本文主要研究内容
作者都玉印（2019）在《血红素加氧酶1抑制鸭坦布苏病毒在体外复制作用的研究》一文中研究指出：鸭坦布苏病毒病是由鸭坦布苏病毒（Duck Tembusu virus,DTMUV）感染引起鸭的一种以发育缓慢、产蛋量骤降和瘫痪等为特征的传染病。DTMUV是单股正链RNA病毒,属于黄病毒科、黄病毒属、恩塔亚病毒群,它不但可以感染鸭,而且还可以感染鸡、鹅等禽类,对包括人类在内的哺乳动物具有潜在的健康威胁。血红素加氧酶（HO）是细胞的一种催化血红素降解的起始酶和非常重要的限速酶,血红素加氧酶1（HO-1）是HO的一种亚型,它是在机体内正常存在的一种重要的内源性保护蛋白,其活性不仅与机体的抗炎、抗氧化、抗凋亡等功能密切相关,而且在病毒的感染及复制过程中发挥着非常重要的调控作用,但是对不同病毒调控作用不尽相同。DTMUV感染能否影响细胞中HO-1的表达以及HO-1在DTMUV感染细胞的过程中发挥什么作用尚不清楚。因此本研究拟通过试验明确DTMUV感染对宿主细胞HO-1表达的影响及HO-1在DTMUV感染细胞过程中的作用及其作用机制,从而为该病的防治提供理论依据。DTMUV感染对细胞HO-1基因表达的影响。以实验室保存DTMUV毒株接种鸭胚成纤维细胞（DEF细胞）,同时设未接毒对照组,分别收集感染不同时间段的接毒细胞和对照组细胞,提取各组样品的总RNA进行反转录,以荧光定量PCR方法检测细胞HO-1的表达量。试验结果表明,随着DTMUV感染时间的延长,细胞内HO-1的表达量先短暂升高,随后迅速下降到较低水平,表明DTMUV的感染可以抑制细胞内HO-1基因的表达。上调HO-1的表达对DTMUV在DEF细胞上感染的影响。为探索HO-1在DTMUV感染过程中的作用,本试验使用HO-1的特异性诱导剂——钴原卟啉（CoPP）及构建特异性表达质粒诱导细胞HO-1基因的表达,以检测其对DTMUV感染的影响。结果表明,特异性质粒和CoPP均可以显著上调HO-1基因和蛋白的表达水平而不影响细胞的活性,HO-1的基因表达量与特异性质粒转染含量及CoPP浓度均呈正相关,而DTMUV基因表达水平与其呈负相关,转染HO-1过表达质粒后,细胞内病毒的增殖受到了显著抑制。试验中使用最适浓度的特异性质粒及CoPP处理细胞可使细胞中HO-1的表达量显著上调,随着感染时间的延长,细胞中DTMUV的E基因表达量逐渐降低,表明上调HO-1的表达可以有效抑制DTMUV的感染。下调HO-1的表达对DTMUV感染的影响。为明确HO-1的作用我们利用si RNA特异性沉默HO-1基因以降低HO-1的表达量,然后检测HO-1基因沉默后的细胞中E基因的表达情况。结果表明,转染si RNA的细胞HO-1的基因表达量明显降低,而细胞中E基因表达量明显升高,随着si RNA浓度的升高,HO-1蛋白的表达量逐渐减少,细胞中病毒的含量显著增多,从而说明特异性降低HO-1的表达量可以促进DTMUV在细胞上的增殖。HO-1抑制DTMUV感染的作用机制研究。为了弄清HO-1抑制DTMUV感染的机理,我们在DTMUV感染细胞前、后分别用CoPP处理细胞,结果表明,无论感染前还是感染后处理细胞,均能抑制DTMUV的感染,且结果无显著差异。用biliverdin、CORM及Fe Cl3溶液分别模拟HO-1的三种催化产物biliverdin、CO和Fe2+处理细胞发现,只有用Fe Cl3处理的细胞HO-1的m RNA表达水平明显升高且病毒E基因表达量明显降低,从而说明CoPP促进细胞抑制DTMUV感染的作用与病毒感染的时期无关,在此过程中细胞对病毒感染的抑制作用是由HO-1的催化产物Fe2+介导的。
Abstract
ya tan bu su bing du bing shi you ya tan bu su bing du （Duck Tembusu virus,DTMUV）gan ran yin qi ya de yi chong yi fa yo huan man 、chan dan liang zhou jiang he tan huan deng wei te zheng de chuan ran bing 。DTMUVshi chan gu zheng lian RNAbing du ,shu yu huang bing du ke 、huang bing du shu 、en da ya bing du qun ,ta bu dan ke yi gan ran ya ,er ju hai ke yi gan ran ji 、e deng qin lei ,dui bao gua ren lei zai nei de bu ru dong wu ju you qian zai de jian kang wei xie 。xie gong su jia yang mei （HO）shi xi bao de yi chong cui hua xie gong su jiang jie de qi shi mei he fei chang chong yao de xian su mei ,xie gong su jia yang mei 1（HO-1）shi HOde yi chong ya xing ,ta shi zai ji ti nei zheng chang cun zai de yi chong chong yao de nei yuan xing bao hu dan bai ,ji huo xing bu jin yu ji ti de kang yan 、kang yang hua 、kang diao wang deng gong neng mi qie xiang guan ,er ju zai bing du de gan ran ji fu zhi guo cheng zhong fa hui zhao fei chang chong yao de diao kong zuo yong ,dan shi dui bu tong bing du diao kong zuo yong bu jin xiang tong 。DTMUVgan ran neng fou ying xiang xi bao zhong HO-1de biao da yi ji HO-1zai DTMUVgan ran xi bao de guo cheng zhong fa hui shen me zuo yong shang bu qing chu 。yin ci ben yan jiu ni tong guo shi yan ming que DTMUVgan ran dui su zhu xi bao HO-1biao da de ying xiang ji HO-1zai DTMUVgan ran xi bao guo cheng zhong de zuo yong ji ji zuo yong ji zhi ,cong er wei gai bing de fang zhi di gong li lun yi ju 。DTMUVgan ran dui xi bao HO-1ji yin biao da de ying xiang 。yi shi yan shi bao cun DTMUVdu zhu jie chong ya pei cheng qian wei xi bao （DEFxi bao ）,tong shi she wei jie du dui zhao zu ,fen bie shou ji gan ran bu tong shi jian duan de jie du xi bao he dui zhao zu xi bao ,di qu ge zu yang pin de zong RNAjin hang fan zhuai lu ,yi ying guang ding liang PCRfang fa jian ce xi bao HO-1de biao da liang 。