞细胞外基质分泌与自身降解中的作用机制。方法1.Western Blot法观察NMDA对人胎肺成纤维细胞pERK的影响,2.ELISA法观察阻断ERK_(1/2)磷酸化及PKC后对NMDA促人胎肺成纤维细胞Ⅰ/Ⅲ型胶原,MMP1/TIMP1释放的影响。3.定量PCR方法(Real Time PCR)检测NMDA对人胎肺成纤维细胞NMDARs mRNA表达的影响。结果1.正常人胎肺成纤维细胞存在ERK_(1/2)磷酸化,1mM NMDA可以促进ERK_(1/2)磷酸化增强,MK-801可以降低1mM NMDA诱导的ERK磷酸化增强。ERK磷酸化抑制剂U0126可以显着降低细胞正常ERK_(1/2)磷酸化水平,阻断NMDA诱导的ERK_(1/2)磷酸化增强。PKC抑制剂H7也可以显着降低细胞正常ERK_(1/2)磷酸化水平,阻断NMDA诱导的ERK_(1/2)磷酸化增强。2.U0126组与对照组比较Ⅰ/Ⅲ型胶原分泌显着降低,对TIMP-1、MMP-1分泌无显着影响。U0126可以显着抑制NMDA诱导的Ⅰ/Ⅲ型胶原含量及TIMP-1分泌的增加。H7组与对照组比较Ⅰ型胶原分泌显着降低,对Ⅲ型胶原含量及TIMP-1、MMP-1分泌无显着影响。H7可以显着抑制NMDA诱导的Ⅰ/Ⅲ型胶原含量及TIMP-1分泌的增加。3.1mM NMDA作用372小时后,NR1 mRNA表达无显着改变。NR2D mRNA对表达显着增强六倍以上,NR2B/NR2C mRNA表达也较对照组显着增强。NR2A mRNA表达显着下降。结论1.NMDA可以通过NMDA受体介导ERK_(1/2)磷酸化影响人胎肺成纤维细胞胶原的分泌与自身降解。2.NMDAR-PKC-ERR_(1/2)途径是NMDA促人胎肺成纤维细胞胶原分泌与降解的细胞信号转导通路之一。3.NMDA可以引起人胎肺成纤维细胞NMDA受体各亚基表达改变,其生物学意义有待进一步研究。(本文来源于《中南大学》期刊2009-05-01）
吕梅[8]（2009）在《MK-801对宫内缺氧所致胎鼠胰腺发育受阻的影响》一文中研究指出研究目的检测NMDAR在胎鼠胰腺中的表达。观察宫内缺氧对母鼠摄食热卡,胎鼠存活率,体重,胎盘重量,胎盘重量/体重,胰腺重量,胰重/体重,胰岛β细胞的比例的影响,并通过观察NMDAR拮抗剂MK-801对宫内缺氧所致的胎鼠胰腺发育受阻的影响,推断NMDAR激活在此过程中所起的作用。方法1.使用Real-time PCR检测胎鼠胰腺中NMDAR的表达。2.观察MK-801对宫内缺氧所致胎鼠整体及胰腺发育受阻的影响:孕鼠实验分组:空气对照组,空气+MK-801组(0.05mg/kg,腹腔注射),缺氧组,缺氧+MK-801组(0.05mg/kg,腹腔注射),后叁组又分为2天组,6天组和10天组,分别于孕第19天、孕第15天、孕第11天给予相应的处理。通过降低母鼠吸入氧浓度至10.5±1.0%,建立宫内缺氧的模型。于孕21天剖宫取胎,观察缺氧对母鼠摄食热卡、胎鼠存活率、出生体重、胎盘重量、胎盘重/体重、胰腺重量、胰腺重/体重、母鼠及胎鼠血糖、胎鼠血糖/母鼠血糖、胰腺和胰岛的形态、胰岛β细胞比例的影响,以及MK-801对缺氧所致胎鼠上述各项指标变化的影响。结果1.缺氧对胎鼠整体及胰腺发育的影响:(1)母鼠摄食热卡:各缺氧组母鼠摄食热卡均低于空气对照组(p＜0.01或p＜0.05)。(2)存活率:各缺氧组胎鼠的存活率均明显低于空气对照组(p＜0.01)。(3)体重,低出生体重鼠发生率:各缺氧组胎鼠的体重均明显低于空气对照组,且随缺氧天数的增加进行性下降(所有p＜0.01),低出生体重鼠发生率明显高于空气对照组(所有p＜0.01)。