导读:本文包含了裂解红细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:红细胞裂解液,FACS裂解液,Optilyse,C裂解液,CD34+细胞百分比
裂解红细胞论文文献综述
詹茜,万雪颖,程伟,崔瑾,张阳丽[1]（2019）在《红细胞裂解液对CD34~+细胞相对计数的影响及其原因初步探讨》一文中研究指出目的:研究红细胞(red blood cell,RBC)裂解液对CD34~+细胞相对计数的影响。方法:收集101份外周血干细胞采集物,CD34-PE及CD45-FITC双色免疫荧光染色后,分别用FACS裂解液(FACSTM lysing solution,FACS)、Optilyse C裂解液(optilyse C lysing solution,Optilyse C)及自配裂解液溶解红细胞,采用洗涤程序和运用ISHAGE设门策略,检测CD34~+细胞、淋巴、粒、单核细胞相对数,CD45~+细胞占全部收集信号百分比及各类细胞前向散射光(forward scatter,FSC)及侧向散射光(side scatter,SSC)信号。结果:比较3种裂解液处理后样本的CD34~+细胞百分比,FACS裂解液处理的样本CD34~+细胞百分比最低,自配裂解液最高(FACS vs. Optilyse C vs.自配=0.49±0.43 vs. 0.67±0.50 vs. 0.73±0.66,P=0.000)。FACS裂解后样本CD45+细胞百分比远高于Optilyse C及自配裂解液(t=142.500,P=0.000)。3种裂解液对淋巴细胞百分比结果(F=35.340,P=0.000)具有统计学差异;而粒细胞百分比(F=0.610,P=0.540)、单核细胞百分比(F=1.590,P=0.210)差异无统计学意义。FACS裂解液处理后,CD34~+细胞、淋巴细胞的FSC和SSC信号强度均弱于Optilyse C裂解液及自配的裂解液;而粒、单核细胞的SSC信号,FACS裂解液处理后最强,Optilyse C裂解液处理后最弱。另外,动员后的白细胞数多少与CD34~+细胞百分比不存在相关性(r=0.108,P=0.312)。结论:红细胞裂解液导致CD34~+细胞相对计数差异的原因可能与CD45+细胞比例有关,即获取的有效细胞数;裂解液对细胞形态的影响与造成淋巴细胞比例有显着性差异有关。鉴于不同红细胞裂解液对CD34等抗原阳性细胞的相对计数确实有不良影响,因此在应用流式细胞术检测或计数时应慎重选择。(本文来源于《重庆医科大学学报》期刊2019年09期）
刘会敏,郭娟,杨霄[2]（2014）在《流式细胞计数法评定不同抗凝剂对骨髓样本红细胞的裂解作用》一文中研究指出目的初步探讨临床常用的肝素钠、乙二胺四乙酸盐(EDTA)、草酸盐等抗凝剂在流式细胞仪细胞采集、分析过程中,对骨髓样本红细胞裂解作用的影响。方法收集叁组抗凝剂组骨髓标本各20份,带有PreCP荧光的CD45抗体标记后,用solarbio红细胞裂解液处理后分析残留红细胞与有核细胞总数比例。结果枸橼酸钠、EDTA、肝素钠叁组抗凝剂样本叁组均值分别为1.70%±1.04%、0.08%±0.14%、1.00%±0.78%。叁组间方差分析差异有统计学意义(F值=22.83,P=0.00)。组间差异性分析可知,叁组间两两比较,差异均有统计学意义。结论 EDTA抗凝剂对骨髓样本的红细胞裂解效率最好,残留红细胞最低。在进行流式细胞分析时,EDTA抗凝剂作为首选。(本文来源于《中国卫生检验杂志》期刊2014年02期）
