导读:本文包含了链延长酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:油菜,FAE1,底物特异性,脂肪酸
链延长酶论文文献综述
淮东欣,张园园,张椿雨,Edgar,B.CAHOON,周永明[1]（2018）在《甘蓝型油菜脂肪酸碳链延长酶BnaA.FAE1与BnaC.FAE1的底物特异性分析》一文中研究指出研究脂肪酸碳链延长酶(FAE1)的底物特异性,旨在为改良油料种子脂肪酸提供信息,将甘蓝型油菜A、C基因组的BnaA. FAE1和BnaC. FAE1分别在亚麻荠种子中表达。其转基因种子中,山嵛酸与芥酸含量的比值(C22∶0/C22∶1)分别为0. 18和0. 88,表明BnaA. FAE1对单不饱和脂肪酸亲和力较高,而BnaC. FAE1则对饱和脂肪酸亲和力较高,这种差异在各转基因世代表现稳定。通过分析T3转基因家系种子中酰基辅酶A(Acyl-Co As)的组成,进一步证明了上述结论。但是在拟南芥中分别异源表达上述基因,并没有观察到类似的底物特异性差异。在甘蓝型油菜祖先种,白菜型油菜和甘蓝种子中调查其C22∶0/C22∶1比值,同样未发现其FAE1底物特异性存在差异。综上认为BnaA. FAE1和BnaC. FAE1在亚麻荠中存在底物特异性。(本文来源于《中国油料作物学报》期刊2018年05期）
陈晓峰,江贤章,毛若雨[2]（2010）在《脂肪酸碳链延长酶与脱饱和酶在酿酒酵母中共表达》一文中研究指出为了利用转基因技术在酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae中生产二十二碳六烯酸(DHA,22∶6Δ4,7,10,13,16,19n-3),构建了同时含C20-Δ5脂肪酸碳链延长酶(TFD5)和C22-Δ4脂肪酸碳链脱饱和酶(FAD4)基因的共表达质粒pYTFD5-FAD4.该质粒是通过基因重组的方法,使脂肪酸碳链延长酶与脱饱和酶基因置于各自启动子和终止子下获得的.共表达质粒pYTFD5-FAD4转化酿酒酵母所得到基因工程菌,在添加终质量分数为2%的半乳糖,终体积分数为1%的NP-40和0.3 mmol/L的底物二十碳五烯酸(EPA,20∶5Δ5,8,11,14,17n-3)下进行诱导,可直接转化二十碳五烯酸(EPA,20∶5Δ5,8,11,14,17n-3)生成二十二碳五烯酸(DPA,22∶5Δ4,7,10,13,16n-3)和二十二碳六烯酸(DHA,22∶6Δ4,7,10,13,16,19n-3).(本文来源于《福建师范大学学报(自然科学版)》期刊2010年04期）
陈晓峰[3]（2010）在《脂肪酸碳链延长酶与脱饱和酶在酿酒酵母中共表达》一文中研究指出DHA在人体中有许多重要的生理作用,对维持人体健康是不可或缺的,研究还发现其对改善高血压、关节炎、抑郁症等也有显着效果。DHA由于具有这些特殊生理作用,现今已成为高附加值、市场需求广泛的产品。现今对DHA研究主要集中于利用转基因手段在各种作物和微生物中大量、廉价生产DHA。为利用转基因技术在酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae中生产二十二碳六烯酸(DHA,22：6△4,7,10,13,16,19 n-3),本文通过基因重组的方法构建了同时含破囊壶菌Thraustochytrium sp. FJN-10△5脂肪酸延长酶(TFD5)基因、△4脂肪酸脱饱和酶(FAD4)基因的共表达质粒PYTFD5-FAD4.该质粒是通过基因重组的方法,使FTD5、FAD4基因置于各自启动子和终止子下获得的。该质粒转化酿酒酵母所构建的重组工程菌,在添加终浓度为2%的半乳糖、终浓度为1%的NP-40和0.3mmol/L的底物二十碳五烯酸(EPA,20：5△5,8,11,14,17 n-3)下进行诱导,可直接转化二十碳五烯酸(EPA,20：5△5,8,11,14,17 n-3)生成二十二碳五烯酸(DPA,22：5△4,7,10,13,16 n-3)和DHA,从EPA到DHA的转化效率为12.47%。