导读:本文包含了髓样前体细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:胆碱能前体细胞,海马,细胞移植,绿色荧光蛋白
髓样前体细胞论文文献综述
曹敬丽,王雅杰[1]（2015）在《胆碱能前体细胞移植入β-淀粉样前体蛋白转基因小鼠脑内的存活和迁移》一文中研究指出目的观察新生小鼠海马原代培养的胆碱能神经前体细胞移植入淀粉样前体蛋白(amyloid precusor protein,APP)转基因小鼠脑内以后的存活和迁移状况,以探索胆碱能神经前体细胞对阿尔茨海默病的治疗前景。方法取新生24h以内增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)转基因小鼠,以原代细胞分离培养方法获得海马胆碱能神经前体细胞,以前体细胞特异性标记抗巢蛋白(Nestin)和胆碱能细胞特异性标记胆碱乙酰基转移酶(choline acetyltransferase,Ch AT)做细胞免疫组化鉴定细胞特性。细胞培养成功后,收集细胞,在小鼠脑立体定位仪的固定下,参照小鼠脑立体定位图谱对APP转基因小鼠施行脑内注射。移植1周以后灌注取移植鼠脑组织行冰冻切片,在共聚焦显微镜下通过外源细胞的绿色自发荧光观察移植细胞的存活和迁移情况。结果在移植位点,外源性绿色荧光细胞存活良好并以移植点为中心向外迁移,且呈继续迁移的趋势。结论新生小鼠海马原代细胞培养以后呈现神经前体细胞的特性并且胆碱能阳性,移植入APP转基因小鼠脑内以后,这些胆碱能阳性的神经前体细胞存活良好并呈现较强迁移能力,为进一步探索该细胞对阿尔茨海默病的治疗可能性提供了依据。(本文来源于《标记免疫分析与临床》期刊2015年09期）
吴蓉蓉[2]（2009）在《人胚胎干细胞建系，鉴定及分化为多能性间充质样前体细胞》一文中研究指出人胚胎干细胞(hESC)是一类来源于植入前囊胚内细胞团(ICM),具有体外无限增殖潜能且能在特定条件下分化为多类成体组织或胚外组织的细胞群体。它作为体外研究人类胚胎发育的优势模型,进行药物筛选的良好平台,参与细胞治疗的无限资源,越来越受到全世界科研工作者的关注。目前,建立能广泛适用于临床的hES细胞系成为世界关注的焦点。然而大部分已经建立的hES细胞系,包括NIH认可的在内,均在建系之初以及后续的培养过程中直接或间接地接触到非人源化物质,这将限制其未来的临床应用前景。虽然人源饲养层培养体系,hESC自体来源的饲养层培养体系,以及多种无饲养层培养体系或许能安全有效地培养hESC,但是完全不接触任何异源物质的ICM分离过程也亟待建立。我们采用非接触性激光辅助孵出系统结合连续的培养来获得孵出囊胚,并以此为材料,不通过“免疫手术”等可能接触异源物质的操作,建立起一株属于中国族群的hES细胞系ZJUhES-1。该细胞系符合hESC的相关标准:具备典型的形态学特征;表达一系列hESC特异性标志;能长期增殖并维持稳定的二倍体核型;能在体内体外分化为多个胚层的细胞。同时,DNA指纹图谱鉴定证实ZJUhES-1具有特有的身份,不同于其它已报道细胞系。成功建立干细胞治疗需要具备多向分化潜能且免疫相容的干细胞群体,高效的定向分化技术,以及能安全有效地扩增干细胞群体的培养体系。除了所熟知的一些成体组织外,hESC逐渐成为又一类能分离获得间充质样细胞的组织来源。然而hESC单细胞消化后难以存活的特征,限制其目前的分化研究和未来的临床应用。因此我们采用ROCK抑制剂Y-27632提高hESC单细胞消化贴壁后的存活率,并以此单层系统为基础,利用无血清无血清替代物且成分明确的N2B27培养体系,将hESC分化为间充质样前体细胞(hESC-MP),整个过程不接触任何动物源性物质。分化所得的细胞呈现成纤维样细胞形态,符合MSC的评价标准,如自我更新潜能,表达多种MSC特异性标志,能分化为成骨细胞,脂肪细胞和软骨细胞等间质细胞。与其他文献报道的hESC-MSC相比,我们所获得hESC-MP还能分化为平滑肌细胞,心肌细胞,功能性肝细胞和表达不同神经递质的神经细胞,这使得它们更适合于未来的临床应用。此外,我们还通过Y-27632协助的单层诱导系统在含血清的培养条件下将hESC分化为另一类MSC。与N2827培养体系中获得的hESC-MP相比,这类hESC-MSC表达更高比例的MSC特异性分子标志,并呈现更强的增殖潜能。我们将其移植入四氯化碳(CCl_4)诱导的小鼠急性肝损伤模型中,初步发现这类细胞能改善肝功能,并促进肝组织自身修复。(本文来源于《浙江大学》期刊2009-05-01）