(4)胎盘重量,胎盘重/体重:各缺氧组胎盘重量均低于空气对照组(p＜0.01),胎盘重/体重比值随缺氧天数增加逐渐升高,缺氧6天组胎盘重/体重明显大于缺氧2天组(p＜0.05)而与空气对照组相比无统计学差异。缺氧10天组胎盘重/体重明显大于其它缺氧组和空气对照组(p＜0.01)。(5)胰腺重量,胰腺重/体重:各缺氧的胰腺重量随缺氧时间的延长进行性下降(p＜0.01),缺氧10天组胰腺重/体重明显低于空气对照组和其它缺氧组(p＜0.01)。(6)母鼠及胎鼠血糖,血糖比值:缺氧不影响母鼠血糖和胎鼠血糖值,但导致缺氧2天组胎鼠血糖/母鼠血糖升高(p＜0.05),缺氧6天组胎鼠血糖/母鼠血糖下降(p＜0.01)。(7)胰腺及胰岛形态学:缺氧2天组和6天组胎鼠单位面积胰腺内的胰岛数、胰岛面积/胰腺面积、单个胰岛内细胞数、单个胰岛直径和面积与空气对照组均无明显差异。但缺氧10天组的胰岛面积/胰腺面积、单个胰岛内细胞数、单个胰岛直径和面积较空气对照组明显下降(p＜0.01或p＜0.05),HE染色显示胰腺内外分泌部发育不成熟,未形成典型胰岛样结构。(8)胰岛中β细胞比例:各缺氧组的胰岛β细胞比例随缺氧天数的增加进行性下降(p＜0.01或p＜0.05)。2.NMDAR在胎鼠胰腺的表达:胎鼠胰腺中同时存在NMDAR1、NMDAR2A、NMDAR2B、NMDAR2C、NMDAR2D mRNAs的表达,以NMDAR2D的表达量最高,NMDAR2A和NMDAR2C表达量其次,NMDAR1和NMDAR2B表达量最少。3.MK-801对宫内缺氧所致胎鼠整体及胰腺发育受阻的影响:(1)母鼠摄食热卡:缺氧+MK-801各组母鼠摄食热卡与缺氧组相比均无统计学差异,仍低于空气对照组(p＜0.01或p＜0.05)。各空气+MK-801组母鼠摄食热卡均明显低于空气对照组(p＜0.01或p＜0.05)。(2)存活率:缺氧+MK-801各组胎鼠的存活率均明显高于相应的缺氧组(p＜0.01或p＜0.05),与空气对照组相比无统计学差异。空气+MK-801各组的胎鼠存活率与空气对照组相比均无统计学差异。(3)体重,低出生体重鼠发生率:缺氧+MK-801 2天组胎鼠体重明显低于缺氧2天组(p＜0.01),低出生体重鼠发生率较缺氧2天组升高(p＜0.01)。缺氧+MK-801 6天组和10天组胎鼠体重均高于相应的缺氧组(p＜0.01),6天组的低出生体重鼠发生率低于于缺氧组(p＜0.05),缺氧+MK-801 10天组的低出生体重鼠发生率与缺氧10天组相比无统计学差异。空气+MK-801各组的体重均明显低于空气对照组(p＜0.01),低出生体重鼠发生率均明显高于空气对照组(p＜0.01),但各空气+MK-801组之间比较无统计学差异。(4)胎盘重量,胎盘重/体重:缺氧+MK-801 2天组和6天组的胎盘重量与相应的缺氧组相比无统计学差异,10天组胎盘重量明显高于缺氧10天组(p＜0.01)。缺氧+MK-801 2天组胎盘重/体重比值高于缺氧2天组(p＜0.05),缺氧+MK-801 6天组与缺氧6天组相比无统计学差异,缺氧+MK-80110天组胎盘重/体重比值明显低于缺氧10天组(p＜0.01),缺氧+MK-801各组与空气对照组相比均无统计学差异。各空气+MK-801组的胎盘重量均较空气对照组降低(p＜0.01或p＜0.05),胎盘重/体重与空气对照组相比无统计学差异,空气+MK-801 10天组的胎盘重/体重明显高于2天组和6天组(p均＜0.05)。