张卫东,章方彪,史宏灿,谭荣邦,叶钢[3]（2013）在《红细胞裂解液法体外分离培养兔骨髓间充质干细胞》一文中研究指出背景:有研究向骨髓液中加入红细胞裂解液来提高分离纯化骨髓间充质干细胞的效率,以期获得纯度高、数量多的骨髓间充质干细胞。目的:进一步验证红细胞裂解液法体外分离纯化兔骨髓间充质干细胞的增殖特性,并对其进行细胞生物学鉴定。方法:使用红细胞裂解液提取含有兔骨髓间充质干细胞的骨髓悬混液,于4,7,10,13 d记录比较原代细胞的生长相对数量;观察传代细胞的生长情况,绘出P2、P3、P4及P5代细胞的生长曲线,比较各代细胞的增殖特点;倒置相差显微镜观察细胞的形态,细胞免疫荧光及流式细胞仪检测所获得细胞的CD44、CD34表面抗原的表达情况。结果与结论:红细胞裂解液法所获得的兔骨髓间充质干细胞为均一规则的以梭形为主的贴壁细胞,其胞核胞核均质、核仁明显、胞浆丰富,且CD44抗原表达阳性、CD34抗原表达阴性;原代细胞生长曲线呈类"S"型;P4代细胞具有较好的增殖活性,其生长速度、所获取的细胞数量均优于其他代数细胞。说明红细胞裂解液法可以在体外较好的培养出骨髓间充质干细胞,其P4代细胞是骨髓间充质干细胞增殖能力最强的一代细胞。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2013年49期）
周朗,李乔婧,李永生,高秀峰[4]（2012）在《裂解加热-荧光毛细管法快速测定血液红细胞内丙酮酸》一文中研究指出在常规红细胞处理方法中,用生理盐水对红/白细胞清洗分离会导致细胞内丙酮酸外渗,造成丙酮酸测定值不能反映细胞内丙酮酸的真实浓度。本研究设计了"氯化铵裂解液特异性裂解红细胞-离心分离白细胞/血小板-加热去除蛋白-丙酮酸酶荧光毛细管分析"方法。最优化的血样预处理条件是:以16000 r/min离心血液1 min,获得红细胞;裂解液裂解红细胞后在100℃下加热5 min。对比实验发现,本方法优于其它红细胞处理法。本研究中丙酮酸测定方法的线性范围为10～120 mmol/L;检出限为0.98 mmol/L;灵敏度为5.64 F L/mmol,高于文献方法60倍以上;测定红细胞内丙酮酸值的相对标准偏差小于2.8%(n=11),回收率在98.3%～104.1%之间。(本文来源于《分析化学》期刊2012年11期）
吕婧玉,和小娥,张志平,许晓婷,冯建昆[5]（2012）在《红细胞裂解法及不同培养条件对兔骨髓间充质干细胞体外增殖的影响》一文中研究指出研究采用红细胞裂解液法从兔骨髓中分离BMSCs,相差显微镜观察其形态,四甲基偶氮唑盐法(MTT法)筛选基础培养液和血清浓度,绘制生长曲线,用流式细胞仪检测细胞周期,免疫细胞化学鉴定表面抗原。分离的细胞在形态学观察与生长动力学上均符合BMSCs特征;在实验范围内DMEM/F12+20%FBS是体外培养兔BMSCs的最佳体系;细胞周期结果显示,BMSCs平均82%处于G0/G1期,18%处于S+G2期;免疫细胞化学结果显示所分离的BMSCsCD90、CD44阳性表达,CD34阴性表达。本研究结果表明,通过红细胞裂解液法分离的兔BMSCs,其具有体外增殖和多向分化的潜能,可以作为组织工程的种子细胞。(本文来源于《江西农业学报》期刊2012年11期）