王晓梅[3]（2009）在《Gr-1~+CD11b~+髓样前体细胞在小鼠哮喘相关炎症中作用的初步研究》一文中研究指出目的研究Gr-1+CD11b+髓样前体细胞在卵清蛋白(Ovalbumin, OVA)诱导的小鼠哮喘相关炎症中的作用。方法采用Percoll密度梯度离心从小鼠肺组织或骨髓中分离获得组分2(Fraction 2, Fr2),经贴壁处理后,收集非粘附细胞,获得Gr-1+CD11b+髓样前体细胞。将SPF级雌性BALB/c小鼠随机分为3组:正常对照组、哮喘组、哮喘/处理组。(1)通过腹腔注射的方式于实验的第0、7、14天用OVA-氢氧化铝佐剂分别致敏哮喘组以及哮喘/处理组小鼠。于第17天开始给予哮喘组和哮喘/处理组小鼠OVA雾化吸入进行激发,持续7天。正常对照组则用PBS进行致敏和激发。(2)于第16天和第19天分别过继性转移Gr-1+CD11b+髓样前体细胞到哮喘/处理组小鼠体内,进行治疗。(3)采用Percoll密度梯度离心从哮喘小鼠肺组织中分离获得Fr2细胞,贴壁处理4 h后,收集非粘附细胞,流式细胞术检测非粘附的Fr2细胞中Gr-1+CD11b+细胞的比例。然后通过瑞氏染色的方法得到Gr-1+CD11b+髓样前体细胞的形态学。(4)用CFSE标记Gr-1+CD11b+髓样前体细胞,从尾静脉注入小鼠体内,12 h后处死,取出肺组织,制成冰冻切片,荧光显微镜观察CFSE标记的细胞在肺组织中的分布;流式细胞术检测CFSE标记的细胞的比例。(5)分别在雾化吸入OVA的第3天、第5天和第7天,流式细胞术检测哮喘组小鼠肺组织中Gr-1~+CD11b+细胞比例的变化。(6)MTT比色法以及流式细胞术分析法检测Gr-1~+CD11b+髓样前体细胞对anti-CD3/anti-CD28诱导的初始T细胞增殖的抑制作用。(7)通过比较支气管肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid, BALF)的总数量以及细胞分类计数情况,观察输入Gr-1~+CD11b+髓样前体抑制细胞治疗哮喘小鼠气道炎症的效果。(8)将肺组织进行苏木精伊红(Hematoxylin and eosin, HE)染色,观察肺组织病理学改变。( 9)酶联免疫吸附试验( Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组小鼠外周血血清中OVA特异性的Ig-E的含量以及BALF上清中IL-4和IFN-γ的含量。(10)RT-PCR检测小鼠肺组织中IL-4和IFN-γmRNA的表达。结果(1)哮喘小鼠肺组织中存在一定量Gr-1~+CD11b+髓样前体细胞:哮喘组小鼠肺组织中Fr2细胞的数量,以及Fr2细胞中Gr-1~+CD11b+细胞的比例都高于正常对照组。(2)Gr-1~+CD11b+髓样前体细胞具有向哮喘小鼠肺组织趋化、聚集的能力,且随着炎症的进展其趋化、聚集能力逐渐增强:CFSE标记的Gr-1~+CD11b+髓样前体细胞在哮喘组小鼠肺组织中的分布较正常对照组增加;伴随着OVA雾化次数的增加,哮喘小鼠肺组织中Gr-1~+CD11b+细胞的比例逐渐上升。(3)哮喘小鼠肺组织中Gr-1~+CD11b+髓样前体细胞对anti-CD3/anti-CD28诱导的初始T细胞的增殖有明显的抑制作用,且随着数量的增加,抑制能力越强。(4)Gr-1~+CD11b+髓样前体细胞对哮喘小鼠气道炎症有明显的抑制作用:哮喘/处理组小鼠BALF细胞总数以及嗜酸性细胞和巨噬细胞所占的比例明显低于哮喘组。(5)哮喘/处理组小鼠肺组织中血管周围及支气管各层组织中炎性细胞浸润的程度以及杯状细胞增生的程度较哮喘组小鼠减轻。(6)哮喘/处理组小鼠外周血血清中OVA特异性Ig-E的含量和哮喘组小鼠相比明显降低;哮喘/处理组小鼠BALF上清中IL-4的含量较哮喘组小鼠降低,IFN-γ的含量较哮喘组小鼠升高;在mRNA水平上,哮喘/处理组小鼠较哮喘组小鼠IL-4 mRNA的表达下调,IFN-γmRNA的表达上调。结论哮喘小鼠肺组织中存在一定量的Gr-1~+CD11b+髓样前体细胞,并具有一定的免疫抑制功能;过继性转移来源于荷瘤鼠骨髓的Gr-1~+CD11b+髓样前体抑制细胞,对哮喘小鼠有显着的治疗效应。因此,探讨适宜的策略诱导肺组织中Gr-1~+CD11b+髓样前体细胞的数量增加以及免疫抑制功能增强,可望成为临床过敏性哮喘预防和治疗的一种新策略。(本文来源于《华中科技大学》期刊2009-05-01）