为进一步提高转化率,通过基因重组的方法构建了同时含TFD5基因、FAD4基因和酿酒酵母细胞色素b5基因的共表达质粒pYTFD5-FAD4-B5,各基因拥有各自的启动子和终止子。该质粒转化酿酒酵母所构建的工程菌在上述诱导条件下,从DPA到DHA的转化效率未见明显提高,表明启动子是影响本实验转化率的主要因素。(本文来源于《福建师范大学》期刊2010-06-30）
陈晓峰,江贤章,吴松刚,黄建忠[4]（2010）在《脂肪酸碳链延长酶与脱饱和酶在酿酒酵母中共表达》一文中研究指出DHA在人体中有许多重要的生理作用,对维持人体健康是不可或缺的,研究还发现其对改善高血压、关节炎、抑郁症等也有显着效果。DHA由于具有这些特殊生理作用,现今已成为高附加值、市场需求广泛的产品。现今对DHA研究主要集中于利用转基因手段在各种作物和微生物中大量、廉价生产DHA。为利用转基因技术在酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae中生产二十二碳六烯酸(DHA,22:6△~(4,7,10,13,16,19)n-3),本文通过基因重组的方法构建了同时含破囊壶菌Thraustochytrium(本文来源于《华东六省一市生物化学与分子生物学会2010年学术交流会论文集》期刊2010-06-23）
张芹[5]（2010）在《长链不饱和脂肪酸链延长酶与去饱和酶进化分析及phytophthora infestans中相关基因鉴定》一文中研究指出作为鱼油主要成分的EPA和DHA等长链多不饱和脂肪酸(Long-Chain PolyUnsaturated fatty acids,LCPUFAs),是胎、婴、幼儿的视网膜与大脑皮层正常发育所必需的,对防治心脑血管等疾病起重要作用。它们的保健功能已得到人们广泛认识。通常人体合成的EPA和DHA能够满足正常的生理活动需要,但是孕妇、婴幼儿、老年人和疾病患者需要饮食中补充部分EPA和DHA。目前,LCPUFA主要来源于海洋野生鱼和单细胞微藻。由于海洋野生鱼资源日益枯竭,其产量已不能满足人们日益增长的需求,而且,由于环境污染等原因导致这类鱼油不适于孕妇和婴幼儿食用,而通过单细胞微藻发酵途径提炼鱼油成本太高。因此寻找能够持续、经济、安全的EPA和DHA生产替代来源成为亟待解决的问题。代谢基因工程技术的发展,为通过转基因技术在油料作物中生产LCPUFA提供了可能。最近,已从微藻中克隆、鉴定了一些LCPUFA合成过程中的链延长酶和去饱和酶基因,并在油料作物中成功表达,合成了EPA和DHA,但合成水平远远低于克隆这些基因的野生微藻。解决转基因植物中LCPUFA合成水平低的方法除优化基因表达、选择合理的合成代谢途径外,克隆超表达活性的基因显然是最有效的途径之一。但是,由于LCPUFA合成代谢过程中的链延长酶和去饱和酶,除保守区的少数几个氨基酸高度保守外,同源性很低,造成该类新基因克隆困难。目前,主要是通过cDNA文库杂交筛选和规模化测序相结合来筛选、克隆该类新基因,比较费时费力,成本高。近年来,公共生物信息数据库中有关各种生物的核酸、蛋白序列信息已呈爆炸式增长,为分析和鉴定某类基因提供了强大的信息资源支持。本研究拟用已知功能的LCPUFA合成代谢途径中的链延长与去饱和酶氨基酸序列在NCBI上进行PSI-BLAST搜索,一方面系统搜索整理功能已鉴定或已预测的去饱和酶和链延长酶;另一方面,对搜寻到的一些未知同源序列,通过生物信息学分析手段初步筛选、鉴定可能的去饱和酶和链延长酶。在此基础上,分别构建去饱和酶和链延长酶的进化树,绘制这些酶基因的生物详细分布表,为克隆、鉴定该类新基因提供全面系统的参考指引。