(5)胰腺重量,胰腺重/体重:缺氧+MK-801 2天组胰腺重量明显低于缺氧2天组,缺氧+MK-801 6天组和10天组的胰腺重量均明显高于相应的缺氧组,但仍明显低于空气对照组(所有p＜0.01或p＜0.05)。缺氧+MK-801 2天组和6天组的胰腺重/体重的比值较空气对照组和相应缺氧组均无统计学差异,但缺氧+MK-801 10天组的胰腺重/体重明显高于缺氧10天组(p＜0.01)。各空气+MK-801组的胰腺重量均低于空气对照组(p＜0.01),仅空气+MK-801 6天组的胰腺重/体重明显低于空气对照组(p＜0.01),其余各组胰腺重/体重与空气对照组相比无统计学差异。(6)母鼠及胎鼠血糖,血糖比值:缺氧+MK-801 2天组胎鼠血糖/母鼠血糖的比值低于缺氧2天组(p＜0.05),缺氧+MK-801 6天组和10天组胎鼠血糖/母鼠血糖的比值较对应的缺氧组升高(p＜0.01)。缺氧+MK-801各组与胎鼠血糖/母鼠血糖的比值与空气对照组相比无统计学差异。缺氧+MK-801各组的母鼠血糖及胎鼠血糖与相应的缺氧组和空气对照组相比,无统计学差异。空气+MK-801各组的胎鼠及母鼠血糖均与空气对照组相比无统计学差异,空气+MK-801 6天组的胎鼠血糖/母鼠血糖高于空气对照组(p＜0.05)。(7)胰腺及胰岛形态学:缺氧+MK-801 2天组和6天组胎鼠单位面积胰腺内的胰岛数、胰岛面积/胰腺面积、单个胰岛内细胞数、单个胰岛直径和面积与相应的缺氧组和空气对照组相比,无统计学差异。缺氧+MK-801 10天组单位面积胰腺内胰岛数大于缺氧10天组(p＜0.05),胰岛面积/胰腺面积与缺氧10天组和空气对照组相比均无统计学差异,因缺氧10天组胰岛面积/胰腺面积低于空气对照组(p＜0.05),提示缺氧+MK-80110天组胰岛面积/胰腺面积高于缺氧10天组。HE染色显示缺氧+MK-801 10天组胰腺及胰岛的发育明显较缺氧10天组成熟。空气+MK-801各组与空气对照组相比,胰岛面积/胰腺面积、单个胰岛的直径和面积均小于空气对照组(p＜0.01或p＜0.05)。(8)胰岛中β细胞比例:缺氧+MK-801 2天组胰岛β细胞比例与缺氧2天组相比无统计学差异,仍明显低于空气对照组(p＜0.01)。缺氧+MK-801 6天组和10天组胰岛的β细胞比例均较相应的缺氧组明显升高(p＜0.01或p＜0.05),缺氧+MK-801 6天组与空气对照组相比无统计学差异,10天组仍明显低于空气对照组(p＜0.01)。空气+MK-801各组的胰岛中β细胞比例均明显低于空气对照组(p＜0.01或p＜0.05)。结论1.首次发现大鼠胎鼠胰腺中存在NMDAR的表达,以NMDAR2D表达量最高,NMDAR2A和NMADR2C表达量其次,NMDAR1和NMDAR2B表达量最低。2.成功制备宫内缺氧模型。3.MK-801可以明显改善长期慢性宫内缺氧胎鼠的整体和胰腺的发育受阻,NMDAR的过度激活在宫内缺氧所致胎鼠整体及胰腺发育受阻中起到重要作用。4.MK-801可以引起正常胎鼠的整体和胰腺胰岛发育受阻,提示NMDAR可能在胎鼠和胰腺胰岛的发育中起有重要作用。(本文来源于《中南大学》期刊2009-05-01）
岳少杰,邓晓丹,罗自强,尚利宏,黄芙蓉[9]（2007）在《MK-801对新生大鼠高氧性肺损伤后肺泡发育受阻及肺组织胶原沉积的影响》一文中研究指出目的：观察 NMDA 受体阻断剂 MK-801对持续高氧暴露下新生大鼠肺损伤及损伤后胶原沉积和肺泡发育的保护作用。方法：160只孕22天顺产分娩 SD 新生大鼠生后12小时内编号并随机分为四组：空气对照组(n=26)．空气+MK-801组(n=30),高氧组(n=47),高氧+MK-801组(n=57)。空气+MK-801组和高氧+MK -801组分别每天腹腔注射 MK-801 0．05mg／kg,空气对照组和高氧组以同样方法接受等量生理盐水。高(本文来源于《全国围产医学专题学术研讨会论文汇编》期刊2007-08-01）