shi yan jie guo biao ming ,sui zhao DTMUVgan ran shi jian de yan chang ,xi bao nei HO-1de biao da liang xian duan zan sheng gao ,sui hou xun su xia jiang dao jiao di shui ping ,biao ming DTMUVde gan ran ke yi yi zhi xi bao nei HO-1ji yin de biao da 。shang diao HO-1de biao da dui DTMUVzai DEFxi bao shang gan ran de ying xiang 。wei tan suo HO-1zai DTMUVgan ran guo cheng zhong de zuo yong ,ben shi yan shi yong HO-1de te yi xing you dao ji ——gu yuan bu lin （CoPP）ji gou jian te yi xing biao da zhi li you dao xi bao HO-1ji yin de biao da ,yi jian ce ji dui DTMUVgan ran de ying xiang 。jie guo biao ming ,te yi xing zhi li he CoPPjun ke yi xian zhe shang diao HO-1ji yin he dan bai de biao da shui ping er bu ying xiang xi bao de huo xing ,HO-1de ji yin biao da liang yu te yi xing zhi li zhuai ran han liang ji CoPPnong du jun cheng zheng xiang guan ,er DTMUVji yin biao da shui ping yu ji cheng fu xiang guan ,zhuai ran HO-1guo biao da zhi li hou ,xi bao nei bing du de zeng shi shou dao le xian zhe yi zhi 。shi yan zhong shi yong zui kuo nong du de te yi xing zhi li ji CoPPchu li xi bao ke shi xi bao zhong HO-1de biao da liang xian zhe shang diao ,sui zhao gan ran shi jian de yan chang ,xi bao zhong DTMUVde Eji yin biao da liang zhu jian jiang di ,biao ming shang diao HO-1de biao da ke yi you xiao yi zhi DTMUVde gan ran 。xia diao HO-1de biao da dui DTMUVgan ran de ying xiang 。wei ming que HO-1de zuo yong wo men li yong si RNAte yi xing chen mo HO-1ji yin yi jiang di HO-1de biao da liang ,ran hou jian ce HO-1ji yin chen mo hou de xi bao zhong Eji yin de biao da qing kuang 。jie guo biao ming ,zhuai ran si RNAde xi bao HO-1de ji yin biao da liang ming xian jiang di ,er xi bao zhong Eji yin biao da liang ming xian sheng gao ,sui zhao si RNAnong du de sheng gao ,HO-1dan bai de biao da liang zhu jian jian shao ,xi bao zhong bing du de han liang xian zhe zeng duo ,cong er shui ming te yi xing jiang di HO-1de biao da liang ke yi cu jin DTMUVzai xi bao shang de zeng shi 。HO-1yi zhi DTMUVgan ran de zuo yong ji zhi yan jiu 。wei le long qing HO-1yi zhi DTMUVgan ran de ji li ,wo men zai DTMUVgan ran xi bao qian 、hou fen bie yong CoPPchu li xi bao ,jie guo biao ming ,mo lun gan ran qian hai shi gan ran hou chu li xi bao ,jun neng yi zhi DTMUVde gan ran ,ju jie guo mo xian zhe cha yi 。yong biliverdin、CORMji Fe Cl3rong ye fen bie mo ni HO-1de san chong cui hua chan wu biliverdin、COhe Fe2+chu li xi bao fa xian ,zhi you yong Fe Cl3chu li de xi bao HO-1de m RNAbiao da shui ping ming xian sheng gao ju bing du Eji yin biao da liang ming xian jiang di ,cong er shui ming CoPPcu jin xi bao yi zhi DTMUVgan ran de zuo yong yu bing du gan ran de shi ji mo guan ,zai ci guo cheng zhong xi bao dui bing du gan ran de yi zhi zuo yong shi you HO-1de cui hua chan wu Fe2+jie dao de 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自山东农业大学的都玉印，发表于刊物山东农业大学2019-07-08论文，是一篇关于鸭坦布苏病毒论文,血红素加氧酶论文,复制论文,抑制论文,山东农业大学2019-07-08论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自山东农业大学2019-07-08论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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