生物信息学分析结果如下:1、共从NCBI数据库中搜索到功能已鉴定的267个去饱和酶和243个链延长酶,功能已预测未鉴定的107个去饱和酶和389个链延长酶,同时新分析预测了近400个去饱和酶和链延长酶类似基因。2、用neighbor-joining法构建了由532个去饱和酶构成的无根进化树,进化树共有6个骨干分枝,显示去饱和酶在进化早期就分化为6个不同亚家族。其中4个大亚家族分别为(1)First Desaturase、(2)Omega Desaturase、(3)Front-End Desaturase和(4)Sphingolipid Desaturase,与现有去饱和酶分类标准相符;另外一个是在进化起源上很古老的亚家族,仅由来源于Phytophthora infestans中的3去饱和酶构成,在进化树中位置独特;还有一个由来源于不同生物的11个去饱和酶构成的小亚家族,后两个小亚家族成员不适于现有去饱和酶分类标准分类。3、同样方法构建了由871个链延长酶构成的无根进化树,进化树共有2大支,显示链延长酶在进化早期就分化为2个不同亚家族:(1)S/MUFA链延长酶,(2) PUFA链延长酶。2个亚家族间有1个共同保守的氨基酸框,意味着所有的链延长酶可能起源相同,不同功能的分化可能是在进化过程中适应环境变化的结果。4、对去饱和酶和链延长酶进化树研究分析表明,去饱和酶和链延长酶在功能进化上至少是通过两个时期来完成的。第一个时期,这些蛋白分化成不同的亚家族,其中去饱和酶分化成6个亚家族,而链延长酶分化成2个亚家族,它们分别具有不同的底物特异性。第二个时期,每一个独特的亚家族又发生了底物专一性和未知特异性的分化,使亲缘关系很近的物种之间脂肪酸种类也出现了不同。即第一个时期限制了具有这些酶的功能范围,第二个时期则是在这些范围内发生了不同功能的分化。5、比较分析Phytophthora infestans中去饱和酶和链延长酶进化历程发现,去饱和酶在进化起源上很古老,在去饱和酶进化历程中的第一次功能分化时期就已形成,而链延长酶是在进化历程经历多次功能分化时期才形成的。表明来源于同一生物中同一代谢途径中的两种酶的进化历程可以不同。鉴于Phytophthora infestans中EPA合成途径中的去饱和酶在进化历程中的独特性,我们决定优先对预测到的来源于Phytophthora infestans中的3个去饱和酶和4个链延长酶类似基因进行克隆,并通过酵母表达系统进行功能鉴定。一方面是为了检验我们生物信息学的分析结果,另一方面是为了克隆鉴定一些超标达活性的去饱和酶和链延长酶基因,提高转基因油料作物中EPA和DHA的生产水平,结果如下:1、RT-PCR克隆到1个长度为911bp的基因片段,序列分析表明是一个新的链延长酶类似基因PinE4,在酿酒酵母中的表达产物,可将外源底物C18: 2(?9,12)脂肪酸转变成C20: 2(?11, 14)脂肪酸,表明其具有?9链延长酶活性。2、RT-PCR克隆到1个长度1013bp的基因片段,序列分析表明是一个含有2个内含子的新链延长酶类似基因PinE3,去内含子后,获得全长741bp的编码片段;同样的方法分别克隆到另外2个新的类似链延长酶基因PinE1(1022bp)和PinE2 (1044 bp)及1个新的类似去饱和酶基因PinD1 (1374bp)。本研究新预测了约400个长链不饱和脂肪酸合成过程中的去饱和酶和链延长酶类似基因,分别绘制了迄今为止包含数目最多的去饱和酶和链延长酶进化树,不但系统揭示了去饱和酶和链延长酶的进化历程,也为这些酶基因的克隆与鉴定提供了参考指引,同时Phytophthora infestans中EPA合成过程中的去饱和酶和链延长酶基因的克隆与鉴定,也为在转基因作物中生产鱼油提供了新的基因。(本文来源于《山东农业大学》期刊2010-06-10）