邓晓丹,罗自强,尚利宏,黄芙蓉,王铭杰[10]（2007）在《NMDA受体介导新生大鼠高氧性肺损伤后肺组织胶原沉积及肺泡发育受阻的机制探讨》一文中研究指出目的：观察 MK-801对高氧暴露下新生大鼠肺组织前Ⅰ、Ⅲ型胶原、TGF-β_1、bFGF 及 NF- κB 表达的影响,进一步阐明 NMDA 受体激活在高氧性肺损伤后肺泡发育受阻及肺组织胶原沉积中的作用及机制,为高氧所致慢性肺损伤的防治研究开辟新的途径。方法：163只孕22天顺产分娩 SD 新生大鼠生后 12小时内编号并随机分为四组：空气对照组(n=26),空气+MK-801组(n=27),高氧组(n=53),高氧+ MK-801组(n=57)。空气+MK-801组和高氧+MK-801组分别每天腹腔注射 MK-8010．05mg/kg,空气对照组和高氧组以同样方法接受等量生理盐水。高氧组与高氧+MK-801组置于有机玻璃箱中,持续输入≥95％O_2,用钠石灰吸收 CO_2,使 CO_2浓度≤5％；空气对照组和空气+MK-801组置于同一室内,接受常压空气。分别在实验后第7天、第14天腹腔注射过量戊巴比妥钠(90mg/kg)后,腹主动脉放血处死动物。部分动物取肺进行实时荧光定量 PCR 检测前Ⅰ、Ⅲ型胶原 mRNA 水平及 TGF-β_1、bFGFmRNA 水平,ELISA 试剂盒测定肺组织匀浆中 TGF-β_1、bFGF 含量；部分动物取肺进行 NF-κB 免疫组化染色。结果：①持续高氧暴露7天时,前Ⅰ型胶原 mRNA 水平虽较空气组和空气组+MK-801组增高,但差异无显着性意义(P＞ 0．05)；随着高氧暴露时间的延长其水平进一步增加,至高氧暴露14天时即明显高于空气组和空气+MK- 801组(P 均＜0．01)。而前Ⅲ型胶原 mRNA 水平变化和前Ⅰ型胶原相反,在高氧暴露7天时,即明显高于空气组和空气+MK-801组(P 均＜0．01),随后却逐渐下降,至高氧暴露14天时虽仍高于空气组和空气+ MK-801组(P 均＜0．01)．但较7天时已明显下降(P＜0．01)。MK-801可抑制持续高氧暴露7天及14天时前Ⅲ型胶原 mRNA 水平的增加(P 均＜0．01),以及抑制持续高氧显露14天时前Ⅰ型胶原 mRNA 水平的增加(P 均＜0．05)。②持续高氧暴露可导致肺组织中 TGF-β_1mRNA 水平的增加,高氧暴露7天时,高氧组肺组织 TGF-β_1mRNA 水平明显高于空气组和空气+MK-801组更为明显(P 均＜0．01),高氧暴露14天时增高较空气组和空气+MK-801组(P 均＜0．01)；持续高氧暴露下肺组织 TGF-β_1蛋白含量与 mRNA 水平变化具有一致性。MK-801可降低持续高氧暴露7天及14天 bFGF-β_1mRNA 水平及蛋白含量的增加(P 均＜0．01)。③持续高氧暴露可导致 bFGF mRNA 水平的增高,至高氧暴露14天时高氧组肺组织 bFGF mR- NA 水平显着高于空气组和空气+MK-801(P 均＜0．01)；持续高压暴露下肺组织 bFGF 蛋白含量与 mRNA 水平变化具有一致性。MK-801可抑制高氧暴露14天时 bFGF mRNA 水平及蛋白含量的增加(P＜0．05,P ＜0．01)。