巩文玉,刘怡,李蓓,张瑞东,李志刚[6]（2010）在《红细胞裂解液对CD34~+细胞相对计数的影响》一文中研究指出为了研究红细胞裂解液对CD34+细胞相对计数结果的影响,对37份外周血干细胞采集物进行CD34-PE及CD45-FITC双色免疫荧光染色后用FACS裂解液(FACSTM lysing solution,FACS)、IOTest3裂解液(IOTest 3 lysings olution,IOTest)及自配裂解液溶解红细胞,采用洗涤程序和运用ISHAGE设门策略,检测CD34+细胞相对数,同时记录细胞的前向散射(forward scatter,FSC)、侧向散射(side scatter,SSC)信号及CD45+细胞百分比。结果表明,FACS处理的样本CD34+细胞百分比低于IOTest(0.50±0.42vs0.92±0.59,p=0.004);而IOTest与自配红细胞裂解液处理结果的差异无统计学意义(0.92±0.59vs0.95±0.64,p=0.902)。经IOTest裂解后细胞的FSC、SSC信号均显着高于FACS(p<0.01)。IOTest裂解后的样本CD45+细胞百分比低于FACS。WBC数的多少与CD34+细胞百分比不存在相关关系(rs=0.192,p=0.357)。结论:某些红细胞裂解液对CD34等抗原阳性细胞的相对计数确有不良影响,用流式细胞术检测或计数时应慎重选择红细胞裂解液。(本文来源于《中国实验血液学杂志》期刊2010年03期）
喻晶,聂李平,桂耀庭,彭黎明[7]（2007）在《流式细胞仪全血红细胞裂解液研究》一文中研究指出目的研制流式细胞仪全血红细胞裂解液,并与进口试剂比对效果,以期大大降低试剂的成本,使其在中国广泛应用。方法采用流式细胞术,分别用进口试剂和自制试剂制备全血样品,比较两种试剂对30例健康体检者白细胞分群的影响、淋巴细胞亚群比例的影响、淋巴细胞亚群的平均荧光强度的影响。结果自制试剂制备的样品中淋巴细胞、单核细胞和粒细胞的分布与进口试剂一致;自制试剂制备的样品,T淋巴细胞(CD3+)、B淋巴细胞(CD19+/CD3-)、辅助/诱导T淋巴细胞(CD3+CD4+CD8-)、抑制/细胞毒T淋巴细胞(CD3+CD4-CD8+)、NK细胞(CD16+56+/CD3-)的百分率与进口试剂无明显差异(P>0.05);自制试剂制备的样品,T淋巴细胞、B淋巴细胞、辅助/诱导T淋巴细胞和抑制/细胞毒T淋巴细胞的平均荧光强度与进口试剂无明显差异(P>0.05),但NK细胞的平均荧光强度弱于进口试剂(P<0.05)。结论与进口试剂比对的结果表明,自制试剂对白细胞的分群、淋巴细胞亚群的百分率、淋巴细胞表面分子CD3、CD4、CD8、CD19的表达量,均达到了进口试剂的效果,而成本大大降低。(本文来源于《医学研究杂志》期刊2007年07期）
邓近平,戴钟铨,刘收,聂捷琳,李莹辉[8]（2007）在《红细胞裂解法分离及培养大鼠骨髓间充质干细胞(英文)》一文中研究指出背景:骨髓间充质干细胞在骨髓中的含量非常少,而且与其他细胞特别是易与红细胞相混杂,因此在分离过程中需去除干扰,以获得尽可能多的高纯度的骨髓间充质干细胞。目的:采用红细胞裂解法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,同时进行生物学鉴定。设计:观察对比实验。单位:中国航天员科研训练中心航天细胞分子生物学实验室。材料:选用50只生后30d的雄性SD大鼠,体质量100g,SPF级,购自北京实验动物中心(合格证:SCXK(京)2002-0003)。