田宝玉,江贤章,秦丽娜,吴松刚,黄建忠[6]（2007）在《Thraustochytr ium DHA生物合成途径碳链延长酶的克隆与表达》一文中研究指出二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,简称DHA)是目前发现的碳链最长、不饱和度最高的ω-3长链高度不饱和脂肪酸,具有抗心血管疾病、抗血脂、降血压、预防各种癌症等重要生理功能,是目前研究的热点。DHA的生物合成途径涉及到脂肪酸碳链的延长反应,催化这一反应的酶是碳链延长酶。由于碳链延长酶是膜结合蛋白,目前还没有行之有效生化手段对其进行分离纯化进行研究,因此只能通过基因的克隆,从分子水平对其酶学表征进行研究。本文以海洋真菌(本文来源于《第六届中国酶工程学术研讨会论文摘要集》期刊2007-10-21）
郭经宇,王茂华,刘绵学,王慧,徐柯[7]（2007）在《甘蓝型油菜脂肪酸链延长酶基因FAE1的克隆与原核表达》一文中研究指出脂肪酸延长酶1(FAE1)是广泛存在于植物中并定位于内质网上的一种能催化脂肪酸碳链延长的酮脂酰CoA合成酶.根据Genbank上已知的植物FAE1基因设计引物,以从甘蓝型油菜叶片中提取的总DNA为模板,进行PCR扩增,获得了1380bp的片段.回收该片段,并连接到pMD18-T载体测序.序列比对结果说明了该片段与植物中已知的FAE1序列有极高的相似性,并且不存在内含子序列.将该片段通过高保真酶扩增,EcoRⅠ酶切消化后定向克隆到pGEX-2T表达载体中,在IPTG诱导下于28℃表达出Mr76×103的蛋白质条带.用兔抗GST多克隆抗体做第一抗体进行Western-blot检测,并获得阳性检测结果.这为甘蓝型油菜脂肪酸链延长酶基因FAE1功能的进一步研究奠定了基础.图4表1参14(本文来源于《应用与环境生物学报》期刊2007年02期）
李柱刚,崔崇士,曹鸣庆,马荣才[8]（2006）在《芸薹属作物脂肪酸链延长酶基因(FAE1)拷贝数和序列变异分析》一文中研究指出利用拟南芥脂肪酸合成途径中的脂肪酸链延长酶FAE1基因序列的保守性设计PCR简并引物,对芸薹属(Brassica)作物3个基本种和3个复合种进行了标记,并且对每个栽培种的PCR产物进行克隆和测序,进而对所获得的FAE1基因部分序列(C-端编码区序列)进行了分析。结果表明,拟南芥(Arabidopsisthaliana)和芸薹属作物基因组中具有不同拷贝数(1￣3)的FAE1基因,所测定的部分基因序列相互之间具有很高的同源性,并与其它酶基因如3-氧乙酰-乙酰载体蛋白合成酶,超长链脂肪酸合成酶和酮乙酰CoA合成酶基因具有共同的起源。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2006年06期）
江贤章,施巧琴,吴松刚,黄建忠[9]（2006）在《Thraustochytrium DHA生物合成途径碳链延长酶的克隆与表达》一文中研究指出二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,简称DHA)是目前发现的碳链最长、不饱和度最高的ω- 3长链高度不饱和脂肪酸,具有抗心血管疾病、抗血脂、降血压、预防各种癌症等重要生理功能,是目前研究的热点。DHA的生物合成途径涉及到脂肪酸碳链的延长反应,催化这一反应的酶是碳链延长酶。由于碳链延长酶是膜结合蛋白,目前还没有行之有效生化手段对其进行分离纯化进行研究,因此只能通过基因的克隆,从分子水平对其酶学表征进行研究。本文以海洋真菌Thraustochytrium sp．FJN-10为研究对象,利用RT-PCR结合RACE,获得了两个碳链延长酶的完整基因,并在S．cerevisiae INVSc1中实现功能的表达。(本文来源于《华东六省一市生物化学与分子生物学学会2006年学术交流会论文集》期刊2006-10-01）