骆惊涛[4]（2009）在《骨髓源性髓样前体细胞参与肝癌转移复发的实验研究》一文中研究指出目的:利用骨髓源性髓样前体细胞(MPCs)在血管形成过程中的积极作用,研究肝癌组织中肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)的表达与临床病理学特征的关系及对肿瘤血管生成的影响。方法:经8.0Gy剂量辐照的BALB/c nu/nu裸小鼠,接受同型小鼠骨髓细胞分选后的移植,经4周骨髓重建后行肝脏原位种瘤,观测分选移植骨髓动员情况。应用免疫组织化学方法检测49例肝癌组织中TAMs、微血管密度、血管内皮生长因子的分布,并用计算机图像分析系统进行分析。结果:采用CD45抗体交联免疫磁珠分选法,并加以优化,分选出骨髓源性髓样前体细胞,呈典型的MPCs形态特征,免疫组化证实CD45表达阳性。具有干细胞标记物CD133阳性的髓样前体细胞MPCs在种瘤后第3-5周达到高峰。TAMs定量与肿瘤血管侵犯显着相关(P＜0.05);与Edmonson分级密切相关(P＜0.01),而TAMs计数与肿瘤大小、HBsAg和AFP水平无明显关系(P＞0.05),与患者年龄性别亦无明显关系(P＞0.05)。肿瘤组织中MVD及VEGF表达高于对照组(P＜0.05)。TAMs分布与MVD及VEGF呈正相关(r=0.56,P＜0.05;r=0.58,P＜0.05),VEGF表达与MVD呈显着正相关(r=0.334,P＜0.01)。结论:1.在X射线的放射率0.8Gy/min时,8Gy是雄性BALB/c nu/nu裸小鼠骨髓毁损的理想照射剂量。骨髓毁损的雄性BALB/c nu/nu裸小鼠骨髓移植后4周骨髓功能重建完全。2.骨髓重建完全肝脏原位种瘤3-5周时肿瘤血管生成达到高峰,MPCs特异性趋化进入肝癌组织并参与血管生成。3.肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)在所有HCC组织中均呈现不同程度表达,其表达强度与肿瘤侵犯血管之间存在明显相关关系,提示TAMs是介导HCC侵犯血管的因素之一。4.HCC中TAMs表达与HCC病理分化程度明显相关,低分化或Edmondson分级Ⅲ-Ⅳ级TAMs阳性率显着高于中高分化组或Edmondson分级Ⅰ-Ⅱ级。5.正常组织、癌间质、癌周组织中TAMs表达差异有显着性,其中癌间质表达最高。HCC中TAMs表达与肝癌组织中肿瘤微血管密度存在正相关关系,提示TAMs可能参与到肝癌血管生成的过程中,为肝癌肿瘤血管生成的研究提供了新途径,并有可能为抑制肝癌血管生成提供新的靶向。(本文来源于《天津医科大学》期刊2009-05-01）
何朝荣,王玮,张群林,杜先华,刘瑜[5]（2004）在《骨髓内皮样前体细胞的体外研究》一文中研究指出目的 探讨骨髓内皮样前体细胞体外扩增及其向内皮细胞定向分化条件。方法采用细胞密度梯度离心法分离兔骨髓单个核细胞 ,用内皮细胞生长添加剂对贴壁细胞进行诱导分化 ,观察细胞增殖情况及其生物学特性。结果在ECGS作用下贴壁细胞每扩增一代 ,细胞数量增加 5～ 8倍。细胞单层排列时呈现“铺路石”样形态 ,同时扩增细胞表达vonWillebrandfactor(vWF) ,具有吞噬ac LDL的功能。结论成体骨髓存在一定数量的内皮样前体细胞 ,体外ECGS能刺激其增殖并定向分化(本文来源于《中国输血杂志》期刊2004年03期）