④肺组织 NF-KB 表达高氧暴露7天时,高氧组肺组织细胞核明显阳性着色,而胞浆阳性着色少, 与空气组、空气+MK-801组比较差异有显着性(P 均＜0．01)；持续高氧暴露14天时,高氧组胞核着色仍持续强于空气组及空气+MK-801组(P 均＜0．01),MK-801可减轻不同高氧暴露时间所致的 NF-KB 表达的增加(P 均＜0．01)。结论：高氧暴露可促进新生大鼠肺组织 NF-KB 蛋白的表达和激活,上调 TGF-β_1 和 bFGF 的表达,使得前Ⅰ、Ⅲ型胶原表达增加,进而导致高氧性肺损伤后肺泡发育受阻和肺组织胶原沉积。谷氨酸 NMDA 受体阻断剂 MK-801可抑制持续高氧暴露所致新生大鼠肺组织 NF-KB 蛋白的表达和激活, 下调 TGF-β_1及 bFGF 的表达及前胶原的表达,从而减轻高氧性肺损伤后肺泡发育受阻及肺组织胶原沉积的发生。(本文来源于《全国围产医学专题学术研讨会论文汇编》期刊2007-08-01）
发育受阻论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
蜕皮激素是一种可以诱导一系列变态发育关键过程的昆虫蜕皮调节激素,与蜕皮激素受体结合以后与配体蛋白Usp作用形成一个复合体发挥作用.通过兼并引物克隆获得斜纹夜蛾一个600 bp的EcR cDNAs片段编码200个氨基酸,斜纹夜蛾是东亚地区一种主要的农作物害虫.利用这段序列设计了EcR-dsRNA通过注射幼虫的实验来分析EcR基因在不同发育阶段的功能.同时利用印楝素喂食RNAi注射的幼虫观察其与正常对照组有何发育差异.结果显示EcR RNAi会影响正常的蜕皮过程并导致不完成蛹化,在EcR RNAi注射并喂食印楝素的实验组,幼虫出现生长迟缓、发育进程紊乱和腹足发育不正常等现象,由此推测印楝素和EcR RNAi或许影响了蜕皮级联调控通路,由此引发变态发育过程中组织重建紊乱.
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
发育受阻论文参考文献
[1].王伟周.褪黑素缓解老化卵母细胞体外受精后发育受阻的研究[D].中国人民解放军军事医学科学院.2017
[2].赵锦程,吴天旻,刘丽花,汪洋,何琳.EcR-RNAi和印楝素处理斜纹夜蛾幼虫诱导腹足发育受阻表型(英文)[J].华东师范大学学报(自然科学版).2014
[3].谢周涛.丙戊酸可致宫内胎儿认知功能发育受阻[J].药物流行病学杂志.2013
[4].姜雨飞,张燕琴,初晨凤,许颂华,史河秀.抑制雌激素受体α使阻滞和非阻滞品系小鼠受精卵体外发育受阻[C].中华医学会第八次全国计划生育学术会议论文汇编.2012
[5].姜雨飞,张燕琴,初晨凤,许颂华,史河秀.抑制雌激素受体α使阻滞和非阻滞品系小鼠受精卵体外发育受阻[C].中华医学会第六次全国生殖医学学术会议专刊.2012
[6].周小程.NMDA受体激活在宫内缺氧胎鼠肺发育受阻中的作用[D].中南大学.2009
[7].王铭杰.NMDA受体的激活在高氧暴露后新生大鼠肺损伤和肺泡发育受阻中的作用及机制研究[D].中南大学.2009
[8].吕梅.MK-801对宫内缺氧所致胎鼠胰腺发育受阻的影响[D].中南大学.2009
[9].岳少杰,邓晓丹,罗自强,尚利宏,黄芙蓉.MK-801对新生大鼠高氧性肺损伤后肺泡发育受阻及肺组织胶原沉积的影响[C].全国围产医学专题学术研讨会论文汇编.2007
[10].邓晓丹,罗自强,尚利宏,黄芙蓉,王铭杰.NMDA受体介导新生大鼠高氧性肺损伤后肺组织胶原沉积及肺泡发育受阻的机制探讨[C].全国围产医学专题学术研讨会论文汇编.2007