江贤章,施巧琴,吴松刚,黄建忠[10]（2006）在《Thraustochytrium DHA生物合成途径碳链延长酶的克隆与表达》一文中研究指出二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,简称DHA)是目前发现的碳链最长、不饱和度最高的ω-3长链高度不饱和脂肪酸,具有抗心血管疾病、抗血脂、降血压、预防各种癌症等重要生理功能,是目前研究的热点。DHA的生物合成途径涉及到脂肪酸碳链的延长反应, 催化这一反应的酶是碳链延长酶。由于碳链延长酶是膜结合蛋白,目前还没有行之有效生化手段对其进行分离纯化进行研究,因此只能通过基因的克隆,从分子水平对其酶学表征进行(本文来源于《2006中国微生物学会第九次全国会员代表大会暨学术年会论文摘要集》期刊2006-10-01）
链延长酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为了利用转基因技术在酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae中生产二十二碳六烯酸(DHA,22∶6Δ4,7,10,13,16,19n-3),构建了同时含C20-Δ5脂肪酸碳链延长酶(TFD5)和C22-Δ4脂肪酸碳链脱饱和酶(FAD4)基因的共表达质粒pYTFD5-FAD4.该质粒是通过基因重组的方法,使脂肪酸碳链延长酶与脱饱和酶基因置于各自启动子和终止子下获得的.共表达质粒pYTFD5-FAD4转化酿酒酵母所得到基因工程菌,在添加终质量分数为2%的半乳糖,终体积分数为1%的NP-40和0.3 mmol/L的底物二十碳五烯酸(EPA,20∶5Δ5,8,11,14,17n-3)下进行诱导,可直接转化二十碳五烯酸(EPA,20∶5Δ5,8,11,14,17n-3)生成二十二碳五烯酸(DPA,22∶5Δ4,7,10,13,16n-3)和二十二碳六烯酸(DHA,22∶6Δ4,7,10,13,16,19n-3).
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
链延长酶论文参考文献
[1].淮东欣,张园园,张椿雨,Edgar,B.CAHOON,周永明.甘蓝型油菜脂肪酸碳链延长酶BnaA.FAE1与BnaC.FAE1的底物特异性分析[J].中国油料作物学报.2018
[2].陈晓峰,江贤章,毛若雨.脂肪酸碳链延长酶与脱饱和酶在酿酒酵母中共表达[J].福建师范大学学报(自然科学版).2010
[3].陈晓峰.脂肪酸碳链延长酶与脱饱和酶在酿酒酵母中共表达[D].福建师范大学.2010
[4].陈晓峰,江贤章,吴松刚,黄建忠.脂肪酸碳链延长酶与脱饱和酶在酿酒酵母中共表达[C].华东六省一市生物化学与分子生物学会2010年学术交流会论文集.2010
[5].张芹.长链不饱和脂肪酸链延长酶与去饱和酶进化分析及phytophthorainfestans中相关基因鉴定[D].山东农业大学.2010
[6].田宝玉,江贤章,秦丽娜,吴松刚,黄建忠.ThraustochytriumDHA生物合成途径碳链延长酶的克隆与表达[C].第六届中国酶工程学术研讨会论文摘要集.2007
[7].郭经宇,王茂华,刘绵学,王慧,徐柯.甘蓝型油菜脂肪酸链延长酶基因FAE1的克隆与原核表达[J].应用与环境生物学报.2007
[8].李柱刚,崔崇士,曹鸣庆,马荣才.芸薹属作物脂肪酸链延长酶基因(FAE1)拷贝数和序列变异分析[J].农业生物技术学报.2006
[9].江贤章,施巧琴,吴松刚,黄建忠.ThraustochytriumDHA生物合成途径碳链延长酶的克隆与表达[C].华东六省一市生物化学与分子生物学学会2006年学术交流会论文集.2006
[10].江贤章,施巧琴,吴松刚,黄建忠.ThraustochytriumDHA生物合成途径碳链延长酶的克隆与表达[C].2006中国微生物学会第九次全国会员代表大会暨学术年会论文摘要集.2006