安小惠,蔡国平[6]（2002）在《人脐带血中内皮样前体细胞的初步研究》一文中研究指出目的 观察脐带血中内皮细胞的前体细胞 ,并研究该前体细胞分化成熟所需条件。方法 采用常规分离方法 ,分离脐带血中的单个核细胞 ,培养于含小牛下丘脑提取液和地塞米松的MCDB131培养液中 ,以获得具有粘附性的细胞 ,于倒置相差显微镜下每日观察两次一并记录。结果初步的实验结果表明脐带血中存在内皮细胞的前体细胞 ,小牛下丘脑提取物对该细胞的生成有促进作用 ,而地塞米松对其生成有抑制作用。结论 初步证实脐带血中有内皮细胞的前体细胞存在 ,并对其分化发育条件有了初步认识 ,为对其进一步的研究及应用打下了基础(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2002年06期）
髓样前体细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
人胚胎干细胞(hESC)是一类来源于植入前囊胚内细胞团(ICM),具有体外无限增殖潜能且能在特定条件下分化为多类成体组织或胚外组织的细胞群体。它作为体外研究人类胚胎发育的优势模型,进行药物筛选的良好平台,参与细胞治疗的无限资源,越来越受到全世界科研工作者的关注。目前,建立能广泛适用于临床的hES细胞系成为世界关注的焦点。然而大部分已经建立的hES细胞系,包括NIH认可的在内,均在建系之初以及后续的培养过程中直接或间接地接触到非人源化物质,这将限制其未来的临床应用前景。虽然人源饲养层培养体系,hESC自体来源的饲养层培养体系,以及多种无饲养层培养体系或许能安全有效地培养hESC,但是完全不接触任何异源物质的ICM分离过程也亟待建立。我们采用非接触性激光辅助孵出系统结合连续的培养来获得孵出囊胚,并以此为材料,不通过“免疫手术”等可能接触异源物质的操作,建立起一株属于中国族群的hES细胞系ZJUhES-1。该细胞系符合hESC的相关标准:具备典型的形态学特征;表达一系列hESC特异性标志;能长期增殖并维持稳定的二倍体核型;能在体内体外分化为多个胚层的细胞。同时,DNA指纹图谱鉴定证实ZJUhES-1具有特有的身份,不同于其它已报道细胞系。成功建立干细胞治疗需要具备多向分化潜能且免疫相容的干细胞群体,高效的定向分化技术,以及能安全有效地扩增干细胞群体的培养体系。除了所熟知的一些成体组织外,hESC逐渐成为又一类能分离获得间充质样细胞的组织来源。然而hESC单细胞消化后难以存活的特征,限制其目前的分化研究和未来的临床应用。因此我们采用ROCK抑制剂Y-27632提高hESC单细胞消化贴壁后的存活率,并以此单层系统为基础,利用无血清无血清替代物且成分明确的N2B27培养体系,将hESC分化为间充质样前体细胞(hESC-MP),整个过程不接触任何动物源性物质。分化所得的细胞呈现成纤维样细胞形态,符合MSC的评价标准,如自我更新潜能,表达多种MSC特异性标志,能分化为成骨细胞,脂肪细胞和软骨细胞等间质细胞。与其他文献报道的hESC-MSC相比,我们所获得hESC-MP还能分化为平滑肌细胞,心肌细胞,功能性肝细胞和表达不同神经递质的神经细胞,这使得它们更适合于未来的临床应用。此外,我们还通过Y-27632协助的单层诱导系统在含血清的培养条件下将hESC分化为另一类MSC。与N2827培养体系中获得的hESC-MP相比,这类hESC-MSC表达更高比例的MSC特异性分子标志,并呈现更强的增殖潜能。我们将其移植入四氯化碳(CCl_4)诱导的小鼠急性肝损伤模型中,初步发现这类细胞能改善肝功能,并促进肝组织自身修复。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
髓样前体细胞论文参考文献
[1].曹敬丽,王雅杰.胆碱能前体细胞移植入β-淀粉样前体蛋白转基因小鼠脑内的存活和迁移[J].标记免疫分析与临床.2015
[2].吴蓉蓉.人胚胎干细胞建系，鉴定及分化为多能性间充质样前体细胞[D].浙江大学.2009
[3].王晓梅.Gr-1~+CD11b~+髓样前体细胞在小鼠哮喘相关炎症中作用的初步研究[D].华中科技大学.2009
[4].骆惊涛.骨髓源性髓样前体细胞参与肝癌转移复发的实验研究[D].天津医科大学.2009
[5].何朝荣,王玮,张群林,杜先华,刘瑜.骨髓内皮样前体细胞的体外研究[J].中国输血杂志.2004
[6].安小惠,蔡国平.人脐带血中内皮样前体细胞的初步研究[J].细胞与分子免疫学杂志.2002