DAB浓缩显色液(含过氧化氢,中杉公司),兔抗大鼠多克隆抗体(武汉博士德公司),FCS(PAA,Austria),LG-DMEM培养基(Sigma,USA)。方法:实验于2004-09/2005-09在中国航天员科研训练中心航天细胞分子生物学实验室完成。将大鼠脱臼处死,暴露骨髓腔,收集细胞悬液,采用全骨髓培养法对骨髓间充质干细胞分离与原代培养。①红细胞裂解实验:取A、B、C、D4管分别加入0.5mL过滤并充分吹打均匀后的骨髓冲洗液,分别对应加入红细胞裂解液、氯化氨2mL、磷酸盐缓冲生理盐水2mL和体积分数为0.04的乙酸溶液0.5mL,分别测量各组吸光度值及血红蛋白浓度,并观察细胞生长情况。②骨髓间充质干细胞生长曲线、倍增时间及表面标志分子表达情况的观察:根据公式:群体倍增时间(TD)=t[lg2/(lgNt-lgN0)](N0和Nt分别代表接种后和培养t小时的细胞数),计算出细胞的群体倍增时间并描绘并分析骨髓间充质干细胞第2、4、6代细胞的生长曲线;采用亚甲基兰染色测定骨髓间充质干细胞增殖情况;采用免疫细胞化学染色检测骨髓间充质干细胞表面标志分子表达情况。主要观察指标:①大鼠骨髓间充质干细胞分离和培养的观察结果。②不同处理方法对红细胞的裂解效果及其对骨髓间充质干细胞生长的影响。③第2、4、6代细胞的生长曲线及细胞倍增时间。④大鼠骨髓间充质干细胞表面标志分子表达情况。结果:①大鼠骨髓间充质干细胞的分离和培养结果:原代培养48h后大部分细胞已贴壁,72h时贴壁细胞已开始分裂增殖。7￣8d后可见有明显集落形成,之后集落迅速增多,不断扩大,互相融合,14～16d时细胞克隆生长稠密。刚传代的细胞呈球形,很快沉降贴壁,少部分圆形细胞悬浮。贴壁细胞均匀分布,3～5d增殖迅速。虽然传代后细胞形态未变,但增殖速度明显增快,约6d长满培养瓶底。②不同处理方法对红细胞的裂解效果及其对骨髓间充质干细胞生长的影响:红细胞裂解液处理组,氯化氨处理组和4%乙酸处理组的血红蛋白浓度明显高于磷酸盐缓冲生理盐水处理组,差异有显着性(P<0.01)。③不同代骨髓间充质干细胞的生长曲线观察结果:第2,4,6代细胞生长曲线基本相同,经过一两天的潜伏适应期后进入对数生长期,第5天达顶点,以后进入平台期(在第5～7天)。第6代骨髓间充质干细胞的潜伏期表现不明显骨髓间充质干细胞的群体倍增时间平均约为34h。④不同代骨髓间充质干细胞的免疫表型鉴定:各代细胞CD44和CD106染色均呈阳性,表现为棕黄色颗粒沉淀,CD34染色呈阴性。结论:采用红细胞裂解液处理骨髓冲洗液后再行接种,能提高骨髓间充质干细胞的贴壁效率,同时不影响其贴壁后的生长,是一种可行的分离方法。细胞表面标记染色鉴定证明,本实验所分离细胞是骨髓间充质干细胞。(本文来源于《中国组织工程研究与临床康复》期刊2007年03期）
喻晶,李瑞珍,聂李平,彭黎明[9]（2006）在《流式细胞仪全血红细胞裂解液的研究》一文中研究指出流式细胞术(Flowcytometry,FCM)是对单细胞定量分析和分选的新技术,它具有检测速度快、准确、灵敏度高和重复性好等优点,已广泛用于基础和临床医学研究。近年来,随着单克隆抗体技术和免疫标记技术的不断发展,流式细胞术发展十分迅速,也从基础实验室逐步进入临床实验室,成为检验医学发展的一个热点。(本文来源于《第五次全国中青年检验医学学术会议论文汇编》期刊2006-06-01）
汪志文,王华,周学武[10]（2000）在《一种适用于流式细胞术的简便红细胞裂解法》一文中研究指出目的 探讨一种简便、快捷的红细胞列解法 ,以适宜应用流式细胞仪对白细胞亚群进行检测和分选。方法 采用常规试剂配置不同浓度应用液 ,按步骤完成红细胞裂解过程 ,上机检测。同时采用密度梯度离心法提取单核细胞和粒细胞 ,比较两者上机检测的结果。结果 在流式细胞仪检测的细胞点图上 ,可见采用红细胞裂解法处理的标本白细胞成簇分布 ,淋巴细胞、单核细胞、粒细胞群清晰可辩 ,通过测定各群细胞上标记的特异性荧光 ,可进一步分离出淋巴、单核和粒细胞的亚群 ,细胞纯化程度高。采用密度梯度离心法纯化的粒细胞或单核细胞 ,在细胞点图上可见细胞散在分布 ,不成群 ,纯化程度低。其原因可能是该方法中长时间离心、改变血液渗透压、反复离心洗涤等步骤影响了白细胞的形态结构有关。结论 本实验介绍的红细胞裂解法满足了白细胞流式细胞仪检测分选要求 ,价格低廉 ,是一种简便快捷、经济实用的白细胞纯化分选方法(本文来源于《第叁军医大学学报》期刊2000年12期）
裂解红细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的初步探讨临床常用的肝素钠、乙二胺四乙酸盐(EDTA)、草酸盐等抗凝剂在流式细胞仪细胞采集、分析过程中,对骨髓样本红细胞裂解作用的影响。方法收集叁组抗凝剂组骨髓标本各20份,带有PreCP荧光的CD45抗体标记后,用solarbio红细胞裂解液处理后分析残留红细胞与有核细胞总数比例。结果枸橼酸钠、EDTA、肝素钠叁组抗凝剂样本叁组均值分别为1.70%±1.04%、0.08%±0.14%、1.00%±0.78%。叁组间方差分析差异有统计学意义(F值=22.83,P=0.00)。组间差异性分析可知,叁组间两两比较,差异均有统计学意义。结论 EDTA抗凝剂对骨髓样本的红细胞裂解效率最好,残留红细胞最低。在进行流式细胞分析时,EDTA抗凝剂作为首选。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
裂解红细胞论文参考文献
[1].詹茜,万雪颖,程伟,崔瑾,张阳丽.红细胞裂解液对CD34~+细胞相对计数的影响及其原因初步探讨[J].重庆医科大学学报.2019
[2].刘会敏,郭娟,杨霄.流式细胞计数法评定不同抗凝剂对骨髓样本红细胞的裂解作用[J].中国卫生检验杂志.2014
[3].张卫东,章方彪,史宏灿,谭荣邦,叶钢.红细胞裂解液法体外分离培养兔骨髓间充质干细胞[J].中国组织工程研究.2013
[4].周朗,李乔婧,李永生,高秀峰.裂解加热-荧光毛细管法快速测定血液红细胞内丙酮酸[J].分析化学.2012
[5].吕婧玉,和小娥,张志平,许晓婷,冯建昆.红细胞裂解法及不同培养条件对兔骨髓间充质干细胞体外增殖的影响[J].江西农业学报.2012
[6].巩文玉,刘怡,李蓓,张瑞东,李志刚.红细胞裂解液对CD34~+细胞相对计数的影响[J].中国实验血液学杂志.2010
[7].喻晶,聂李平,桂耀庭,彭黎明.流式细胞仪全血红细胞裂解液研究[J].医学研究杂志.2007
[8].邓近平,戴钟铨,刘收,聂捷琳,李莹辉.红细胞裂解法分离及培养大鼠骨髓间充质干细胞(英文)[J].中国组织工程研究与临床康复.2007
[9].喻晶,李瑞珍,聂李平,彭黎明.流式细胞仪全血红细胞裂解液的研究[C].第五次全国中青年检验医学学术会议论文汇编.2006
[10].汪志文,王华,周学武.一种适用于流式细胞术的简便红细胞裂解法[J].第叁军医大学学报.2000
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